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文檔簡介
家畜傳染病學實驗指導
獸醫專業用
農業出版社出版
第三版修訂者
主編者鄭明球(南京農業大學)
編寫實驗19、27、28、30、32、33。
編寫者沈正達(甘肅農業大學)
編寫實驗1?6、9、12—15、21、25o
王錫禎(甘肅農業大學)
編寫實驗8、10、16、22、24、26o
劉秀梵(揚州大學農學院)
編寫實驗17、29、31、34、35o
肖傳發(山東農業大學)
編寫實驗7、11、18、20
審定者蔡寶祥
第二版參加編寫人員
沈正達、王錫禎(甘肅農業大學)
費恩閣(解放軍獸醫大學)
焦殿刪(東北農學院)
郭玉璞阮煥文(北京農業大學)
梁英(內裳古農牧學院)
劉堯服(江西共大總校)
駱春陽(江蘇農學院)
盛佩良(福建農學院)
肖傳發(山東農學院)
陸仿與(華南農學院)
鄭明球(南京農學院)
第一版參加編寫人員
沈正達、王錫禎(甘肅農業大學)
費恩閣(解放軍獸醫大學)
王殿瀛(解放軍獸醫大學)
郭玉璞、阮煥文(北京農業大學)
梁英(內蒙古農牧學院)
劉堯服(江西共大總校)
駱春陽(江蘇農學院)
盛佩良(福建農學院)
肖傳發(山東農學院)
陸仿與(華南農學院)
鄭明球(南京農學院)
目錄
家畜傳染病學實驗須知....................................................1
實驗一家畜傳染病的臨診記錄和表報.....................................1
實驗二消毒............................................................9
實驗三傳染病病畜(禽)尸體的處理.......................................13
實驗四免疫接種........................................................15
實驗五病料的取材和送檢.............................................19
實驗六家畜傳染病的疫情調查和統計.....................................22
實驗七炭疽的診斷和防治...............................................28
實驗八鏈球菌病的實驗室診斷...........................................30
實驗九巴氏桿菌的實驗室診斷...........................................33
實驗十結核病的檢疫....................................................34
實驗十一布氏桿菌病的檢疫.............................................38
實驗十二鉤端螺旋體病的實驗室診斷.....................................44
實驗十三衣原體病的實驗室診斷.........................................48
實驗十四狂犬病的實驗室診斷...........................................52
實驗十五偽狂犬病的實驗室診斷.........................................53
實驗十六口蹄疫的實驗室診斷...........................................55
實驗十七豬瘟的診斷....................................................65
實驗十八豬丹毒的診斷.................................................67
實驗十九豬氣喘病的診斷和治療.........................................69
實驗二十豬痢疾的實驗室診斷...........................................72
實驗二十一副結核病的實驗室診斷.......................................76
實驗二十二牛病毒性腹瀉——粘膜病的實驗室診斷........................80
實驗二十三牛傳染性鼻氣管炎的實驗室診斷...............................84
