1、 空氣、物體表面、醫務人員手的監測采樣及檢查原則：采樣應具有一定數量和代表性，采樣后必須盡快對樣品按要求指標進行檢測，送檢時間不得6小時，若樣品保存在冰箱內送檢時間不24小時。一、空氣監測：1、  采樣時間：消毒處理后，操作前2、  采樣方法：平板沉降法 （1）布點方法：室內面積30²，設內、中、外對角線3點，兩端距墻1米；室內面積30²，設東、西、南、北4角及中央5點，其中東、西、南、北均距墻1米。潔凈手術室9個點。（2）采樣方法：將直徑為9cm普通營養瓊脂平板在室內各采樣點處，采樣高度為距地面0.8-1.5米，采樣時將平板蓋打開，扣放于平板旁，暴露5

2、-15-30分鐘，蓋好立即送檢。 ( 3)注意事項：采樣前，關好門、窗，在無人走動的情況下，靜止10min 進行采樣。表4：潔凈手術室靜態（空態）時空氣采樣方法（沉降法） 等級空氣潔凈度級別布 點 要 求細菌最大平均濃度手術區周邊區手術區周邊區I100級1000級0.20.41000級10000級0.751.510000級100000級24輔100000級5(5)質控標準：類區域（潔凈手術室）：細菌總數4cfu/m3(30分鐘9cm平皿)， 新風機組2d清潔一次，初效過濾器1-2月更換，中效每周檢查3個月更換，高效每年更換，末端高效每年檢查3年更換。回風口每周清潔一次、每年更換一次。 類區域：

3、細菌總數4cfu/m3(15min9cm平皿)， 類區域：細菌總數4cfu/m3(5min9cm平皿)， 二、醫務人員手的監測：1、  采樣時間：在接觸病人和從事醫療活動前進行采樣或消毒后立即采樣。2、  采樣面積及方法：放被檢人（五指并攏），用浸有無菌鹽水的棉拭子在雙手指屈面從指根到指端往返涂擦 各2 次(雙手涂擦面積約60平方厘米），并隨之轉動采樣棉拭子，剪去操作者手接觸部位，將棉拭子投入 5ml 無菌鹽水試管內，立即送檢。 3、質控標準：工作人員手衛生：細菌總數10cfu/cm2 。外科手衛生：細菌總數5cfu/cm2， 。3、 物體表面監測1、.采樣時間：在消毒處理

4、后4小時內進行采樣。2、.采樣方法：用5cm×5cm的標準滅菌規格板，放在被檢物體表面，用浸有無菌鹽水的棉拭子1支，在規格板內橫豎往返均勻涂擦各5次，并隨之轉棉拭子，連續采樣4個，采樣面積100cm2剪去手接觸部位后，將棉拭子投入5ml含無菌鹽水試管內，立即送檢。門把手等不規則物體表面用棉拭子直接涂擦采樣3. .結果判定： 、類區域：細菌總數5cfu/cm2， 類區域細菌：總數10cfu/cm2， 4.注意事項： 采集樣本要有足夠的數量且具有代表性，如層流潔凈手術室，選擇具有代表性采樣地點（如手術臺、治療車、無影燈把手等）； 采樣時，棉拭子處于濕潤狀態，如處于飽和狀態可將多余的采樣液

5、在采樣管壁上擠壓去除。禁止使用干棉拭子采樣。 四、消毒液的監測1、 常用消毒液有效成分含量測定2、 使用中消毒液細菌監測：1ml使用中消毒液+9ml中和劑3、 結果判定：使用中的滅菌用消毒液、無細菌生長。使用中皮膚粘膜消毒液10cfu/ml 其他使用中的消毒液細菌總數100cfu/m五、壓力蒸汽滅菌效果監測方法：壓力蒸汽滅菌效果監測是一組綜合措施，包括工藝監測、化學監測、生物監測，各個環節缺一不可。1、物理監測（又稱程序監測）每鍋進行，并詳細記錄，包括滅菌設備故障檢查，滅菌溫度（波動+3度內）、壓力、時間（最低要求）等滅菌參數。滅菌物品包裝、大小擺放正確等。2、 化學監測法：（1）包內化學指示

6、卡監測：1）化學指示卡(管)監測方法: 將既能指示蒸汽溫度，又能指示溫度持續時間的化學指示管(卡) 放入大包和難以消毒部位的物品包中央，經一個滅菌周期后，取出指示管(卡)，根據其顏色及性狀的改變判斷是否達到滅菌條件。2）結果判定: 檢測時，所放置的指示管(卡) 性狀或顏色均變至規定的條件，判為滅菌合格；若其中之一未達到規定的條件，則滅菌過程不合格。（2）包外化學指示膠帶監測1）監測方法: 將化學指示膠帶粘貼于每一待滅菌物品包外，經一個滅菌周期后，觀察其顏色的改變，以指示是否經過滅菌處理，而不能作為滅菌效果判定指標。2）結果判定: 檢測時，所放置的指示管(卡)、膠帶的性狀或顏色均變至規定的條件，

