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文檔簡介
1、項目十二尿液分析儀檢驗學習目標學習目標 了解尿液干化學分析儀發展史、結構及檢測了解尿液干化學分析儀發展史、結構及檢測原理原理 掌握尿液干化學檢驗中各項目的原理、方法掌握尿液干化學檢驗中各項目的原理、方法 重點掌握尿液干化學檢驗中的注意事項及臨重點掌握尿液干化學檢驗中的注意事項及臨床意義床意義 掌握干化學檢查過程中應注意的問題掌握干化學檢查過程中應注意的問題 現代尿液分析儀類型現代尿液分析儀類型 干化學分析儀檢驗干化學分析儀檢驗 全自動尿沉渣分析儀全自動尿沉渣分析儀 流式細胞術分析儀流式細胞術分析儀 影像式尿沉渣影像式尿沉渣尿干化學試帶測試原理、臨床尿干化學試帶測試原理、臨床應用級及質量控制應用
2、級及質量控制主要內容主要內容 干化學尿液分析儀試劑干化學尿液分析儀試劑帶檢測原理帶檢測原理 干化學尿液分析儀檢驗干化學尿液分析儀檢驗的干擾因素及質量控制的干擾因素及質量控制 干化學尿液分析儀檢驗干化學尿液分析儀檢驗的臨床應用的臨床應用歷史回顧歷史回顧 1616世紀:英國物理學家世紀:英國物理學家Robert BoyleRobert Boyle發明石蕊試發明石蕊試紙,用于測定溶液紙,用于測定溶液pHpH 19371937年:費格爾利用年:費格爾利用“蛋蛋白質誤差(白質誤差(protein protein errorerror)原理,首次發明)原理,首次發明了測定尿蛋白的一種單顏了測定尿蛋白的一種
3、單顏色反應,此發明奠定了以色反應,此發明奠定了以后發展浸入即讀(后發展浸入即讀(Dip-Dip-and-Readand-Read)干化學試帶的)干化學試帶的基礎基礎 19561956年:聯合尿糖、蛋白、年:聯合尿糖、蛋白、pHpH等的多聯試紙問世,從等的多聯試紙問世,從3-43-4個項目組合到九十年代的尿個項目組合到九十年代的尿液液1010項干化學試帶,已經達項干化學試帶,已經達到比較理想的境地到比較理想的境地 19701970年起,用于判讀尿試帶年起,用于判讀尿試帶顏色變化的半自動化儀器問顏色變化的半自動化儀器問世世 19801980年年: :具有自動進樣,點具有自動進樣,點滴,試帶傳輸和打
4、印功能的滴,試帶傳輸和打印功能的全自動尿干化學分析儀問世全自動尿干化學分析儀問世歷史回顧歷史回顧歷史回顧歷史回顧-中國中國 19661966年:北京協和醫院檢驗年:北京協和醫院檢驗科生產出科生產出1212種用于測定尿液種用于測定尿液中化學成分的試紙,包括尿中化學成分的試紙,包括尿蛋白、尿糖、酮體、膽紅素、蛋白、尿糖、酮體、膽紅素、pHpH、潛血等項目、潛血等項目 19801980年,北京協和醫院與美年,北京協和醫院與美國國AmesAmes公司簽訂雙方協作計公司簽訂雙方協作計劃,首次從美國引進一批自劃,首次從美國引進一批自動化和半自動化檢驗設備動化和半自動化檢驗設備中級醫刊,1966年特刊8項目
5、半自動尿液干化學分析儀 近代尿液分析儀近代尿液分析儀 19851985年,國內不少廠家如桂年,國內不少廠家如桂林醫療電子儀器廠等引進日林醫療電子儀器廠等引進日本京都第一化學或日本榮研本京都第一化學或日本榮研化學的技術,生產化學的技術,生產8 8項的干項的干化學試帶生產線化學試帶生產線 然后還引進了然后還引進了MA-4210MA-4210等型等型號的尿液分析儀號的尿液分析儀 進入上世紀進入上世紀9090年代以后,尿年代以后,尿液干化學分析儀器和試帶已液干化學分析儀器和試帶已經擴展為經擴展為1010項至項至1111項項MA-4210尿液化學尿液化學分析儀分析儀近代尿液分析儀近代尿液分析儀Clini
