1、實驗一實驗一 顯微鏡油鏡的運顯微鏡油鏡的運用和細菌形狀的察看用和細菌形狀的察看u目的要求目的要求u顯微鏡油鏡運用的原理顯微鏡油鏡運用的原理u實驗資料實驗資料u實驗程序實驗程序u思索題思索題目目 的的 要要 求求u學習并掌握顯微鏡油鏡的運用技術及維學習并掌握顯微鏡油鏡的運用技術及維護的根本知識護的根本知識u運用油鏡察看細菌的幾種根本形狀運用油鏡察看細菌的幾種根本形狀u用懸滴法在高倍鏡或油鏡下察看細菌的用懸滴法在高倍鏡或油鏡下察看細菌的運動運動顯微鏡油鏡運用的原理顯微鏡油鏡運用的原理u普通光學顯微鏡普通光學顯微鏡u歐林巴斯歐林巴斯OLYMPUSOLYMPUS生物顯微鏡生物顯微鏡u歐林巴斯歐林巴斯O

2、LYMPUSOLYMPUS相差顯微鏡相差顯微鏡普通光學顯微鏡普通光學顯微鏡u顯微鏡的構造顯微鏡的構造 1.1.光學部分光學部分: :接目接目鏡鏡 、 接物鏡接物鏡 、 照明安裝照明安裝( (聚光鏡、聚光鏡、 虹彩光圈、虹彩光圈、 反光反光鏡等鏡等). ). 它使檢視它使檢視物放大物放大, ,呵斥物象呵斥物象. . 2.2.機械部分機械部分: :鏡座、鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡臂、鏡筒、物鏡轉換器、載物鏡轉換器、載物臺、載物臺轉移臺、載物臺轉移器、粗調理器、器、粗調理器、細調理器等部件細調理器等部件. .它起著支持它起著支持 調理調理 固定等作用固定等作用. .普通光學顯微鏡普通光學顯微鏡u顯微鏡的

3、放大倍數和分辨率顯微鏡的放大倍數和分辨率 1.1.放大倍數放大倍數= =接物鏡放大倍接物鏡放大倍數數接目鏡放大倍數接目鏡放大倍數 2. 2. 顯微鏡的分辨率顯微鏡的分辨率 是表是表示顯微鏡辨析物體兩端示顯微鏡辨析物體兩端兩點之間間隔的才干，可用兩點之間間隔的才干，可用公式表示為：公式表示為： D=/2nsin(/2 ) D=/2nsin(/2 ) 式中式中D D：物鏡分辨出物體兩：物鏡分辨出物體兩點間的最短間隔。點間的最短間隔。 ：可見光的波長平均：可見光的波長平均0.550.55m) m) n: n: 物鏡和被檢標本間介質物鏡和被檢標本間介質的折射率。的折射率。 ：鏡口角即入射角。：鏡口角即

4、入射角。普通光學顯微鏡普通光學顯微鏡u油鏡運用的原理油鏡運用的原理 油鏡，即油浸接物油鏡，即油浸接物鏡。當光線由反光鏡。當光線由反光鏡經過玻片與鏡頭鏡經過玻片與鏡頭之間的空氣時，由之間的空氣時，由于空氣與玻片的密于空氣與玻片的密度不同，使光線遭度不同，使光線遭到曲折，發生散射，到曲折，發生散射，降低了視野的照明降低了視野的照明度。假設中間的介度。假設中間的介質是一層油其折質是一層油其折射率與玻片的相射率與玻片的相近，那么幾乎不近，那么幾乎不發生折射，添加了發生折射，添加了視野的進光量，從視野的進光量，從而使物象更加明晰。而使物象更加明晰。實實 驗驗 材材 料料u顯微鏡顯微鏡燈、香柏油、二甲苯、

5、顯微鏡顯微鏡燈、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙等。擦鏡紙、吸水紙等。u細菌三種形狀的染色標本。細菌三種形狀的染色標本。u培育培育1218h1218h的枯草桿菌的枯草桿菌B.subtilis)B.subtilis)u蓋玻片、凹玻片、接種環、酒精燈。蓋玻片、凹玻片、接種環、酒精燈。實驗程序實驗程序顯微鏡的運用顯微鏡的運用u主要是油鏡的運用主要是油鏡的運用 1.1.用前檢查：零件能否齊全，鏡頭能否清潔。用前檢查：零件能否齊全，鏡頭能否清潔。 2.2.調理光亮度調理光亮度 3.3.低倍鏡察看：粗調、細調低倍鏡察看：粗調、細調 4.4.依次再進展中倍、高倍察看依次再進展中倍、高倍察看 5.5.油鏡察看：

6、高倍鏡下找到明晰的物象后，提油鏡察看：高倍鏡下找到明晰的物象后，提升聚光鏡，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡升聚光鏡，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調至看清物象為止。鏡頭浸入香柏油中，細調至看清物象為止。 6.6.換片：另換新片，必需從第三條開場操作。換片：另換新片，必需從第三條開場操作。 7.7.用后復原：察看終了，上懸鏡筒，先用擦鏡用后復原：察看終了，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復原。的二甲苯，后將鏡體

