1、農藥生物活性測定課后復習題1 簡述農藥生物測定的概念、意義。度量農藥對生物群體、個體、活體組織或細胞產生效應大小的生物測定技術。通常采用不同藥劑劑量或濃度對測定對象產生的效應強度，來評價兩種或兩種以上藥劑的相對效力。2 簡述農藥生物測定的原理、原則。原理：研究藥劑與生物的相關性原則v 控制影響因素盡可能一致：溫度、濕度、光照等外界環境條件 ;農藥的理化性狀;供試生物的生理狀態 ;處理方法及處理部位v 設立對照：空白對照、溶劑對照、標準藥劑對照v 重復測定v 運用生物統計分析試驗結果v 供試生物應盡量選擇農作物害蟲、病原菌和農田主要雜草3 何為高通量篩選，其組成部分有哪些？以玻璃片、膜片或培養板

2、為載體，用高密度、微量自動化加樣的方法，實現短時間內分析大量樣本。高通量篩選方法通常一次可以測定3841536個點，現在還有3456個點的超高通量篩選方法（ultra-high-throughput screening, UHTS）。主要組成部分：自動化操作系統；高靈敏度檢測系統；分子、細胞水平的高特異性體外篩選模型；被篩樣品管理庫（即樣品庫）；數據采集傳輸處理系統4 何為殺蟲劑生物測定？度量殺蟲劑對昆蟲（包括螨類和昆蟲綱以外的小動物）產生效應大小的農藥生物測定。通過比較不同殺蟲劑的劑量或濃度對供測昆蟲產生效應強度的方法，來評價兩種或兩種以上殺蟲劑的相對效力。5 什么是標準目標昆蟲？簡述目標昆

3、蟲室內飼養定向控制的條件？標準目標昆蟲：是指被普遍采用的，具有一定代表性和經濟意義，以及抗藥力穩定均勻的農藥殺蟲毒力和毒效指示試蟲群體。6 殺蟲劑生物測定中移取試蟲的方法有哪些？（1）一般移取法：對于活動強度不大或具有假死習性的試蟲（棉鈴蟲等），可用鑷子移取。體型小，軟體或易碰傷的試蟲（蚜蟲、紅蜘蛛等），用毛筆移取，注意刺吸式口器的口針。 沾藥未干的試蟲，必須等藥干后才能移取。（2）趨光法：利用昆蟲的趨光性來移取試蟲（如家蠅）。（3）吸蟲法：適用于活動強度不大，微小的或易受機械傷害的目標昆蟲（擬谷盜、米象等），用真空或喉管空氣注射吸蟲法移取。（4）自行遷移移蟲法：利用試蟲的自行遷移生活特性達到

4、混勻移蟲的目的。如蚜蟲等。（5）麻醉法：對于飛翔或活動強度大的試蟲，采用物理或化學方法進行麻醉處理。7 論述胃毒、觸殺、熏蒸、內吸、忌避作用測定技術的基本原理及方法。一、胃毒作用測定技術的基本原理：通過試蟲吞食帶藥食料，由消化道中毒致死，以測定胃毒毒力的殺蟲劑生物測定技術。無限取食法：試蟲可以無限制地取食含有殺蟲劑的飼料，不計算實際吞食藥量的用藥方法。此法簡單，但不能避免其他毒殺作用的干擾；藥量不易掌握，有拒食效應時難獲得滿意結果。例如：1）飼料混藥喂蟲法2）培養基混藥法3）毒餌法4）土壤混藥法定量取食法：使供試昆蟲按預定殺蟲劑的劑量取食，或能準確地測出試蟲取食后所吞食藥量的用藥方法。例如：葉

5、片夾毒法）、液滴飼喂法、口腔注射法二、觸殺作用測定技術原理：將藥劑施于蟲體的全部或局部（合適部位），使藥劑經體壁進入蟲體而發揮觸殺作用。直接施藥法：直接將藥劑施加在昆蟲體表（噴粉及噴霧法、浸漬法、浸玻片法）。局部施藥法：將藥劑均勻地施于蟲體的合適部位，使其充分發揮觸殺作用。由于藥劑不接觸昆蟲的口器，可以避免胃毒作用的干擾（藥膜法、點滴法）。三、熏蒸作用測定技術的基本原理：使藥劑以氣態經呼吸系統進入蟲體，在作用部位產生毒力反應，以測定熏蒸毒力的殺蟲劑生物測定。方法：溫度25，相對濕度50%下進行的。熏蒸時間一股不超過5小時。試驗昆蟲最常用的是米象與雜擬谷盜成蟲(羽化后23天)，也可以用黃粉甲幼蟲