6、tek 500型半自動尿液干化學分析儀 Roche 2400全自動尿液干化學分析系統 近代尿液分析儀近代尿液分析儀Clinitek Atlas 全自動尿液干化學分析儀 迪瑞H800全自動尿液干化學分析儀 愛科來AUTION MAX AX-4280全自動尿干化學分析儀和iQ-200尿液有形成分分析儀連接運行尿干化學試帶結構及組成試帶構成試帶構成 第一層尼龍膜起保護作用,第一層尼龍膜起保護作用,防止大分子物質的污染防止大分子物質的污染 第二層絨制層,包括碘酸鹽第二層絨制層,包括碘酸鹽層和試劑層,碘酸鹽層可破層和試劑層,碘酸鹽層可破壞壞VitcVitc等干擾物質,試劑層等干擾物質,試劑層與尿液所測定
7、物質發生化學與尿液所測定物質發生化學反應反應 第三層是固有試劑的吸水層,第三層是固有試劑的吸水層,可使尿液均勻,快速地浸入,可使尿液均勻,快速地浸入,并能抑制尿液流到相鄰反應并能抑制尿液流到相鄰反應區區 第四層選取尿液不浸潤第四層選取尿液不浸潤的塑料片為支持體的塑料片為支持體干化學檢測原理干化學檢測原理 不同型號尿干化學分析不同型號尿干化學分析儀使用配套的專用試帶儀使用配套的專用試帶 各試劑模塊與尿中被測各試劑模塊與尿中被測成分的反應呈現不同的成分的反應呈現不同的顏色變化,顏色的深淺顏色變化,顏色的深淺與尿中相應物質呈正比與尿中相應物質呈正比 空白塊,固定塊作用空白塊,固定塊作用檢測參數檢測參
8、數 8項:PH、PRO、GLU、KET、BIL 、URO、ERY、NIT 9項:增加WBC 10項:SG 11項:Vit C 腎病四聯試帶:PH、PRO、ERY、SG 糖尿病五聯試帶:PH 、PRO 、GLU、KET 、SG 肝病二聯試帶: BIL、URO測定原理測定原理 模塊成分模塊成分 吲哚酚酯吲哚酚酯 重氮鹽重氮鹽注意事項注意事項本法主要檢測粒細胞酯酶,本法主要檢測粒細胞酯酶,不與淋巴細胞反應不與淋巴細胞反應尿中含福爾馬林、呋喃坦啶、尿中含福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素可致假陽性大量膽紅素可致假陽性高比重尿、高蛋白(高比重尿、高蛋白(5g/L)5g/L)、VCVC、尿中含頭孢霉素、慶大、
9、尿中含頭孢霉素、慶大霉素、四環素以及霉素、四環素以及硼酸硼酸、草、草酸可致假陰性酸可致假陰性注意事項注意事項尿液標本應新鮮,尿液在尿液標本應新鮮,尿液在膀胱時間過長,或標本存膀胱時間過長,或標本存儲時間過長,引起白細胞儲時間過長,引起白細胞破壞,導致干化學陽性,破壞,導致干化學陽性,鏡檢陰性的假陽性出現鏡檢陰性的假陽性出現綜合酯酶、亞硝酸鹽、鏡綜合酯酶、亞硝酸鹽、鏡檢、結合臨床分析結果檢、結合臨床分析結果白細胞和紅細胞白細胞和紅細胞10/10/l l、亞硝酸鹽和蛋白陰性,可亞硝酸鹽和蛋白陰性,可以使用干化學過篩而不進以使用干化學過篩而不進行鏡檢行鏡檢 鏡檢標準鏡檢標準 腎科及泌尿系病人腎科及泌
