1、Wednesday, July 06, 2022藥物分析1第十四章第十四章 內容內容了解中藥制劑的分類及中藥制劑分析的特點熟悉中藥制劑分析的一般程序掌握中藥制劑常用的定量分析方法第1頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析2一、定義 中藥制劑是根據藥典、制劑規范和其它規定的處方，將中藥的原料藥物加工制成具有一定規格，可以直接用于防病、治病的藥品第一節第一節 概述概述第2頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析3注意：中藥制劑必須是以中醫藥基礎理論和用藥原則為指導制成的單方或復方制劑。中藥的成方制劑又稱為中成藥第3頁/共139頁Wedn

2、esday, July 06, 2022藥物分析4同物異名 同名異物（30多種，鱗毛蕨科、蹄蓋蕨科、 紫萁科、烏毛蕨科）貫眾二、中藥制劑分析的特點 中藥市場混亂1.第4頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析5同物異名現象嚴重： 重樓為百合科Paris polyphylla Smith. 的根莖又名七葉一枝花、蚤休、草河車 拳參為蓼科Polygonum bistra L.的根莖又名草河車第5頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析6生長環境、采收季節及部位差異麻黃 東北西北（-）麻黃堿含量 （+）麻黃堿含量GAP 中藥材生產質量管理規

3、范中藥材質量的不穩定性2.第6頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析7益母草 水蘇堿 營養期含量最高 益母草堿 營養期含量最低薄荷腦 秋季葉變黃時含量最高丹參酮 11、12月份含量最高第7頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析8不同部位人參皂苷的含量 重量比(%) 總皂苷含量(%) 周皮 6.9 2.60韌皮 46.6 3.04木質部 46.5 0.31第8頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析9五倍子 鞣質（70%）槐米 蘆?。?0%）長春花 長春新堿（百萬分之一）美登木 美登木堿（千萬分之一）各

4、種有效成分含量相差懸殊3.第9頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析10 中藥藥效的發揮是多種成分協同作用的結果，因此應從整體上來控制中藥的質量成分復雜且大多數有效成分尚不十分清楚4.第10頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析11鞣質 地榆（止血） 其他（無藥效）有效 無效同一成分在不同藥材中的藥理作用不同5.第11頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析12例 三黃瀉心湯干浸膏有效成分與濃縮干燥方法的關系(%) 常壓 減壓 逆浸透 成分 濃縮 濃縮 噴霧大黃酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8

5、小檗堿 34.5 37.5 94.5黃連堿 6.3 12.0 93.7黃岑苷 77.4 77.6 98.5制劑工藝不同，有效成分的量也不同6.第12頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析13丸、散、片、錠、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等劑型繁多，輔料干擾大7.第13頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析14 針對不同的劑型，采用相應的方法進行分離純化后測定蠟丸 蜂蠟蜜丸 蜂蜜糊劑 糯米粉、黃米粉曲劑 發酵膠劑 豆油、黃酒、冰糖第14頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析15中藥制劑的分類二

6、、中國藥典（2000年版）一部（二十六種）丸劑 膠劑 膏藥 顆粒劑 滴眼劑散劑 合劑 露劑 糖漿劑 軟膏劑片劑 酒劑 茶劑 滴丸劑 注射劑錠劑 酊劑 搽劑 膠囊劑 滴鼻劑栓劑 巴布膏劑 橡膠膏劑 氣霧劑噴霧劑 煎膏劑（膏滋）流浸膏劑與浸膏劑第15頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析16（一）液體制劑用藥材提取物制備的液體制劑合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑 滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等（無植物組織與細胞，故無顯微鑒別）第16頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析171、 合劑與口服液（單劑量合劑也可稱為“口服液”）合劑系指藥材用水

7、或其他溶劑，采用適宜方法提取，經濃縮制成的內服液體制劑一般檢查項目第17頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析182、 酒劑與酊劑酒劑酊劑藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液體制劑藥物用規定濃度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液體制劑一般檢查項目甲醇量檢查（GC）總固體微生物限度含乙醇量（GC）裝量第18頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析19（二）半固體制劑軟膏裝量微生物限度檢查項目常用基質 油脂性、水溶性 乳劑型（乳膏劑）藥物、藥材細粉、藥材提取物與適量基質混合制成的半固體外用制劑第19頁/共139頁Wednesday, July 06

8、, 2022藥物分析20 藥材提取液的濃縮液（三）半流體制劑煎膏劑(膏滋)流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）（無植物組織與細胞，故無顯微鑒別）第20頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析21藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉蜜或糖制成的半流體制劑1、 煎膏劑(膏滋) 相對密度不溶物 裝量微生物限度檢查項目應無焦臭、異味，無糖結晶析出第21頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析222、流浸膏劑與浸膏劑（半/固）藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分或全部溶劑，調整濃度至規定標準而制成的制劑裝量微生物限度檢查項目1ml流 浸膏 1g 原藥材1g 浸

