1、血細胞分離機AutoPBSC程序與MNC程序采集外周血干細胞的效果比較及影響因素分析曾豐1魏世金1黃豪博1黃清華1林秋燕1范麗萍1黃惠炆1付丹暉1，2*1福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院輸血科；2福建省血液病研究所血液科，福建福州350001摘要： 本研究旨在分析COBE Spectra血細胞分離機自動采集程序（AutoPBSC程序）與半自動采集程序（MNC程序）在外周血干細胞采集中的效果及影響因素。109例采集按對象不同分為患者自體組（患者）和異基因供者組（供者），通過比較采集物中干細胞數(shù)量與質(zhì)量及采集程序特點，分別對兩種采集程序在兩組中的采集結(jié)果及影響因素進行分析。結(jié)果表明在全血處理量基本相同的情

2、況下，全組中兩種程序采集物中MNC%與CD34+%、CD34+細胞數(shù)及血紅蛋白含量差異無顯著性（P0.05）；與MNC程序比較， AutoPBSC程序采集物中血小板混入少，采集物體積小，但抗凝劑用量多，采集時間長（P0.05）。相關(guān)性分析顯示：患者組兩種程序采集物中MNC數(shù)（r=0.314,P=0.015）、CD34+細胞數(shù)（r=0.922,P=0.000）與采集前對應(yīng)參數(shù)呈正相關(guān)，采集物CD34+細胞數(shù)與WBC數(shù)（r=0.369,P=0.004）及MNC數(shù)（r=0.495,P=0.000）正相關(guān)；供者組Auto PBSC程序采集物中MNC數(shù)與采集前呈正相關(guān)（r=0.896,P=0.000），

3、MNC程序采集物中CD34+細胞數(shù)與采集前呈正相關(guān)（r=0.666,P=0.000）。患者組Auto PBSC程序采集物中MNC數(shù)與CD34+細胞數(shù)男性顯著高于女性（P0.05），年齡40歲以下顯著高于年齡40歲以上（P0.05），而MNC程序年齡40歲以上患者采集的CD34+細胞數(shù)顯著高于年齡40歲以下患者（P0.05）。供者組僅MNC程序采集物中MNC數(shù)與CD34+細胞數(shù)男性顯著高于女性（P0.05）。結(jié)論：在全血處理量相同時，患者自體和健康供者PBSC采集中兩種程序收獲的MNC純度與CD34+細胞純度及濃度高度一致但患者自體PBSC采集結(jié)果受年齡與性別影響較大。 關(guān)鍵詞：外周血造血干細胞

4、；采集；自體；異基因；AutoPBSC程序；MNC程序Analysis of the Efficiency and Influence Factors of PBSC Collection with Cell Separator ：comparison between AutoPBSC and MNC procedureAbstract This study was aimed to analyze efficiency and influence factors of PBSC collection by an automatic (AutoPBSC procedure) and a sem

5、iautomatic apheresis procedure ( MNC procedure) of COBE Spectra cell separators. According to the different objects, 109 cases of apheresis were divided into autologous cohort (patient) and allogeneic cohort (donor), we made a comparison of the qunatity and quality of the collections and the charact

6、eristics of apheresis procedure, analysed the yields and influence factors of two cohorts with two kinds of procedures respectively. The results shows that the collections of two procedure in patients and donors which processed the similar blood volumes were insignificantly different in MNC%, CD34+

7、%, CD34+ cell counts and Hb concentration（P0.05）; the collections by AutoPBSC procedure had got fewer platelets, less product volumes whereas more ACD-A used, longer apheresis time in comparison with MNC procedure (P<0.05). Correlation analysis indicated that MNC（r=0.314,P=0.015） , CD34+ cell cou

8、nts（r=0.922,P=0.000） in collections were positive correlated with preahperesis in the autologus cohort by two procedures, CD34+ cell counts were correlated with WBC（r=0.369,P=0.004） and MNC（r=0.495,P=0.000） in collections; MNC（r=0.896,P=0.000）was positive correlated with preahperesis by AutoPBSC pro

