1、高考生物一輪專題復習現(xiàn)代高考生物一輪專題復習現(xiàn)代生物科技專題基因工程講義生物科技專題基因工程講義種類種類Ecoli DNA連接酶連接酶T4DNA連接酶連接酶來源來源大腸桿菌大腸桿菌_功能特功能特性性只能將雙鏈只能將雙鏈DNA片段片段互補的互補的_連接連接起來起來“縫合縫合”兩種末端，但兩種末端，但連接平末端之間的效率連接平末端之間的效率_ 作用作用將雙鏈將雙鏈DNA片段片段“縫合縫合”起來，恢復被限制酶起來，恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的切開的兩個核苷酸之間的_T4噬菌體噬菌體黏性末端黏性末端較低較低磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵比較項目比較項目限制酶限制酶DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶

2、解旋酶作用底物作用底物DNA分子分子DNA分子片段分子片段脫氧核苷酸脫氧核苷酸DNA分子分子作用部位作用部位磷酸二磷酸二酯鍵酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對堿基對間的氫鍵間的氫鍵形成產物形成產物黏性末端黏性末端或平末端或平末端形成重組形成重組DNA分子分子新的新的DNA分子分子形成單鏈形成單鏈DNA類型類型步驟步驟檢測內容檢測內容方法方法分分子子檢檢測測第一步第一步轉基因生物的轉基因生物的DNA上上是否插入了目的基因是否插入了目的基因_(DNA和和DNA之間之間)第二步第二步目的基因是否轉錄出目的基因是否轉錄出了了mRNA_(DNA和和mRNA之間之間)第三步第三步目的基因是

3、否目的基因是否翻譯成蛋白質翻譯成蛋白質_個體生物學個體生物學水平鑒定水平鑒定抗蟲或抗病接種實驗，以確定是否有抗性抗蟲或抗病接種實驗，以確定是否有抗性以及抗性的程度以及抗性的程度DNA分子雜交技術分子雜交技術分子雜交技術分子雜交技術抗原抗體雜交技抗原抗體雜交技術術從基因文庫中獲取從基因文庫中獲取人工合成人工合成方方法法從基因組文從基因組文庫中獲取庫中獲取從部分基因文庫，如從部分基因文庫，如cDNA文庫中獲取文庫中獲取化學合化學合成法成法反轉反轉錄法錄法過過程程生物種類生物種類植物細胞植物細胞動物細胞動物細胞微生物細胞微生物細胞常用方法常用方法農桿菌轉化法農桿菌轉化法顯微注射技術顯微注射技術感受態(tài)

4、細胞法感受態(tài)細胞法受體細胞受體細胞 體細胞體細胞受精卵受精卵原核細胞原核細胞轉化轉化過程過程將目的基因插入將目的基因插入到到Ti質粒的質粒的TDNA上上農農桿菌桿菌導入植物導入植物細胞細胞整合到受整合到受體細胞的染色體體細胞的染色體DNA上上表達表達將含有目的基將含有目的基因的表達載體因的表達載體提純提純取卵取卵(受受精卵精卵)顯微注顯微注射射受精卵發(fā)受精卵發(fā)育育獲得具有獲得具有新性狀的動物新性狀的動物 處理細胞處理細胞感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞重組表達載重組表達載體與感受態(tài)細體與感受態(tài)細胞混合胞混合感受感受態(tài)細胞吸收態(tài)細胞吸收DNA分子分子項目項目蛋白質工程蛋白質工程基因工程基因工程區(qū)區(qū)別別過過程

5、程預期蛋白質功能預期蛋白質功能設計設計預期的蛋白質結構預期的蛋白質結構推推測應有的氨基酸序列測應有的氨基酸序列找到相對應的脫氧核苷找到相對應的脫氧核苷酸序列酸序列獲取目的基因獲取目的基因構建構建基因表達載體基因表達載體將目將目的基因導入受體細胞的基因導入受體細胞目的基因的檢測與目的基因的檢測與鑒定鑒定實實質質定向改造或生產人類所定向改造或生產人類所需的蛋白質需的蛋白質定向改造生物的遺傳定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所特性，以獲得人類所需的生物類型或生物需的生物類型或生物產品產品結結果果可生產自然界沒有的蛋可生產自然界沒有的蛋白質白質只能生產自然界已有只能生產自然界已有的蛋白質的蛋白質聯(lián)系聯(lián)系蛋白質工程是在基因工程基礎上延伸出來的第蛋白質工程是在基