9、膏 2 5g 原藥材第22頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析23生產提取溶劑大多為水或稀醇檢測時一般需經有機提取后分析對于流浸膏，有的測總固體量以控制其質量有效成分不明或無定量方法的，可 測一定溶劑的浸出物含量 有效成分明確且有適當方法 ，測定有效成分的含量第23頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析24（四）固體制劑 藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑（有植物組織與細胞，可做顯微鑒別）第24頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析

10、251、 丸劑 指藥材細粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等檢查項目水分、重量差異(按丸或重量)裝量差異(按一次劑量分裝的)溶散時限、微生物限度第25頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析26裝量差異(按一次劑量分裝的)水分、重量差異(按丸或重量)溶散時限微生物限度檢查項目第26頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析27水分規定大蜜丸、小蜜丸、濃縮蜜丸 15.0%水蜜丸、濃縮水蜜丸 12.0%水丸、糊丸、濃縮水丸 9.0%裝量差異 %限限量量標標示示裝裝量量

11、裝裝量量瓶瓶每每袋袋 高低溶散時限6丸，照崩解時限檢查法第27頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析28重量差異重量差異第一法（按丸服用）每次最高丸數或每第一法（按丸服用）每次最高丸數或每 丸（丸（1.5g），），10份份%W限量限量次次最高丸數最高丸數丸丸標示重量標示重量次次最高丸數最高丸數 高高低低%W限限量量標標示示重重量量每每丸丸 高高低低第二法（按重量服）每份第二法（按重量服）每份10丸，丸，10份份%W限限量量平平均均重重量量或或標標示示重重量量丸丸 10 高高 低低第28頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析292、

12、 散劑 一種或多種藥材混合制成的粉末狀制劑，分內服和外用散劑 檢查項目均勻度水分裝量差異微生物限度第29頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析30均勻度取供試品適量置光滑紙上，平鋪約5cm2，將其表面壓平，在亮處觀察，應呈現均勻的色澤，無花紋、色斑水分9.0%第30頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析313、顆粒劑 藥材提取物與適宜輔料或藥材細粉制成的顆粒狀制劑，分為可溶性顆粒劑、混懸性顆粒劑、泡騰性顆粒劑 檢查項目粒度 水分 溶化性裝量差異 微生物限度第31頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析

13、32粒度 1號篩4號篩8%(左右輕輕往返3分鐘)溶化性溶溶化化攪攪拌拌倍倍熱熱水水 52010g裝量差異單劑量包裝 同丸劑多劑量包裝 最低裝量檢查法(附錄 C) 平均裝量標示裝量 每個裝量限量% 第32頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析334、 片劑 藥材提取物加藥材細粉或藥材細粉與適宜輔料混勻壓制而成的園片狀或異形片狀的制劑，分為浸膏片、半浸膏片和全粉片檢查項目重量差異崩解時限微生物限度原粉片30浸膏片1h薄膜衣片1h第33頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析345、膠囊劑硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑 檢查項目水分裝量差異崩

14、解時限微生物限度第34頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析35第二節 中藥制劑分析的一般程序含量測定檢查鑒別取樣提取純化第35頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析36供試品溶液的制備一、（一）提取方法1、萃取法 利用溶質在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使物質從一種溶劑轉移到另一種溶劑中，將測定組分提取出來的方法第36頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析37用于皂苷類正丁醇氯仿乙醚、石油醚醋酸乙酯（1）萃取溶劑的選擇.用于生物堿類用于黃酮類用于揮發油第37頁/共139頁Wednesday,

15、July 06, 2022藥物分析38（2）水相pH的選擇酸性成分 比其pKa低12個pH單位 比其pKa高12個pH單位 堿性成分第38頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析39（3）儀器和提取次數（4）酒劑和酊劑先揮去乙醇（5）防止和消除乳化分液漏斗鑒別1次含量測定 3 4次第39頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析402、冷浸法 樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時間的提取方法適宜易溶出的組分適宜遇熱不穩定的藥物 費時（8 24小時）特點適用范圍適宜植物性粉末不宜動物性粉末第40頁/共139頁Wednesday, July 06

16、, 2022藥物分析41親脂性 親水性石油醚 苯 氯仿 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙醇 甲醇 水第41頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析423、 回流提取法 樣品置有機溶劑中加熱回流的提取方法加快溶出速度，省時適宜受熱穩定的藥物適宜較難溶出的組分特點儀器普通回流裝置通過更換溶劑，使提取更完全第42頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析43第43頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析444、 連續回流提取法 樣品置有機溶劑中加熱，蒸發的溶劑經冷凝流回樣品管的提取方法節省溶劑，提高提取效率適宜受熱穩定的

17、藥物費時特點儀器索氏提取器第44頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析45第45頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析465、 水蒸氣蒸餾法 適用于具揮發性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測定麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮發油第46頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析476、 超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器） 簡便 省時 提取率高 利用超聲波的助溶作用進行提取原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現“空化”現象（氣泡的形成、產生及破裂現象），形成超過1000個大氣壓的沖擊力第47頁/共13

