動(dòng)物專用抗原蟲藥咪唑苯脲研究進(jìn)展趙蕾蕾1，楊娟1，劉義明1，李鵬飛2，王中杰3，蘇丹3，李秀波1（1.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院飼料研究所，北京100081；2中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所，北京100081；3中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，北京100193)摘要：咪唑苯脲是一種具有良好治療和預(yù)防作用的動(dòng)物專用抗原蟲藥。文章綜述了其理化性質(zhì)、抗原蟲機(jī)理、藥代動(dòng)力學(xué)、毒性、殘留和臨床應(yīng)用等方面的研究進(jìn)展，旨在為其在獸醫(yī)臨床的合理使用提供理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：咪唑苯脲；抗原蟲；藥代動(dòng)力學(xué)；毒性；殘留；臨床應(yīng)用中圖分類號(hào)：S85979文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：16717236(2012)02015105ResearchProgressinAnimalspecificAntiprotozoalDrugImidocarbZHAOLeileil，YANGJuanl，LIUYimin91，LIPengfei2，WANGZhongjie3，SUDan3，LIXiub01(KeyLaboratoryofVeterinaryPharmaceuticalDevelopment，MinistryofAgriculture，Engineering&TechnologyResearchCenterofTraditionalChineseVeterinaryMedicineofGansuProvince，LanzhouInstituteofHusbandryandPharmaceuticalSciencesofCAAS，Lanzhou730050，China)Abstract：ToscreenChinesemateriamedicaforpreventionandcureembryoimplantationdysfunction，mousemodelwithembryoimplantationdysfunctionwasestablishedbyinjectedsubcutaneouslywithmifepristoneComplexprescriptioncomposedofsuchChinesemateriamedicaasSalviamiltiorrhiza，Radixastragali，Szechwanlovagerhizome，Radixscutellariae，Rhizomaatractylodismacrocephalae，Semencuscutae，Herbataxilli，Radixdipsaci，Radixcodonopsis。Radixangelicaesinensisandsomeofthemwereevaluatedinthemodel，pregnancyrate(PR)，numberofembryoimplantation，progestin(P)，estradiol(E2)andratioofprogestintOestradiol(P4/E2)werethemainindexTheresultsofthescreentestshowedthatPRwassignificantlyhigherinprescription3groupthanthatinprescription1group，Semencu$cutaegroupandRadixdipsacigroup(PO05)。andwashigherthanthoseintheprescription2groupandcontrolgroup，whichindicatedthatprescription3wasbenefittOembryoimplantationinmicePharmacodynamictestshowedthatPRwasextremesignificantlyhigherintocolysisgroupthanthoseinthecontrolgroupandhighdosegroup(Psignificantlyhigherthanthatinthelowdosegroup(PPlevelandP4/E2wereextremesignificantlyhigherinthetocolysisgroupthanthoseinthehighdosegroup，lowdosegroup，controlgroupandhealthgroup(PP4/Ezwassignificantlyhigherinthetocolysisgroupthanthatinmiddledosegroup(PEzlevelinserumwassignificantlylowerinthetocolysisgroup。