9、cedures and CD34+ cell counts （r=0.666,P=0.000）by MNC procedure in the allogeneic cohort. Male had got more MNC and CD34+ cell counts than female (P<0.05),age40 had got more MNC and CD34+ cell counts than age>40 (P<0.05) in patients by AutoPBSC procedure; age40 had got more CD34+ cell count

10、s than age40 by MNC procedure(P<0.05). Only male had got more MNC and CD34+ cell counts than female (P<0.05) by MNC procedure in donors. Concluded: With same amount of blood processing, the PBSC collections from autologous patients and allogeneic donors had got a high degree of uniformly in pu

11、rity of MNC and purity and concentration of CD34+ cell counts by two procedure, whereas sex and age imposed more influence on PBSC collection in autologous. Key words peripheral blood stem cell; apheresis; autologous; allogeneic ; AutoPBSC procedure; MNC procedure外周血造血干細胞移植（ peripheral blood stem ce

12、ll transplantation, PBSCT）因其造血干細胞采集方便、無需全身麻醉、移植后造血功能及免疫功能重建快等優(yōu)點，已成為治療某些惡性血液性疾病、實體瘤、遺傳性及免疫性疾病的可靠選擇1。外周血造血干細胞（ peripheral blood stem cell，PBSC）的數(shù)量和質(zhì)量是PBSCT成功的關(guān)鍵因素2。目前國內(nèi)外對不同血細胞分離機PBSC采集效果及影響因素的報道較多，對COBE Spectra血細胞分離機6.1版Auto-PBSC程序與MNC程序在PBSC采集效果及影響因素研究末見報道，本研究回顧性分析我科在2010年11月份至2013年11月份應(yīng)用COBE Spectra

13、 血細胞分離機中的MNC程序和AutoPBSC程序?qū)?09例患者自體和健康供者進行211次PBSC采集，通過比較采集物中PBSC的數(shù)量與質(zhì)量差異，探討AutoPBSC程序和MNC程序在PBSC的采集中的效果及影響因素。資料及方法病例資料2010年11月至2013年11月間，我科應(yīng)用COBE Spectra血細胞分離機的MNC及AutoPBSC程序共采集包括患者自體和異基因供者PBSC109例211次。其中男55例，女54例；中位年齡43歲（1867歲）。患者61例，其中多發(fā)性骨髓瘤（MM）13例、霍奇金淋巴瘤（HL）8例、非霍奇金淋巴瘤（NHL）15例、急性早幼粒細胞白血病（APL）10例、急

14、性單核細胞白血病（AMoL）7例、急性粒細胞白血病部分分化型（M2）5例、其它疾病3例；異基因供者48例，其中8例為父子、母子間的半相合移植，其余40例均為同胞供者移植。病例資料按采集程序及患者/供者不同分兩組四類統(tǒng)計（表1）。Table1:Characterisitics of Patients and donorsAutoPBSC procedureMNC procedurePatientsDonorsPatientsDonorsCases/Times28/5913/2633/6535/61Age43(18-67)40(22-62)47(23-63)41(19-64)Men/Women15

15、/136/716/1718/17Diagnosis:Hodgkin lymphoma35Non-HL510Multiple myeloma67APL73M214AMoL52other12儀器設(shè)備及采集程序 2010年11月至2012年12月期間應(yīng)用COBE Spectra血細胞分離機（美國Terumo BCT公司）AutoPBSC程序（版本6.1），AutoPBSC專用采集管道；2012年12月至2013年11月期間使用MNC程序（版本6.1），MNC專用采集管道。ACD-A血液保存液（500ml/袋，廣東費森尤斯卡比醫(yī)療用品公司產(chǎn)品）；一次性靜脈穿刺針（17G，廣州貝恩醫(yī)療用品公司）；500

16、ml塑料袋裝生理鹽水（福州海王醫(yī)藥有限公司）；全自動高頻熱合封口機（日本泰爾茂）等。采集前動員 健康供者每日皮下注射重組人類粒細胞集落刺激因子（G-CSF，特爾金）510g/(kg.d)，于注射后第4天開始采集PBSC。患者化療后每天注射G-CSF 300g，每日監(jiān)測外周血白細胞（WBC）數(shù)，當(dāng)WBC下降至低谷并開始回升至25×109/L時開始采集。AutoPBSC程序PBSC采集方法 使用6.1版軟件的COBE Spectra血細胞分離機和雙級充填盤，按照采集液流徑指示膜安裝AutoPBSC管路，初始化后輸入供者身高、體重、HCT、WBC計數(shù)、MNC%，設(shè)定循環(huán)血量10000ml，

