1、器官保存技術新進展器官保存技術發展概覽理想的保存技術評論保存時間更長的保存時間可帶來的優勢：更好的受者配型，更長的轉運距離，更佳的受者準備，精力更充沛的手術團隊減少缺血損傷盡可能減少器官獲取前及器官獲取時的損傷；器官復蘇移植評估/可行性評估在移植前評估器官功能，以減少因不確定移植后移植物功能而造成的不必要的丟棄；消除器官評估的“主觀性”干預保存期間的干預包括：藥物治療以改善移植物功能，移植物或受者基因靶向治療，免疫調節實用性保存技術對器官獲取團隊具有實用性；盡量減少不穩定供者或心臟死亡后器官捐獻的準備時間可控性設備易于控制、移動，最好可在供者準備介導到移植中心全程使用安全性減小保護技術及相關保

2、護設備的內在風險Transplantation Reviews 26 (2012) 156162. (ref 1)器官保存方法分類單純冷藏Simple Cold Storage，SCS 主要的器官保存方式機械灌注Machine Perfusion，MP 低溫機械灌注 亞低溫機械灌注 常溫機械灌注中華移植雜志（電子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)SCS不能滿足當前器官保存需求 單純低溫保存（SCS）技術簡單，易于操作。 SCS是目前最主要的器官保存方式。然而： 供者死亡和器官保存的持續損傷不可逆轉 冷保存本身可導致時間依賴的缺血損傷 移植前無法評估器官功能 保存時間非常有限

3、Transplantation Reviews 26 (2012) 156162.(ref 1)中華移植雜志（電子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)機械灌注的出現與應用 1968年，Folker O.Belzer首次報道應用持續低溫灌注保存腎臟并成功實行腎移植的成功案例 1970年代低溫機械關注主要用于美國歐洲移植中心，用于腎臟保護和轉運 隨后，不同的灌注機械被研制，用于臨床Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)機械灌注的常用技術機械

4、灌注低溫機械灌注亞常溫機械灌注常溫機械灌注（0-4）（20-30）（37）中華移植雜志（電子版）.2011,5(3):41-44. (ref 2)與SCS相比，低溫機械灌注受者肝功能更好Guarrera JV, Henry SD, Samstein B, et al. Am J Transplant 2010;10(2):372e81.(ref 4)納入20例供肝經低溫機械灌注保存的肝移植受者，并將同期20例供肝經SCS保存的受者作為對照組，評估低溫機械灌注與冷保存對肝移植受者肝腎功能的影響。與SCS相比，亞低機械溫灌注保存顯著減少肝臟損傷Gringeri, E., et al. Transp

5、lant Proc, 2012. 44(7): p. 2026-8.(ref 5)MP vs CS ,p0.0001MP vs CS ,p0.000110例供豬肝臟分別經Celsior靜態冷保存或亞低溫（20）灌注保存6小時。后經供者血再灌注2小時以模擬移植過程，再灌注后30分鐘、60分鐘、2小時測定供肝功能。低溫機械灌注仍有不足Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)中華移植雜志(電子版）.2007,1(1). (ref 6)細胞水腫細胞間隙水腫細胞內酸

6、化再灌注損傷鈣超載血管內皮損傷能量物質缺乏即使短時間的冷保存后恢復常溫，也會導致DCD供肝的肝細胞、Kupffer細胞及內皮細胞的損傷常溫機械灌注的優勢常溫灌注可評估移植物功能延長保存時間保存期間可進行藥物干預基因治療可與常溫循環相結合改善細胞能量代謝，減少組織損傷，改善移植后肝臟功能Matsuno, N., K. Uchida, and H. Furukawa, Transplant Proc, 2014. 46(4): p. 1099-103.(ref 3)Transplantation Reviews 26 (2012) 156162.(ref 1)37下行機械灌注有效保護供肝功能Bes

7、sems M, Doorschodt BM, Albers PS,et al. Liver Int. 2006.26(7):880-8. (ref 7) *P0.05 vs 37獲取心臟死亡后小鼠供肝，熱缺血30分鐘后采用Polysol液在4、18、37（每組6只小鼠）下行機械灌注，比較不同溫度下行機械灌注對供肝功能的影響。常溫機械灌注模式圖供肝常溫供血氧合灌注循環：在常溫灌注前管道中需用供血預充。預充血經門靜脈（圖中數字3）流入肝臟，通過腔靜脈（圖中數字7）進入離心泵（P），經離心泵（P）離心后流入氧合器（O），經氧合后的血一部分經肝動脈（圖中數字1）進入肝臟，另一部分經心臟交換器（HE）交

8、換后再次通過門靜脈進入肝臟形成供肝常溫供血氧合灌注循環。旁路循環：經24小時的熱保存后，肝動脈（數字1）、門靜脈（數字3）夾閉，冷沖洗液（數字2、5）開放，流出液經腔靜脈通路（數字7）進入離心泵。此時旁路循環開放（圖中數字4和8）。再次灌注時，肝臟經供血、冷沖液灌注，流出液經圖中數字6所示的通道排出循環外。此時門靜脈（數字3）和肝動脈（數字1）處開放，并將旁路循環（數字4、8）關閉。Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)常溫機械灌注在肝移植中的應用動物研究顯示，常溫機械灌注顯著改善肝臟合成功能通過標準方法（與人體