low-dosegroupandhealthgroupthanthatinthehighdosegroupandthecontrolgroup(Pinserumwassignificantlyhigherinthemiddle-dosegroupthanthatinthecontrolgroup(Pconclusion，prescription3couldimproveprogestinlevelinserumandtheratioofprogestintOestradiolinmice，whichwerehelpfulforembryoimplantationKeywords：embryoimplantationdysfunction；Chinesemateriamedica；progestin；estradiol咪唑苯脲(imidocarb，IM)又稱雙脒苯脲或咪多卡，是一種動(dòng)物專用抗原蟲藥物(王兆學(xué)等，2008)，由瑞士Monbijoustrasse公司研發(fā)，1969年其二鹽酸鹽首次在瑞士面市。1969年Schmidt等在應(yīng)用鼠駱巴貝斯蟲篩選均二苯脲類化合物時(shí)，發(fā)現(xiàn)該藥具有極好的抗梨形蟲作用。隨后相繼證明其對(duì)馬、牛、羊及犬等的巴貝斯蟲病也有良好的治療和預(yù)防作用(李德昌，1986)。該藥已廣泛應(yīng)用于世界各地，是當(dāng)今國(guó)際公認(rèn)的最佳抗原蟲藥(李光壁等，2008)，文章就該藥的研究進(jìn)展作一概述。1理化性質(zhì)咪唑苯又稱雙咪苯脲咪唑啉卡普(Marchetti等，2008)，為均二苯脲(carbanilide)類中聯(lián)咪(diamidine)的衍生物(Rie等，2011)，分子式為C19H20N6O，分子質(zhì)量為34840g/mol，化學(xué)名為N，N，-二3一(4，5二氫-1H-咪唑-2-基)苯基脲(李光壁等，2008)，商品名為imizol(李德昌，1986)，結(jié)構(gòu)式見圖1。用于臨床的咪唑苯脲衍生物有兩種：二鹽酸咪唑苯脲(imidocarbdihydrochloride，MD)和二丙酸咪唑苯脲(imidocarbdipropionate，IMDP)。臨床多用其二丙酸鹽。IMDP是一種白色結(jié)晶性粉末，熔點(diǎn)205，無(wú)色、無(wú)臭、不溶于水，分子式為C19H20N6O2(C3H602)，分子質(zhì)量為49657g/mol。圖1瞇唑苯脲的化學(xué)結(jié)構(gòu)式2抗原蟲機(jī)理IMDP可直接作用于蟲體，引起核槽擴(kuò)張，核崩解，胞漿形成空泡和核糖體減少，但其確切的抗原蟲機(jī)制尚不確定(Su等，2007)。Emea(1998)報(bào)道了兩種可能的作用方式：其一是調(diào)控蟲體內(nèi)多胺的合成，以干擾蟲體DNA、RNA及蛋白質(zhì)等物質(zhì)的生物代謝，Bacchi等(1981)也認(rèn)為該藥抗大鼠布氏錐蟲感染是通過干擾多胺產(chǎn)生；另一種是阻止宿主合成的肌糖進(jìn)入帶蟲的紅細(xì)胞，McHardy等(1986)認(rèn)為該藥抗綿羊巴貝斯蟲是通過阻止肌醇進(jìn)入紅細(xì)胞。HashemiFesharki等(1975)認(rèn)為IMDP附著在血紅細(xì)胞的細(xì)胞膜上，堵塞了纖維糖合成的受體，纖維糖是寄生蟲代謝的重要因素，因此紅細(xì)胞內(nèi)的寄生蟲死亡。Katayama(2003)研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞內(nèi)較高濃度的IM能明顯增強(qiáng)由脂多糖(LPS)介導(dǎo)的白細(xì)胞介素一10的表達(dá)，抑制LPS介導(dǎo)的腫瘤壞死因子一a的產(chǎn)生，能緩解蟲體引起的炎性反應(yīng)。3藥代動(dòng)力學(xué)IM同其他雙脒類化合物相似，口服不易吸收，通常采用肌注或皮下注射給藥。IMDP藥物代謝的特點(diǎn)是吸收快，分布廣泛，血藥半衰期長(zhǎng)，藥物長(zhǎng)期儲(chǔ)存在肝臟、腎臟、肌肉組織中，消除緩慢。