18、9頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析487、 超臨界流體萃?。⊿FE法）當壓力和溫度超過氣體的臨界點時所形成的單一相態超臨界流體 是一種處于超臨界點之上的流體，是介于氣體與液體之間的一種物相，兼有氣體與液體的一些特性第48頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析49氣體超臨界流體氣體T 壓力T 壓力第49頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析50 SFE 工藝流程第50頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析51 超臨界流體萃取與化學法萃取相比有以下突出的優點： （1） 它具有與

19、液體相似的密度，因而具有與液體相似的較強的溶解能力；（2）溶質在流體中的擴散系數與氣體相似，具有傳質快，提取時間短的優點； （3）超臨界流體的表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測定組分；第51頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析52（4）超臨界流體在通常狀態下為氣體，萃取后溶劑可立即變成氣體而逸出，易達到濃集的目的；（6） CO2價格便宜，純度高，容易取得，且在生產過程中循環使用，從而降低成本；（5） CO2是一種不活潑的氣體, 萃取過程不發生化學反應,且屬于不燃性氣體,無味、無臭、無毒，故安全性好；（7） 該技術易與其他儀器聯用實現自動化第52頁/共139頁

20、Wednesday, July 06, 2022藥物分析53（二）純化方法1、萃取法 利用藥物與雜質溶解性能的不同進行分離例棄去棄去水層水層含生物堿樣品含生物堿樣品 H生物堿鹽 游離生物堿游離生物堿氯仿氯仿氨水H2O第53頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析542、 柱色譜法（1）保留測定組分在柱上，洗去雜 質，再用適當溶劑洗下組分（2）保留雜質于柱上常用固定相硅膠氧化鋁大孔吸附樹脂第54頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析55鑒別試驗二、鑒定有臨床療效的已知成分黃連 小檗堿（抗菌消炎） 麻黃 麻黃堿（支氣管哮喘）烏頭 烏頭堿

21、（毒性）洋地黃 強心苷（強心）延胡索 延胡索乙素（鎮痛）第55頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析56（一）顯微鑒別（含生藥粉制劑）丸劑、片劑、膠囊劑、散劑快速，簡便，覆蓋面大 選擇原則1、應選有專屬性的特征進行鑒別2、多來源的藥材應選擇共有的特征進行 鑒別第56頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析571、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、梔子8、郁金9、黃芩安宮牛黃丸安宮牛黃丸第57頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析58（二）化學鑒別 抗干擾能力差顯色、熒光 試劑試劑

22、組分組分例 二妙丸中蒼術的鑒別褪褪色色醚醚層層樣樣品品乙乙醚醚 4KMnO蒼術酮蒼術炔第58頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析59（三）色譜鑒別TLC法應用最多 （Rf、顏色、熒光）GC法 適用于含揮發性成分 的藥物 HPLC法常與含量測定同時進 行第59頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析60陰、陽對照法陽性對照 將要鑒別的藥材按制劑 工藝處理，再按鑒別方 法提取的溶液陰性對照 把制劑中要鑒別的藥材 除去，用剩下的各味藥 按制劑工藝處理，再按 鑒別方法提取的溶液 第60頁/共139頁Wednesday, July 06,

23、2022藥物分析61 O O O O O O O O O O 例例陽性對照陰性對照樣品第61頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析62大補陰丸大補陰丸 黃柏的黃柏的TLC法鑒法鑒別別 樣品對照藥材小檗堿O O OO O 例例第62頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析63薄層板的選擇薄層板的選擇 硅膠G板（可加0.3% 0.5% CMC-Na） 多用 氧化鋁板 常用于生物堿類藥物 聚酰胺板 常用于黃酮類及酚類 藥物 纖維素板 常用于氨基酸類藥物 第63頁/共139頁1.定義：定義： 中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段

24、，中藥材或中藥制劑經適當處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜得到的能夠標定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜（四）中藥鑒別新技術中藥指（四）中藥鑒別新技術中藥指 紋圖譜紋圖譜第64頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析652. 色譜指紋圖譜的基本屬性色譜指紋圖譜的基本屬性模糊性 強調分析、比較指紋圖譜的相似性，而不是完全相同。是一種綜合的、量化的色譜鑒別手段。整體性 將指紋圖譜作為一個整體來分析和比較它的綜合特征以達到鑒別的目的。第65頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析66第66頁/

25、共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析673. 指紋圖譜的應用第67頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析68雅蓮云蓮味蓮雅蓮云蓮第68頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析69IIIIII訶 子小訶子大訶子絨毛訶子第69頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析70人參須根人參主根第70頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析71不同產地高良姜的氣相指紋圖譜第71頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析72指紋圖譜

26、研究過程中的注意事項：指紋圖譜研究過程中的注意事項：1、在、在藥效學指導下藥效學指導下進行研究，保證指紋圖譜反映進行研究，保證指紋圖譜反映的化學成分包括中藥材中有效部位所含的絕大部的化學成分包括中藥材中有效部位所含的絕大部分成分或有效成分的全部。分成分或有效成分的全部。2、樣品的預處理過程及測定方法應、樣品的預處理過程及測定方法應簡便、經濟、簡便、經濟、易行易行，且，且專屬性、準確度與重現性好專屬性、準確度與重現性好。第72頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析73雜質檢查三、水分總灰分和酸不溶性灰分重金屬砷鹽殘留農藥 主要項目第73頁/共139頁Wednesd