17、全血流速4075ml。采集PBSC的收獲量35ml，追趕量4ml,根據(jù)WBC數(shù)設(shè)定每8001600ml收獲一次，采集物終體積為（收獲量+追趕量）×收獲次數(shù)。連續(xù)采集23天，以達到預(yù)期PBSC為準。MNC程序PBSC采集方法 選用單級充填盤，基本步驟同AutoPBSC程序，初始化后輸入供者身高、體重、HCT，設(shè)定循環(huán)血量10000ml，全血流速4075ml。MNC程序在采集界面建立時需操作人員根據(jù)經(jīng)驗，通過目測比色法手控調(diào)節(jié)血漿泵流速進行PBSC采集，采集物終體積為采集界面建立后至總循環(huán)血量結(jié)束所需時間對應(yīng)的毫升數(shù)，約為110ml200ml。連續(xù)采集13天，以達到預(yù)期PBSC為準。靜脈

18、通路 COBE Spectra血細胞分離機是雙針式管路，需建立兩條靜脈通路，健康供者一般選用外周肘部靜脈，采血端使用一次性17G采血針，回輸端使用18G靜脈留置針；患者靜脈通路在化療后遭到不同程度的破壞，所以采集前置12F的三腔血透管，采集完成后拔除。觀察指標(biāo) 全血處理量、采集時間、抗凝劑用量、采集物體積，采集物中WBC數(shù)、單個核細胞（MNC）數(shù)、MNC%、CD34+細胞數(shù)、CD34+%、混入血小板數(shù)、混入血紅蛋白量。PBSC檢測方法 供者血常規(guī)及采集物的細胞數(shù)及單個核細胞測定應(yīng)用Sysmex-XE2100血細胞分析儀結(jié)合人工涂片分類計數(shù), CD34+細胞應(yīng)用庫爾特FC500流式細胞儀檢測。統(tǒng)

19、計分析采用EXCEL2003及SPSS19.0統(tǒng)計軟件進行T檢驗及相關(guān)分析，所得數(shù)據(jù)用±SD表示，p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié) 果兩種采集程序PBSC采集結(jié)果比較在患者/供者兩組中，與MNC程序比較，Auto-PBSC程序中的全血處理量差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P0.05），但采集物的體積明顯減少，抗凝劑用量顯著增多，采集時間明顯延長（P<0.05）。在患者組，與MNC程序比較，Auto-PBSC程序中采集物中的CD34+細胞的百分比、濃度、細胞總數(shù)及Hb含量無顯著性差異（P0.05），MNC濃度明顯增高，采集物中血小板混入數(shù)明顯降低（P<0.05）。供者組兩種程序的PBSC

20、采集結(jié)果與患者組相似（表2）。Table 2:Harvest details of Auto-PBSC and MNC procedurePatientsDonorsAuto-PBSC(n=59)MNC(n=65)Auto-PBSC(n=26)MNC(n=61)Total vol.of blood processed(L)9.78±0.999.82±0.779.51±1.239.49±1.20Volume of product (ml)67.34±21.46135.053±18.98*86.85±16.71136.87

21、77;28.34*Apheresis time (min)208±44159±20*221±40159±42*ACD-A used (ml)772±95710±70*783±108687±90*WBC×109/L238.23±82.29199.30±91.32*219.62±67.80222.83±84.78MNC(%)48.64±22.9652.78±21.5770.28±21.3261.23±19.37MNC×1

22、09/L115.38±70.0594.77±41.48*157.39±75.51133.98±59.58MNC×1098.10±6.1812.64±5.70*13.76±7.9017.77±8.02*CD34+(%)2.10±4.552.70±3.190.65±0.460.69±0.68CD34+×109/L6.04±14.646.59±9.721.33±0.891.50±1.61CD34+×1066.31

