1、精選優質文檔-傾情為你奉上藥審中心：含量測定分析方法驗證的可接受標準簡介藥審中心：含量測定分析方法驗證的可接受標準簡介審評四部 黃曉龍摘要：本文介紹了在對含量測定所用的分析方法進行方法學驗證時，各項指標的可接受標準，以利于判斷該分析方法的可行性。關鍵詞：含量測定 分析方法驗證 可接收標準在進行質量研究的過程中，一項重要的工作就是要對質量標準中所涉及到的分析方法進行方法學驗證，以保證所用的分析方法確實能夠用于在研藥品的質量控制。為規范對各種分析方法的驗證要求，我國已于2005年頒布了分析方法驗證的指導原則。該指導原則對需要驗證的分析方法及驗證的具體指標做了比較詳細的闡述。但是文中未涉及各具體指標

2、在驗證時的可接受標準，國際上已頒布的指導原則中也未發現相關的要求。另一方面，大多數藥品研發單位在進行質量研究時，已逐步認識到分析方法驗證的必要性與重要性，大都也在按照指導原則的要求進行分析方法驗證，但驗證完后卻因沒有一個明確的可接受標準，而難以判斷該分析方法是否符合要求。本文結合國外一些大型藥品研發企業在此方面的要求，提出了在對含量測定方法進行驗證時的可接受標準，供國內的藥品研發單位在進行研究時參考。1準確度該指標主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求分別配制濃度為80、100和120的供試品溶液各三份，分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率。可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應

3、在98.0%-102.0%之間，9個回收率數據的相對標準差（RSD）應不大于2.0%。2線性線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：在80至120的濃度范圍內配制6份濃度不同的供試液，分別測定其主峰的面積，計算相應的含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析。可接受的標準為：回歸線的相關系數（R）不得小于0.998，Y軸截距應在100響應值的2以內，響應因子的相對標準差應不大于2.0%。3精密度1）重復性配制6份相同濃度的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標準差應不大于2.0%。2）中間精密度配制6份相同濃度

4、的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數據的相對標準差應不大于2.0%。4專屬性可接受的標準為：空白對照應無干擾，主成分與各有關物質應能完全分離，分離度不得小于2.0。以二極管陣列檢測器進行純度分析時，主峰的純度因子應大于980。5檢測限主峰與噪音峰信號的強度比應不得小于3。6定量限主峰與噪音峰信號的強度比應不得小于10。另外，配制6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液主峰的保留時間的相對標準差應不大于2.0%。7耐用性分別考察流動相比例變化±5、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5、流速相對值變化±20時，儀器色

5、譜行為的變化，每個條件下各測試兩次。可接受的標準為：主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離；各條件下的含量數據（n=6）的相對標準差應不大于2.0%。8、系統適應性配制6份相同濃度的供試品溶液進行分析，主峰峰面積的相對標準差應不大于2.0%，主峰保留時間的相對標準差應不大于1.0%。另外，主峰的拖尾因子不得大于2.0，主峰與雜質峰必須達到基線分離，主峰的理論塔板數應符合質量標準的規定。有關物質分析方法驗證的可接受標準簡介藥品中的有關物質泛指在藥品的生產與儲存過程中產生的工藝雜質或降解產物。由于這些有關物質的存在會影響到藥品的純度，進而可能會產生毒副作用，所以有關物質的控制是

6、藥品研發的一個重要方面，也是我們在藥品審評中一直重點關注的要點之一。而要對有關物質進行嚴格的控制，就離不開專屬性強、靈敏度高的分析方法，這就涉及到分析方法的篩選與驗證。從現有的申報資料看，藥品研發單位已基本上意識到分析方法驗證的重要性，但是對驗證時各具體指標是否可行尚沒有一個明確的可接受標準，從而難以對驗證結果進行評判。為解決這一問題，本文結合國外一些大型藥品研發企業在此方面的要求，提出了在對有關物質檢查方法進行驗證時的可接受標準，供國內的藥品研發單位在進行研究時參考。1準確度該指標主要是通過回收率來反映。驗證時一般要求根據有關物質的定量限與質量標準中該雜質的限度分別配制三個濃度的供試品溶液各

7、三份（例如某雜質的限度為0.2%，則可分別配制該雜質濃度為0.1、0.2和0.3的雜質溶液），分別測定其含量，將實測值與理論值比較，計算回收率，并計算9個回收率數據的相對標準差（RSD）。該項目的可接受的標準為：各濃度下的平均回收率均應在80%-120%之間，如雜質的濃度為定量限，則該濃度下的平均回收率可放寬至70%-130%，相對標準差應不大于10%。2線性線性一般通過線性回歸方程的形式來表示。具體的驗證方法為：在定量限至一定的濃度范圍內配制6份濃度不同的供試液，分別測定該雜質峰的面積，計算相應的含量。以含量為橫坐標（X），峰面積為縱坐標（Y），進行線性回歸分析?？山邮艿臉藴蕿椋夯貧w線的相關

8、系數（R）不得小于0.990，Y軸截距應在100響應值的25以內，響應因子的相對標準差應不大于10%。3精密度1）重復性配制6份雜質濃度（一般為0.1%）相同的供試品溶液，由一個分析人員在盡可能相同的條件下進行測試，所得6份供試液含量的相對標準差應不大于15%。2）中間精密度配制6份雜質濃度（一般為0.1%）相同的供試品溶液，分別由兩個分析人員使用不同的儀器與試劑進行測試，所得12個含量數據的相對標準差應不大于20%。4專屬性可接受的標準為：空白對照應無干擾，該雜質峰與其它峰應能完全分離，分離度不得小于2.0。5檢測限雜質峰與噪音峰信號的強度比應不得小于3。6定量限雜質峰與噪音峰信號的強度比應

9、不得小于10。另外，配制6份最低定量限濃度的溶液，所測6份溶液雜質峰保留時間的相對標準差應不大于2.0%，峰面積的相對標準差應不大于5.0%。7耐用性分別考察流動相比例變化±5、流動相pH值變化±0.2、柱溫變化±5、檢測波長變化±5nm、流速相對值變化±20以及采用三根不同批號的色譜柱進行測定時，儀器色譜行為的變化，每個條件下各測試兩次?？山邮艿臉藴蕿椋焊麟s質峰的拖尾因子不得大于2.0，雜質峰與其他成分峰必須達到基線分離；各條件下的雜質含量數據（n=6）的相對標準差應不大于2.0%，雜質含量的絕對值在±0.1以內。8、系統適應性配制6份相同濃度的雜質溶液進行分析，該雜質峰峰面積的相對標準差應不大于2.0%，保留時間的相對標準差應不大于1.0%。另外，雜質峰的拖尾因子不得大于2.0，理論塔板數應符合質量標準的規定。9溶液穩定性按照分析方法分別配置對照品溶液與供試品溶