27、ay, July 06, 2022藥物分析74雜質來源及檢查意義水分 結塊、霉變或有效成分水解灰分 控制藥物本身及泥土、沙石 等無機雜質砷鹽 劇毒，常由除草劑、殺蟲劑 或化肥引入重金屬 環境污染和使用農藥引入 殘留農藥 有毒第74頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析75烘干法（不含或少含揮發性成分）甲苯法 （含揮發性成分）減壓干燥法（含揮發性成分貴重藥） GC法（一）水分測定法第75頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析76酸不溶性灰分的測定 灰化灰化恒重恒重炭化炭化供試品供試品已恒重坩堝已恒重坩堝600500 炭化炭化灰化灰化

28、過濾過濾總灰分總灰分已恒重坩堝已恒重坩堝HCld總灰分的測定（二）總灰分和酸不溶性灰分的測定第76頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析77WHO規定植物藥鉛10ppm鎘0.3ppm干法破壞濕法破壞硫代乙酰胺法（三）重金屬的測定第77頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析78干法破壞（ChP）濕法破壞（USP）灰化灰化炭化炭化供試品供試品低溫低溫 6005003HNO蒸蒸干干蒸蒸干干第第一一法法 HClOH2(調到中性) 第第一一法法消消化化供供試試品品凱凱氏氏燒燒瓶瓶O第78頁/共139頁Wednesday, July 06,

29、2022藥物分析79法法古蔡氏法古蔡氏法供試品供試品有機破壞有機破壞DDCAg 堿融法破壞濕法破壞堿融法 灰灰化化炭炭化化供供試試品品6005002OHCaH+ 34AsO（四）砷鹽的測定第79頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析80（五）殘留農藥的測定1、 總氯量的測定2、 總磷量的測定3、GC法第80頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析81 中國藥典中藥制劑含量測定所占比中國藥典中藥制劑含量測定所占比例例 版本版本 % 1977 1.48 1985 5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09

30、（HPLC 36% TLCS 24% GC 3%)含量測定項目的選定四、第81頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析82測定項目的選定原則1 首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立 含量測定方法2 其次考慮臣藥及其他味藥3 有效成分明確的，可選有效成分4 成分類別清楚的，可測某一類總 成分的含量第82頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析835 檢測成分應歸屬某單一藥味6 檢測成分應與中醫用藥的功能主 治相近7 確無法含量測定的，可測定浸出 物含量化學分析法色譜法常用定量方法 分光光度法第83頁/共139頁Wednesday, July 0

31、6, 2022藥物分析84（一）化學分析法重量分析法 容量分析法特點 A、準確度、精密度高 B、抗干擾能力差昆昆明明山山海海棠棠片片 HCl殘殘渣渣濾濾液液樣樣品品乙乙醇醇 OHNH23乙乙醚醚恒恒重重稱稱重重 例第84頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析85（二）分光光度法UV法 比色法特點 A、靈敏度高 B、簡便、快速 C、精密度稍低 D、干擾多 第85頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析86蘆丁蘆丁nm,max359299266259 黃芩苷黃芩苷nm,max314271240 小檗堿小檗堿 nm,max36035034

32、5 丹皮酚丹皮酚nmmax274 第86頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析87（三）TLCS法 測定薄層板上斑點對單色光的吸收或反射的強度而進行定量的方法特點 A、分離效果好 B、適用于無法用UV、HPLC 法測定的組分 C、準確度、精密度低于HPLC第87頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析882000年版中國藥典（年版中國藥典（2000年版）年版）薄層掃描法品種薄層掃描法品種 品種數量品種數量 TLCS數量數量 占總占總數數%534（藥材）（藥材） 20 3.74458（成藥）（成藥） 32 6.99978（總數）（總數

33、） 52 10.73第88頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析891、 選擇測定條件（1）薄層色譜條件 分離好 不拖尾（2）檢測方法吸收測定法熒光測定法反射法透射法（3）掃描方式 單波長雙波長線性掃描法鋸齒掃描法外標法內標法第89頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析90（4）散射參數SX薄層板的散射使ECLA Kubelka-Munk方程 jSiKSdxdi iSjKSdxdj 第90頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析91（1）薄層板 均勻、平整2、 注意事項（2）點樣量 準確（4）顯色劑

34、均勻、適當（5）保護斑點 用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，以起固定和隔絕空氣作用（3）斑點 應完全分離，不拖尾第91頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析92 樣樣 樣樣 對對 對對 樣樣 樣樣 對對 對對 樣樣 樣樣 對對 對對 低低 高高 低低 高高 低低 高高 外標法（兩點校正法）外標法（兩點校正法）第92頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析93第93頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析94（四）HPLC法RP - HPLC色譜柱 ODS流動相 甲醇 - 水PIC 反離

