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文檔簡介
1、培養液中酵母菌種群數量的動態變化 計劃制定:培養一個酵母菌種群計劃制定:培養一個酵母菌種群通過顯微鏡觀察,用通過顯微鏡觀察,用“血球計數板血球計數板”計數計數7 7天內天內10ml10ml培養液中酵母菌的數量培養液中酵母菌的數量計算平均值計算平均值畫出畫出“酵母菌種群數量的增長曲線酵母菌種群數量的增長曲線” 實驗方法:實驗方法: (1 1)將)將10mL5%10mL5%葡萄糖培養液加入試管中。葡萄糖培養液加入試管中。 (2 2)將酵母菌菌種接入試管中的培養液內混合均勻。)將酵母菌菌種接入試管中的培養液內混合均勻。 (3 3)將試管在)將試管在2828條件下連續培養條件下連續培養7 7天。天。
2、(4 4)每天取樣每天取樣計數酵母菌數量,采用計數酵母菌數量,采用抽樣檢測抽樣檢測方法。方法。 (5 5)分析所取得數值并用曲線圖表示出來,分析圖形得)分析所取得數值并用曲線圖表示出來,分析圖形得出酵母菌種群數量變化規律。出酵母菌種群數量變化規律。 1 1、血球計數板是由一塊比普通載玻片、血球計數板是由一塊比普通載玻片厚厚的玻片特制的玻片特制而成。而成。2 2、板的中部有一部分比兩邊低、板的中部有一部分比兩邊低0.1mm0.1mm,兩邊有溝。,兩邊有溝。血球計數板構造血球計數板構造NoImage稀釋倍數每小格平均菌數稀釋倍數小格內菌數毫升個菌數 61046104100100) / (計數室是一
3、大格(計數室是一大格(S=1mm2S=1mm2)由由2525個中格組成,每一中格個中格組成,每一中格又分為又分為1616個小格,共個小格,共400400個小個小格(也有一種計數板是格(也有一種計數板是1616中中格格2525小格,總數也是小格,總數也是400400格)。格)。每小格容積為每小格容積為0.000250.00025立方毫立方毫米,即米,即1/41/410-610-6亳升亳升 每個樣品重復計數每個樣品重復計數2-3次,取其平均值,按次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數。下式計算樣品中的菌數。 刻度為刻度為2516(大格)的計數板:(大格)的計數板: 刻度為刻度為1625(大格)的計
4、數板:(大格)的計數板: 稀釋倍數每小格平均菌數稀釋倍數小格內菌數毫升個菌數610461048080)/(血球計數板的使用方法 (一)取清潔干燥的血球計數板,(一)取清潔干燥的血球計數板,加蓋玻片加蓋玻片蓋住蓋住網格和兩邊的槽。網格和兩邊的槽。 (二)將待測菌液(二)將待測菌液充分搖勻充分搖勻后,用無菌吸管吸少后,用無菌吸管吸少許,由許,由蓋玻片邊緣或槽內加入蓋玻片邊緣或槽內加入計數板來回推壓蓋計數板來回推壓蓋玻片,使其緊貼在計數板上,計數室內玻片,使其緊貼在計數板上,計數室內不能有氣不能有氣泡泡。靜置靜置5-105-10分鐘。分鐘。 (三)在低倍鏡下找到小方格網后更換高倍鏡觀(三)在低倍鏡下
5、找到小方格網后更換高倍鏡觀察計數,上下調動細螺旋,以便看到小室內不同察計數,上下調動細螺旋,以便看到小室內不同深度的菌體。位于分格線上的菌體,只數兩條邊深度的菌體。位于分格線上的菌體,只數兩條邊上的,其余兩邊不計數。如數上線就不數下線,上的,其余兩邊不計數。如數上線就不數下線,數左邊線就不數右邊線。數左邊線就不數右邊線。 (四)計數時若使用刻度為(四)計數時若使用刻度為25251616(大格)的計(大格)的計數板,則數四角的數板,則數四角的4 4個中格(即個中格(即100100小格)內的菌小格)內的菌數。如用刻度為數。如用刻度為16162525(大格)的計數板,除數(大格)的計數板,除數四角的
6、四角的4 4個大格外,還需數中央個大格外,還需數中央1 1個大格的菌數個大格的菌數(即(即8080小格)。小格)。每小格中菌數以每小格中菌數以5-105-10個為宜個為宜,如,如菌液過濃可適當稀釋菌液過濃可適當稀釋 稀釋倍數每小格平均菌數稀釋倍數小格內菌數毫升個菌數 61046104100100) / ((五)計算(五)計算計算次計算次數數各方格中細胞數各方格中細胞數1ml1ml懸液中總細胞懸液中總細胞數數3 3次平均次平均數數1 12 23 34 45 51 12 23 3 每個樣品重復計數每個樣品重復計數2-3次,取其平均值,按次,取其平均值,按下式計算樣品中的菌數。下式計算樣品中的菌數。 刻度為刻度為2516(大格)的計數板:(大格)的計數板: 刻度為刻度為1625(大格)的計數板:(大格)的計數板: 稀釋倍數每小格平均菌數稀釋倍數小格內菌數毫升個菌數610461048080)/(實驗注意事項 血球計數板的使用血球計數板的使用 1、先蓋蓋玻片,再滴加菌液、先蓋蓋玻片,再滴加菌液 2、菌液從平臺兩側凹槽處滴加,不要產生氣泡、菌液從平臺兩側凹槽處滴加,不
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