實驗二十四牛白血病的診斷.............................................86
實驗二十五羊魏氏梭菌腸毒素的分離和鑒定...............................90
實驗二十六藍舌病的實驗室診斷.........................................93
實驗二十七馬傳染性貧血的檢疫.........................................95
實驗二十八馬副傷寒的實驗室診斷.......................................105
實驗二十九雞新城疫的診斷.............................................107
實驗三十拐城疫弱毒疫苗的制造和免疫接種.................................111
實驗三H??一雞馬立克氏病的診斷和免疫接種...............................113
實驗三十二雞傳染性法氏囊病的診斷.....................................115
實驗三十三鴨瘟的診斷.................................................118
實驗三十四禽支原體病的診斷...........................................119
實驗三十五雞白痢的檢疫...............................................122
家畜傳染病學實驗須知
家畜傳染病往往借助人類的活動而傳播,有些是人獸共患傳染病,如炭疽、布氏桿菌
病、結核、狂犬病等。因為在家畜傳染病學實驗的對象和材料,與病畜和病原微生物有關,
所以學生在操作過程中稍有疏忽,就有可能引起疫病流行,甚至感染人身,危及生命,于是
實驗時必須遵守下列規定。
1.在實驗時必須穿工作服,當接觸或操作危險材料時,須穿戴膠靴、圍裙、手套及眼
鏡,用后應立即消毒清洗后,方可再用。在操作時,一定嚴肅認真,勿以手指或其他器物等
接觸口唇、眼、鼻和面部,手和面部有傷口時,應避免危險材料的接觸。
2.使用危險材料應行無菌操作,盛危險材料的器皿要牢固,以免操作過程破裂,以防
液體流出,造成污染。用過的尸體、內臟、血液以及廢棄的培養基、生物制品等,須嚴加,
消毒或深埋。用過的棉球、紗布等污物,放在固定容器中,統一處理,不得隨意拋棄。萬一
危險材料滴出或打翻,或發生其他意外,應立即報告指導老師及時處理。如手指或皮膚受污
染,立即將手浸入消毒液中15min,然后用清水洗干凈。
3.實驗完畢,將操作臺面用消毒液消毒?下,自身的手也須消毒和洗刷干凈后方得離
開實驗室。
4.實驗前應對本次實驗目的、有關內容和操作技術進行預習;實驗時在老師指導下進
行,并遵守實驗程序,均不可潦草應付或不動手;實驗時應作好記錄,特別是實驗內存、方
法及結果應詳細記錄,認真做好作業。
5.愛惜藥械和儀器,特別對精密儀器一定要按照教師指導的方法和步驟進行操作,不
可粗心大意,以免發生損壞。
實驗一家畜傳染病的臨診記錄和表報
目的
1.認識傳染病臨診記錄和表報工作的意義。
2.熟悉家畜傳染病的主要表格及其使用方法。
內容及方法
一、傳染病臨診記錄和表報工作的實際意義
有關家畜傳染病防治工作的部門,應建立制度,堅持作好臨診記錄和表報工作。臨診記
錄和表報做得好壞,反映有關獸醫機構和人員的業務水平和工作質量。沒有詳細的臨診記錄,
就無從進行全面的統計和對疾病的正確分析,因而也就不可能擬定出有預見性的防疫計劃和
有效的家畜保健措施。
二、有關家畜傳染病的主要表格
1.家畜衛生卡片畜牧場、農場和機關單位的養畜場,均應建立家畜卡片制度,進行
家畜健康史的登記。每頭或每群家畜填寫衛生卡片一張,由有關的獸醫人員或獸醫機構統一
管理。格式見表1。卡片編號最好和畜號統一起來,即括號內標明畜別,后面填畜號。健康
史欄著重寫下列內容:原產地家畜傳染病流行情況簡介;其親代何時患過何種傳染病:該家
畜在入場或建立卡片以前何時患過何種疾病或接受過何種預防注射及檢疫。
2.家畜傳染病防疫措施登記表也可稱為免疫接種和檢疫登記簿。各農牧場、獸醫診
療部門和各級獸醫防治機構均可使用。格式如表2o
3.疫情登記表供各級獸疫防治機構作為地區的基本流行病學統計資料。格式如表3。
4.畜禽檢疫(驗)證明畜禽及畜禽產品在長途運輸時,在啟運前須經有關獸醫單位進
行必要的檢疫(驗),并經預防接種或消毒后簽發檢疫(驗)證明:檢疫(驗)證明有:畜禽產地檢
疫證明、畜禽產品檢疫(驗)證明、畜禽及畜禽產品運載工具消毒證明和畜禽運輸檢疫證明,
檢疫(驗)證明的格式由農業部監制。檢疫(驗)證明一式2~3聯,第聯存根,第二聯交畜(貨)