35、子 氫氧化四丁基銨色譜柱 ODSRP - PIC 反離子 烷基磺酸鹽 無機陰離子外標法和內標法第94頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析95離子對色譜法（PIC） 極性流動相中加入離子對試劑，與被分析離子生成中性離子對，從而增加在非極性固定相中的溶解度，使分配系數增大第95頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析962000年版中國藥典（年版中國藥典（2000年版）年版）HPLC法品種法品種 品種數量品種數量 HPLC數量數量 占總數占總數%534（藥材）（藥材） 54 10.11458（成藥）（成藥） 48 10.48978（總

36、數）（總數） 102 20.59第96頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析97應用實例應用實例- -小青龍合劑小青龍合劑 處方處方 麻黃麻黃125g 125g 桂枝桂枝125g 125g 白芍白芍125g 125g 干姜干姜125 125 五味子五味子125g125g 細辛細辛62g 62g 甘草甘草( (蜜炙蜜炙) ) 法半夏法半夏188g188gNOTESNOTES：合劑是在傳統湯劑基礎上改進后的一種新劑：合劑是在傳統湯劑基礎上改進后的一種新劑型型生物堿桂皮醛芍藥甙揮發油三萜皂甙第97頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析9

37、8應用實例應用實例- -小青龍合劑小青龍合劑 制法制法 以上八味，細辛、桂枝提取揮發油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與白芍、以上八味，細辛、桂枝提取揮發油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與白芍、麻黃、五味子、甘草加水煎煮至味盡，合并煎液，濾過，濾液和蒸餾后的水溶液合并，濃麻黃、五味子、甘草加水煎煮至味盡，合并煎液，濾過，濾液和蒸餾后的水溶液合并，濃縮至約縮至約1000ml1000ml。法半夏、甘姜照流浸膏劑項下滲漉法，用。法半夏、甘姜照流浸膏劑項下滲漉法，用70%70%乙醇作溶劑，浸漬乙醇作溶劑，浸漬2424小時后小時后進行滲漉，漉液濃縮，與上述藥液合并，靜置，濾過，濾液濃縮至進行滲漉，漉液濃縮

38、，與上述藥液合并，靜置，濾過，濾液濃縮至1000ml1000ml，加入苯甲酸，加入苯甲酸鈉鈉3g3g與細辛、桂枝揮發油，攪勻，即得。與細辛、桂枝揮發油，攪勻，即得。第98頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析99 性狀性狀 本品為棕黑色的液體；氣微香，味甜、微辛。本品為棕黑色的液體；氣微香，味甜、微辛。 功能與主治功能與主治 解表化飲，止咳平喘。用于風寒水飲，惡寒發熱，無汗，喘咳解表化飲，止咳平喘。用于風寒水飲，惡寒發熱，無汗，喘咳痰稀。痰稀。 用法與用量用法與用量 口服，一次口服，一次10-20ml10-20ml，一日，一日3 3次，用時搖勻。次，用時搖勻。第

39、99頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析100方藥分析：方藥分析：君君 麻黃麻黃發汗為君發汗為君臣臣 桂枝桂枝解表為臣解表為臣佐佐 甘草甘草恐發汗太過恐發汗太過, , 佐以甘草緩佐以甘草緩 之之使使 白芍、干姜、細辛、法半夏、五白芍、干姜、細辛、法半夏、五 味子味子幾藥合力共為使。幾藥合力共為使?？赏獍l汗，內行水，散表里之邪?？赏獍l汗，內行水，散表里之邪。第100頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析101漢代張仲景漢代張仲景傷寒論傷寒論小青龍湯小青龍湯近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑近代由重慶桐君閣中藥廠該湯劑為合劑本方治療

40、傷寒表不解，心下有水氣，干嘔，發熱而咳。近代也用于慢性支氣本方治療傷寒表不解，心下有水氣，干嘔，發熱而咳。近代也用于慢性支氣管炎，支氣管哮喘、肺氣腫，均見咳、喘、痰白清稀者。管炎，支氣管哮喘、肺氣腫，均見咳、喘、痰白清稀者。第101頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析102供試品溶液與陰性對照液的制備：供試品溶液與陰性對照液的制備： 取合劑取合劑10 ml10 ml，石油醚分，石油醚分3 3次萃取，合并石油醚萃取液次萃取，合并石油醚萃取液 油層油層 ，濃縮至，濃縮至1ml1ml，為供試品溶液為供試品溶液A A； 水層水層 用用NaNa2 2COCO3 3調調P

41、H11-12PH11-12，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，殘渣，用氯仿萃取，合并氯仿萃取液，回收氯仿至干，殘渣用用1ml1ml甲醇溶解，為供試品溶液甲醇溶解，為供試品溶液B B；NOTESNOTES：陰性對照液陰性對照液如上法同步進行。如上法同步進行。第102頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1031. 1. 桂皮醛的鑒別桂皮醛的鑒別 取供試品液取供試品液A A、陰性對照液、桂皮醛對照液（、陰性對照液、桂皮醛對照液（1ug/ml1ug/ml）15ul15ul，點于同一硅膠，點于同一硅膠G G板上，環己烷板上，環己烷- -乙酸乙酯（乙酸乙酯（171

