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文檔簡介

1、L0目的檢測食品飲料中的大腸菌群，以監測飲料的微生物狀況。2.0范圍適用于咖啡飲料，茶飲料等產品的大腸菌群的測定。3.0職責微生物品控員負責本文件的執行；QA檢驗工程師負責監督本文件的有效執行。4.0定義無5.0程序5.1 培養介質的準備所有培養劑必須根據制造商的說明進行制備和滅菌。它們對熱很敏感，所以不能過熱。培養劑應裝入200-300ml的瓶內進行滅菌。容器中至少保留15%的空間。5.2 培養皿準備521按測試內容及測試樣品數量準備好平板和乳糖膽鹽發酵管，另外每個測試項目加一個發酵管作對照試驗，放入滅菌釜滅菌。5.3操作步驟5.2.2將滅菌好的發酵管和平板置于干燥箱中高溫烘干。冷卻待用。5

2、3.1 檢樣稀釋及培養53.1.1 以無菌操作，將檢樣25g或25ml放于含有225ml無菌水的玻璃瓶內（瓶內預置適當數量的玻璃珠），經充分振搖作成1:10的均勻稀釋液。53.1.2 用1ml滅菌吸管吸到1:10稀釋液1ml,沿管壁徐徐注入含有9ml無菌水的試管內（注意吸管尖端不要觸及管內稀釋液），振搖試管混合均勻，作成1:100的稀釋液。53.1.3 3另取1ml滅菌吸管，按上項操作順序，作10倍遞增稀釋液，如此每遞增稀釋一次，即換用1支1ml滅菌吸管。53.1.4 由于本方法所適用的樣品均要求無菌，因此只選擇原液、1:10和1:100兩個稀釋度，分別作10倍遞增稀釋的同時，即以吸取該稀釋度

3、的吸管移1ml稀釋源于滅菌發酵管內（已按待測樣品的類別和批號分別作好記號）內，每個稀釋度作三個發酵管。5.3.2 乳糖發酵試驗將檢驗樣品接種于乳糖膽鹽發酵管內，每一稀釋度接種三管，置36+/ToC溫箱內，培養24+/-2小時，如所有乳糖膽鹽發酵管都不產氣，則可報告大腸菌群陰性，如有產氣者，則按下列程序進行。5.3.3 分離培養將產氣的發酵管分別轉種在伊紅美藍瓊脂平板上，置36+/-1OC溫箱內，培養48+/-2h,然后取出，觀察菌落形態，并作革蘭氏染色和證實試驗。5.3.4 證實I熠在上述平板上，挑取可疑大腸菌群菌落1-2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發酵管，置36+/-1C溫箱內培養24+/-2h,觀察產氣情況，凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的無芽胞桿菌，即可報告為大腸菌群陽性。5.3.5 才反告根據證實為大腸桿菌陽性的管數，在GB4789.3食品衛生微生物學檢驗大腸菌群的測定中查MPN僉索表，報告每100ml大腸菌群的最可能數，并將結果記錄在微生物檢驗記錄FM-QA-520±o生效日期：2003/04/10編寫：版本：B審核：修訂次數：00批準：共2頁，第1頁6.0參考文獻6.1 本文件支持綱要文件：R-QA-006微生物監控綱要大腸菌群測定。6.2 本文件參考：GB4789.3食品衛生微生物學檢驗7.0附件/記錄7.1 附件：無7.2 記錄：微生物檢驗記錄FM-Q

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