實驗二溫度 pH值 激活劑和抑制劑對酶活性的影響及特異性 一 實驗目的 1 通過實驗 觀察溫度 pH值 激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響 2 能運用所學的生化知識對實驗結果進行正確的分析 二 實驗原理 利用淀粉及其水解產物的顏色反應 來比較唾液淀粉酶在不同條件下催化淀粉水解的程度 從而判斷溫度 pH 激動劑和抑制劑對酶的活性影響 二 實驗原理 在低溫時 酶活性降低 酶促反應速度較慢 甚至停止 隨著溫度升高 酶的活性恢復 反應速度加快 當達到最適溫度時 酶的活性最大 酶促反應速度達到最大 人體內大多數的酶的最適溫度在37 左右 溫度過高 酶變性失活 酶促反應速度下降 甚至停止 每種酶都有最適的pH值 在最適pH值時 酶的活性最大 酶促反應速度最快 偏離酶的最適pH均可引起酶蛋白變性而降低或失去活性 唾液淀粉酶的最適pH值為6 8 氯離子對唾液淀粉酶有激活作用 銅離子對唾液淀粉酶有抑制作用 三 實驗材料 1 1 淀粉溶液取可溶性淀粉1g 加5ml蒸餾水 調成糊狀 再加80ml蒸餾水 加熱并不斷攪拌 使其充分溶解 放冷 最后用蒸餾水稀釋至100ml 2 pH3 0緩沖液取0 2mmol LNa2HPO4溶液205ml 0 1mol L檸檬酸溶液795ml 混合即成 3 pH6 8緩沖液取0 2mmol LNa2HPO4溶液772ml 0 1mol L檸檬酸溶液228ml 混合即成 4 pH8 0緩沖液取0 2mmol LNa2HPO4溶液972ml 0 1mol L檸檬酸溶液28ml混合即成 5 0 9 NaCl溶液6 1 CuSO4溶液7 碘液9 試管架11 試管夾12 滴管13 白瓷板14 恒溫水浴箱15 電爐16 燒杯 注意事項 1 注意實驗器材的干凈 避免雜質影響反應結果2 各管反應時間應嚴格控制 保證一致 四 實驗方法 稀釋唾液制備用水漱口 含蒸餾水咀嚼2分鐘后 把唾液吐進燒杯中備用 注 唾液淀粉酶活性具有個體差異 按下述各實驗方法進行實驗 有部分同學可能失敗 可重新操作 但在重做過程中 要根據第一次實驗結果改變稀釋唾液的用量 反應太慢 則增加稀釋唾液用量 如果反應太快 則減少稀釋唾液的用量 煮沸唾液的制備取上述唾液約5ml 放入沸水中煮沸5分鐘 取出備用 一 溫度對酶促反應速度的影響 2020 3 15 10 可編輯 取白瓷板一塊 向各凹分別加1滴碘液 每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴 加到已加有碘液的小凹中 觀察顏色變化 直至與碘不呈色時 即只顯棕黃色時 向各管加碘液1滴 搖勻觀察顏色變化 切記勿搖動 搖勻再觀察 二 pH對酶促反應速度的影響 將各管混勻 放進37 水浴箱中保溫 取白瓷板一塊 向各凹分別加1滴碘液 每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴 加到已加有碘液的小凹中 觀察顏色變化 直至與碘不呈色時 即只顯棕黃色時 向各管加碘液1滴 搖勻觀察顏色變化 三 激活劑與抑制劑對酶促反應速度的影響 將各管搖勻 放進37 水浴箱中保溫 取白瓷板一塊 向各凹分別加1滴碘液 每隔半分鐘用滴管或玻棒從2號管取溶液1滴 加到已加有碘液的小凹中 觀察顏色變化 直至與碘不呈色時 即只顯棕黃色時 向各管加碘液1滴 搖勻 觀察各管顏色變化 激活劑與抑制劑 激活劑與抑制劑 五 思考題1 什么是酶的最適溫度 2 什么是酶的最適pH 3 激活劑與抑制劑對酶活性影響實驗中設置第四管的作用是什么 4 什么是酶的特異性 四 酶的專一性對酶促反應的影響 2