根據(jù)Su等(2007)對(duì)豬體內(nèi)IMDP藥代動(dòng)力學(xué)和生物利用度的研究，給豬靜注2mg/kg體重時(shí)，其血藥濃度接近于Aliu等(1977)報(bào)道的綿羊血藥濃度，在(O54025)h時(shí)血藥濃度達(dá)到峰值(202073)tg/mL，半衰期為(018009)h，這與Belloli等(2006)報(bào)道的綿羊和山羊的半衰期一致，分布半衰期接近于Abdullah等(1983)報(bào)道的犬的(88231)min和羊的(68109)min。IMDP在動(dòng)物體內(nèi)代謝緩慢，一般不被肝臟所代謝，以原形存在及排泄，Emea(1998)報(bào)道了該藥在小鼠體內(nèi)的代謝情況，發(fā)現(xiàn)肝腎中90的藥物以原形存在，尿中95的藥物以原形排泄。另外，膽汁也是該藥在綿羊體內(nèi)的一種排泄方式(Aliu等，1977)。4毒性與不良反應(yīng)IM治療牛巴貝斯蟲病時(shí)，因靜注毒性最大，一般采用肌注或皮下注射(Wood等，1971)。陳聲國(guó)等(2008)研究發(fā)現(xiàn)，大劑量使用IMDP時(shí)，評(píng)價(jià)肝臟功能的重要指標(biāo)GPT和GOT明顯高于其他各組，說(shuō)明大劑量的IMDP對(duì)豬的肝臟功能損傷較大，而對(duì)腎功能沒有影響。Ashley等(2010)用IMDP治療犬巴貝斯蟲，發(fā)現(xiàn)副作用與抗膽堿酯酶相關(guān)，副作用包括流涎、流淚、嘔吐、痢疾、肌肉震顫、不安定、心動(dòng)過速、呼吸困難，但副作用很少出現(xiàn)。有研究報(bào)道表明，犬過量使用該藥導(dǎo)致肝壞死，隨后死亡(Kock，1991)。吳永魁等(1993)研究發(fā)現(xiàn)，IM對(duì)母鼠受孕率無(wú)明顯影響，但高劑量IM對(duì)孕鼠體重增長(zhǎng)有不良影響。56mg/kg體重IM組的每窩大鼠平均吸收胎和死胎率明顯升高，活胎率、平均窩重明顯降低，表明高劑量的IM對(duì)大鼠有胚胎毒性。5殘留Wang等(2009)用HPLC-UV檢測(cè)豬組織中IM的殘留消除，發(fā)現(xiàn)肝臟和腎臟藥物濃度最高，表明這些器官是IM殘留的靶器官，與山羊、綿羊(Lai等，2002)、犬(Abdullah等，1983)、馬(Belloli等，2002)的報(bào)道一致。肌肉也是殘留的靶器官，但I(xiàn)M的殘留濃度比肝臟和腎臟低。IM藥物最長(zhǎng)消除時(shí)間在肝臟為54d，腎臟為34d(Wang等，2009)。該藥在動(dòng)物體內(nèi)持久殘留是因?yàn)槠淇股镛D(zhuǎn)化，能與DNA含量較高的組織結(jié)合緊密(主要在肝臟和腎臟)(Moore等，1996)。Callow等(1984)通過一系列試驗(yàn)結(jié)果表明，該藥殘留物對(duì)人體無(wú)害。烈iu等(1977)用含IM1.143.27g/mL的羊奶飼喂3只羔羊，在血液中未檢測(cè)到IM。1999年歐洲藥物評(píng)價(jià)署公布了IM的最大殘留限量，該藥在可食用的牛、羊組織中的殘留限量分別為：肌肉300弘g/kg、脂肪50gg/kg、肝臟2000ttg/kg、腎臟1500ttg/kg。6臨床應(yīng)用IM通常以其二丙酸鹽的形式給藥，在抗牛(Kuttler等，1986)、羔羊(Sevine等，2007)、羊(McHardy等，1986)、馬(Freriehs等，1973)、犬(Penzhorn等，1995)巴貝斯蟲病方面有良好的治療和預(yù)防作用。IM也常用于抗牛邊蟲病(wilson等,1979)，抗犬埃立克體病(Price等，1980)，抗小鼠利什曼病(Rodrigues等，2006)，抗牛泰勒蟲病(Purnell等，1981)，抗豬(Su等，2007)、羊附紅細(xì)胞體病(Hung，1986)等。61巴貝斯蟲病6.1.1牛Callow等(1970)發(fā)現(xiàn)以2mg/kg體重一次注射MD能保護(hù)牛1個(gè)月內(nèi)不受雙芽巴貝斯蟲的侵害。612馬舒展等(1999)對(duì)馬巴貝斯蟲病畜肌注MD12mg/kg體重，每日1次，連用23次，治愈率為100，選無(wú)臨床癥狀的馬類家畜，以IM12mg/kg體重肌注，預(yù)防組首例病畜出現(xiàn)在第59天，在4個(gè)月內(nèi)發(fā)病率為095，與不預(yù)防對(duì)照組差異顯著。美國(guó)FDA批準(zhǔn)該藥按2mg/kg體重肌注，間隔24h連續(xù)給藥兩次用于治療馬駑巴貝斯蟲病；4mg/kg體重間隔72h給藥4次用于治療馬巴貝斯蟲病。613羊Belleli等(2006)發(fā)現(xiàn)IMDP253mg/kg體蕈可以有效預(yù)防羊巴貝斯蟲。