7、判為滅菌合格；若其中之一未達到規定的條件，則滅菌過程不合格。（3）B-D試驗：用于預真空（包括脈動真空）壓力蒸汽滅菌器冷空氣排放效果的檢測，冷空氣是造成預真空（包括脈動真空）壓力蒸汽滅菌失敗的主要因素之一。對預真空和脈動真空壓力蒸汽滅菌，每日進行一次B-D試驗。新安裝、移位后連續三次生物監測、B-D試驗。1）檢測方法：B-D試驗要求做前預熱、空載監測每天一次，將B-D試紙放入標準測試包，中間包好，水平放入滅菌柜內滅菌車的前底層，靠近柜門與排氣口底前方（上方）滅菌柜內除測試包無任何物品。2）結果判定:經134，3.54分鐘后，取出B-D測試紙觀察顏色變化。若變色均勻一致，說明冷空氣排放效果良好，

8、滅菌器可以使用。（4）化學檢測注意事項: 監測所用化學指示物須經衛生部批準，并在有效期內使用。3、生物監測法1）指示菌株: 指示菌株為耐熱的嗜熱脂肪桿菌芽胞(ATCC 7953 或 SSIK 31株)，在 121±0.5條件下，D值為 1.3 min1.9min，殺滅時間(KT值)19min，存活時間(ST值)為3.9min。（2）檢測方法: 將壓力蒸汽滅菌生物培養指示劑放于標準測試包（由16條41cm .66cm的全棉手術巾制成)中，按照國家規范，分別將測試包放于鍋內不同位置，滅菌完畢，取出該生物指示劑送檢。3）結果判定: 每個指示劑接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養基都不變色，判定為滅菌

9、合格；指示菌片之一接種的溴甲酚紫蛋白胨水培養基，由紫色變為黃色時，則滅菌過程不合格。4）注意事項: 監測所用菌片須經衛生部認可，并在有效期內使用。生物指示物監測應每周1次。4、質控標準：1）  工藝監測應每鍋進行。2）  化學監測：應每包內放置化學指示卡，包外貼化學指示膠帶，監測合格方可使用。預真空和脈動真空壓力蒸汽鍋每日做BD試驗合格后方可使用。3）  生物監測應每周一次，無菌生長。六、紫外線消毒效果的監測1、檢測方法: 開啟紫外線燈5min后，將指示卡置紫外燈下垂直距離1m處，有圖案一面朝上，照射1min（紫外線照射后，圖案正中光敏色塊由乳白色變成不同程度的淡

10、紫色），觀察指示卡色塊的顏色，將其與標準色塊比較，讀出照射強度。2、結果判定: 普通 30w 直管型紫外線燈，使用中紫外線燈輻照強度70W/cm2 為合格。3、注意事項：1）因指示卡光敏色塊會隨時間發生變化，放置時間過久，指示卡會變淡，應及時記錄判斷結果。2）指示卡應用黑色紙包裝，置4冰箱內儲存，以免光敏色塊遇日光照射不穩定變色，而影響監測結果。3）指示卡應獲得衛生部的衛生許可批件，并在有效期內使用。七、使用中消毒劑與無菌物品保存液監測用試紙或指示卡檢測化學消毒劑含量是近年來化學消毒劑濃度簡易測定方法的新發展，它解決了醫院進行消毒劑使用過程的濃度監測。1、  化學監測：（1）G-I型

11、消毒劑濃度試紙：1）  適用于過氧乙酸及其他含氯消毒劑和含次氯酸鈉的清洗消毒劑等的監測。2）  使用方法：取試紙條于消毒劑溶液中，片刻取出。半分鐘內，在自然光下與標準色塊比較，直接讀出溶液所含有效成分濃度值，時間超過1分鐘，著色逐漸消退。（2）戊二醛濃度測試卡使用辦法：從瓶中取出一條測試卡，并旋緊瓶蓋，將指標色塊完全浸沒于待測消毒液中，沾下瓶蓋上的紙墊，去除多余的液體，橫置于瓶蓋上等候58分鐘（不要將色塊面朝下，以免受到污染），觀察色塊著色變化，若指示色塊變成均勻黃色，表示溶液濃度2.0%，若色塊全部或仍有部分白色，表示溶液濃度2.0%；2、 生物監測：1）  采

12、樣時間：采取更換前使用中的消毒液與無菌器械保存液。2）  采樣量及方法：用無菌注射器吸取2毫升被檢液。（加入9毫升稀釋液中混勻送檢。不同的消毒劑加入相應的中和劑，對于醇類與酚類消毒液，稀釋液用普通營養肉湯即可，對于含氯消毒液、含碘消毒液、過氧化物消毒液，需在肉湯中加入中和劑0.1%硫代硫酸鈉；對于氯己定（洗必泰）、季胺鹽類消毒液，許在肉湯中加入3%（w/v）吐溫80和0.3%卵磷脂；對于醛類消毒液，需在肉湯中加入0.3%甘氨酸；對于含有表面活性劑的各種復方消毒液，需在肉湯中加入3%（w/v）吐溫80，以中和被檢液的殘效作用。）3）  注意事項：（1）  不同消毒劑

