1、常見自身抗體檢測及意義 The Common Autoantibodies Examination and Clinical Significance 診斷學 免疫學檢驗The First Affiliated Hospital of Nanchang University Qingshui Huang(黃清水)1Teaching outline理解幾個概念AutoimmunityAutoimmune diseasesAutoantibodies and characteristics掌握常見自身抗體及其臨床意義ANA、 RF、ENA 、ANCA、autoimmune liver diseas

2、es Clinical significance1學時Case one患者女，30歲，因面部紅斑、胸悶、發熱1個月加重7天入院。查體：體溫38.5，脈搏102次/分，呼吸28次/分，面部紅斑，左胸脅部飽滿，呼吸活動度減弱，局部叩診呈濁音，語顫、呼吸音消失，抗生素治療無效。診斷考慮？鑒別診斷？需要完善哪些檢查？Autoimmunity自身免疫是指機體免疫系統受某些內外因或遺傳等因素作用產生針對自身抗原發生免疫應答反應，出現自身抗體或自身致敏淋巴細胞的現象。Autoimmune diseases自身免疫性疾病一類由自身免疫反應導致對機體造成免疫性病理損傷或功能障礙的疾病，可分為器官特異性（慢性甲狀

3、腺炎）和非器官特異性（SLE、RA）兩大類。The pathogenesy of autoimmune disease自身組織免疫耐受myasthenia gravisGraves diseaseAIHA1 type DMmultiple sclerosisRheumatoid arthritisSystemic lupus erythematosusSjogrens syndrome Systemic sclerosis Polymyositis/dermatomyositis Wegeners granulomatosis消化系統眼抗磷脂抗體綜合征血液系統神經系統肺臟心血管肌肉骨骼皮膚粘膜

4、漿膜炎腎臟全身癥狀干燥綜合征Autoimmune diseasesAutoimmune diseases characteristics病程長，女性患者居多，病因不清，有遺傳傾向，臨床癥狀多樣病理特征為免疫炎癥免疫抑制劑治療有一定療效可檢出高滴度的自身抗體和（或）自身致敏淋巴細胞Autoantibodies自身抗體是針對自身組織成分產生的抗體，與自身組織成分的抗原決定簇發生反應，通過各種途徑造成自身免疫損傷，如：變態反應、免疫復合物、ADCC、炎癥反應及干擾細胞功能等。Autoantibodies characteristics自身抗體特性產生 在遺傳背景下，隱蔽抗原的釋放或移位，自身組織抗原

5、的改變或修飾，交叉抗原，免疫系統的調節異常等。作用 自身抗體參與免疫病理損傷，對某些自身免疫性疾病的診斷具高度特異性，血清滴度與疾病的活動性密切相關。自身免疫=自身免疫性疾病？Autoantibodies significance斑點法印跡法Methodes of common examinationWestblotIIFELISACommon examination itemsANAds-DNAENAANCAAnti-CCPGBMACLautoimmune liver diseases Antinuclear antibodiesANA：是指存在與血液和體液中，能與真核細胞核抗原起反應的自身

6、抗體的總稱。狹義的ANA是指用間接免疫熒光法檢出的抗細胞核成分的抗體；廣義的是指用各種方法能檢出的核物質，包括核酸、酸或堿性核組織蛋白和非組織蛋白等的抗體。Antinuclear antibodiesANA的性質主要是IgG，無器官特異性和種屬特異性，可與所有動物的細胞核發生反應。核抗原成分復雜，已經發現有幾十種，高滴度ANA對多種自身免疫免疫性疾病具有重要的診斷意義，有的已成為某些自身免疫性疾病的診斷標志物。ANA篩查及亞類ANA抗體的檢測對明確診斷、臨床分型、病情觀察、預后等具有重要意義。Indirect immunofluorescenceThe common ANA photofluo