9、獲取方法相同）獲取3050kg大白豬的肝臟。獲取的肝臟分別經UW液低溫保存（n=5）或在體溫下經供豬血氧合灌注保存（n=5）24小時。在24小時的再灌注階段檢測兩組供肝的合成功能、代謝功能、血流動力學及再灌注損傷的標記物。xp0.05Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)動物研究顯示，常溫機械灌注顯著改善移植物肝功能通過標準方法（與人體獲取方法相同）獲取3050kg大白豬的肝臟。獲取的肝臟分別經UW液低溫保存（n=5）或在體溫下經供豬血氧合灌注保存（n=5）24小時。在24小時的再灌注階段檢測兩組供肝的合成功能、

10、代謝功能、血流動力學及再灌注損傷的標記物。xp0.05與經UW液單純低溫保存相比，常溫下供血氧合灌注是一種更好的供肝保存方法。此外，通過該灌注方法可在移植前進行移植物功能的評估。Imber CJ, et al. Transplantation. 2002;73(5):701-709.(ref 8)動物研究顯示，常溫機械灌注可改善肝移植物血流動力學Liu Q,et al. Liver Transpl. 2014 May 8. doi: 10.1002/lt.23906. (ref 9)再灌注后時間（小時）再灌注后時間（小時）門靜脈血流量肝動脈血流量*P0.05*P0.05熱缺血60分鐘后的供肝分

11、別經冷保存（CS組，n=5）或常溫供血機械灌注保存（NMP組，n=5）10小時，然后在獨立灌注系統中經全血再灌注24小時以模擬移植過程。評估NMP與CS對供肝血流動力學及肝內膽管組織學的影響。動物研究顯示，常溫機械灌注可改善膽管上皮細胞再生能力熱缺血60分鐘后的供肝分別經冷保存（CS組，n=5）或常溫供血機械灌注保存（NMP組，n=5）10小時，然后在獨立灌注系統中經全血再灌注24小時以模擬移植過程。評估NMP與CS對供肝血流動力學及肝內膽管組織學的影響。常溫機械灌注顯著降低膽管組織學損傷評分膽管組織學損傷評分常溫機械灌注組供肝出現肝外膽管上皮細胞再生單純冷保存組常溫機械灌注組NMP作為更好的

12、器官保存方法，可改善缺血事件后的膽管上皮細胞再生，從而可能預防臨床移植中的缺血性膽道病變。Liu Q,et al. Liver Transpl. 2014 May 8. doi: 10.1002/lt.23906. (ref 9)ILTS2014最新研究報道：常溫機械灌注顯著改善肝移植受者早期肝功能NMP技術最早由牛津技術最早由牛津大學研發，現已由實大學研發，現已由實驗室開始走向臨床，驗室開始走向臨床，已完成已完成I期臨床試驗，期臨床試驗，即將開始即將開始II期臨床試驗。期臨床試驗。常溫機械灌注在供肝保存中的應用 期、非隨機、前瞻性研究 2020例NMPNMP（常溫機械灌注）供肝移植 評估NM

13、PNMP應用于肝移植的安全性及可行性 研究由以下機構合作執行： Kings College Hospital University Hospitals Birmingham University of Oxford常溫機械灌注在供肝保存中的應用研究流程供肝分配給研究受者NMP組對照組傳統肝移植流程設備及后臺準備后臺準備并于冷UW液中插管，供肝與移動灌注設備連接與設備相連的供肝轉運至移植中心從設備上取下供肝并行肝移植供體所在點轉運移植中心單純冷藏保存NMP前供肝準備下腔靜脈處理和插管NMP前供肝準備肝動脈、門靜脈、膽管插管NMP設備準備灌注：灌注：肝素、前列環素、膽汁酸鹽、胰島素、肝素、前列環素

14、、膽汁酸鹽、胰島素、營養物質營養物質預充：預充： 500ml膠體液膠體液 3單位的符合交叉配型的袋裝紅細胞單位的符合交叉配型的袋裝紅細胞 葡萄糖酸鈣、肝素、頭孢呋辛、碳酸氫鈉葡萄糖酸鈣、肝素、頭孢呋辛、碳酸氫鈉使用NMP后的供肝供肝處于NMP下的時間NMP時間時間中位時間：中位時間：9.3小時小時I期臨床研究顯示NMP組AST顯著改善結果NMP組對照組P值主要終點移植物天存活率 100（n=20）97.5(n=37)1.000次要終點原發性無功能0(n=0)0(n=0)1.000早期移植物失功15(n=3)22.5(n=9)0.734天內峰濃度，（），中位數（范圍）417(84-4681)902(218-8786)0.034重癥監護時間（天），中位數（范圍3(1-8)3(1-41)0.459住院時間（天），中位數（范圍12(6-34)14(8-88)0.100天死亡率0(n=0)2.5(n=1)1.000個月存活率100(n=20)97.5(n=39)1.000離體供肝常溫灌注在供肝保存中的應用研究小結 I期臨床研究的數據令人鼓舞，NMP組受者早期的肝功能指標得到顯著改善。 在使用NMP的情況下，供肝的獲取、保存和運輸、移植等過程順利，證實該技術具備可操作性。 更大樣本的臨床試