1、毒理學研究方法選修課教學大綱課程名稱：毒理學研究方法課程性質：選修課總學時數：34學時學分：1.7學分適用專業和層次：臨床醫學、中醫、影像、麻醉等專業本科層次課程教材：毒理學基礎、毒理學試驗方法與技術第一講毒理學概論教學目標與要求要求學生熟悉：1毒物、毒性的概念，造成選擇毒性的原因，毒作用的類型及其分級，損害作用及非害作用；毒效應譜、靶器官、生物學標志物及其分類。2 劑量、量反應及質反應、的概念，劑量-量反應關系和劑量-質反應關系的區別，劑量-反應關系曲線的類型，即兩-反應關系曲線轉換的意義。3 .表示毒性的常用指標一一LD。、閾劑量和最大無作用劑量、毒作用帶。教學時數5學時教學方式多媒體教學

2、內容一、毒理學的概念二、毒理學研究任務三、毒理學研究內容1. 描述毒理學2. 機制毒理學3. 管理毒理學四、毒理學研究方法（一）人群流行病學（二）生物學實驗1. 人體志愿者2. 動物實驗1）整體動物實驗（invivo）一般毒性試驗特殊毒性試驗（2）體外試驗（invitro）五、毒理學研究領域六、現代毒理學在理論和實踐上發展的幾方面（一）生物轉化與毒物動力學（二）中毒機制的探討（三）化學結構與毒性作用的關系（四）解毒藥物的發展（五）衛生標準的制定（六）新的毒理學分支日益增多（七）方法學的發展（八）生物標記的研究與應用七、為來毒理學的發展趨勢（一）從整體動物試驗到替代試驗（二）從外源化學物的特異毒

3、性作用擴展到人類慢性病、多發病的研究（三）建立生物標志物，發展個體的危險度評價八、毒理學基本概念（一）毒物、毒性和毒作用（二）毒物及其分類（三）毒性及其分級1. 影響毒性及其性質的因素（1） 接觸途徑（2） 接觸期限、速率和頻度2. 出現選擇毒性的原因（1） 種屬和細胞學的差異（2） 不同生物或組織器官對化學物質生物轉化的差異（3） 不同組織器官對化學物的親和力差異（4） 不同組織器官對化學物所致損害的修復能力的差異（四）毒性作用及其分類（五）損害作用與非損害作用（六）毒效應譜及靶器官（七）生物標志物1. biomarkerofexposure2. biomarkerofeffect3. bi

4、omarkerofsusceptibility（八）劑量、劑量-量反應關系、劑量-質反應關系1. 劑量的概念2. 量反應與質反應3. 劑量-量反應關系、劑量-質反應關系4. 劑量-反應關系曲線5. 1）劑量-反應關系曲線的形式6. ）劑量-反應關系曲線的轉換7. 3）轉換的意義（九）表示毒性常用指標1. 致死劑量2. 閾劑量和最大無作用劑量（1）NOAEL（2）LOAEL3. 毒作用帶（1）急性毒作用帶（2）慢性毒作用帶4. 安全限值（ 1）每日容許攝入量（ADI）（ 2）最高容許濃度（MAC）第二講一般毒性作用評價方法急性毒性試驗教學目標與要求要求學生熟悉：1 急性毒性的概念、急性毒性試驗目

5、的、急性毒性試驗設計的要點及評價。2 蓄積毒性作用的研究方法3 蓄積毒作用的概念亞曼性和慢性毒性試驗設計要點。教學時數4學時教學方式多媒體教學內容一、急性毒性的概念及注意的問題二、急性毒性試驗的目的三、急性毒性試驗設計的要點（一）實驗動物的選擇和要求1. 實驗動物的種屬和品系2. 實驗動物的年齡和體重3. 實驗動物的性別4. 實驗動物分組與數量5. 實驗動物的預檢6. 實驗動物的給藥前禁食處理（二）受試物的處理1. 受試物的化學結構等資料2. 受試物配制的溶劑選擇3. 最大染毒容量（三）染毒方法1. 經口（胃腸道）染毒2. 經呼吸道染毒3. 經皮膚染毒（四）劑量選擇1. 查閱受試物相關資料2.

6、 確定LD50的計算方法3. 確定預試驗的染毒劑量及致死劑量范圍4. 計算染毒劑量的組距并確定正式試驗的染毒劑量（五）毒作用觀察1. 中毒體征及發生過程2. 死亡情況與時間分布3. 體重變化4. 病理檢查（六）觀察時間和周期四、急性毒性分級和評價思考題1. 以某化學毒物為例寫出急性毒性試驗設計第三講一般毒性作用評價方法蓄積、鴨慢性、慢性毒性試驗教學目標與要求要求學生了解：1 蓄積毒性作用的概念、蓄積毒性作用的研究方法2 亞曼性和慢性毒性的概念、試驗目的、試驗設計要點。教學時數4學時教學方式多媒體教學內容第一節蓄積毒性作用一、蓄積毒性的概念1. 蓄積作用2. 功能蓄積3. 物質蓄積二、蓄積毒性的

