1、自動化方法驗證2004年7月林振賢博士, Ph.D. 加拿大CVG協(xié)會 百萬個時機數(shù)據(jù)自動化LIMS數(shù)據(jù)備份/存檔數(shù)據(jù)采掘物理自動化樣品制備/分析挑選合成實驗室自動化總況實驗室自動化的益處 添加產(chǎn)出 改良員工和儀器的運用情況 更少制備任務(wù),更多靈敏機動 每時每刻都可以運轉(zhuǎn)改良結(jié)果質(zhì)量 更好的精度和準(zhǔn)確度 降低誤差 方法轉(zhuǎn)換容易平安性 減少在有毒環(huán)境的中的暴露 降低一切溶劑的數(shù)量自動化系統(tǒng)含量測定片劑處置任務(wù)站- Caliper前置任務(wù)站 - Caliper溶出AT70溶出系統(tǒng) - Sotax多劑量任務(wù)站 - Caliper自動化任務(wù)站片劑處置任務(wù)站圖示 自動化任務(wù)站溶出任務(wù)站圖示 系統(tǒng)性能是自

2、動化分析勝利的關(guān)鍵從分析員到任務(wù)站建立該系統(tǒng)的可靠性和效果 提供該系統(tǒng)可以準(zhǔn)確地、準(zhǔn)確地和可靠地執(zhí)行義務(wù)的書面闡明系統(tǒng)合格化情況2個能夠的情況：1. 有手動方法且曾經(jīng)過驗證2. 沒有手動方法典型的分析程序包括:樣品制備丈量數(shù)據(jù)處置把手動制備步驟轉(zhuǎn)化成自動步驟 堅持一樣的濃度(一樣的LC濃度) 單個自動步驟替代多重稀釋步驟順序處置替代批量處置 恒器或者超聲處置替代晃動自動化方法建立自動化方法建立方法建立包括：密度確定體積轉(zhuǎn)移系統(tǒng)兼容性過濾研討溫度研討殘存度研討溶液穩(wěn)定性萃取研討溶液密度分量法溶劑配分或稀釋假設(shè)要求二次稀釋，預(yù)備好稀釋液和過濾液體積轉(zhuǎn)移劑型占有體積 假設(shè)轉(zhuǎn)移的體積很大，手動和自動的

3、結(jié)果將會不一樣自動化方法建立使系統(tǒng)單元的影響最小化可以從系統(tǒng)單元和過濾器中萃取的把溶劑經(jīng)過過濾器或液體通道與沒有經(jīng)過過濾的溶劑比較系統(tǒng)單元和過濾器活性保管把被分析物或樣品經(jīng)過過濾器或液體通道沒有經(jīng)過過濾的樣品比較處置過的沒有經(jīng)過過濾的樣品之間的差別不應(yīng)該超出公稱濃度的1%。自動化方法建立過濾研討過濾預(yù)濕體積分析與過濾之間的平衡最正確流速高流速會呵斥過濾器堵塞回流壓力低流速會呵斥精細(xì)顆粒穿過過濾器的容積可以有效過濾的溶液體積自動化方法建立溫度研討萃取過程會呵斥萃取溶劑溫度的顯著上升溫度上升會呵斥因溶劑密度的改動導(dǎo)致稀釋誤差要妥善選擇溶劑和過程以使溶劑熱效應(yīng)最小可以在計算中糾正上述問題，或需求在方

4、法中附加浸泡/廓清時間來允許溶液降溫到室溫自動方法建立轉(zhuǎn)接同樣的液體通道每次都要運用每分析一個樣品后(最濃的)就分析一個空白樣品規(guī)范穩(wěn)定性蒸發(fā)和降解樣品穩(wěn)定性通常不是一個問題在重新測試穩(wěn)定性前，在典型的環(huán)境條件下，存放這些溶液一段可以到達(dá)希望的穩(wěn)定性的時間。自動化方法建立優(yōu)化從基質(zhì)中回收藥物崩解單元 的速度萃取步驟時段萃取步驟數(shù)目浸泡時間和廓清時間自動化方法建立驗證的目的和范圍自動系統(tǒng)描畫驗證參數(shù)實驗程序接受規(guī)范論證極限偏向與修正驗證方案根本假設(shè)經(jīng)過IQ、OQ、PQ和規(guī)范的性能核實建立起來的系統(tǒng)根本效能驗證參數(shù)等價性 (假設(shè)存在有驗證過的手動方法回收率 (選項，假設(shè)存在有驗證過的手動方法殘存度

5、(積累性殘存度)反復(fù)性程式化自動化放方法建立等價性與驗證過的手動方法一致比較手動與自動結(jié)果分析上還是統(tǒng)計上的差別? 設(shè)置合理的判據(jù) 等價性含量均勻性/多重劑型含量均勻性：在全濃度100%公稱濃度范圍內(nèi)10個確測點理想情況測3批總共30個樣品批量含量：在全濃度100%公稱濃度范圍內(nèi)6個確測點理想情況測3批總共18個樣品經(jīng)過手動方法獲得一樣批號樣品的數(shù)據(jù)手動和自動方法平均差要滿足 3%等價性降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似; 一切超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足以下限制： 1.0% + 0.3%確定一個具有代表性的劑型，理想情況需求兩批不同樣品，還要與手動方法對這一樣兩批樣品進(jìn)展