42、7：3 3）展開，晾干，噴）展開，晾干，噴2 2，4 4二硝基苯肼乙醇二硝基苯肼乙醇T.ST.S，供試品供試品A A與對照品在相應位置上顯相同的橙色斑點，而陰性對照液無此斑點。與對照品在相應位置上顯相同的橙色斑點，而陰性對照液無此斑點。第103頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1042. 2. 細辛揮發油的鑒別細辛揮發油的鑒別 取供試品液取供試品液A A、陰性對照液、細辛揮發油對照液（、陰性對照液、細辛揮發油對照液（1 1：1010乙醚液）乙醚液）5ul5ul，點，點于同一硅膠于同一硅膠G G板上，環己烷展開，晾干，噴板上，環己烷展開，晾干，噴10%10%香

43、草醛濃硫酸香草醛濃硫酸T.ST.S，加熱至顯色，加熱至顯色，供試品供試品A A與對照品在相應位置上顯相同的粉紅色斑點，而陰性對照液無此斑點。與對照品在相應位置上顯相同的粉紅色斑點，而陰性對照液無此斑點。第104頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1053. 麻黃堿的鑒別麻黃堿的鑒別 取供試品液取供試品液B，陰性對照液，麻黃堿對照品液（，陰性對照液，麻黃堿對照品液（1mg/ml）各）各5ul，點于同一硅，點于同一硅膠膠G，氯仿，氯仿-甲醇甲醇-濃氨水濃氨水（20：5：0.5）展開，晾干，噴茚三酮）展開，晾干，噴茚三酮T.S，加熱至斑點顯色，供試品，加熱至斑點顯色

44、，供試品B與對照品與對照品在相應位置上顯相同的藍紫色斑點，而陰性對照液無此斑點。在相應位置上顯相同的藍紫色斑點，而陰性對照液無此斑點。第105頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析106 取合劑取合劑5ml，上聚酰胺柱，上聚酰胺柱，DW洗脫，洗脫液水浴濃縮至干，用洗脫，洗脫液水浴濃縮至干，用1ml甲醇溶甲醇溶解，為供試品溶液解，為供試品溶液C； 聚酰胺柱再用聚酰胺柱再用95%乙醇洗脫，棄取洗脫液，用乙醇洗脫，棄取洗脫液，用3M氨乙醇液洗脫，收集洗脫氨乙醇液洗脫，收集洗脫液水浴蒸干，液水浴蒸干， 1ml甲醇溶解，為供試品溶液甲醇溶解，為供試品溶液D。第106頁/共

45、139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1074. 芍藥甙的鑒別芍藥甙的鑒別 取供試品液取供試品液C、陰性對照液、芍藥甙對照液（、陰性對照液、芍藥甙對照液（1mg/ml）10ul，點于同一硅膠，點于同一硅膠G板上，氯仿板上，氯仿-乙酸乙酯乙酸乙酯-甲醇甲醇-冰醋酸冰醋酸-甲酸（甲酸（8：1：2：0.04）展開，晾干，噴）展開，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，供試品硫酸乙醇液，加熱至顯色，供試品C與對照品在相應位置上顯相同的紫色斑點，而陰與對照品在相應位置上顯相同的紫色斑點，而陰性對照液無此斑點。性對照液無此斑點。 第107頁/共139頁Wednesday, Jul

46、y 06, 2022藥物分析1085. 甘草酸的鑒別甘草酸的鑒別 取供試品液取供試品液D、陰性對照液、甘草酸銨對照液（、陰性對照液、甘草酸銨對照液（2mg/ml）2ul，點于同一硅，點于同一硅膠膠G板上，乙酸乙酯板上，乙酸乙酯-甲酸甲酸-冰醋酸冰醋酸-蒸餾水（蒸餾水（30：2：2：4）展開，晾干，噴）展開，晾干，噴10%硫酸乙醇液，加熱至顯色，硫酸乙醇液，加熱至顯色，UV燈燈365nm觀察，供試品觀察，供試品D與對照品在相應位置上顯與對照品在相應位置上顯相同的紫色斑點，而陰性對照液無此斑點。相同的紫色斑點，而陰性對照液無此斑點。第108頁/共139頁Wednesday, July 06, 20

47、22藥物分析109含量測定含量測定HPLC法測定芍藥甙的含量法測定芍藥甙的含量儀器與色譜條件儀器與色譜條件 BECKMAN 332型高效液相色譜儀型高效液相色譜儀163型可變波長紫外檢測儀，型可變波長紫外檢測儀，220nm427型記錄及數據處理儀型記錄及數據處理儀色譜柱為色譜柱為YWGC18流動相乙腈流動相乙腈-水（水（15：85）第109頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析110 標準曲線制備標準曲線制備 精密稱取芍藥甙精密稱取芍藥甙5.08mg，溶于水至，溶于水至50ml量瓶中，定容，分別吸取量瓶中，定容，分別吸取0.50、1.00、1.50、2.00ml