6、或麥蛾幼蟲(3齡左右)。四、內吸毒力測定技術的基本原理：使藥劑經根、莖、葉或種子吸收和傳導后，通過供試昆蟲取食植物帶毒組織或汁液產生中毒反應，以衡量內吸毒力的殺蟲劑生物測定。直接測定法：將試蟲置于經殺蟲劑處理植株的未施藥的部位，隔一定時間后，觀察試蟲中毒死亡情況，以判斷內吸殺蟲能力的方法。間接測定法：利用敏感水生昆蟲（蚊幼蟲）對受藥植物浸出液的反應，來測定進入植物體內的內吸殺蟲劑有效成分含量的方法8 簡述葉片夾毒法的基本原理和實驗方法。基本原理是用兩張葉片，中間均勻地放入一定量的殺蟲劑飼喂目標昆蟲，然后由被吞服的葉片面積，計算出吞服的藥量。1、夾毒葉片的制備2、飼喂方法3、結果檢查4、致死中量

7、的計算9 何為殺菌劑生物測定。利用病原菌或感菌生物體對殺菌劑的反應，來確定殺菌劑效力(毒力,藥效)的農藥生物測定。10 簡述菌種保存的方法？1）傳代培養保藏法：是將菌株定期的移植到新鮮的培養基上進行培養保存的方法。是最基本的保藏法。2）液體石蠟覆蓋保藏法：是傳代培養保藏法的一種改進，利用在斜面上加注滅菌的液體石蠟使培養物隔絕空氣，同時防止培養基干涸而達到延長保藏時間的目的。本法適用于霉菌、酵母菌、放線菌和好氣細菌的保存。3）水保藏法：將細菌或真菌懸浮在無菌水中在室溫下保存菌種的方法。4）冷凍保藏法：通過冷凍使細胞停止活動進行保存的方法。）、低溫冰箱保藏法（冷凍法）：將菌體移入分散劑中，保存在低

8、溫冰箱內。 ）、液氮保藏法：將菌種用液氮進行超低溫（-196）處理保存。本法適用范圍最廣，適于絕大多數微生物、病毒、人類和動植物組織、原代及傳代細胞、雜交瘤、體外質粒、重組DNA、單細胞藻株、原生動物等。5）干燥保藏法：將細菌或真菌干燥，停止代謝活動，然后進行冷凍或冷藏的保存方法。6）冷凍干燥保藏法：將細胞冷凍使代謝活動完全停止，然后在真空下通過冰的升華除去水分并在真空狀態下保存。為防止冷凍干燥過程中細胞受到損傷，要在菌體內加入適當的保護劑，然后進行冷凍干燥。7）寄主保藏法：霜霉菌、銹菌、白粉菌等專性寄生菌的保存，一般是在植株幼苗上接種使其發病，隔一定時間后，取其孢子再接種到新的植物幼苗上，如

9、此反復進行菌種保存。8）基因工程菌的保藏：基因工程菌最好應保藏在含低濃度選擇劑的培養基中。例如，質粒pBR322。它除了能將外源DNA 輸入Ecoli細胞外，還賦予Ecoli細胞Ampr和Tetr。如果在培養基中加入Amp和Tet，則培養時可選擇出含pBR322質粒的細胞。11 簡述孢子萌發試驗法、生長速率測定法、附著法、稀釋法和抑菌圈測定法的基本原理和測定方法？一、孢子萌發試驗法的基本原理：通過藥劑與病菌孢子接觸后，根據抑制病菌孢子萌發的多少來判定藥劑效力的殺菌劑生物測定方法。可用于殺菌劑的篩選，藥劑抗雨水沖刷的測定，也可用于殺菌劑作用方式的測定。二、生長速率測定法的基本原理：利用

