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1、生物化學(xué)核酸的化學(xué)ATP能量“貨幣”GTP參加蛋白質(zhì)和嘌呤的合成多級(jí)螺旋模型壓縮倍數(shù) 7 6 40 5 (8400) DNA 核小體 螺線管 超螺線管 染色單體 2nm 10nm 30(10)nm 400nm 210m 一級(jí)包裝 二級(jí)包裝 三級(jí)包裝 四級(jí)包裝 染色體包裝的結(jié)構(gòu)模型DNA與基因組DNATranscription RNA(mRNA、tRNA、rRNA)TranslationProtein基因基因是DNA片段的核苷酸序列,DNA分子中最小的功能單位。結(jié)構(gòu)基因調(diào)節(jié)基因基因組指一個(gè)物種單倍體的染色體所攜帶的一整套基因。(一)DNA與基因真核生物與原核生物基因組的比較:1)真核生物基因分布
2、在多個(gè)染色體上,而原核生物只一個(gè)染色體。2)真核生物在基因組轉(zhuǎn)錄后的絕大部分前體RNA必須經(jīng)過剪接過程才能形成成熟的mRNA,而原核生物的基因幾乎不需要轉(zhuǎn)錄后加工。3)真核生物細(xì)胞中DNA與組蛋白和大量非組蛋白結(jié)合,并有核膜將其與細(xì)胞質(zhì)隔離,結(jié)果真核細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄和翻譯在時(shí)間上和空間上都是分離的,而原核細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯是同步的。4)真核生物的基因是不連續(xù)的,中間存在不被翻譯的內(nèi)含子序列,而原核生物幾乎每一個(gè)基因都是完整的連續(xù)的DNA片段?;蚪M大小和C值C值 (C Value):在每一種生物中其單倍體基因組的DNA總量是特異的。DNA的長(zhǎng)度是根據(jù)堿基對(duì)的多少推算出來的。C值是每種生物的一個(gè)特征
3、,不同生物之間差別很大低等真核生物中與形態(tài)學(xué)復(fù)雜程度相關(guān),但高等真核生物中變化很大生物體進(jìn)化程度高低與C值不成明顯線性相關(guān)親緣關(guān)系相近的生物C值相差較大。高等生物的C值不一定就意味著它的C值高于比它低等的生物。C值矛盾/ C值悖論:C值和生物結(jié)構(gòu)或組成的復(fù)雜性不一致的現(xiàn)象。C值變化范圍寬意味著在某些生物中有DNA是不編碼的。(二)原核生物基因組的特點(diǎn)1. DNA大部分為結(jié)構(gòu)基因,每個(gè)基因出現(xiàn)頻率低。2. 功能相關(guān)基因串聯(lián)在一起,并轉(zhuǎn)錄在同一mRNA中(多順反子)。3.有基因重疊現(xiàn)象。ABCDEFG(三)真核生物基因組的特點(diǎn)1. 重復(fù)序列單拷貝序列:在整個(gè)DNA中只出現(xiàn)一次或少數(shù)幾次,主要為編碼
4、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。中度重復(fù)序列:在DNA中可重復(fù)幾十次到幾千次。高度重復(fù)序列:可重復(fù)幾百萬次高度重復(fù)序列一般富含A-T或G-C,富含A-T的在密度梯度離心時(shí)在離心管中形成的區(qū)帶比主體DNA更靠近管口;富含G-C的更靠近管底,稱為衛(wèi)星DNA(satellite DNA)富含A-T富含G-C主體DNA2. 有斷裂基因mRNA1 872bp內(nèi)含子(intron):基因中不為多肽編碼,不在mRNA中出現(xiàn)。ABCDEG7 700bpF外顯子(exons):為多肽編碼的基因片段。:由于基因中內(nèi)含子的存在。例外:組蛋白基因(histongene)和干擾素基因(interferon gene)沒有內(nèi)含子。tr
