1、實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時(shí)時(shí))目的要求目的要求 、觀察植物組織在不同濃度下細(xì)胞質(zhì)壁分離產(chǎn)生過程； 、掌握質(zhì)壁分離法測(cè)定植物組織滲透勢(shì)的原理。 當(dāng)植物組織細(xì)胞內(nèi)的汁液與其周圍的某種溶液處于滲透平衡狀態(tài)，植物細(xì)胞內(nèi)的壓力勢(shì)為零時(shí)，細(xì)胞汁液的滲透勢(shì)就等于該溶液的滲透勢(shì)。該溶液的濃度稱為等滲濃度。代入公式即可計(jì)算出滲透勢(shì)。實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時(shí)時(shí))實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法 質(zhì)壁分離法 實(shí)驗(yàn)儀器實(shí)驗(yàn)儀器 顯微鏡、載玻片及蓋玻片、鑷子、刀片、移液器等。 實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（

2、質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)學(xué)時(shí)時(shí))實(shí)驗(yàn)操作方法實(shí)驗(yàn)操作方法 1、配制各種濃度的蔗糖溶液（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L） 2、剝?nèi)⊙笫[鱗莖外表皮（0.5cm ） 3、迅速投入各種濃度的蔗糖溶液中（5-10min） 4、低倍顯微鏡觀察并記錄質(zhì)壁分離的相對(duì)程度 5、確定使細(xì)胞發(fā)生初始質(zhì)壁分離的（初始質(zhì)壁分離的濃度）2實(shí)驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)一 植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）植物組織滲透勢(shì)測(cè)定（質(zhì)壁分離法）(2學(xué)時(shí)學(xué)時(shí))6、計(jì)算滲透勢(shì) 細(xì)胞滲透勢(shì) R為氣體常數(shù)=0.083105/LP/molK。 T為絕對(duì)溫度，單位K，即273+t，t為實(shí)驗(yàn)濕度。 I為解離系數(shù)，蔗糖為1

3、。 C為等滲溶液的濃度，單位為mol/L。 則： s =-0.083105(273+t)1C實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)實(shí)驗(yàn)要點(diǎn) 1、撕下的表皮組織必須完全浸沒于溶液中 2、選用有色素的洋蔥鱗莖外表皮實(shí)驗(yàn)效果較好s =iCRT蔗糖摩爾濃度（蔗糖摩爾濃度（mol/L）滲透勢(shì)（滲透勢(shì)（P）質(zhì)壁分離的相對(duì)質(zhì)壁分離的相對(duì)程度程度（%）0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 實(shí)驗(yàn)人實(shí)驗(yàn)人 日期日期 材料名稱材料名稱 實(shí)驗(yàn)時(shí)室溫實(shí)驗(yàn)時(shí)室溫 25 實(shí)驗(yàn)五實(shí)驗(yàn)五 植物組織水勢(shì)的測(cè)定植物組織水勢(shì)的測(cè)定 （小液流法）（小液流法） 1.了解測(cè)定植物組織水勢(shì)的方法及其優(yōu)缺點(diǎn)； 2.掌握用小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)的方法。 一、實(shí)

4、驗(yàn)?zāi)康囊弧?shí)驗(yàn)?zāi)康?當(dāng)植物組織與外液接觸時(shí)，如果植物組織的水勢(shì)低于外液的滲透勢(shì)（溶質(zhì)勢(shì)），組織吸水、重量增大而使外液濃度變大；反之，則組織失水、重量減小而外液濃度變小；若兩者相等，則水分交換保持動(dòng)態(tài)平衡，組織重量及外液濃度保持不變。根據(jù)組織重量或外液濃度的變化情況即可確定與植物組織相同水勢(shì)的溶液濃度，然后根據(jù)公式計(jì)算出溶液的滲透勢(shì)，即為植物組織的水勢(shì)。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 溶液滲透勢(shì)的計(jì)算： s = - iCRT 式中：s 溶液的滲透勢(shì)，以 MPa 為單位。 R 氣體常數(shù)，為 0.008314 MPaL/（molK ）。 T絕對(duì)溫度，即 273 + t 。 C 溶液的質(zhì)量摩爾濃度，以 mo

5、l/kg 為單位。 i 為解離系數(shù)，蔗糖為 1 。 三、實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備三、實(shí)驗(yàn)材料、試劑與儀器設(shè)備 （一）實(shí)驗(yàn)材料（一）實(shí)驗(yàn)材料植物葉片或洋蔥鱗莖。 （二）試劑（二）試劑 1 甲烯藍(lán)粉末。 2 蔗糖溶液：包括 0.20 、 0.3 、 0.4 、 0.5 、 0.6 mol/L 5種不同質(zhì)量摩爾濃度的溶液。（三）儀器設(shè)備（三）儀器設(shè)備 指形管10支，毛細(xì)吸管5支，培養(yǎng)皿，打孔器，剪刀 l 把，鑷子 1 把，解剖針1把。 四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟 取干燥潔凈的指型管10支，毛細(xì)吸管5支，編號(hào)貼標(biāo)簽，按序號(hào)排好。 1. 編號(hào)貼標(biāo)簽編號(hào)貼標(biāo)簽 2. 打取、浸泡葉片打取、浸泡葉片 取待測(cè)樣品

6、的功能葉數(shù)片，用打孔器打取小圓片約 60 片，放在培養(yǎng)皿中，混合均勻。用鑷子分別把 5 8 個(gè)小圓片放到盛有 4 mL不同質(zhì)量摩爾濃度蔗糖溶液的指形管中，浸沒葉片，蓋緊瓶塞，放置 30 min ，并不斷輕搖小瓶，以加速水分平衡（如溫度低時(shí)可延長(zhǎng)放置時(shí)間）。3. 染染色色到預(yù)定時(shí)間后，用解剖針尖蘸取微量甲烯藍(lán)粉末，加入各指形管中，并搖動(dòng)，使溶液染色均勻。 4. 測(cè)定測(cè)定把不同濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)液分別倒入對(duì)應(yīng)的指形管中，用毛細(xì)吸管吸取對(duì)應(yīng)編號(hào)指型管內(nèi)的有色溶液少許，插入相同編號(hào)的小試管溶液中部，輕輕擠出有色溶液一小滴，小心取出毛細(xì)管（勿攪動(dòng)有色液滴），觀察有色液滴的升降情況，并記錄于表 1 中。若有色溶液液滴上升，表示浸過葉片的溶液濃度變小（即植物葉片組織中有水排出），說明葉片組織的水勢(shì)大于該濃度溶液的溶質(zhì)勢(shì)；若有色液滴下降，則說明葉片組織的水勢(shì)小于該濃度的溶質(zhì)勢(shì)；若有色小液滴靜止不動(dòng)，說明葉片組織的水勢(shì)等于該濃度溶液的溶質(zhì)勢(shì)。若在前一濃度溶液中下降，而在后一濃度中上升，則植物組織的水勢(shì)可取二種濃度溶液的溶質(zhì)勢(shì)的平均值。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分別測(cè)定不同濃度中有色液滴的升降，找出與組織水勢(shì)相當(dāng)?shù)臐舛取Ｓ涗泴?shí)驗(yàn)時(shí)的溫度，根據(jù)原理中公式）計(jì)算出組織的水勢(shì)。六、注意事項(xiàng)六、注意事項(xiàng) 1. 所取材料在植株上的部位要一致，打取葉圓片要避開主