10、病菌在含有不同濃度藥劑的培養基上生長速度的快慢，來判定藥劑毒力大小的殺菌劑生物測定方法。適用于不產孢子或產生孢子緩慢，而菌絲生長迅速、整齊、平伏于培養基上呈放射狀生長的病菌。三、附著法的基本原理：將病菌孢子附著于滅菌的種子、濾紙片、果皮或其它保護材料上，使其接觸藥劑，在一定條件下培養一定時間后觀察有無菌絲生長，以比較藥劑效果。常用于殺真菌劑的生物測定。四、稀釋法的基本原理：又稱最低抑制濃度測定法。通過測定能完全抑制病菌生長的藥劑最低濃度，來衡量藥劑毒力的殺菌劑生物測定方法。此法可用于多種化合物對真菌、細菌和酵母藥效篩選的毒力測定。五、抑菌圈測定法的基本原理：通過藥劑在含菌培養基平面上水平擴散，

11、形成大小不同的抑菌圈來比較毒力的殺菌劑生物測定方法。12 簡述溫室盆栽試驗中接菌施藥方法及藥效調查方法？接菌方法：噴灑法：是將病原菌的孢子制成孢子懸浮液噴灑于植物表面。噴粉法：是直接用孢子粉（用滑石粉稀釋）噴撒于植物葉片上。涂抹法：是用手指或紗布將孢子懸浮液涂抹于葉片表面，或在孢子懸浮液中加適量金剛砂，用手指涂抹于葉片表面。注射法：是將病原菌孢子懸浮液用注射針注入寄主的生長點或幼嫩部分。針刺法：用滅菌的針刺傷寄主組織，然后將病菌接種在傷口內。拌種法：將病原菌的孢子拌在植物種子中。浸種法：將孢子懸浮液與種子浸泡在一起，然后播種。土壤接種法：將病菌在播種前或播種時拌在土壤中。蘸根接種法：將幼苗的根

12、部稍加損傷，在孢子或菌絲體懸浮液中浸過以后移植。根部切傷接種法：是移植鏟或其他器具在植株的附近插入土壤中，使植株的根部部分受到損傷，然后將孢子或菌絲體的懸浮液灌注在根部附近的土壤中，最好從移植鏟插入的空隙中灌入。施藥方法：1) 測定藥劑的保護效果：先噴藥，后接菌。2) 測定藥劑的治療效果：先接菌，待病菌入侵后（1-2天）再施藥。3) 測定藥劑的內吸作用：先噴藥，后接菌。4) 測定藥劑的持效期：一次施藥后，間隔1天，2天，4天，6天，8天或更長時間分期接種病原菌。5) 測定抗雨淋作用：先噴藥，用噴霧裝置降水淋洗一定時間以模擬降雨，然后接菌。效果調查：1）調查發病普遍率：以病害發生的普遍與否表示藥

13、劑的效果，計算調查總株（或總葉）數中發病百分率。適用于某些土壤和種子傳染的苗期病害，也適用于全株性病害。2) 計數法：適用于葉斑類病害。調查每一葉上的病斑數,求得平均每葉病斑數,并以此比較發病情況,計算防治效果。3）分級計數法：將病害分級調查后，計算病情指數及防治效果。13 什么是除草劑生物測定？度量除草劑對雜草生物效應大小和對作物安全性的農藥生物測定。通常采用不同劑量的除草劑對供試雜草（或作物）產生效應強度的相對比較方法，以評價一種或多種除草劑的相對效力（或安全性）。14 簡述除草劑生物測定的分類及原理（除草劑生物活性測定參數有哪些）。一、整株水平測定（1） 植株生長量：通過植物地上部分的生

14、長量或形態特征變化的大小，來測定除草劑效力高低。 以鮮重或株高為指標。（2） 癥狀：有些除草劑可引起試材的典型癥狀，可以利用此種反應來鑒定除草劑。二、組織或器官水平測定種子發芽：通過種子萌發率或對胚芽、胚根伸長長度的受抑制程度，來測定除草劑效力 。三、細胞或細胞器水平、酶水平測定1）生理生化指標：通過對植物生理過程（二氧化碳交換量、水分消耗、黃化反應、根系活力）的抑制效應，來測定除草劑的活性和效力。2）植物的部分細胞或細胞器：如愈傷組織、線粒體、葉綠體等。3）藻類的應用：濁度計測定生長量、分光光度計測定葉綠素含量、氧氣釋放、抑制面積的測定、直觀觀察4）新化合物的高通量篩選15 簡述除草劑生物測