7、rogram熒光型相關抗體臨床意義均質型抗dsDNA抗體、抗組蛋白抗體SLE、RA、SS斑點型抗ENA抗體MCTD、多種自身免疫性疾病核膜型抗dsDNA抗體SLE核仁型抗核仁核糖核酸抗體硬皮病著絲點型抗著絲點抗體硬皮病胞漿型抗細胞漿成分抗體原發性膽汁性肝硬化ANA clinical significance多種風濕性疾病可出現陽性正常人可有5%的陽性率，并隨年齡增加有上升趨勢，5%SLE病人的ANA為陰性ANA對診斷風濕病敏感，但特異性差，不能提示發生免疫反應的是抗細胞核那種成分抗體，只能根據熒光型大致估計，臨床作為診斷風濕病的篩選實驗。ANA testing guidelinesAnti-D

8、NA antibody概述：染色體由dsDNA和組蛋白（H1、H2、H2、H3、H4五種成分）及非組蛋白組成（種類很多如：核酸代謝所需的各種酶等），抗DNA抗體包括兩大類：抗dsDNA抗體和抗ssDNA抗體參考值：IFA法為陰性臨床意義 抗dsDNA抗體陽性：對SLE特異性高，活動期陽性率達7090%，但敏感性低 抗ssDNA抗體陽性：許多自身免疫性疾病都可有陽性，其診斷特異性不如抗dsDNA抗體Anti-Extractable Nuclear antigen AntibodiesENA為用等滲鹽水或磷酸鹽緩沖液所提取的核內抗原多種相對分之量不同的多肽，成分復雜，達數十種之多，用于檢測相應抗體

9、，包括：抗Sm抗體、抗RNP抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗Scl-70抗體、抗Jo-1抗體等參考值：IBT法(免疫印跡) 為陰性The common markers for autoimmune diseases 標志抗體相關疾病抗dsDNA抗體SLE抗Sm抗體SLE抗SS-B抗體SS抗著絲點抗體SSc(局限型)抗Scl-70抗體SSc(彌漫型)抗PM-Scl抗體PM/DM抗Jo-1抗體PM/DM高滴度抗RNP抗體MCTDThe common markers for autoimmune diseases標志抗體相關疾病抗腎小球基底膜抗體肺出血腎炎綜合征抗平滑肌抗體型自身免疫性肝炎抗肝腎

10、微粒體抗體型自身免疫性肝炎抗可溶性肝抗原抗體型自身免疫性肝炎抗線粒體抗體型原發性膽汁性肝硬化抗角蛋白抗體類風濕性關節炎抗橋粒抗體尋常天皰瘡抗肌內膜抗體過敏性腸病Specific autoantibodies for SLE靶抗原 陽性率(%) ssDNA 70-95 dsDNA 30-90 組蛋白 40-80 核小體 50-95 U1-nRNP 15-40 Sm 5-30 SS-A 20-60 SS-B 10-20 核糖體P蛋白 5-15 Ku 10 PCNA 3 心磷脂, 2-GP1 20-40Specific autoantibodies for pSS靶抗原 陽性率 (%) SS-A 4

11、0-95 SS-B 40-95Specific autoantibodies for SSc靶抗原 陽性率(%) 著絲點 80-95 Scl-70 25-75 原纖維蛋白 5-10 PM-Scl (與多肌炎的重疊綜合征） 2-5Specific autoantibodies for PM/DM靶抗原 陽性率(%) ssDNA40-50 Jo-125-35 PM-Scl (與硬化癥的重疊綜合征) 8 Mi-2 5 Ku (與硬化癥的重疊綜合征) 1-7 PL-7, PL-12, OJ, EJ, KJ 2-3(各種氨基酰rRNA合成酶)antineutrophil cytoplasmic anti

