1、 生生長長曲曲線線的的制制作作：接接種種適適溫溫培培養養定定時時取取樣樣測測定定生生長長量量細細菌菌數數目目的的對對數數值值時間時間t特征：特征： 不立即進行細胞分裂、增殖，數量不不立即進行細胞分裂、增殖，數量不變甚至減少變甚至減少停滯期停滯期v影響停滯期長短的因素影響停滯期長短的因素 繼靜止期后，由于營養物被繼靜止期后，由于營養物被耗盡，細菌因缺乏營養而利用貯存物質進耗盡，細菌因缺乏營養而利用貯存物質進行內源呼吸，即自身溶解。行內源呼吸，即自身溶解。特點：特點： p與菌種的遺傳特性有關與菌種的遺傳特性有關: : 有些細菌的培養經有些細菌的培養經歷所有的各個生長時期，幾天以后死亡歷所有的各個生

2、長時期，幾天以后死亡, ,有些細有些細菌培養幾個月乃至幾年以后仍然有一些活的細菌培養幾個月乃至幾年以后仍然有一些活的細胞；胞；p與營養物質和有毒物質有關：補充營養和能與營養物質和有毒物質有關：補充營養和能源，以及中和環境毒性，可以減緩死亡期細胞源，以及中和環境毒性，可以減緩死亡期細胞的死亡速率，延長細菌培養物的存活時間。的死亡速率，延長細菌培養物的存活時間。代謝活力比對數期差，但仍有相當的代謝活力，并代謝活力比對數期差，但仍有相當的代謝活力，并且微生物積累大量的貯存物，強化了生物吸附能力，且微生物積累大量的貯存物，強化了生物吸附能力，在二沉池中泥水分離效果好，出水水質好。在二沉池中泥水分離效果

3、好，出水水質好。v v 單批培養單批培養 恒濁法恒濁法恒化法恒化法 單 批 培 養單 批 培 養連 續 培 養連 續 培 養時間時間lg細胞數（個細胞數（個/ml）連續培養連續培養 裝置裝置控制對控制對象象培養培養基基培養培養基流基流速速生長速生長速率率產物產物應用應用范圍范圍恒濁恒濁器器菌體密菌體密度（度（內內控制控制）無限無限制生制生長因長因子子不恒不恒定定最高最高大量菌大量菌體或與體或與菌體形菌體形成相平成相平行的產行的產物物生產生產為主為主恒化恒化器器培養基培養基流速流速（外控外控制制）有限有限制生制生長因長因子子恒定恒定低于最低于最高高不同生不同生長速率長速率的菌體的菌體實驗實驗室為

4、室為主主n測定微生物總數：計數器直接計數；比測定微生物總數：計數器直接計數；比例計數法；比濁法例計數法；比濁法n測定活細菌數：平板菌落法（測定活細菌數：平板菌落法（CFU）計）計數；液體稀釋培養計數數；液體稀釋培養計數n計算生長量：測細胞干重法；通過測細計算生長量：測細胞干重法；通過測細胞含氮量確定細胞濃度胞含氮量確定細胞濃度平板菌落計數法平板菌落計數法(CFU)最常用的活菌計數法。將適當稀釋的菌液傾注平板或涂布在平板表面，經保溫培養后，以平板上出現的菌落數乘以稀釋度就可以計算出原菌液的含菌量。直徑9cm的培養皿平板上出現菌落數一般以50500為宜。按照國家標準規定的樣品菌落總數測定的計數原則

5、，以平板菌落數在30300之間為報告依據。9ml 9ml9ml9ml1ml1ml1ml1ml1ml1ml1ml222液體稀釋法液體稀釋法對對樣品做樣品做10倍連續稀釋，從適宜的倍連續稀釋，從適宜的3個連續稀釋度個連續稀釋度中各取中各取5ml試樣，接種試樣，接種3組共組共9支裝有培養液的試支裝有培養液的試管中（每管接入管中（每管接入1ml）。）。經培養后，記錄每個稀經培養后，記錄每個稀釋度出現生長的試管數，然后查釋度出現生長的試管數，然后查M.P.N.表（表（most probable number，最大可能數），根據樣品稀釋最大可能數），根據樣品稀釋倍數就可計算處其中的活菌含量。倍數就可計算處