IMDP治療羊巴貝斯蟲的劑量是1-2mg/kg體重(McHardy，1986)。Yeruham等(1998)發(fā)現(xiàn)12mg/kg體重IMDP肌注能控制脾切除綿羊巴貝斯蟲的試驗(yàn)性感染，如復(fù)發(fā)再次用類似劑量即可控制。楊白軍等(2003)發(fā)現(xiàn)，用三氮脒和MD配合治療，殺蟲迅速、副作用小，3個(gè)治療組的總體有效率均在96以上。614犬單劑量75mg/kg體重肌注或與三氮脒聯(lián)合用藥已被證明對(duì)犬巴貝斯蟲臨床癥狀有顯著療效。以566mg/kg體重在第1天和第14天給犬肌注能消除臨床癥狀并降低了蜱媒介感染(Uilenberg等，1981)。615驢Kumar等(2003)發(fā)現(xiàn)，用IM與青蒿素和布帕伐醌混合能在治療后25d從血循環(huán)中清除寄生蟲，但治療后5558d巴貝斯蟲寄生復(fù)發(fā)。616狐貉王志遠(yuǎn)等(2003)用3mg/kg體重MD給藥2次后仍有復(fù)發(fā)病例，而連用3次者2個(gè)月內(nèi)未見復(fù)發(fā)，表明連續(xù)用藥3次為宜。MD用量超過4mg/kg體重時(shí)可能會(huì)引起動(dòng)物腹痛、嘔吐等不良反應(yīng)，可用阿托品治療。617梅花鹿劉得貴等(2003)用MD12mg/kg體重頸部肌注治療梅花鹿焦蟲病，效果較好。一般1次即可，重者可隔日再注射1次。62附紅細(xì)胞體病621豬陳聲國(guó)等(2008)以PCR檢測(cè)陽(yáng)性的斷奶仔豬為對(duì)象，注射免疫抑制劑后誘導(dǎo)發(fā)病再治療，對(duì)比用藥前后附紅細(xì)胞體PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)陰情況和姬姆薩染色鏡檢附紅細(xì)胞體的感染率變化，用IMDP20mg/kg體重治療時(shí)，對(duì)附紅細(xì)胞體有一定的抑制和殺滅作用，優(yōu)于三氮脒。嚴(yán)煥仲(2008)對(duì)附紅細(xì)胞體常用治療藥物進(jìn)行臨床療效對(duì)比試驗(yàn)，結(jié)果表明IM對(duì)豬附紅細(xì)胞體的作用明顯好于三氮脒和鹽酸多西環(huán)素注射液，劑量為1mg/kg體重，1次/d，連用2d。用藥期間19頭豬都沒有病情反復(fù)，而三氮脒組和鹽酸多西環(huán)素注射液組分別有2頭和5頭豬出現(xiàn)病情反復(fù)。齊志翔(2006)根據(jù)臨床試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，IM2mg/kg體重深部肌注，1次/d，連續(xù)注射23次，治療效果良好。622狐貍張劍等(2006)發(fā)現(xiàn)臨床防治狐貍的附紅細(xì)胞體病可首選磺胺間甲氧嘧啶鈉和磷酸伯氨喹，其次可選用三氮脒、咪唑苯脲、大蒜素、氟苯尼考等藥物。623奶牛洪冰等(2006)用MD治療病牛83例，痊愈70例，治愈率為8434，好轉(zhuǎn)12例，總有效率為9880，表明該藥適宜在農(nóng)村獸醫(yī)臨床上推廣應(yīng)用。王永等(2008)用MD注射粉劑按2mg/kg體重，臨用時(shí)用滅菌生理鹽水配成10的溶液作臀部深層肌注，1次/d，隔24h再注射1次，對(duì)奶牛附紅細(xì)胞體病有良好的治療效果。624犬董霞等(2007)發(fā)現(xiàn)用三氮脒與IM聯(lián)合用藥治療犬附紅細(xì)胞體病效果最好，三氮脒、咪唑苯脲次之，土霉素效果一般。625水貂高光平等(2008)體外藥物篩選時(shí)，發(fā)現(xiàn)三氮脒、敵百蟲、IM效果較好。給藥后6h水貂附紅細(xì)胞體萎縮，9h水貂附紅細(xì)胞體折光性減弱、甚至變黑。三氮脒和IM組紅細(xì)胞的染蟲率大幅下降。626野豬張劍等(2008)用IM治療23只患病野豬，2mg/kg體重肌注，1次/d，連用2d；間隔1d，再用磷酸伯氨喹1.4mg/kg體重肌注，1次/d，連用2d。經(jīng)過2個(gè)療程的治療，全部痊愈。627羊Hung(1986)對(duì)染病的脾臟切除的切維厄特綿羊和艾羊，皮下注射4mg/kg體重IMDP，間隔24h用藥兩次。第一次注射后綿羊附紅細(xì)胞體寄生蟲迅速下降，48h后組織中不可見。14和28d后艾羊和切維厄特綿羊分別再次感染。63邊蟲病Adams(1976)用IMDP治療牛巴貝斯蟲和邊蟲病并發(fā)，肌注2.5mg/kg體重IMDP，間隔48h用藥5或lO次，清除了巴貝斯蟲感染，但是沒有清除邊蟲感染。王修文等(1989)用1.0、2.0、2.5mg/kg體重一次肌注IM抗牛邊蟲病和巴貝斯蟲病混合感染，平均