23、±15.688.53±12.351.17±0.891.89±1.84Hb g0.25±0.270.25±0.270.14±0.150.27±0.37Platelets×1069.70±7.6413.29±10.29*21.16±11.2055.01±45.24*P<0.05,compared with AutoPBSC procedurePBSC采集的相關(guān)性分析在患者組，Auto-PBSC程序和MNC程序采集物中CD34+細胞數(shù)采集前后呈高度相關(guān)（R=0.92

24、2，R=0.666），MNC數(shù)采集前后分別為中或低度相關(guān)（R=0.314 ，R=0.279），WBC數(shù)采集前后分別為低或中度相關(guān)（R=0.231，R=0.371）（表3）；Auto-PBSC程序采集物中CD34+細胞數(shù)與WBC數(shù)及MNC數(shù)呈中度相關(guān)（R=0.369，R=0.495）；MNC程序中僅采集物中CD34+細胞數(shù)與WBC數(shù)呈中度相關(guān)（R=0.599）（表4）。Table 3:Main parameters correlation between pre-apheresis and collection by Auto-PBSC or MNC procedure in PaitentsA

25、uto-PBSCMNCnPre-apheresis/collectionR valuenPre-apheresis/collectionR valueWBC×109/L5918.84±21.80/238.23±82.290.2316513.74±10.45/199.30±91.310.371MNC(%)5919.05±11.21/48.64±21.96-0.2566525.53±16.02/52.79±21.570.053MNC×109/L592.26±2.37/115.38±

26、;70.050.314652.80±2.01/94.79±41.480.279CD34+(%)360.59±1.24/2.79±5.660.9342.49±2.68/3.20±3.150.97CD34+×109/L360.27±0.67/8.31±18.270.92240.24±0.25/7.98±8.640.666Table 4: correlation analysis of CD34+and WBC/MNC by Auto-PBSC and MNC procedure in Pa

27、itentscollectionn Auto-PBSC R valuen MNC R valueWBC/CD34+×109/L59238.23±82.29/8.31±18.270.36965199.30±91.31/7.98±8.640.599MNC/CD34+×109/L59115.38±70.05/8.31±18.270.4956594.78±41.48/7.98±8.640.001在供者組，Auto-PBSC程序中MNC數(shù)和WBC數(shù)采集前后呈高、中度相關(guān)(R=0.896, 0.502)，C

28、D34+%及CD34+細胞數(shù)采集前后無相關(guān)（R=0.003）；MNC程序中WBC數(shù)采集前后呈低度相關(guān)（R=0.189）， CD34+%百分率及CD34+細胞數(shù)采集前后呈中度相關(guān)（R=0.457，0.666）（表5）；兩種程序采集物中CD34+細胞數(shù)與WBC數(shù)、MNC數(shù)之間均呈低度相關(guān)（表6）。Table 5:Main parameters correlation between pre-apheresis and collection using Auto-PBSC and MNC procedure in DornorsAuto-PBSCMNCnPre-apheresis/collectio

29、nR valuenPre-apheresis/collectionR valueWBC×109/L2643.34±10.57/219.62±67.800.5026136.11±10.21/222.83±84.780.189MNC(%)2613.96±5.39/70.28±21.330.8896111.90±6.37/61.23±19.370.133MNC×109/L265.93±2.58/157.39±75.510.896614.24±2.86/133.98

30、7;59.580.044CD34+(%)220.22±0.22/0.73±0.450.039200.15±0.09/0.84±0.710.457CD34+×109/L220.93±1.03/14.77±8.640.003200.57±0.45/16.31±14.690.666Table 6: correlation analysis of CD34+and WBC/MNC by Auto-PBSC and MNC procedure in Donorscollectionn Auto-PBSC R val

31、uen MNC R valueWBC/CD34+×109/L26219.62±67.80/14.77±8.640.22461222.83±84.78/16.31±14.690.255MNC/CD34+×109/L26157.39±75.51/14.77±8.640.11761133.98±59.58/16.31±14.690.229性別對PBSC采集的影響在患者組，Auto-PBSC程序采集物中CD34+%、CD34+細胞數(shù)、MNC數(shù)及WBC數(shù)男性顯著高于女性，差別具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.