15、定的測定方法。種子發芽測定法、植株生長量測定法、生理生化指標測定法、癥狀鑒定法、愈傷組織鑒定法16 列舉至少5種抑制光合作用除草劑的生物測定方法。去胚乳小麥幼苗法、番茄水培法、浮萍法、圓葉片漂浮法、葉片內葉綠素熒光測定法光合速率測定法、葉圓片亞硝酸還原酶活性測定法、離體葉綠體測定法17 何為植物激素的生物測定？利用敏感植物某些性狀反應作指標，對生理活性物質進行定性或定量的農藥生物測定。18 簡述植物激素生物測定技術的分類，各常用測定方法的基本原理。生長素的生物測定方法：燕麥彎曲法、小麥胚芽鞘伸長法、綠豆生根法赤霉素的生物測定方法：水稻幼苗葉鞘伸長“點滴”法、 大麥胚乳法 矮生玉米葉鞘法細胞分裂

16、素的生物測定法： 蘿卜子葉增重法 莧紅素合成法 組織培養鑒定法 小麥葉片保綠法脫落酸的生物測定：小麥胚芽鞘伸長法 棉花外植體脫落法乙烯的生物測定法： 乙烯可抑制黃化豌豆幼苗下胚軸的伸長；使下胚軸細胞橫向擴大，下胚軸短粗；偏向上生長，從而使下胚軸橫向生長。黃化幼苗對乙烯的這三種反應被稱為“三重反應”。19 如何利用豌豆、綠豆、蘿卜、棉花、燕麥來鑒別生長素、赤霉素、細胞分裂素、脫落酸和乙烯？（或者：大麥、小麥、綠豆、豌豆、蘿卜）生長素：綠豆生根法、赤霉素：矮生豌豆下胚軸試法、大麥胚乳法細胞分裂素：蘿卜子葉增重法、脫落酸：棉花外植體脫落法 、小麥胚芽鞘伸長法乙烯：黃化豌豆幼苗、20 論述農藥對非靶標

17、生物的毒性類型及測定技術。1）急性毒性：急性毒性是指機體(人或實驗動物)一次(或24小時內多次)接觸外來化合物之后所引起的中毒效應，甚至引起死亡。2）亞急性（subacute toxicity）或亞慢性(subchronic toxicity)毒性：化學物對生物體多次重復作用后，所產生的毒性。是指實驗動物連續多日接觸較大劑量的外來化合物所出現的中毒效應。所謂較大劑量，是指小于急性LD50的劑量。兩者的區別在于給藥劑量和給藥期限的不同，亞急性給藥期限一般為14-28天，而亞慢性則為3-6個月。3）慢性毒性（chronic toxicity）：化學物長期低劑量對生物體作用后，所產生的毒性。是指以低

18、劑量外來化合物長期給予實驗動物接觸，觀察其對實驗動物所產生的毒性效應。農藥對非靶標生物毒性測定包括急性毒性測定、亞急性毒性測定、 亞慢性毒性測定、慢性毒性測定。21 農藥對靶標生物的急性毒性測定試驗中，染毒的途徑有哪些？1）經口(胃腸道)接觸：灌胃：是將化合物配制成一定濃度，裝入注射器等定量容器，經過導管注入胃內。在每一試驗系列中，同物種實驗動物灌胃體積應一致，以單位體重計算所給予的毫升數，即ml/kg或ml/g。吞咽膠囊：將一定劑量受試化合物裝入藥用膠囊內，強制放到動物的舌后后咽部迫使動物咽下。此種方式劑量準確，尤其適用于易揮發、易水解和有異味的化合物。家兔及貓、狗等大動物可用此法。2）經呼吸道接觸（吸入接觸）靜式吸入：系將實驗動物置于一個有一定體積的密閉容器內，加入定量的易揮發的液態化合物或一定體積的氣態化合物，在容器內形成所需要的受試化合物濃