10、尿系病人 以鏡檢作為診斷或療效以鏡檢作為診斷或療效依據的,如結石、結晶、依據的,如結石、結晶、腫瘤腫瘤 尿液外觀異常時尿液外觀異常時 依據醫師指定要求做沉依據醫師指定要求做沉渣鏡檢的標本渣鏡檢的標本。 注意事項注意事項 只要完全符合以下條件的可不進行顯微鏡只要完全符合以下條件的可不進行顯微鏡檢查。檢查。白細胞結果為陰性白細胞結果為陰性亞硝酸鹽為陰性尿亞硝酸鹽為陰性尿蛋白為陰性蛋白為陰性尿紅細胞檢查尿紅細胞檢查10/10/l l排除藥物及其它因素的干擾排除藥物及其它因素的干擾尿中白細胞試帶法與鏡檢結果比較 試帶法白細胞(試帶法白細胞(- -)試帶法白細胞(試帶法白細胞(+ +) 鏡檢白細鏡檢白細
11、胞(胞(- -)正常標本正常標本白細胞破壞、標本久置、白細胞破壞、標本久置、低滲尿、高低滲尿、高pHpH尿、漏檢尿、漏檢白細胞白細胞鏡檢白細鏡檢白細胞(胞(+ +)試帶失效、高滲尿、抗試帶失效、高滲尿、抗生素、錯誤識別:滴蟲、生素、錯誤識別:滴蟲、鱗狀上皮裸核型,排斥鱗狀上皮裸核型,排斥等等(+ +)臨床意義臨床意義 白細胞增多主要見于泌尿系白細胞增多主要見于泌尿系炎癥炎癥 腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎,腎小球腎炎前列腺炎,腎小球腎炎 中性粒細胞見于急性炎癥中性粒細胞見于急性炎癥 淋巴細胞、單核細胞見于腎淋巴細胞、單核細胞見于腎移植、慢性炎癥、新月形腎移植、慢性
12、炎癥、新月形腎小球腎炎、抗癌藥物引起的小球腎炎、抗癌藥物引起的間質性腎炎間質性腎炎 嗜酸性細胞見于過敏性炎嗜酸性細胞見于過敏性炎癥、變態反應引起的泌尿癥、變態反應引起的泌尿系炎癥系炎癥 急性腎小管壞死,可見急性腎小管壞死,可見單核細胞減少或消失單核細胞減少或消失 女性生殖系統炎癥分泌女性生殖系統炎癥分泌物污染物污染Vit C概述概述 人、靈長類和豚鼠不能合人、靈長類和豚鼠不能合成成 VCVC的閾值的閾值14mg/L14mg/L 通過消化道需能吸收通過消化道需能吸收 通過尿液排出,其重吸收通過尿液排出,其重吸收機制和葡萄糖基本一致機制和葡萄糖基本一致 攝入攝入45mg/L,45mg/L,血液中血
13、液中6mg/L6mg/L 模式模式 左旋抗壞血酸左旋抗壞血酸 左旋脫氫抗壞血酸左旋脫氫抗壞血酸 測定方法測定方法 同時測定:二硝基苯肼同時測定:二硝基苯肼比色法和高效液相色譜比色法和高效液相色譜法法 測定左旋抗壞血酸:干測定左旋抗壞血酸:干化學法和二氯靛酚藍化學法和二氯靛酚藍檢測原理檢測原理 模塊組成:模塊組成:2,6-2,6-二氯靛酚鈉、中性紅、亞甲基綠磷酸二氫二氯靛酚鈉、中性紅、亞甲基綠磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉鈉、磷酸氫二鈉 VCVC含有含有1 1,2-2-烯二醇,在酸性條件使氧化態粉紅色烯二醇,在酸性條件使氧化態粉紅色2,6-2,6-二二氯靛酚還原為無色的氯靛酚還原為無色的2 2,6-6-
14、二氯二對酚胺二氯二對酚胺注意事項注意事項 在堿性環境中不穩定,標本在堿性環境中不穩定,標本要新鮮,及時測定,防止被要新鮮,及時測定,防止被細菌破壞細菌破壞 只對左旋抗壞血酸反應只對左旋抗壞血酸反應 時,內源性酚和巰基化合物時,內源性酚和巰基化合物如半胱氨酸、硫代硫酸鈉使如半胱氨酸、硫代硫酸鈉使結果偏高結果偏高 著重反映飲食著重反映飲食VCVC含量,反映含量,反映體內體內VCVC營養狀況,營養狀況,VCVC低見于低見于攝入不足或抗壞血酸病,長攝入不足或抗壞血酸病,長期增高與結石形成有關期增高與結石形成有關 維生素維生素C C含量的高低對血紅蛋含量的高低對血紅蛋白、葡萄糖、膽紅素、尿膽白、葡萄糖、
