1、代寫醫學職稱論文映山紅總黃酮的鎮咳平喘作用與毒性研究【關鍵詞】 映山紅；,總黃酮；,鎮咳；,平喘；,毒性摘要：目的研究映山紅總黃酮的鎮咳平喘作用和毒性反應。方法采用急性毒性試驗確定藥效劑量，以慢性氣管炎的主要癥狀咳、喘為藥效學指標，采用小鼠氨水引咳法、整體動物藥物引喘法研究映山紅總黃酮的鎮咳平喘作用。結果映山紅總黃酮（0.064 g/kg）對致咳小鼠具有顯著的鎮咳作用，映山紅總黃酮（0.038 g/kg）對致喘豚鼠具有顯著的平喘作用，同時，映山紅粗提物及總黃酮對實驗動物具有不同程度的毒性反應。結論映山紅總黃酮在發揮藥效的同時，不可忽視其毒性反應。關鍵詞：映山紅； 總黃酮； 鎮咳； 平喘； 毒性

2、Study on Antitussive, Antiasthmatic Effects and Toxicity of Total Flavanoid of Rhododendron simsii PlanchWANG Mingjun(Zhejiang Pharmaceutical College, Ningbo 315100,China)Abstract：ObjectiveTo study antitussive, antiasthmatic effects and toxicity of total flavanoid of Rhododendron simsii Planch(TFR).

3、MethodsEffective dosage was decided with acute toxicity experiment. As major symptoms of chronic bronchitis, cough and asthma were studied on TFR with experiments of mice and Guinea pigs with ammonia and histamine, respectively.ResultsTFR(0.064，0.038g/kg) had obvious antitussive, antiasthmatic effec

4、ts on mice and guinea pigs with ammonia and histamine, respectively. And Rhododendron simsii Planch extracts , total flavanoid had different degree of toxicity reactions to laboratory animal. ConclusionToxicity of TFR shouldnt be neglected when it has effects.Key words：Rhododendron simsii Planch； To

5、tal flavanoid； Antitussive； Antiasthma； Toxicity 映山紅系杜鵑花科植物映山紅Rhododendron simsii Planch 的干燥葉，具有活血止痛，祛風利濕，止咳喘的功效，臨床上主要用于治療慢性氣管炎、風濕性關節炎和跌打損傷等，但可致頭昏、惡心、嘔吐、心跳減慢和四肢發麻等毒性反應1，2 。本研究通過考察映山紅粗提物、映山紅總黃酮的急性毒性作用，確定以慢性氣管炎的主要癥狀咳、喘為藥效學指標，研究映山紅總黃酮的鎮咳平喘作用，旨在揭示映山紅總黃酮在發揮藥效的同時，不可忽視其毒性反應。1 儀器與材料1.1 藥物映山紅原藥材：采自湖南省長沙市郊，經本

6、校中藥教研室鑒定為杜鵑花科植物映山紅Rhododendron simsii Planch 的干燥葉，陰干后粉碎，放于干燥處備用。映山紅粗提物（60%乙醇提取物，濃縮藥液至與原藥材比例11）；映山紅總黃酮（原藥材經乙醇提取，濾過，濃縮，酸堿處理，醋酸乙酯萃取，濃縮干燥得到黃色粉末狀物質，即總黃酮部位，得率為0.706%）；咳必清（由丹東制藥廠生產,批號0030929）；氨茶堿（由山西省曙光制藥廠生產,批號990519）。1.2 動物小鼠，KM種，各半，體重(202)g；豚鼠，隨機雜種，幼鼠，體重150200 g，購于廣州中醫藥大學實驗動物中心（粵檢證字：第2001A054號）。1.3 儀器恒壓霧

7、化引咳及引喘裝置。2 方法與結果32.1 急性毒性實驗采用少量小鼠，將小鼠隨機分為3組，每組3只，組間劑量比為10.7，灌胃給藥，觀察小鼠的死亡情況。找出引起動物零死亡率（Dn）和全死亡率（Dm）的劑量。經預試，測定結果（見表12）：映山紅粗提物：Dn 7.93 g/kg；Dm 23.08 g/kg；映山紅總黃酮部位：Dn 0.237 g/kg；Dm 0.678 g/kg。表1 映山紅粗提物的急性毒性實驗分組及結果（略）表2 映山紅總黃酮部位的急性毒性實驗分組及結果（略）結果表明，映山紅粗提物的LD50 13.14 g/kg相當于人的給藥量101.08 g生藥，映山紅總黃酮部位的LD50 0.

