1、方法驗證”和方法確認”其實不一樣!a方法驗證和方法確認到現(xiàn)在還混淆不清？那簡直弱爆了 ！本文小析姐教你幾招，告訴你兩者最大的區(qū)別是什么？國內(nèi)外方法驗證和確認的參數(shù)有何不同，分別有什么步驟？很多實驗室認為方法確認或驗證困難重重原因有？ 方法驗證和確認的定義方法驗證 (Validation of method )USP :方法驗證是一個通過實驗室研究來證明程序的性能參數(shù)符合期望的分析應用要求的 過程。ICH :分析方法驗證的目的是顯示分析方法適用于它所期望的應用目的。FDA :方法驗證是一個闡述分析方法適合于其使用目的的過程。方法確認 (Verificatio n of method )USP&l

2、t;1225> : USP-NF所收載方法的使用者不需要驗證這些方法的準確性和可靠性，但需要確認這些方法在實際使用條件下的適應性。USP<1226> :確認包括所涉及方法的性能參數(shù)，如那些在<1225>中描述的，以建立恰當?shù)摹⑾鄳臄?shù)據(jù)，而不是重復驗證的過程。FDA :出現(xiàn)在USP中的方法被認為已驗證，對于法定方法，廠家必須闡明該方法在實際使 用情況下的狀態(tài)。總體來講，方法驗證是闡明方法適合于它使用目的的一個過程，方法確認是通過已驗證的方法進行檢測的條件確實適合于該已驗證方法的過程。表1典型化學分析方法驗證參數(shù)的選擇檢測限檢出限正里 限正確度'回 收率精密

3、度（重復性和再 現(xiàn)性）選擇性，專屬性適用性/穩(wěn)健性/穩(wěn)定性線性/靈敏度/范圍5+-卡+k法匚-+*工工P匚'+-+*1法(十一+4-+H-申注：篩選方法（Screening methods）,忙"=確五選參數(shù)；方法(Gonfi rmry methods)表2國內(nèi)外對方法驗證參數(shù)的要求嘗數(shù)對相關嘗數(shù)做出要求的法規(guī)、標準正里限U5P、ICH、I5O/TEC17025, CKP <2010版）、SN/T 326G-2012,黑化礦金專 業(yè)化學分析方法蛾瞬序（試行（CMCA）>食品化壯品專業(yè)化學分析方法 撿證程序XCNW &食品化妝品專業(yè)生物檢渕方法確認（臉證）程

4、序XCNCA） > 化學分折方法驗證程序（征求意見稿，AQSIQ） *爍化學藥物質(zhì)量控制分析 方法峻證技術指導原則（CFDA）.農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認J旨南（征求 意見稿，農(nóng)業(yè)部檢測限/檢出 限不含農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確認旨南（征乗竜見稿，亠業(yè)部蘇他同定量限八：準確度/正確 度/回收率同罡量限精密度1重真 性1中間精密度1再現(xiàn)性 （復現(xiàn)性1重 現(xiàn)性）同走量限；不含MP,其他同定量限；ICH、化學藥物庾量控制分析方法驗證技 術指導原則（CFM;同定量限。專屬性/選擇性/特異性同疋量限；幾個術語的正義命枉相同或相近之處，USP. ICH稱為專屬性 ISO/IEC17025稱為選擇性，某些標

5、準稱為特異性，某些標準將選擇性定義為包容 性和排他性的組合。耐用性，適用 性朋健性/穩(wěn)定性不含SN/T 3266-2012和農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量分析方法確謝旨南（征求意見稿農(nóng) 業(yè)gf） T其他同定量限；不同標準采用的術語徉在差異，但其定義相同或相近線性同定量限范圍/測定范 圍不含SM/T 3266*2012和農(nóng)藥嚴品質(zhì)量分析方法確謝旨南（征求意見稿，農(nóng) 業(yè)部）、其他同罡量限靈敏度不含化學藥物康量控制分析方法驗證技術指導原則和農(nóng)藥產(chǎn)呂質(zhì) 量分析方法確認指南（征求意見稿，農(nóng)業(yè)部，其他同定量限定義方法范圍樣品基質(zhì) 化合物設備弱位ft確定驗證接受限度確定性能參數(shù)和'$接受限度開發(fā)測試實例性能試驗測定性

6、能參數(shù)丿-標準操作規(guī)程常規(guī)試驗過程1-系統(tǒng)適應性躍分柝質(zhì)量控制 TP77祈萬法驗證常規(guī)歩噪方法驗證的步驟方法驗證常規(guī)步驟方法的確認的步驟（1） 詳細說明有關要求（指的是我們得知道我們要滿足的特定要求”是什么，其中包括客戶要求）（2）確定檢測和/或校準方法的特性；（3） 檢查核實使用該方法能夠滿足有關要求；（4）聲明有效性如果我們對于所使用新的非標準方法進行了如上的確認，則在適用范圍內(nèi)就不需要對后期使用再進行確認了。（當然，如發(fā)現(xiàn)方法特性變差等可能方法不適用時，需要重新確認）。標準方法也需做進一步的驗證？ISO/IEC 17025要求：應優(yōu)先使用以國際、區(qū)域或國家標準發(fā)布的方法。”，這些標準方法