6、比較等價性溶出每一個溶出需求6個全濃度范圍確實丈量來確定(理想情況測3批總共18個樣品)經(jīng)過手動方法獲得一樣批號樣品的數(shù)據(jù)在樣品從同一次實驗中獲得的情況下,手動方法和自動方法之間的平均差別在Q時間點要求 3%, 否那么if 那么要求滿足 5%等價性溶出情況比較回收率 (準(zhǔn)確率)含量基質(zhì)的活性成分回收率等價實驗顯示回收率接近公稱濃度的100%在公稱濃度80%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收率每個程度+ 2% 溶出在公稱濃度0%-120%之間優(yōu)化操作顯示較好回收率每個程度+ 3%含量均勻性樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的70 130% 中的最小范圍 (3 個濃度/ 3次復(fù)測 = 9 個樣品)

7、一切回收率應(yīng)該是目的濃度的2%批量測試樣品基質(zhì)的活性成分回收率是公稱濃度的80 120% 中的最小范圍 (3 個濃度/ 3次復(fù)測 = 9 個樣品)一切回收率應(yīng)該是目的濃度的2%回收率 (準(zhǔn)確率)降解與雜質(zhì)比較數(shù)據(jù)；大致情況應(yīng)該類似; 一切超出定量極限的雜質(zhì)或降解產(chǎn)物應(yīng)該存在，并且滿足在前面列出的限制.在撫慰劑中摻入可以得到的雜質(zhì)/降解產(chǎn)物，涵蓋公稱濃度的定量極限至130%(3 個濃度/ 3次復(fù)測 = 9 個樣品)一切回收率應(yīng)該是目的濃度的10%回收率(準(zhǔn)確率) 溶出樣品基質(zhì)的活性成分回收率是在Q時間點屬性的20% 中的最小范圍 (3 個濃度/ 3次復(fù)測 = 9 個樣品) 一切回收率應(yīng)該是目的濃

8、度的3% 準(zhǔn)確率可以經(jīng)過稱心的專屬性、線性和精度來保證回收率 (準(zhǔn)確率)殘存度一切樣品運用一樣的液體通道顯示系統(tǒng)有效的清洗和最小的交叉污染程序操作典型的樣品，接著做空白樣品分析在空白中殘留的活性成分在空白中活性成分的濃度小于前面分析樣品的1% 或小于公稱濃度的1% 殘存度片劑含量分析三個典型樣品，每一個樣品后分析一個空白計算察看到的殘存度程度殘存度溶出 分別每個容器的取樣線普通來說，一次活性測試緊跟一次空白測試所以容器都具有共同的取樣線在三個溶出容器中每一個都放入一片藥片進(jìn)展溶出操作接著進(jìn)展一次容器中沒有藥片的操作對其它兩個容器反復(fù)上面的步驟計算察看到的殘存度程度精度精度精度闡明產(chǎn)生一致性數(shù)據(jù)

9、的才干可以比較兩個獨立操作的相對規(guī)范偏向百分比和平均值 典型的接受規(guī)范含量測試: + 2% 平均值, + 2% 相對規(guī)范偏向百分比的差值溶出操作: + 3% fo平均值 + 3%相對規(guī)范偏向百分比的差值含量均勻性100%公稱濃度范圍需求10個確測點自動方法相對規(guī)范偏向RSD在手動方法RSD 2% 范圍，且不得超越6%沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足 6%批量測試100%公稱濃度范圍需求6個確測點自動方法的RSD在手動方法RSD的 2% 范圍沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足 3% 精度降解物和雜質(zhì)對于知雜質(zhì)數(shù)量的單批樣品或摻雜樣品的制劑需求6個確測點 對于單個雜質(zhì)：RSD 15%

10、 對于雜質(zhì)總量： RSD 10%精度溶出100%公稱濃度范圍需求6個確測點自動方法的RSD不超越手動方法RSD的2% 沒有手動方法存在，自動方法的RSD要滿足 3%精度重現(xiàn)性實驗室之內(nèi)：假設(shè)有一個以上系統(tǒng)實驗室之間：普通作為方法轉(zhuǎn)讓進(jìn)展穩(wěn)定性:樣品制備步驟的程式化在大量的方法建立中都有描畫分析丈量的程式化將類似于普通的程式化評價重現(xiàn)性和程式化參考文獻(xiàn)Chapter 5: Development and Validation of Automated Methods, Chantal Incledon and Herman Lam; Analytcial Method Validation an

11、d Instrument Performance verification, Chung Chow Chan, Y.C. Lee, Herman Lam and Xue Ming Zhang, Wiley InterScience, 2004. Development and Validation of Automated Methods for Finished Product Testing, A Walsh et al, Pharmaceutical Technology Europe, p44 May, 2000.Development and Validation of Analytical MethodsChristopher Riley and Thomas Rosanke, Pergamon, 1996. Chapter