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《灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)規(guī)程SSR分子標(biāo)記法》江西省地方標(biāo)準(zhǔn)編制說明一、編制本標(biāo)準(zhǔn)的目的、意義辣椒(Capsicumspp.)為茄科(Solanaceae)辣椒屬蔬菜作物,是我國(guó)主要蔬菜作物之一,也是江西省栽培面積最大的蔬菜作物。辣椒屬共有5個(gè)栽培種,分別為:一年生辣椒(C.annuum)、灌木辣椒(C.frutescens)、中華辣椒(C.chinense)、長(zhǎng)柄辣椒(C.baccatum)、茸毛辣椒(C.pubescens)。灌木辣椒(C.frutescens)種質(zhì)主要分布于中南美洲、亞洲和非洲的低緯度地區(qū),在中國(guó)則主要分布于海南和云南等地,在江西省贛州、吉安、宜春等地區(qū)亦有種質(zhì)資源的分布。我國(guó)辣椒主要以一年生辣椒(C.annuum)為主,遺傳基礎(chǔ)較為狹窄。灌木辣椒具有耐高溫潮濕、抗疫病及黃萎病、耐瘠薄和耐弱光的特性,果實(shí)辣度強(qiáng)并具有獨(dú)特的清香味,可做為特異資源和抗原材料在辣椒育種中加以利用,因此灌木辣椒種質(zhì)資源的收集與鑒定對(duì)辣椒遺傳改良具有重大意義。但長(zhǎng)期以來,由于灌木辣椒種質(zhì)與一年生辣椒種質(zhì)親緣關(guān)系較近,在農(nóng)藝性狀方面有不少相似之處,通過表型鑒定等常規(guī)方法很難快速有效將灌木辣椒種質(zhì)與一年生辣椒種質(zhì)區(qū)分開來,容易造成辣椒種質(zhì)分類上的混亂,不利于辣椒種質(zhì)資源保護(hù)開發(fā)和高效利用。目前國(guó)內(nèi)只制定了辣椒品種鑒定規(guī)程SSR分子標(biāo)記法的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),但對(duì)照品種主要都是一年生辣椒,未建立灌木辣椒種質(zhì)和品種鑒定的相關(guān)規(guī)程。本標(biāo)準(zhǔn)提供的SSR分子標(biāo)記可將灌木辣椒與一年生辣椒種質(zhì)資源區(qū)別開,操作簡(jiǎn)單、重現(xiàn)性好、準(zhǔn)確度高,可有效克服用表型鑒定方法難以區(qū)分灌木辣椒種質(zhì)與一年生辣椒種質(zhì)的缺點(diǎn),可在辣椒種質(zhì)鑒別、種質(zhì)資源保護(hù)、分子輔助育種和種質(zhì)資源創(chuàng)新中發(fā)揮重要作用二、標(biāo)準(zhǔn)編制概況(一)基本情況1、本標(biāo)準(zhǔn)由江西省農(nóng)業(yè)廳提出。2、本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所。3、本標(biāo)準(zhǔn)起草人:周坤華、方榮、陳學(xué)軍、袁欣捷、郭麗虹、羅海平、黃國(guó)東、袁青云、涂年生。4、本標(biāo)準(zhǔn)編寫格式符合GB/T1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫。5、本標(biāo)準(zhǔn)是在進(jìn)行系列試驗(yàn),查閱了大量相關(guān)文獻(xiàn)資料,廣泛收集和總結(jié)辣椒品種鑒定既有研究成果基礎(chǔ)上編制而成。(二)灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)SSR分子標(biāo)記法的確立本規(guī)程的項(xiàng)目來源為:江西省市場(chǎng)監(jiān)督管理局2018年第七批江西省地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂計(jì)劃,計(jì)劃項(xiàng)目編號(hào)為:DB2018-7-28。本規(guī)程得到江西省蔬菜產(chǎn)業(yè)重大技術(shù)協(xié)同推廣計(jì)劃、國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系專項(xiàng)資金項(xiàng)目(CARS-24-G-08)、江西省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專項(xiàng)(JXARS-06,2016~2020年)和江西省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科研協(xié)同創(chuàng)新專項(xiàng)(JXXTCX2015005,2015~2017年)等的資助。標(biāo)準(zhǔn)起草單位在開展灌木辣椒種質(zhì)收集和保存、灌木辣椒優(yōu)異基因篩選、辣椒核心種質(zhì)構(gòu)建及利用和相關(guān)分子生物技術(shù)研究的基礎(chǔ)上,并參閱有關(guān)技術(shù)文獻(xiàn),集成編制了《灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)SSR分子標(biāo)記法》。(三)主要技術(shù)依據(jù)和部分條款說明編制遵循“先進(jìn)性、實(shí)用性、統(tǒng)一性”的原則,盡可能與國(guó)內(nèi)外領(lǐng)先標(biāo)準(zhǔn)接軌,注重了標(biāo)準(zhǔn)的可操作性,嚴(yán)格按GB/T1.1-2009最新版本要求進(jìn)行編寫。1、范圍。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了利用簡(jiǎn)單重復(fù)序列(Simplesequencerepeats,SSR)分子標(biāo)記法快速鑒定灌木辣椒(CapsicumfrutescensL.)種質(zhì)技術(shù)有關(guān)的術(shù)語和定義、儀器設(shè)備與主要試劑耗材、溶液配制、核心引物、參照種質(zhì)、操作步驟、指紋比對(duì)和結(jié)果判定等方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于灌木辣椒種質(zhì)灌木辣椒(CapsicumfrutescensL.)的SSR分子指紋比對(duì)鑒定。2、術(shù)語。參考了現(xiàn)行的我省及國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)內(nèi)有關(guān)文獻(xiàn)資料,本技術(shù)規(guī)程采用的術(shù)語規(guī)范、明確。對(duì)部分術(shù)語如參照種質(zhì)、核心引物、指紋圖譜和指紋比對(duì)等進(jìn)行了定義與解釋。3、本標(biāo)準(zhǔn)確定的“灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)SSR分子標(biāo)記法”在江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所作物種質(zhì)資源重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行并進(jìn)行了進(jìn)行了多次重復(fù),科學(xué)、規(guī)范、可操作性強(qiáng),對(duì)灌木辣椒種質(zhì)鑒定、分類、保護(hù)和利用都具有很好的指導(dǎo)作用。三、征求意見和修改情況本規(guī)程在起草過程中,在起草人員內(nèi)部進(jìn)行了充分的討論、交流,形成了《灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)規(guī)程SSR分子標(biāo)記法》初稿,2018年3~10月,起草小組與我省種質(zhì)資源調(diào)查人員、分子生物學(xué)技術(shù)人員等進(jìn)行了座談、交流,根據(jù)大家的意見,對(duì)初稿又進(jìn)行了認(rèn)真修改、補(bǔ)充和進(jìn)一步完善,形成了《灌木辣椒種質(zhì)鑒定技術(shù)規(guī)程SSR分子標(biāo)記法》現(xiàn)稿。四、其它說明本規(guī)程的編
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