5、anscriptionRNA的結(jié)構(gòu)與功能RNA分子是含短的不完全的螺旋區(qū)的多核苷酸鏈。(一)tRNAtRNA約占RNA總量的15%,主要作用是轉(zhuǎn)運(yùn)氨基酸用于合成蛋白質(zhì)。tRNA分子量為4S,1965年Holley 測(cè)定AlatRNA一級(jí)結(jié)構(gòu),提出三葉草二級(jí)結(jié)構(gòu)模型。主要特征:1.四臂四環(huán);2.氨基酸臂3端有CCAOH的共有結(jié)構(gòu);3.D環(huán)上有二氫尿嘧啶(D);4.反密碼環(huán)上的反密碼子與mRNA相互作用;5.可變環(huán)上的核苷酸數(shù)目可以變動(dòng);6.TC環(huán)含有T和;7.含有修飾堿基和不變核苷酸。主要特征:1.四臂四環(huán);2.氨基酸臂3端有CCAOH的共有結(jié)構(gòu);3.D環(huán)上有二氫尿嘧啶(D);4.反密碼環(huán)上的反
6、密碼子與mRNA相互作用;5.可變環(huán)上的核苷酸數(shù)目可以變動(dòng);6.TC環(huán)含有T和;7.含有修飾堿基和不變核苷酸。tRNA二級(jí)結(jié)構(gòu)(二)rRNA占細(xì)胞RNA總量的80%,與蛋白質(zhì)(40%)共同組成核糖體。原 核 生 物 真 核 生 物核糖體rRNA核糖體rRNA70S(30S、50S)16S、5S、23S80S(40S、60S)18S、5S、5.8S、28S(三)mRNA與hnRNAmRNA約占細(xì)胞RNA總量的35%,是蛋白質(zhì)合成的模板。真核生物mRNA的前體在核內(nèi)合成,包括整個(gè)基因的內(nèi)含子和外顯子的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,形成分子大小極不均勻的hnRNA。(四)snRNA和asRNAsnRNA主要存于細(xì)胞核中
7、,占細(xì)胞RNA總量的0.11%,與蛋白質(zhì)以RNP(核糖核酸蛋白)的形式存在,在hnRNA和rRNA的加工、細(xì)胞分裂和分化、協(xié)助細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸、構(gòu)成染色質(zhì)等方面有重要作用。asRNA可通過互補(bǔ)序列與特定的mRNA結(jié)合,抑制mRNA的翻譯,還可抑制DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。(五)RNA的其它功能1981年,Cech發(fā)現(xiàn)RNA的催化活性,提出核酶(ribozyme)。大部分核酶參加RNA的加工和成熟,也有催化C-N鍵的合成。23SrRNA具肽酰轉(zhuǎn)移酶活性。RNA在DNA復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯中均有一定的調(diào)控作用,與某寫物質(zhì)的運(yùn)輸與定位有關(guān)。核酸的性質(zhì)(一)一般理化性質(zhì)1.為兩性電解質(zhì),通常表現(xiàn)為酸性。2.DNA
8、為白色纖維狀固體,RNA為白色粉末,不溶于有機(jī)溶劑。3.DNA溶液的粘度極高,而RNA溶液要小得多。4.RNA能在室溫條件下被稀堿水解而DNA對(duì)堿穩(wěn)定。5.利用核糖和脫氧核糖不同的顯色反應(yīng)鑒定DNA與RNA。(二)核酸的紫外吸收性質(zhì)核酸的堿基具有共扼雙鍵,因而有紫外吸收性質(zhì),吸收峰在260nm(蛋白質(zhì)的紫外吸收峰在280nm)。核酸的光吸收值比各核苷酸光吸收值的和少3040%,當(dāng)核酸變性或降解時(shí)光吸收值顯著增加(增色效應(yīng)),但核酸復(fù)性后,光吸收值又回復(fù)到原有水平(減色效應(yīng))。Southern 印跡法(Southern blotting):DNA限制片段限制性內(nèi)切酶帶有DNA片段的凝膠瓊脂糖凝膠
9、電泳堿液浸泡,并中和凝膠上DNA變性變性的單鏈DNA轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素薄膜上放射性標(biāo)記探針雜交雜交DNA-DNA分子放射自顯影顯示出雜交分子的位置04全國)115下列哪些有關(guān)DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的說法是正確的A反應(yīng)需要一對(duì)引物 B反應(yīng)始終在高于70的條件下進(jìn)行C應(yīng)需要加連接酶 D反應(yīng)中不需要加限制性內(nèi)切酶(05全國)1關(guān)于DNA分子的構(gòu)象,以下哪些說法是正確的?ADNA二級(jí)結(jié)構(gòu)(雙螺旋)主要具有A、B、D、E、Z等構(gòu)象BB型是右手螺旋,其它是左手螺旋C活細(xì)胞中B型最多,且穩(wěn)定不變D.細(xì)胞中A、B、Z型等都可能存在,在一定的生理?xiàng)l件下發(fā)生部分變構(gòu)E.不同的構(gòu)象轉(zhuǎn)錄活性不一樣,A型最高AD