7、被認為已經(jīng)得到驗證。因此，許多技術人員錯誤地認為標準方法不需要在實驗室中做任何進一步的驗證、證實或試驗即可投入使用。ISO/IEC 17025在中有類似的要求：在引入檢測或校準之前，實驗室應證實能夠正 確地運用這些標準方法。如果標準方法發(fā)生了變化，應重新進行證實。”這里明確了標準方法只要不發(fā)生變更，不需要進行驗證，但實驗室應確認其有能力成功運行該方法。當決定選擇什么樣的證實方式最好時，問題又來了。全部的驗證試驗都要重做？是否需要重做部分驗證試驗，還是全部的驗證試驗都要重做？或者僅僅系統(tǒng)適用性試驗或質(zhì)控樣品結(jié)果滿意是否足夠，這些都不清楚。ISO/IEC 17025在545.2中也給出相應的注解：

8、用于確定某方法性能的技術應當是下列之 一，或是其組合：1使用參考標準或標準物質(zhì)（參考物質(zhì)）進行校準；2與其他方法所得的結(jié)果進行比較；3實驗室間比對；4對影響結(jié)果的因素作系統(tǒng)性評審；導致很多實驗室認為方法確認或驗證困難重重原因有？1） 法規(guī)標準的翻譯問題，導致理解存在偏差，比如CNAS-CL01:2006中所描述的 證 實”即與確認”同義；2） 部分法規(guī)標準未作詳細說明，比如實驗室資質(zhì)認定評審準則 ；3） 方法確認和方法驗證定義不清，概念搞混；4）國人缺乏研究心態(tài)，有點困難就逃避，懶惰之心嚴重。“標準方法的確認和評價”也應該有作業(yè)指導書與內(nèi)部制定方法的驗證相同，標準方法的確認和評價也應該遵循文件

9、化的程序，如確認計 劃或作業(yè)指導書表3方法驗證*確認和轉(zhuǎn)移總結(jié)內(nèi)容適用范圍目的發(fā)翔寸機方法驗證k采用新的檢測方法'次檢測方法需變更的,久 采用非法定方法/標準方法4. 了封風標準規(guī)定的 苴他需要驗證的檢測方法證明采用的方法 適合相應檢測墓求1，建立方法時,N方 法修訂時；3.非標方法 批準采用前方法不需要進行菠證的檢測方法5 2、法走方法和 標準方法，比如USP、Ch.P、國際標準、國冢標 準等方邃確認方法在本實 驗室條件下的適用性在實驗室擾隹使用該方 迭前方法轉(zhuǎn)移將方法由A實驗室轉(zhuǎn)移到B實驗室確認采用的方法 在E實驗室條件下的適用性在0實殮室批準使用：. I禺法前；折方法驗證、確認和

10、轉(zhuǎn)移到底有啥聯(lián)系？相對于方法驗證來說，方法確認類似于方法驗證的簡化版，且方式更靈活。但是實驗室最終該如何做好方法驗證或確認，還需要各實驗室對相關法規(guī)標準及參考文獻進行深入的研 究，制定適合自身的作業(yè)指導書并嚴格執(zhí)行。將方法驗證、確認和轉(zhuǎn)移簡單總結(jié)如下：任何分析檢測的目的都是為了獲得穩(wěn)定、可靠和準確的數(shù)據(jù)，方法驗證在其中起著極為重要的作用。方法驗證的結(jié)果可以用于判斷分析結(jié)果的質(zhì)量、可靠性和一致性，這是所有質(zhì)量管理體系不可分割的一部分。一般在下列情況下，要求對分析方法進行驗證 、確認（或稱證實）或重新驗證：1）首次用于常規(guī)檢測前；2）轉(zhuǎn)到另一個實驗室時；3） 對于驗證過的方法，其條件或方法參數(shù)發(fā)生

11、變化時（例如，儀器性能參數(shù)發(fā)生改變或樣品基質(zhì)不同時），并且這種變化超出了方法的原適用范圍。實驗室應對非標準方法確認國內(nèi)第三方檢測機構(gòu)一般均非標準制修訂機構(gòu)，方法驗證或確認的來源基本來自資質(zhì)認定或?qū)嶒炇艺J可的要求，主要依據(jù)如下：CNAS-CL01:2006I 542方法選擇：實驗室制定的或采用的方法如能滿足預期用途并經(jīng)過確認，也可使用。所選用的方法應通知客戶。在引入檢測或校準之前，實驗室應證實能夠正確地運用這些標 準方法。如果標準方法發(fā)生了變化，應重新進行證實。I 545.2實驗室應對非標準方法、實驗室設計（制定）的方法、超出其預定范圍使用的標 準方法、擴充和修改過的標準方法進行確認，以證實該方

