1、初始污染菌和微粒污染控制驗證方案1 .目的通過設計試驗確認XX半成品的儲存環境和存放有效期。其可能存在的環節如下:（1）在內包裝封口前初始污染菌是否滿足控制要求（定期監控）；（2）等待滅菌的產品，密封嚴實存放在外包間，其初始污染菌隨儲存時間變化。2 .適用范圍本驗證方案適用于本產品，通過試驗研究，以確定在各種情況下的儲存有效期。3 .發放范圍管理者代表、生產部和質量部等有關部門及人員。4 .規范性引用文件中華人民共和國藥典2015版附錄微生物限度檢查法5 .組織和職責根據驗證工作量的大小，本公司成立驗證組，由公司管理者代表任組長，生產部、質量部、有關部門及人員任組員。驗證小組職責：負責驗證方案

2、的起草、批準；負責驗證的協調工作，以保證驗證方案規定項目的順利實施；負責驗證數據結果的審核；負責驗證報告的審批；負責發放驗證證書；負責確定該項驗證的再驗證周期。5.1主責部門本方案的主責部門為公司管理者代表，其職責為：負責審批驗證方案和驗證報告，頒發驗證證書。5.2相關部門本方案的相關部門為質量部，其職責為：按標準操作規程及驗證方案進行各項確認，及時報告確認結果，形成驗證報告；負責操作培訓和現場監督。6 .步驟和方法6.1計劃及進度本驗證由質量部提出完整的驗證計劃，經驗證小組批準后實施，由質量部完成，整個驗證活動分為兩個階段完成：運行確認（OQ）從年月日到年月日性能確認（PQ）從年月日到年月日

3、6.2初始污染菌和微粒檢測方法及可接受標準6.2.1抽樣方法和抽樣規律以每一個生產批為產品抽樣批，隨機抽取樣品1片（長寬約5cmx2cm）記為1單位，在潔凈條件下精確稱重，并標記。需要臨時或長期存放時間預計不超過30天（1個月），綜合細菌的生長規律及可能存在的存放天數，其抽樣檢測的時間設計為存入后：第1天、第2天、第3天、第5天、第7天、第15天、第30天。6.2.2供試液制備1）取0.9%的生理鹽水溶液10ml,盛于已滅菌的試管內；2）將取樣依次投入試管，充分搖勻。6.2.3接種與培養1）取上述供試液1ml加入9ml生理鹽水溶液，稀釋成1:10;取上述稀釋液2ml,分別注入2個已滅菌的平皿內

4、（每個平皿注入1ml）;2）同時取1ml加入盛有9ml生理鹽水溶液的試管中， 稀釋成1:100,再取此稀釋液2ml,分別注入2個已滅菌平皿內 （每個平皿注入1ml）;3）用已滅菌的營養瓊脂培養基，融化待冷卻到40-50C,分別傾注15ml上述4個平皿，蓋好上蓋，并以順時針或逆時針方向快速轉動平皿，使供試液與培養基充分混勻。4）以上平皿做好標記，以免混淆。5）待培養基凝固后，將平皿移入37c的培養箱中培養不少于482小時。6.2.4菌落計數1）當菌落數大于300CFU時，應將原液稀釋成1:1000,即取供試液1ml加入0.9%的氯化鈉溶液9ml中取得，然后重新接種及培養。2）當細菌生長呈片狀、花

5、點樣菌落，該平皿不以計數。3）若片狀菌落不到平皿中的一半，而其余一半中菌落數分布又很均勻，則可將此半個平皿菌落計數后乘以2,以代表全平皿菌落數。4）計數方法平均數值X稀釋倍數菌落數/質量（g）=質量a）首先選取平均菌落數在30300之間的平皿，作為菌落總數測定的范圍。b）如只有一個稀釋級平均菌落數在30300之間，則菌落數為該稀釋級的菌落數乘以稀釋倍數。c）如有兩個相鄰稀釋級的平均菌落數在30300之間，則先計算兩稀釋級菌落數的比值。高稀釋級的平均平板菌落數X稀釋倍數比值=低稀釋級的平均平板菌落數x稀釋倍數當比值W2時，則以2個稀釋級的平均菌落數均值報告。當比值2時，則以低稀釋級的平均菌落數乘

6、以稀釋倍數報告。d）如各稀釋級平均菌落數均在300以上，則按最高平均菌落數乘以稀釋倍數報告；如各稀釋級平均菌落數均在30以下，則按最低平均菌落數乘以稀釋倍數報告。e）如各稀釋級平均菌落數均不在30300之間，則以最接近30或300的稀釋級平均菌落數乘以稀釋倍數報告。f）如各稀釋級平均菌落數均無菌落生長或最低稀釋級平均菌落數小于1時，應報告菌數為10個/g。g）如有3個稀釋級平均菌落數均在30300之間，則以后2級計算級間比值報告。h）菌落計數的報告，菌落數在10以內時，按實有數值報告。大于100時，采用二位有效數字，在兩位有效數值后面，應以四舍五入法計算。在報告菌落數為“不可計”時，應表明樣品

7、的稀釋度。例：例次不同稀釋度的平均菌落數兩相鄰稀釋度菌數之比菌落總數個/g報告方式個/g10-110-210-31136516420-1640016000或1.6x10422760295461.63800038000或3.8x10432890271602.227100427000或2.7X104/、可計4650513-513000510000或5.1X105527115-2702270或2.7X10i）總稀釋倍數計算時應包括取樣時的10ml,即已稀釋10倍。6.2.5可接受標準初始污染菌和微粒控制值：W100CFU/單位6.3驗證內容6.3.1包裝封口前的半成品生產批號初始污染菌檢測均值（CFU憚位）結果評價結論：火菌前初始污染菌主檢：復檢：日期：年月日6.3.2等待滅菌的半成品存放時間初始污染菌檢測均值（CFU憚位）評價第1天第2天第3天第7天第15天第30天結論：半成品初始