7、全部復原。實驗程序實驗程序顯微鏡的運顯微鏡的運用用u顯微鏡保養和運用中的本卷須知：顯微鏡保養和運用中的本卷須知： 1.1.不準擅自裝配顯微鏡的任何部件不準擅自裝配顯微鏡的任何部件, ,以免損壞。以免損壞。 2.2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度光潔度 3.3.察看標本時，必需依次用低、中、高倍鏡，最后用察看標本時，必需依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在運用油鏡時，切不可油鏡。當目視接目鏡時，特別在運用油鏡時，切不可運用粗調理器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。運用粗調理器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。 4.4.察看時，兩

8、眼睜開，養成兩眼可以輪換察看的習慣，察看時，兩眼睜開，養成兩眼可以輪換察看的習慣，以免眼睛疲勞，并且可以在左眼察看時，右眼凝視繪以免眼睛疲勞，并且可以在左眼察看時，右眼凝視繪圖。圖。 5.5.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。可單手拿，更不可傾斜拿。 6.6.顯微鏡應存放在陰涼枯燥處，以免鏡片繁殖霉菌而顯微鏡應存放在陰涼枯燥處，以免鏡片繁殖霉菌而腐蝕鏡片。腐蝕鏡片。實驗程序實驗程序IIIIIIu細菌三種根本形狀的察看：細菌三種根本形狀的察看：u 菌落形狀察看和個體形狀察看，菌落形狀察看和個體形狀察看，這里主要指個體形

9、狀的察看。這里主要指個體形狀的察看。 u 1. 1. 結合油鏡的運用，察看三張細結合油鏡的運用，察看三張細菌染色片球狀菌、桿狀菌、和螺菌染色片球狀菌、桿狀菌、和螺旋狀菌，邊察看邊繪圖。旋狀菌，邊察看邊繪圖。 u 2. 2. 看示范鏡：察看雙球菌、四聯看示范鏡：察看雙球菌、四聯球菌，并繪圖。球菌，并繪圖。實驗程序實驗程序細菌運動性的察看示范：細菌運動性的察看示范： 普通采用水浸片法、懸滴法、普通采用水浸片法、懸滴法、半固體培育法，常用水浸法半固體培育法，常用水浸法和懸滴法來察看細菌的運動和懸滴法來察看細菌的運動性。性。 1. 1. 水浸片法水浸片法 2. 2. 懸滴法懸滴法歐林巴斯歐林巴斯OLY

10、MPUSOLYMPUS生物顯微鏡生物顯微鏡uOLYMPUS生物顯微鏡是由日本進口的一種雙筒光學顯微鏡，它運用方便，分辨率高，并且有立體感。是目前研討微生物的良好工具。u顯微鏡的構造錄 像 演 示錄 像 演 示歐林巴斯歐林巴斯OLYMPUSOLYMPUS生物顯微鏡生物顯微鏡 顯微鏡的運用方法顯微鏡的運用方法 u1. 接通電源。 2. 翻開主開關。 3. 挪動電壓調整旋，使亮度適中。 4. 把標本固定在再物臺上。 5. 放松粗調鎖擋。 6. 用低倍物鏡，旋轉粗調和微控制鈕來進展對焦。 7. 調理雙目鏡筒間距和視度差。 8. 再適當調理照明度。 9. 使焦點正確地對準標本。u10. 鎖緊粗調鎖擋。

11、11. 調理孔徑光欄。 12. 依次用低、中、高倍鏡察看。 13. 油鏡察看：與普通光學顯微鏡方法一致。 14. 察看終了，復原：先將電壓調理旋鈕復原，封鎖主開關，切斷電源，放開粗調鎖擋。油鏡的處置與普通光學顯微鏡方法一致。 15. 放入保管箱中。歐林巴斯歐林巴斯OLYMPUSOLYMPUS相差顯微鏡相差顯微鏡u相差顯微鏡的任務原理相差顯微鏡的任務原理 相差顯微鏡具有一個特殊的相差顯微鏡具有一個特殊的由環狀光圈與聚光鏡組合的由環狀光圈與聚光鏡組合的轉盤聚光鏡，經過這個特殊轉盤聚光鏡，經過這個特殊的安裝，就可把光波的相位的安裝，就可把光波的相位差別變為振幅差別，從而使差別變為振幅差別，從而使人們

12、肉眼即能察看到活細胞人們肉眼即能察看到活細胞的細微構造，并有立體感。的細微構造，并有立體感。常用來察看活細胞構造，鞭常用來察看活細胞構造，鞭毛的運動等。毛的運動等。u相差顯微鏡的安裝相差顯微鏡的安裝 u 1. 1. 環狀光圈環狀光圈 2. 2. 相差物鏡具有環狀相差物鏡具有環狀相板相板 3. 3. 定中心望遠鏡亦稱定中心望遠鏡亦稱輔助目鏡輔助目鏡 4. 4. 輔助固定扳手輔助固定扳手 5. 5. 綠色濾光片綠色濾光片歐林巴斯歐林巴斯OLYMPUSOLYMPUS相差顯微鏡相差顯微鏡u相差顯微鏡的運用方法相差顯微鏡的運用方法 1. 1. 相差安裝的安裝相差安裝的安裝 ：轉盤聚光鏡：轉盤聚光鏡 綠綠色濾光片色濾光片 2. 2. 相差物鏡的安裝相差物鏡的安裝 3. 3. 安放標本安放標本 4. 4. 對光對光 5. 5. 調焦：用粗調控制鈕和微調控制鈕調焦：用粗調控制鈕和微調控制鈕調理焦，看清物象時為止調理焦，看清物象時為止 6. 6. 旋轉相差轉盤旋轉相差轉盤 7.