12、法適用于預期的用途。確認應盡可能全面，以滿足預定用途或應用領域的需要。實驗室應記錄所獲得的結(jié)果、使用的確認程序以及該方法是否適合預期用途的聲明。CNAS-CL10:2012 檢測和校準實驗室能力認可準則在化學檢測領域的應用說明542方法的選擇：b）實驗室應對首次采用的檢測方法進行技術能力的驗證，如檢出限、回收率、正確度和精密度等。如果在驗證過程中發(fā)現(xiàn)標準方法中未能詳述但影響檢測結(jié)果 的環(huán)節(jié)，應將詳細操作步驟編制成作業(yè)指導書，作為標準方法的補充。當檢測標準發(fā)生變更涉及到檢測方法原理、儀器設施、操作方法時，需要通過技術驗證重新證明正確運用新 標準的能力。方法確認：a）任何對標準方法的偏離，都必須進

13、行實驗室確認，即使所采用的替代 技術可能具有更好的分析性能 。b）實驗室應通過試驗方法的檢出限 、精密度、回收率、 適用的濃度范圍和樣品基體等特性來對檢測方法進行確認。CNAS-CL09:2013 要求：標準方法引入檢測之前，實驗室應證實能夠正確地運用這些方 法，并未清晰說明如何證實，而對非標方法的確認提供的參考資料。除化學領域明確規(guī)定應對標準方法進行確認或驗證外，其他領域僅要求對非標方法進行確認或驗證，或者未做規(guī)定，而且對確認和驗證是否有區(qū)別也未作說明。但是CNAS-CL52:2014 是與 CNAS-CL01:2006 同步應用的，具有等同效力，因此其他領域如未 對標準方法確認或驗證進行規(guī)

14、定的，應參考CNAS-CL52執(zhí)行。實驗室為啥要進行方法驗證！對于實驗室而言，我們要應該非常的清楚我們是否有能力來滿足客戶的預期需求（用途），這個是最基本的。因此，我們就會涉及到對方法的評審問題，即評審我們是否有能力完成客戶提出的要求。客戶沒有指定所用方法當客戶沒有任何指定所用方法時，毫無疑問，我們也是要選擇”采用滿足客戶需求并適用于所進行的檢測或校準活動的方法 ”。1.這個時候我們會首當其沖采用國際 、區(qū)域或國家、行業(yè)等標準（由標準化組織發(fā)布的） 方法。但是當我們第一次拿到這個標準的時候，也就是說我們從來沒有依照此方法開展過檢測活動，那怎么辦？我們是壯著膽、拍著胸脯告訴客戶 一一沒問題，我們

15、可以做，還是 直接拒絕客戶呢？或許這樣的結(jié)果都會出現(xiàn) ，但是請記住無論實驗室在做出哪個回答時 ， 請你要認真的去證明下你的結(jié)論 ，要給出你的證明材料和論據(jù)來論證你是有能力”還是 沒有能力”完成這個檢測任務，而這個過程一一即針對標準方法，實驗室在準備依照該方法實 施檢測或校準時，證明能夠正確應用這些方法 ，就是叫做方法驗證或證實。該如何證明我們能正確應用所選標準方法 ？這個問題倒是不難來證明 ，因為所謂的操作指南 一一標準都已經(jīng)擺在你面前了 ，就看標準 中所要求的條件 （環(huán)境條件，包括樣品保存條件等）、資源（設備，材料，標準物質(zhì)等） 我們是否可以滿足，當然還有一個非常重要的因素，就是是否有 人”

16、能夠有能力利用這些資源在該條件下做出滿足標準中要求的指標內(nèi)容，如檢出限、測量范圍等。通俗為 人、機、料、法、環(huán)、樣”等進行驗證。如果在現(xiàn)行沒有特別有效的標準方法時，我們也可能會選擇知名機構(gòu)或科學文獻和期刊公布的方法、儀器設備廠商指定的方法找出合適的方法，又可使用實驗室內(nèi)部制定的方法，這些方法都可以稱為非標準方法 。當實驗室在采用這些方法的時候，則需要依據(jù)實際情形采取不同的方式來證明”一一驗室所采用（選擇）的方法能夠滿足客戶的預期用途 。方法的驗證（證實）和非標準方法的確認最大的區(qū)別？通俗的講，標準方法的驗證（證實）和非標準方法的確認最大的區(qū)別是 ，對于前者實驗室可 以依 葫蘆畫瓢”，方法的特性

17、指標、應用范圍等有關權威組織都幫你完成了，而對于后者，你只能通過 自身'努力來證實你所用的方法 ，不論自創(chuàng)還是 模仿”，能夠真正滿足客戶 的要求。方法驗證是否有時間要求，是否一次驗證終身有保障 ？目前的確對方法驗證沒有時間的要求，一定要說多久做一次，有的人也說 5年，那是基于認為中國的標準是 5年一次審查，但實際上10年也許都不會變一次。因此沒有對時間硬性 固定。但絕對不會是終身保障 。明白我們做驗證的目的是要證明我們有能力完成測試認 為，獲得準確結(jié)果，可是當實驗室因數(shù)據(jù)問題遭到投訴、控制圖顯示 QC異常或能力驗證離群，貝U我們要考慮我們的是否出問題呢？此時安排一次給出全面的檢測一一方法驗證，來評估下我們的能