48、于于10ml量瓶中定容。量瓶中定容。 回收率測定回收率測定 精密吸取除去白芍制成的合劑（精密吸取除去白芍制成的合劑（即陰性對照液即陰性對照液）0.3ml與適量芍藥甙對照品與適量芍藥甙對照品液，通過液，通過0.5g聚酰胺柱，用水洗脫至聚酰胺柱，用水洗脫至50ml量瓶中至刻度，依前述條件測定，平均回收率量瓶中至刻度，依前述條件測定，平均回收率為為99.42%，RSD為為0.23%（n=3）。）。第110頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析111 樣品測定樣品測定 取自制小青龍合劑搖勻，用濾紙過濾，精密吸取取自制小青龍合劑搖勻，用濾紙過濾，精密吸取0.3ml0.3m

49、l濾液通過聚酰胺柱，濾液通過聚酰胺柱，以不同回收率測定條件進行測定。以不同回收率測定條件進行測定。第111頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析112第112頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析113 分析實例分析實例萬氏牛黃清心丸萬氏牛黃清心丸 處方處方 牛黃牛黃10g 10g 朱砂朱砂60g 60g 黃連黃連200g 200g 黃芩黃芩120g 120g 梔子梔子120g 120g 郁金郁金80g80g第113頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析114分析實例分析實例萬氏牛黃清心丸萬氏牛黃清

50、心丸 制法制法 以上六味，除牛黃外，朱砂水飛或粉碎成極細粉；其余黃連等四味粉碎成細粉；以上六味，除牛黃外，朱砂水飛或粉碎成極細粉；其余黃連等四味粉碎成細粉；將牛黃研細，與上述粉末配研，過篩，混勻。每將牛黃研細，與上述粉末配研，過篩，混勻。每100g100g粉末加煉蜜粉末加煉蜜100-200g100-200g制成大蜜制成大蜜丸，即得。丸，即得。古方為糊丸，亦有水丸第114頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析115 性狀性狀 本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦。本品為紅棕色至棕褐色的大蜜丸；氣特異，味甜、微澀、苦。 功能主治功能主治 清熱解毒，鎮

51、驚安神。用于熱邪內閉，煩躁不安，神昏譫語，小兒高熱清熱解毒，鎮驚安神。用于熱邪內閉，煩躁不安，神昏譫語，小兒高熱驚厥。驚厥。第115頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析116 方藥分析方藥分析 本方來源于明本方來源于明. .痘疹世醫痘疹世醫心法心法 ，本方為清心開竅劑，主治熱邪內，本方為清心開竅劑，主治熱邪內陷心包所致竅閉神昏癥。陷心包所致竅閉神昏癥。 方中牛黃，清心解毒，豁痰開竅為君藥；黃連、黃芩、梔子清熱瀉火，為臣方中牛黃，清心解毒，豁痰開竅為君藥；黃連、黃芩、梔子清熱瀉火，為臣藥；朱砂清心，重鎮安神，郁金行氣開竅共為佐使藥，合用以奏透邪瀉熱，開竅藥；朱砂

52、清心，重鎮安神，郁金行氣開竅共為佐使藥，合用以奏透邪瀉熱，開竅安神之效。安神之效。第116頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析117 方藥分析方藥分析 牛黃牛黃清熱解毒藥，主含膽酸類成分。清熱解毒藥，主含膽酸類成分。黃連黃連清熱燥濕藥，主要為小檗堿。清熱燥濕藥，主要為小檗堿。黃芩黃芩清熱燥濕藥，主要為黃酮類。清熱燥濕藥，主要為黃酮類。梔子梔子清熱瀉火藥，主含梔子甙。清熱瀉火藥，主含梔子甙。朱砂朱砂安神藥，主含硫化汞（安神藥，主含硫化汞（HgSHgS）。）。郁金郁金活血去瘀藥，主含揮發油?；钛ヰ鏊?，主含揮發油。 第117頁/共139頁Wednesday, Ju

53、ly 06, 2022藥物分析118鑒別鑒別q 顯微鑒別顯微鑒別郁金郁金糊化淀粉團塊幾乎無色。糊化淀粉團塊幾乎無色。梔子梔子種皮石細胞。種皮石細胞。黃芩黃芩纖維淡黃色，梭形，厚壁，孔溝細。纖維淡黃色，梭形，厚壁，孔溝細。黃連黃連纖維鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯。纖維鮮黃色，壁稍厚，紋孔明顯。朱砂朱砂不規則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色。不規則塊狀物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或棕黃色。第118頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析119郁金郁金糊化淀粉團糊化淀粉團塊塊梔子梔子種皮石細胞種皮石細胞黃芩黃芩纖維纖維黃連黃連纖維纖維朱砂朱砂不規則塊狀不規則塊狀