7、研究方法（一）蓄積系數法1. 固定劑量法2. 劑量遞增法3. 劑量固定的20天蓄積法（二）生物半減期發第三節亞曼性和慢性毒性作用一、亞慢性毒性作用（一）亞慢性毒性的概念（二）亞慢性毒性試驗目的（三）亞慢性毒性試驗方法的要點1. 試驗動物的選擇2. 染毒方法3. 劑量選擇和分組4. 觀察指標二、慢性毒性作用（一）慢性毒性的概念（二）慢性毒性試驗目的（三）慢性毒性試驗方法的要點1. 試驗動物的選擇2. 染毒途徑和時限3. 劑量分組4. 觀察指標(四)慢性毒性試驗的注意事項思考題1. 如何設計慢性毒性試驗的染毒時間與期限、劑量分組第四講外源化學物致突變作用研究方法教學目標與要求要求學生熟悉：1 基本

8、概念。2. 突變的類型包括基因突變、染色體畸變。3. 化學致突變物引起的機制即引起突變的DN儂化、致突變的后果。了解：1 機體對致突變作用的影響。2 引起突變的細胞分裂過程的改變。教學時數4學時教學方式多媒體教學內容第一節概述一、基本概念1. 突變2. 自發突變3. 誘發突變4. 遺傳毒理學第二節化學毒物致突變的類型一、基因突變1 堿基置換2 .移碼突變二、染色體畸變三、非整倍體和多倍體第三節化學毒物致突變作用的機制及后果一、引起突變的DNA變化1. 堿基損傷(1) 堿基錯配(2)平面大分子嵌入DNA鏈(3) 堿基類似物取代(4) 堿基的化學結構改變或破壞2. DNA鏈受損(1) 二聚體的形成

9、(2) DNA加合物的形成(3) DNA-蛋白質交聯物二、引起突變的細胞分裂過程的改變1. 與微管蛋白的二聚體結合2. 與微管上的巰基結合3. 以組裝好的微管的破壞4. 中心粒移動受阻三、突變的后果1. 生殖細胞突變2. 體細胞突變第四節機體對致突變作用的影響一、DNA損傷的修復二、遺傳因素對致突變作用的影響1. 代謝酶遺傳多態性2. 修復功能的個體差異第五講觀察化學毒物致突變作用的基本方法教學目標與要求要求學生熟悉：1觀察致突變作用的基本方法、致突變試驗項目的選擇、常用的致突變試驗。2. 常用的致突變試驗的原理、方法、結果評價。3熟悉致突變試驗中的一些問題。教學時數4學時教學方式多媒體教學內

10、容一、觀察項目的選擇1. 觀察效應終點的類型2. 成套的觀察項目二、常用的致突變試驗1. 細菌回復突變試驗2. 微核試驗3. 染色體畸變分析4. SCE5. SLRL6. 顯性致死7. 程序外DN貽成試驗8. 單細胞凝膠電泳試驗（三）致突變試驗中的一些問題思考題1. 生殖細胞和體細胞發生突變的后果分別有哪些？2. 遺傳毒理學試驗配套原則有哪些？為什么要用一組試驗觀察化學毒物的致突變性？3. 試述Ames試驗的原理、方法、指示生物、檢測終點、結果判定4. 常用的體外試驗的代謝活化系統是什么？5.第六講外源化學物致癌作用的研究方法教學目標與要求要求學生熟悉：1 化學致癌的分子機制、化學致癌過程。2

11、 觀察化學毒物致癌作用的基本方法。3 化學致癌物的分類。教學時數5學時教學方式多媒體教學內容一、化學致癌機制（一）與致癌作用有關的代謝（二）化學致癌的分子機制1. DNA加合物2. DNA修復與化學致癌3. 癌基因、原癌基因及抑癌基因4. 基因表達調控異常與腫瘤發生（三）化學致癌過程1. 引發階段2. 促進階段3. 進展階段（四）非遺傳毒性的致癌機制二、化學致癌物的分類（一）根據致癌物對人類和動物的致癌作用分類（二）根據化學致癌物作用機制分類三、觀察化學毒物致癌作用的基本方法（一）短期試驗1. 致突變試驗2. 細胞轉化試驗3. 哺乳動物短期致癌試驗（二）哺乳動物長期致癌試驗（三）人群流行病學調

12、查（四）作為致癌作用模型的轉基因小鼠和基因敲除小鼠第七講發育毒性與致畸作用研究方法教學目標與要求要求學生熟悉：1 基本概念和發育毒性的終點、發育各階段發育毒性作用的特點。2 發育毒性（致畸作用）的機制。3 發育毒性與致畸作用試驗與評價教學時數4學時教學內容一、發育毒理學概念二、從畸胎學到發育毒理學三、基本毒性和發育毒性的終點1. 畸形2. 變異3. 畸胎-胎兒毒性4. 發育毒性5. 出生缺陷四、發育各階段發育毒性作用的特點（一）臨床前期（二）器官形成期（三）胎兒期（四）圍生期和出生后的發育期五、母體毒性與發育毒性（一）母體因素對發育毒性的影響（二）母體毒性與胚胎毒性的關系六、發育毒性的劑量-反應關系模式和閾值概念（一）發育毒性的劑量-反應模式（二）發育毒性的閾值的概念七、致畸（發育毒性）的機制1. 干擾基因表達2. 基因突變與染色體畸變3. 損傷細胞和分子水平的翻譯4. 細胞凋亡5. 干擾細胞-細胞交互作用6. 通過胎盤毒性引起發育毒性7. 干擾母體穩態8. 內分泌干擾作用八、發育毒性和致畸試驗與評價（一）動物發育毒性試驗（二）流行病學研究和人類證據第八講毒理學試驗基礎及一般操作技術教