32、05），而MNC程序中性別對PBSC采集無明顯影響（表7）。在供者組，MNC程序采集物中CD34+細胞數(shù)、MNC數(shù)與WBC數(shù)男性供者顯著高于女性供者，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05 or P<0.01）；Auto-PBSC程序中僅MNC數(shù)男性供者顯著高于女性，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表8）。Table 7:Influence of sex on apheresis by AutoPBSC and MNC procedure in PatientsAuto-PBSCMNCM/F(n=27/30)M/F(n=31/35)WBC×109/L262.36±

33、;69.80/214.90±16.02*206.65±92.46/192.60±91.13MNC(%)53.10±21.59/44.33±23.7853.68±20.52/51.98±22.75MNC×109/L141.46±73.15/90.18±57.54*97.59±39.96/92.22±43.26CD34+(%)3.06±5.35/1.13±3.50*2.30±2.69/3.07±3.58CD34+×106/L7.9

34、4±16.39/2.65±9.97*7.56±11.42/9.41±13.24*P<0.05,*P<0.01,compared with maleTable 8:Influence of sex on apheresis by AutoPBSC and MNC procedure in DonorsAuto-PBSC*MNCM/F(n=12/14)M/F(n=34/27)WBC×109/L243.91±59.52/198.80±69.51248.70±87.92/190.26±69.29*MN

35、C(%)75.08±18.80/66.17±23.1563.46±15.95/58.43±22.97MNC×109/L188.74±73.16/130.52±68.92*154.79±59.73/107.77±41.82*CD34+(%)0.65±0.18/0.65±0.620.88±0.80/0.44±0.38*CD34+×109/L15.95±6.52/10.96±10.152.49±2.18/1.12±0.83

36、*P<0.05,*P<0.01,compared with male年齡對PBSC采集的影響在患者組，Auto-PBSC程序采集物中CD34+%與CD34+細胞數(shù)在年齡40歲的患者中顯著高于40歲以上的患者，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；MNC程序采集物中CD34+%及CD34+細胞數(shù)在年齡>40歲患者中顯著高于40歲以下的患者，差別有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）（表9）。在供者組，僅Auto-PBSC程序中MNC%在年齡40歲供者中明顯高于40歲以上供者（P<0.01）（表10）。Table 9:Influence of age on apheresis

37、 by AutoPBSC and MNC procedure in PatientsAuto-PBSCMNC40/>40(n=25/33)40/>40(n=35/31)WBC×109/L234.61±88.63/241.08±78.22196.86±89.56/203.09±93.33MNC(%)50.46±23.51/47.21±22.7952.55±23.03/53.32±19.82MNC×109/L120.24±73.63/111.56±68.0095.49

38、±44.09/95.47±39.22CD34+(%)3.69±6.59/0.88±0.20*1.79±1.69/3.44±4.02*CD34+×109/L10.26±19.81/1.53±2.57*3.44±4.02/8.93±11.35*P<0.05, compared with age40Table10:Influence of age on apheresis by AutoPBSC and MNC procedure in DonorsAuto-PBSCMNC<40

39、/>40(n=14/12)<40/>40(n=34/27)WBC×109/L209.09±81.83/231.90±47.22231.04±80.28/211.02±91.25MNC(%)82.07±10.36/56.53±22.88*63.10±18.48/58.54±20.66MNC×109/L173.35±74.88/138.77±75.02144.92±58.61/118.22±58.53CD34+(%)0.68±0.3

40、9/0.61±0.550.68±0.57/0.69±0.82CD34+×109/L13.77±8.48/12.66±9.651.97±1.79/1.76±1.94*P<0.01, compared with age>40不良反應(yīng)觀察在PBSC采集過程中， ACD-A抗凝劑與血中游離鈣離子結(jié)合易產(chǎn)生低鈣血癥。因此在采集過程中給予口服10%葡萄糖酸鈣50ml可防止低鈣發(fā)生。109例供者在PBSC采集過程中均未出現(xiàn)嚴重的不良反應(yīng)，其中22例供者（均為女性）在采集過程中出現(xiàn)程度不一的低鈣血癥，表現(xiàn)為口唇、四肢或