12、body,ANCA中性粒細胞ANCA是一組針對中性粒細胞胞漿抗原的自身抗體，其靶抗原為中性粒細胞胞漿中的顆粒蛋白酶隨著對ANCA的深入研究，ANCA的特異性靶抗原逐漸被發現并得到純化 到目前為止，已有十余種中性粒細胞胞漿成分被證實為ANCA的靶抗原ANCAANCA determinationcANCA蛋白酶3 (PR3) pANCA髓過氧化物酶(MPO)aANCAANCA clinical significance與多種疾病相關系統性血管炎診斷與鑒別診斷炎癥性腸病診斷與鑒別診斷自身免疫性肝病診斷與鑒別診斷其它疾病診斷與鑒別診斷 結締組織病 感染性疾病 autoimmune liver dise

13、ases ,AILD自身免疫性肝病是一組免疫介導的肝臟損傷,肝組織改變與慢性病毒性肝炎相一致，但血清病毒標志物陰性。臨床上有自身免疫的各種表現，多數自身免疫性肝病伴有特異性自身抗體的出現，自身抗體的檢測對臨床肝病學具有重要的意義。根據臨床表現、生物化學、影像學和組織病理學特點,可簡單地分為以肝炎為主型的自身免疫性肝炎(AIH)以膽汁淤積為主型的原發性膽汁性肝硬化(PBC)以膽系損害原發性硬化性膽管炎(PSC)Autoantibodies for AILD自身免疫性肝炎（AIH） ANA 、 SMA（抗肌動蛋白抗體 ） 抗LKM1抗體、抗LC1抗體 抗SLA/LP 原發性膽汁性肝硬化（PBC）

14、AMA/AMA-M2 抗核包膜抗體、抗核點抗體、抗著絲點抗體 原發性硬化性膽管炎（PSC） 抗中性粒細胞胞漿抗體（pANCA）AILD determinationAILD clinical significance抗平滑肌抗體（ASMA/ SMA）見于多種肝臟疾病及非肝臟疾病，無疾病診斷特異性，對I型AIH診斷有重要意義，高滴度的SMA（1:160）對AIH診斷敏感性相當高（至少90）抗肝/腎微粒體抗體（抗LKM1抗體）II型AIH血清特異性抗體抗可溶性肝抗原抗體（抗SLA抗體） 型AIH的血清特異性標志抗肝細胞胞漿抗原1型抗體（抗LC1抗體） II型AIH的血清特異性標志抗線粒體抗體Late

15、st study about autoantibodiesRA相關抗體抗角蛋白抗體抗絲集蛋白抗體抗環瓜氨酸肽（CCP）抗體SS相關抗體Anti-alpha-fodrin antibodies 慢性炎癥性腸病相關抗體抗小腸杯狀細胞抗體抗釀酒酵母抗體Latest study about autoantibodiesSLE相關抗體抗核小體抗體抗核糖體P蛋白抗體抗磷脂抗體綜合征抗磷脂抗體多肌炎和皮肌炎相關抗體抗Mi-2抗體How to read the reports?ANAds-DNAENA（ANA譜14項）ANCAAILDOthers幾個要說明的問題ANA（-）而ANA14項（+）ds-DNA（I

16、IF）與ANA14項中不符合ANCA （IIF+）而確認試驗陰性Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-1)血常規尿常規血沉免疫球蛋白補體風濕三項X線MRICTANAENAACLANCAGBMAIH相關抗體診斷治療預后Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-2)紅斑狼瘡篩查干燥綜合癥進行性系統性硬化癥多發性肌炎皮肌炎等懷疑自身免疫性疾病ANA篩查Anti-dsDNA必要時查ANA譜-14項Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-3)可疑自身免疫性肝病ANA篩查必要時查ANA譜-14項自身免疫性肝病篩查自身免疫性肝病相關抗體確認Autoimmune diseases laboratory diagnosis(4-4)炎癥性腸病自身抗體譜血管炎自身抗體譜ANA篩查抗中性粒細胞胞漿抗體（ANCA）必要時查ANA譜-14項提高質量，加強交流質量控制人員室內質控室間質評加強臨床溝通與交流已開展項目新開展項目申請單的填寫科研課題文章Course summary and que