15、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽及白細胞產生原、亞硝酸鹽及白細胞產生負干擾負干擾 尤其注意酮體陽性,葡萄糖尤其注意酮體陽性,葡萄糖陰性或葡萄糖干化學和班氏陰性或葡萄糖干化學和班氏結果不一致時結果不一致時半胱氨酸比色法測定比色法測定VC 使用活性碳將抗壞血酸氧化成氧化型,與使用活性碳將抗壞血酸氧化成氧化型,與2 2,4-4-二二硝基苯肼結合成紅色脎,脎溶解于硫酸,比色硝基苯肼結合成紅色脎,脎溶解于硫酸,比色尿干化學檢測的原理尿干化學檢測的原理方法比較方法比較-尿干化學法尿干化學法 優點:標本用量少;優點:標本用量少;速度快;項目多;重速度快;項目多;重復性好、準確性高;復性好、準確性高;適用大批量標本篩
16、查適用大批量標本篩查 缺點缺點 不能替代對病理性標本的不能替代對病理性標本的顯微鏡檢查,對白細胞、顯微鏡檢查,對白細胞、管型和結晶的檢查屬于間管型和結晶的檢查屬于間接檢查接檢查 很難判斷紅細胞形態特征很難判斷紅細胞形態特征 測定蛋白以白蛋白為主,測定蛋白以白蛋白為主,故不適于腎病患者故不適于腎病患者 易受藥物、外源性物質易受藥物、外源性物質或人為因素影響,出現或人為因素影響,出現假陽性或假陰性假陽性或假陰性 亞硝酸鹽只能檢查出有亞硝酸鹽只能檢查出有硝酸鹽還原酶的細菌硝酸鹽還原酶的細菌 多聯試帶保存和使用要多聯試帶保存和使用要求高求高篩查的目的篩查的目的 檢出異常標本和排除健康標檢出異常標本和排
17、除健康標本,本, 特別是避免假陰性。特別是避免假陰性。 對假陽性可通過鏡檢進一步對假陽性可通過鏡檢進一步排除排除質量控制質量控制 標本必須新鮮,最好標本必須新鮮,最好2 2小時內完成,過久影響結果小時內完成,過久影響結果 避免混入陰道分泌物混入尿標本,否則,引起白避免混入陰道分泌物混入尿標本,否則,引起白細胞假陽性細胞假陽性 了解病人飲食及用藥情況了解病人飲食及用藥情況試劑帶要求試劑帶要求 一定要在失效期內一定要在失效期內 避光、防潮、干燥保存避光、防潮、干燥保存 使用時一次只取出所需使用時一次只取出所需要的試劑帶,并立即蓋要的試劑帶,并立即蓋緊,多余試劑帶不可放緊,多余試劑帶不可放回容器內回
18、容器內 打開蓋子后不能再放冰打開蓋子后不能再放冰箱箱 不可合并各瓶中的試不可合并各瓶中的試劑帶。劑帶。 不可觸摸試劑帶上各不可觸摸試劑帶上各反應檢測塊。反應檢測塊。質量控制質量控制 操作嚴格、操作嚴格、規范、正確規范、正確 2 2種濃度質控種濃度質控液液臨床應用臨床應用全自動尿沉渣分析儀種類種類 流式細胞術尿沉渣分析儀 流式細胞術尿沉渣分析儀流式細胞術尿沉渣分析儀 流式細胞計數儀原理和流式細胞計數儀原理和電阻抗相結合電阻抗相結合 影像式尿沉渣分析系統影像式尿沉渣分析系統 流式細胞分析技術和粒流式細胞分析技術和粒子成像分析技術子成像分析技術影像式尿沉渣分析儀流式細胞術尿沉渣分析儀流式細胞術尿沉渣