8、495 g/kg相當于人的給藥量539.33 g生藥。而藥效學的給藥劑量一般常用1/51/3的LD50，因為若超過1/3 LD50的劑量才有效，那這個藥也就不夠安全了。因此，映山紅粗提物的1/3 LD50相當于人的給藥量33.7 g生藥，這個劑量已超過人的常用劑量1530 g，其安全性較低；而映山紅總黃酮的1/3 LD50相當于人的給藥量179.78 g生藥，即總黃酮1.269 g，此劑量能否產生藥效，還需進一步研究確證。2.2 映山紅總黃酮的鎮咳平喘作用2.2.1 劑量的確定供試藥物、陽性對照藥以小鼠、豚鼠等效于人的臨床常規劑量（換算系數分別是0.0026，0.031）給藥，其中給藥小鼠的映

9、山紅總黃酮分3個劑量組（分別相當于從原藥材70 g，105 g，140 g提取的樣品）, 給藥豚鼠的映山紅總黃酮分3個劑量組（分別相當于從原藥材70 g，105 g，140 g提取的樣品）。2.2.2 動物分組與劑量映山紅總黃酮組（小鼠0.064，0.096，0.128 g/kg；豚鼠0.038，0.057，0.076 g/kg）；陽性對照組(咳必清10 mg/kg，氨茶堿0.1 g/kg)；空白對照組(生理鹽水)。動物隨機分組，小鼠每組10只, 豚鼠每組6只。2.2.3 小鼠氨水引咳法取隨機分組的小鼠，分別灌胃給藥。給藥1 h后將小鼠置于2L玻璃鐘罩內，在恒壓下（約400 mmHg）開始接受

10、18.3%氨水定量噴霧。5 s后立即取出,記錄小鼠從接受噴霧開始到出現咳嗽的潛伏期及2 min內的咳嗽次數, 分別觀察映山紅總黃酮不同劑量的鎮咳作用。見表3。結果表明，咳必清（10mg/kg）與TFR（0.064 g/kg）給藥后，對小鼠具有在2min內減少咳嗽次數的作用，顯示TFR（0.064 g/kg）具有顯著的鎮咳作用。表3 映山紅總黃酮（TFR）對氨水致咳小鼠的影響（略）與空白組比較， *P0.01, *P0.001；n=62.2.4 整體動物藥物引喘法將豚鼠放入噴霧裝置內, 以2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組織胺混合溶液定量恒壓(約400 mmHg)噴霧,每只豚鼠接受噴霧20 s后立

11、即取出,記錄豚鼠從接受噴霧開始到出現喘息性抽搐跌倒的潛伏期。選用6 min內跌倒的豚鼠供第2天實驗用。次日選用合格、隨機分組的豚鼠，分別灌胃給藥。給藥1 h后，將豚鼠放入2 L玻璃鐘罩中，開始噴霧，記錄豚鼠的引喘潛伏期，分別觀察映山紅總黃酮不同劑量的平喘作用。見表4。表4 映山紅總黃酮（TFR）對藥物致喘豚鼠的影響（略）與空白組比較， *P0.05；n=6：TFR大劑量組第1天給藥預試,過夜，第2天給藥后進行實驗，發現動物死亡2只,其余精神萎靡不振，倦怠，實驗過程中與實驗后又死亡1只。因此，無法進行數據處理。結果表明，氨茶堿（100 mg/kg）和TFR（0.038 g/kg）給藥后，對豚鼠具

12、有在6 min內延長引喘潛伏期的作用（P0.05），顯示TFR（0.038 g/kg）具有顯著的平喘作用。3 結論映山紅總黃酮（0.064 g/kg）對致咳小鼠具有鎮咳作用，映山紅總黃酮（0.038 g/kg）對致喘豚鼠具有平喘作用，其余組由于毒性的原因導致用藥后出現不同程度的倦怠、精神不振，甚至死亡，影響了實驗結果的數據處理，而映山紅總黃酮接近1/5LD50和1/3LD50 的劑量組分別對小鼠的鎮咳、豚鼠的平喘作用不明顯，進一步說明該部位的毒性作用4 。通過上述實驗不難得出：在篩選中藥有效部位的研究中，必須先對中藥提取物、提取部位進行毒性指標的實驗，這樣不僅有利于確定進行藥效時的給藥劑量，而且有利于確定其毒性的大小，從