13、使用不同的中和劑中和。（2）  采集消毒液樣品時應在消毒液內沒有物品或防入物品消毒作用到規定時間之后進行采樣。4）  質控標準：（1）、使用中消毒液每季度監測一次，細菌菌落總數應100cfu/ml,不得檢出致病微生物。（2）使用中滅菌劑每月監測一次，應無菌生長。（3）無菌器械保存液必須無菌生長。四、血液透析液監測1、標本采集：透析液的采集應采進入透析器的透析液和離開透析器的透析液2、監測時間：每月對出入透析器的透析液送檢。疑有透析液污染或發生嚴重感染病時，應增加采樣點，如原水口，反滲水出口，儲水罐出口，透析液配比機，濃縮透析液等。懷疑或確定病人在透析中熱源反應和菌血癥時，應

14、隨時監測。3、  控標準：透析器入口液細菌菌落總數必須200cfu/ml，出口液細菌菌落總數必須2000cfu/ml并不得檢出致病微生物。五、內鏡的消毒滅菌效果監測1、化學監測：含氯消毒劑、2%戊二醛濃度等應每日監測，監測方法使用中化學消毒劑監測的化學監測部分。1、  生物監測：采樣部位為內鏡的內腔面采樣方法：用無菌注射器抽取10毫升含相應中和劑的緩沖液，從待檢內鏡活檢口注入，用15毫升無菌試管從活檢口收集，及時送檢，2小時內檢測同時做致病菌監測。2、  質控標準：（1） 消毒劑濃度監測每日定時監測并做好記錄，保證消毒效果。消毒劑使用時間不得超過產品說明書規定的使

15、用期限。（2） 消毒后內鏡（如胃鏡、腸鏡、喉鏡、氣管鏡、鼻竇鏡等）應每季度進行生物學監測并做好監測記錄，其合格標準為細菌總數20cfu/件，不得檢出致病菌。 判斷結果：菌落數/鏡=2個平皿菌落數平均值x20（3）滅菌后內鏡（如腹腔鏡、關節鏡、膽道鏡、膀胱鏡、胸腔鏡、腦室鏡等）應每月進行生物學監測并做好記錄。 判斷結果：合格標準為無菌生長第一部分衛生標準1、 各類環境空氣、物體表面、醫護人員手衛生標準2.1、 細菌菌落總數允許檢出值見表1表1各類環境空氣、物體表面、醫護人員手細菌菌落總數衛生標準境別范圍標準空氣物體表面醫護人員手cfu/m3cfu/m3cfu/m3類層流潔凈手術室、層流潔凈病房1

16、055類普通手術室，產房、嬰兒室、早產兒室、普通保護性隔離室、供應室無菌區、燒傷病房、重癥監護病房20055類兒科病房、婦產科檢查室、注射室、換藥室、治療室、供應室、清潔區、急診室、化驗室、各類普通病房和房間5001010類傳染病科及病房15151.2致病性微生物不得檢出乙型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌及其他致病性微生物。在可疑污染情況下進行相應指標的檢測。母嬰同室、早產兒室、嬰兒室、新生兒及兒科病房的物體表面和醫護人員手上，不得檢出沙門氏菌。2、 醫療用品衛生標準2.1進入人體無菌組織、器官或接觸破損皮膚、粘膜的醫療用品必須無菌。2.2接觸粘膜的醫療用品細菌菌落總數應20cfu/g或100c

17、m2:：致病性微生物不得檢出。3、 使用中消毒劑與無菌器械保存液衛生標準3.1使用中消毒劑細菌菌落總數應100cfu/ml，致病性微生物不得檢出。3.2、無菌器械保存液必須無菌4、污物處理衛生標準污染物品無論是回收再使用的物品，或是廢棄的物品，必須進行無害化處理。不得檢出致病性微生物。在可疑污染情況下，進行相應指標的檢測。第二部分采樣方法4、 采樣及檢查原則采樣后必須盡快對樣品進行相應指標的檢測，送檢時間不得超過6h。若樣品保存04條件時，送檢時間不得超過24h。5、 空氣采樣方法2.1采樣時間選擇消毒處理后與進行醫療活動之前期間采樣。2.2采樣高度與地面垂直高度80150cm。2.3布點方法

18、室內面積30m2，設一條對角線上取3點，既中心一點、兩端各距墻1m處各取一點：室內面積30m2，設東、西、南、北、中5點，其中東、西、南、北點均距墻1m。百級層流13個點，萬級層流9個點。2.4采樣方法用9cm直徑普通營養瓊脂平板在采樣點暴露5min、15min、30min后送檢培養。6、 物體表面采樣方法3.1采樣時間選擇消毒處理后4h內進行采樣。3.2采樣面積被采表面100cm2，取全部表面：被采表面100cm2，取100cm23.3采樣方法用5×5cm2的標準滅菌規格板，放在被檢物體表面，用浸有無菌生理鹽水采樣液的棉拭紙1支，在規格板內橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭紙，連續采樣14個規格板面積，剪去手接觸部分，將棉拭紙放入裝10ml采樣液的試管中送