41、面部發(fā)麻，少數(shù)供者出現(xiàn)手腳抽搐癥狀，經(jīng)口服或靜脈推注10葡萄糖酸鈣、部分供者間斷口服氯化鉀溶液后癥狀緩解或消失，均順利完成采集。討 論外周血造血干細胞移植（ peripheral blood stem cell transplantation, PBSCT）已成為多種惡性血液病治療的重要手段，獲得足夠的外周血干細胞是PBSCT成功的關(guān)鍵。目前臨床用于PBSC單采的血細胞分離機主要有COBE Spectra、Baxter CS 3000 plus和Haemonetics MCS+，多數(shù)研究結(jié)果認為COBE Spectra在PBSC采集效果上更有優(yōu)勢3-7。COBE Spectra血細胞分離機有半

42、自動采集程序（MNC程序）和全自動程序采集程序（Auto-PBSC程序），不同版本的采集程序?qū)BSC的采集效果明顯不同，Del Fante C 等比較了半自動COBE Spectra MNC程序與全自動Spectra Optia 5.0版MNC程序單個核細胞的采集效率，結(jié)果顯示全自動Spectra Optia 5.0版MNC程序能收獲更高質(zhì)量的單個核細胞且采集時間短 8。Rowley等比較了6.0版AutoPBSC與4.7版MNC程序PBSC的采集效果，結(jié)果顯示兩程序均可收獲臨床滿意的CD34+細胞數(shù)，但4.7版MNC程序采集物中CD34+細胞收獲率明顯高于.0版AutoPBSC程序且采集時

43、間明顯縮短9。本研究回顧性分析了6.1版Auto-PBSC程序與MNC程序在患者自體和健康供者109例211次PBSC采集的效果。結(jié)果顯示：在全血處理量相同情況下，患者/供者組在兩種程序采集物中MNC的百分率無明顯差異，提示兩種程序收獲的單個核細胞純度相似；CD34+細胞百分率及濃度無明顯差異，提示在患者/供者組中兩種程序干細胞采集效果相同。兩組采集結(jié)果均顯示Auto-PBSC程序采集物的體積小、混入的血小板更少，提示該程序采集純度更高、血小板減少的風(fēng)險更低，對于需要PBSC凍存的患者自體，采集物細胞純度高且體積小能減少DMSO的用量，有利于凍存和復(fù)蘇，減少在自體造血干細胞回輸時出現(xiàn)不良反應(yīng)的

44、機率10。相較Auto-PBSC程序， MNC程序采集時間和抗凝劑用量明顯減少，分析認為與兩程序采集的原理不同有關(guān)。對于健康供者，MNC程序較短的采集時間與較少的抗凝劑用量將降低采集風(fēng)險、讓供者更易于接受且混入較多血小板的采集物立即回輸給受者有助于減少受者血小板的輸注。PBSC主要存在于MNC細胞群體中，故采集前外周血常規(guī)檢測與CD34+細胞計數(shù)對把握采集時機和預(yù)測采集效果具有重要意義。有研究顯示采集物中CD34+細胞水平與采前CD34+細胞數(shù)呈明顯正相關(guān)11，而與采前WBC數(shù)、MNC數(shù)及Hct無顯著相關(guān)12。本研究對資料完整的患者/供者采集前后及采集物中多個參數(shù)進行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示患者兩

45、種程序采集前后CD34+%及CD34+細胞數(shù)呈高度相關(guān)（R0.9），提示患者自體PBSC采集前CD34+細胞數(shù)高可收獲到較高的干細胞數(shù)。采集物中MNC數(shù)與采集前呈中度相關(guān)，提示臨床可將MNC數(shù)作為患者自體動員后采集時機選擇的指標(biāo)；供者兩種程序采集前后各參數(shù)相關(guān)性表現(xiàn)不一致，AutoPBSC程序采集物中MNC數(shù)與采集前呈高度相關(guān)，而MNC程序采集前后CD34+細胞數(shù)呈高度相關(guān)，考慮可能與異基因供者干細胞動員效率有關(guān)，有待于進一步證實。影響PBSC采集的因素眾多，其中關(guān)于性別和年齡對PBSC采集的影響報道較多，但研究結(jié)果不盡相同。Rinaldi等研究顯示男性采集結(jié)果優(yōu)于女性13,14，張曦等分析結(jié)