19、分析儀 光學檢測系統光學檢測系統 液壓系統液壓系統 電阻抗檢測系電阻抗檢測系統統 電子系統電子系統參數參數 熒光強度(熒光強度(FI):FI):反映細反映細胞染色質強度胞染色質強度 前向熒光脈沖寬度前向熒光脈沖寬度(FLWFLW):主要反映染色):主要反映染色質長度質長度 前向散射光強度(前向散射光強度(FscFsc):):成比例反映細胞大小成比例反映細胞大小 前向散射光脈沖寬度前向散射光脈沖寬度(Fscw):Fscw):反映細胞長度反映細胞長度 定量參數定量參數 WBC/WBC/l l、RBC/ RBC/ l l 、EC/ EC/ l l 、CAST/ CAST/ l l 、 BACT/ B
20、ACT/ l l 、conductivityconductivity 標記參數標記參數 Path CASTPath CAST、SRCSRC、YLCYLC、X X TALTAL、SPERMSPERM等等 紅細胞、白細胞紅細胞、白細胞 isomorphic RBCisomorphic RBC、dysmorphicdysmorphic RBC RBC、Non-Non-LysedLysed RBC#,% RBC#,%、RBC-RBC-MFIMFI、 RBC-RBC-MFscMFsc、 RBC-FI-DWSDRBC-FI-DWSD、WBC-WBC-MFscMFsc) ) FI-FI-FscFsc、Fsc
21、w-FlwFscw-Flw散點圖散點圖 紅細胞:紅細胞:FIFI極低極低,Fsc,Fsc大小不均大小不均 白細胞:白細胞:FIFI大大, Fsc, Fsc較紅細胞大較紅細胞大 細菌:細菌:FSCFSC比白細胞和紅細胞小比白細胞和紅細胞小,FI,FI比比紅細胞大紅細胞大, ,比白細胞小比白細胞小 上皮細胞:均有細胞核上皮細胞:均有細胞核, ,主要分布在主要分布在Fscw-FlwFscw-Flw散點圖左上角散點圖左上角 管型:透明管型有極高的管型:透明管型有極高的Fscw Fscw 和低和低的的FLW;FLW;病理性管型含有其他內容物,病理性管型含有其他內容物,有較高的有較高的FscwFscw和較
22、高的和較高的FLWFLWFSCWFSC 酵母細胞和精子:較高的酵母細胞和精子:較高的FIFI,FscFsc在紅細胞和白細胞之間在紅細胞和白細胞之間; ;酵母的酵母的FSCWFSCW較精子的小較精子的小, ,將其區分開來將其區分開來 結晶出現在紅細胞區域結晶出現在紅細胞區域, ,草酸鹽更草酸鹽更靠近靠近FSC,FSC,尿酸鹽和紅細胞分不清尿酸鹽和紅細胞分不清FSCWFSC紅細胞紅細胞 80%80%的紅細胞的紅細胞Fsc84ch,Fsc84ch,稱為稱為非均一性血尿非均一性血尿 80%80%的紅細胞的紅細胞Fsc126ch,Fsc126ch,稱稱為均一性血尿為均一性血尿 介于兩者之間,混合性血尿介
23、于兩者之間,混合性血尿 結晶、真菌、結晶增多影響結晶、真菌、結晶增多影響結果結果 血尿伴菌尿,尿滲量或放置血尿伴菌尿,尿滲量或放置時間過長,導致改變時間過長,導致改變白細胞白細胞 存活的白細胞,存活的白細胞,FscFsc較強較強而而FIFI弱弱 死亡白細胞,死亡白細胞, FscFsc較弱而較弱而FIFI強強 白細胞前向散射光(白細胞前向散射光(FSC)FSC)強強, ,前向熒光(前向熒光(FIFI)弱,)弱,急性感染;否則急性感染;否則FSCFSC弱,弱,FIFI強慢性感染。強慢性感染。 利用利用WBC-MFscWBC-MFsc來判別白細來判別白細胞狀態,結合白細胞定量胞狀態,結合白細胞定量判斷急性還是慢性感染判斷急性還是慢性感染: :當其時
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