6、其中的活菌含量。9ml 9ml9ml9ml1ml1ml1ml3331ml1ml1ml1ml首先將待分離的樣品進行連續稀釋首先將待分離的樣品進行連續稀釋, ,目的是得到高度稀釋目的是得到高度稀釋的效果的效果, ,使一支試管中分配不到一個微生物。如果經過稀使一支試管中分配不到一個微生物。如果經過稀釋后的大多數試管中沒有微生物生長釋后的大多數試管中沒有微生物生長, ,那么有微生物生長那么有微生物生長的試管得到的培養物可能就是由一個微生物個體繁殖而的試管得到的培養物可能就是由一個微生物個體繁殖而來的純培養物。來的純培養物。這種方法適合于細胞較大的微生物。這種方法適合于細胞較大的微生物。液體稀釋法液體稀

7、釋法2n溫度溫度npHpHn溶解氧溶解氧n氧化還原電位氧化還原電位n水活度水活度n滲透壓滲透壓 p 類型類型與與O O2 2關系關系代謝類型代謝類型專性好氧專性好氧必須有氧必須有氧好氧呼吸好氧呼吸微好氧微好氧有氧，含量低有氧，含量低好氧呼吸好氧呼吸兼性兼性可有、可無可有、可無有氧呼吸或發酵有氧呼吸或發酵專性厭氧專性厭氧氧有毒害或致死氧有毒害或致死無氧呼吸無氧呼吸耐氧耐氧可在有氧下存活，可在有氧下存活，不用氧氣不用氧氣發酵發酵第三節第三節 其他不利環境因子對微生物其他不利環境因子對微生物的影響的影響消 毒（ 部 分 殺 滅 ）殺 菌溶 菌滅 菌（ 徹 底 殺 滅 ）殺 滅防 腐（ 抑 制 霉 腐

8、 微 生 物 ）化 療（ 抑 制 宿 主 體 內 病 原 菌 ）抑 制除 菌控 制 有 害 菌 的 措 施X X射線和射線和 射線射線類型 名稱及使用方法 作用原理 應用范圍鹵素及其化合物0.20.5mg/L氯氣10%20%漂白粉0.5%1%漂白粉2.5%碘酒破壞細胞膜、蛋白質飲水、游泳池水地面水、空氣等皮膚 染料2%4%龍膽紫與蛋白質的羧基結合皮膚、傷口 酸類 0.1%苯甲酸 0.1%山梨酸食品防腐食品防腐極端極端溫度溫度影響影響消毒消毒巴斯德消毒法巴斯德消毒法煮沸消毒法煮沸消毒法滅菌滅菌灼燒灼燒烘箱熱空氣法烘箱熱空氣法 （160170）干熱滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法濕熱滅菌法高壓蒸汽滅菌高

9、壓蒸汽滅菌（0.105MPa，121）牛奶、飲品牛奶、飲品常壓蒸汽滅菌常壓蒸汽滅菌（100） 菌菌 連續在培養基上（內）移種連續在培養基上（內）移種 種種 生活態生活態 傳代培養保藏法傳代培養保藏法 連續在活宿主上（內）移種連續在活宿主上（內）移種 保保 固體斜面固體斜面 藏藏 濕法濕法 半固體瓊脂柱半固體瓊脂柱 方方 休眠態休眠態 液體介質（蒸餾水、糖液、其它溶液）液體介質（蒸餾水、糖液、其它溶液） 法法 干法干法 藏在玻璃管內藏在玻璃管內 吸附在合適的載體上吸附在合適的載體上方法名稱方法名稱主要措施主要措施適宜菌種適宜菌種保藏期保藏期評評價價冰箱保藏法（斜冰箱保藏法（斜面）面）冰箱保藏法（半冰箱保藏法（半固體）固體）石蠟油封藏法石蠟油封藏法*沙土保藏法沙土保藏法冷凍干燥法冷凍干燥法低溫低溫低溫低溫低