46、果顯示性別對采集結(jié)果影響無差別15。本研究結(jié)果顯示患者自體組的AutoPBSC程序和異基因供者組MNC程序男性采集結(jié)果顯著高于女性，提示對于不同供者選擇不同的采集程序可使采集效率最大化。年齡是影響采集結(jié)果的另一重要因素，Richa研究顯示當(dāng)供者年齡大于50歲時，干細胞采集效率顯著下降，CD34+細胞數(shù)明顯減少16；Yang報道顯示年齡對采集效率沒有影響17。本研究結(jié)果顯示患者自體組采集物中CD34+細胞數(shù)受年齡影響較大而異基因供者組干細胞采集結(jié)果與年齡無關(guān)。外周血干細胞采集過程中可能會出現(xiàn)枸椽酸鹽中毒等不良反應(yīng)18。因此采集過程中要注意ACD與全血的比例，在完成一個循環(huán)血量的采集后，可適當(dāng)降低

47、抗凝劑比例從而減少ACD的用量以降低不良反應(yīng)發(fā)生機率。本研究在采集PBSC過程中發(fā)生的幾例不良反應(yīng)均為女性，提示在采集過程中對女性患者/供者要提早且足量補充鈣劑，密切觀察其臨床反應(yīng)，及時對癥處理，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。綜上所述，在全血處理量相同時，COBE Spectra 血細胞分離機AutoPBSC程序與MNC兩種采集程序在患者自體與健康供者PBSC采集中單個核細胞收獲的純度與CD34+細胞純度與濃度高度一致，但患者自體PBSC采集結(jié)果受年齡與性別影響較大。臨床應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)不同采集程序的特點及不同供者選擇合適的采集程序以達到采集效率最佳的效果。參考文獻：1 達成明，裴雪濤. 外周血干細胞移植.

48、 北京:人民衛(wèi)生出版社, 2000:104.2 Mechanic SA, Krause D, Proyteheva MA, et alMobilization and collection of peripheral blood progenitor calls. In:McLeod BC, Price TH, Weinstein K editors. Apheresis: principles and practice. Bethesda (MD):AABB Press; 2003.P:503-5303 Abdelkefi A, Maamar M, Torjman L et al.Prosp

49、ective randomised comparison of the COBE spectra version 6 and haemonetics MCS(+) cell separators for hematopoietic progenitor cells leucapheresis in patients with multiple myeloma.J.Journal of clinical apheresis,2006,21(2):111-115. 4 Perseghin P, Incontri A. Mononuclear cell collection in pati

50、ents treated with extracorporeal photochemotherapy by using the off-line method: a comparison between COBE Spectra AutoPbsc version 6.1 and Amicus cell separators. J Clin Apher. 2010;25(6):310-314. 5Burgstaler EA, Winters JL. Comparison of hematopoietic progenitor cell collection

51、s using the COBE Spectra version 7 and Amicus version 3.1 for patients with AL amyloidosis. Journal of clinical apheresis. 2011,26(4):186-194. 6 Fei-yi Wu ,Kee Khiang Heng, Rohani Binte Salleh, et al. Comparing peripheral blood stem cell collection using the COBE Spectra, Haemonetics MCS+, and Baxte

52、r Amicus. Transfusion and Apheresis Science.2012(47):345-350.7 Flommersfeld S, Bakchoul T, Bein G, et al. A single center comparison between three different apheresis systems for autologous and allogeneic stem cell collections. Transfus Apher Science. 2013 Dec;49(3):428-433. 8 Del Fan

53、te C, Scudeller L, Viarengo G et al. Mononuclear cell collection for extracorporeal photochemotherapy: a study comparing an automatic and a semiautomatic apheresis device.Transfusion. 2013 Sep;53(9):2027-2033. 9 Rowley SD, Prather K, Bui KT,et al. Collection of peripheral bl