54、物或顆粒狀物，暗物或顆粒狀物，暗紅棕色、鮮紅色或紅棕色、鮮紅色或棕黃色棕黃色第119頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析120q 化學鑒別化學鑒別1. 1. 朱砂的鑒別朱砂的鑒別 取本品取本品3g3g，加水適量，研勻，反復洗去懸浮物，可得少量朱紅色沉淀，取出，加，加水適量，研勻，反復洗去懸浮物，可得少量朱紅色沉淀，取出，加入鹽酸入鹽酸1ml1ml及銅片少量，加熱煮沸，銅片由黃色變為銀白色。及銅片少量，加熱煮沸，銅片由黃色變為銀白色。 HgS+2HCl+CuCuCl2+Hg+H2S NOTESNOTES：在酸性條件下，朱砂與銅片發生置換反應析出金屬汞，在銅片表面

55、形成銀：在酸性條件下，朱砂與銅片發生置換反應析出金屬汞，在銅片表面形成銀白色汞齊。白色汞齊。第120頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1212. 2. 人工牛黃的鑒別人工牛黃的鑒別 取本品，剪碎，加硅藻土取本品，剪碎，加硅藻土0.6g0.6g，研勻，加氯仿，研勻，加氯仿10ml10ml、冰醋酸、冰醋酸0.5ml0.5ml，加熱回流，加熱回流30min,30min,放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇2ml2ml使溶解，濾過，濾液作為供試品溶使溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。液。 膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成膽酸和豬去氧膽酸加乙醇制成

56、1ml1ml含含1mg1mg的混合溶液，作為對照品溶液。的混合溶液，作為對照品溶液。第121頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析122TLCTLC法法 CMC-NaCMC-Na，硅膠，硅膠G G展開劑展開劑 醋酸乙酯醋酸乙酯- -正己烷正己烷- -醋酸醋酸- -甲醇甲醇 （32:6:1:132:6:1:1）顯色劑顯色劑 10%10%磷鉬酸乙醇液，磷鉬酸乙醇液， 1100C,10min1100C,10min第122頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析123人工牛黃人工牛黃供試品供試品牛黃空白牛黃空白豬去氧膽酸豬去氧膽酸膽膽酸酸第

57、123頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1243. 3. 黃芩的鑒別黃芩的鑒別 供試品溶液的制備：取本品供試品溶液的制備：取本品3g3g，剪碎，加硅藻土，剪碎，加硅藻土0.5g0.5g，研勻，加甲醇，研勻，加甲醇20ml20ml，加熱回流加熱回流1hr,1hr,放冷，濾過，濾液作為供試品溶液。放冷，濾過，濾液作為供試品溶液。 對照品溶液的制備：黃芩甙對照品加甲醇制成每對照品溶液的制備：黃芩甙對照品加甲醇制成每1ml1ml含含1mg1mg的溶液，作為對照的溶液，作為對照品溶液。品溶液。第124頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分

58、析125TLCTLC法法 CMC-NaCMC-Na，硅膠，硅膠G G （4%4%醋酸鈉）醋酸鈉）展開劑展開劑 醋酸乙酯醋酸乙酯- -丁酮丁酮- -甲酸甲酸- -水水 （5:3:1:15:3:1:1）顯色劑顯色劑 2%2%三氯化鐵乙醇液三氯化鐵乙醇液使斑點更為集中-OH與Fe+3絡合第125頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析126黃芩甙供試品黃芩空白第126頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1274. 4. 梔子的鑒別梔子的鑒別 供試品溶液的制備：取本品供試品溶液的制備：取本品3g3g，加乙醚，加乙醚15ml15ml，研磨，

59、棄去乙醚。殘渣揮干乙醚，加，研磨，棄去乙醚。殘渣揮干乙醚，加醋酸乙酯醋酸乙酯30ml30ml，加熱回流，加熱回流1hr,1hr,放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇3ml3ml溶解，濾過，濾液溶解，濾過，濾液作為供試品溶液。作為供試品溶液。 對照品溶液的制備：梔子甙對照品加甲醇制成每對照品溶液的制備：梔子甙對照品加甲醇制成每1ml1ml含含1mg1mg的溶液，作為對照品溶液。的溶液，作為對照品溶液。第127頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析128TLCTLC法法 CMC-NaCMC-Na，硅膠，硅膠G G展開劑展開劑 醋酸乙酯醋酸

60、乙酯- -丙酮丙酮- -甲酸甲酸- -水水 （10 : 7 : 2 : 0.510 : 7 : 2 : 0.5）顯色劑顯色劑 10%10%硫酸乙醇硫酸乙醇 1050C, 10min1050C, 10min第128頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析129梔子甙供試品梔子空白第129頁/共139頁Wednesday, July 06, 2022藥物分析1305. 5. 黃連的鑒別黃連的鑒別 供試品溶液的制備：取含量測定項下剩余的鹽酸供試品溶液的制備：取含量測定項下剩余的鹽酸- -甲醇提取液甲醇提取液4ml4ml，水浴蒸干，殘渣加甲醇溶解，使成水浴蒸干，殘渣加甲醇