10、AD(05全國)4.在DNA變性過程中,以下哪些現(xiàn)象會(huì)出現(xiàn)?A磷脂鍵的斷裂B.雙螺旋之間氫鍵的斷裂C粘度下降D.沉降速度增加E紫外吸收增加(07全國)107下列有關(guān)DNA和mRNA的描述中正確的是: A.mRNA易被水解,DNA則較穩(wěn)定 BDNA可以配對(duì)形成雙鏈結(jié)構(gòu),而mRNA則不能 C.在一定條件下,DNA和mRNA都可以形成雙鏈結(jié)構(gòu) D細(xì)菌的mRNA與其DNA一樣穩(wěn)定(07安徽)16胸腺嘧啶只會(huì)出現(xiàn)在下列何種分子中( ) AtRNA BmRNA CrRNA DcDNABDEACDD(07安徽)6下列關(guān)于DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)的描述,正確的是( )A兩條鏈均為左手螺旋 B堿基配對(duì)是很準(zhǔn)確的,A總是
11、與C配對(duì),G總是與T配對(duì)C配對(duì)的堿基不充滿雙螺旋空間 D一條長(zhǎng)鏈?zhǔn)菑?一3,另一條長(zhǎng)鏈?zhǔn)菑膹?一5(08全國)70DNA分子一般有成千上萬甚至數(shù)百萬個(gè)堿基對(duì)組成,基因中核苷酸的專一序列就是一種信息,編碼專一蛋白質(zhì)的一級(jí)序列。雙鏈DNA之所以具有較高的熔解溫度是由于它含有較多的:( )AA+G BC+T CA+T DC+G(09安徽)12在DNA的凝膠電泳中,聚丙烯酰胺比瓊脂糖凝膠電泳A分辨率低,分離范圍廣 B分辨率低,分離范圍小C分辨率低,分離純度低 D分辨率低,操作簡(jiǎn)練CD DB(09安徽)13雙鏈DNA中,下列哪一組堿基含量高,則它的的Tm值也高 A腺嘌呤鳥嘌呤 B胞嘧啶胸腺嘧啶 C腺嘌呤
12、胸腺嘧啶 D胞嘧啶鳥嘌呤(09安徽)18關(guān)于PCR擴(kuò)增停滯的原因有很多種,但下列各項(xiàng)中,()不是主要原因A底物(模板)過剩BdNTP的大量消耗C產(chǎn)物的聚集D非特異性產(chǎn)物的競(jìng)爭(zhēng)性抑制DB(10安徽)16、下列關(guān)于Watson and Crick的DNA雙螺旋模型的說法,正確的是( )。 A組成雙螺旋的兩條DNA鏈反向平行 B堿基對(duì)位于雙螺旋的內(nèi)側(cè) C維系雙螺旋結(jié)構(gòu)的作用力主要是堿基堆積力 DDNA雙鏈?zhǔn)亲笫致菪?0安徽)20、檢測(cè)DNA片段與蛋白質(zhì)的相互作用常用的技術(shù)為( )。 A限制性圖譜分析 BSouthern雜交 C凝膠電泳阻抑分析 Dwestern印跡分析(11全國)16DNA的Tm值
13、較高,是由于下列哪組核苷酸含量較高所致: (1分) AA+G BG+C CA+T DC+TABCCB (11全國)17DNA分子的雙螺旋結(jié)構(gòu)被破壞后,其紫外吸收將會(huì): (1分) A減小 B增加 C不變 D以上都可能(11全國)20下列哪些可使DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)穩(wěn)定: (2分) A磷酸二酯鍵 B氫鍵 C堿基堆積作用 D離子鍵(11安徽)16、下列哪一項(xiàng)關(guān)于DNA和RNA的描述是錯(cuò)誤的是( )A、DNA是雙螺旋結(jié)構(gòu),RNA是單鏈結(jié)構(gòu) B、DNA的基本結(jié)構(gòu)是脫氧核糖核酸,RNA的基本單位是核糖核酸 C、DNA只有酸解離,RNA有兩性解離 D、DNA沒有堿基T(胸腺嘧啶),而有堿基U(尿嘧啶)BBCDD(11安徽)20、一個(gè)tRNA的反密碼子為3UGC5,它能識(shí)別的mRNA的密碼子是( )A、5ACG3 B、5UGC3 C、5TCG3 D、3ACG5(12安徽)16(多選)下列關(guān)于核酸的基本結(jié)構(gòu)的說法,正確的是( )ADNA分子是右旋的雙螺旋分子B染色體被吉姆薩染料染色后顯示的G帶是富含G-C核苷酸的
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