主,第三聯同貨隨行,格式如表4—1、4—11、4-Ik運輸時應遵守的特殊要求,如需用
不漏水的車船、沿指定路線,在限定日期內運達指定地點利中途不得停留等限制,可在備注
欄內詳細注明。
5.其他在獸疫防治、診斷檢驗和有關的研究工作實踐中,還需要其他一些記錄表和
報表,如家畜傳染病病歷、家畜傳染病門診病畜登記簿、家畜傳染病住院病畜登記簿、獸醫
診斷室診斷記錄表等,這些表報與一般獸醫診療部門所用的基本相同。
復習題與作業
1.試述臨診記錄和表報工作的實際意義。
2.試將附發的四種表格各填寫一份。
表1(正面)家畜衛生卡片
(農牧場或養畜場的名稱)
()字第號
毛色及出生
畜別品種特征日期
入場
等級性別來源日期
健
康
史
年月日預防注射或檢疫
(背面)
年月日預防注射或檢疫
附
注
獸醫
表2(獸疫防治機關名稱)防疫措施登記表
表3(獸疫防治機關名稱)疫情登記表
表4一1
畜禽產地檢疫證明
__________(動檢)No
畜主產地縣(市)鄉村(屯)
姓名
畜禽單位數量特征
名稱
預防聯
接種
情況存
檢疫
項目根
方法
及結
果
備注
本證限縣境內使用,自簽發之日起日內有效
獸醫衛生檢疫員:檢疫單位(章):
年月日簽發
備注
本證自簽發之日起日內有效
獸醫衛生檢疫員:檢疫單位(章):
鐵路運輸監督簽章年月日簽發
年月日
表4—III
畜禽及畜產品運載工具消毒證明
__________(動檢)No
畜(貨)主承運單位
運輸工具名稱運載工具號碼
該運載工具在裝前(卸后)業經___________________________
消毒,準予運載畜禽或畜禽產品聯
存
備注
根
獸醫衛生檢疫員:檢疫單位(章):
年月日簽發
表4—IV
畜禽運輸檢疫證明
貨主姓名:_______(動檢)No
起運地點:到達地點:
別畜禽種類單位數量
項目
畜禽名稱生產縣名用途—>
免疫接種情況是否非疫區
聯
檢疫(驗)項目
方法及結果存
備注
根
本證自簽發之日起日內有效
獸醫衛生檢疫員:檢疫單位(章):
鐵路運輸監督簽章年月日簽發
年月日
實驗二消毒
目的
1.結合生產實踐掌握畜禽舍、土壤、糞便等消毒方法。
2.檢查消毒質量的方法。
內容及方法
一、消毒的器械和消毒劑
1.噴霧器用于噴灑消毒的器具稱為噴霧器,與吸入或壓力唧筒相似。噴霧器有兩種,
一種是手動噴霧器,另一種是機動噴霧器。前者有背攜式和手壓式兩種(圖1—I、II、
III),常用于小量消毒;后者有背攜式和擔架式兩種(圖1—N、V),常用于大面積消毒。
消毒液在裝入噴霧器之前,應先充分溶解過濾,以免可能存在的殘渣堵塞噴霧器的噴
嘴。
2.火焰噴燈是利用汽油或煤油作為燃料的一種工業用噴燈,常用以消毒被病原體污
染了的各種金屬制品,如鼠籠、兔籠、雞籠等。
3.化學消毒劑消毒劑是防疫工作中的重要武器之一,是消滅被傳染原污染在外界環
境中的病原微生物,可切斷傳播途徑,預防傳染病的發生和蔓延。近年來,我國集約化養殖
業發展很快,而消毒劑II益受到重視。化學消毒劑品種較多,現介紹幾種常用消毒劑。
(1)二氯異氟尿酸鈉(優氯凈)Sodiumdichloroisocyanurata含有效氯60%左右,易溶
于水,殺菌譜廣,對細菌、病毒、真菌及細菌芽胞有較強的殺滅作用I。用具的消毒(0.5%?
10%,15?60min);地面的消毒(5%?10%,350-1000ml/m2,1?3h)。同類產品三氯異氟
尿酸(Trichloroisocynccricacid)含有效氯90%,溶解度低..
(2)農福NewFormulaFarmFluid醋酸、混合酚與烷基苯磺酸復配的水溶液,易溶于水。
對細菌和病毒有殺滅作用。1%?1.3%溶液用于畜禽噴灑消毒,1.7%溶液用器具和車輛消毒。
相近產品毒菌凈(復合酚),易溶于水,0.33%溶液用于細菌性傳染病的畜舍、用具消毒;1%
溶液用于病毒性傳染病的畜舍、籠具消毒。
(3)百毒殺Deciquam222,Bromo-sept50新型季鏤鹽類消毒劑,屬陽離子型表面活性劑,
水溶性低,對馬立克氏病病毒、新城疫病毒有較強滅活,對芽胞和IBDV效力差。環境消毒
時取本晶]ml加入3L水中。飲水消毒時,取1ml加入10?20L水中。
(4)碘伏Iodophors碘與表面活性劑的不定型結合物,在溶液中逐漸釋放碘,對細菌、
病毒、真菌和細菌芽胞有殺滅作用,殺菌濃度為5—10mg/L。
(5)過氧乙酸滅菌譜廣,對細菌、病毒、真菌和芽胞有較強滅菌作用。0.5%溶液用于
噴灑畜、禽舍、地面和食槽。70℃以上易引起爆炸。
(6)漂白粉為次氯酸鈣,是一種廣泛應用的消毒劑,殺菌效力強。10%?20%乳劑用
于畜、禽舍、環境的消毒,在5?log/n?水中,可作飲水消毒。
(7)福爾馬林為38%?40%甲醛的水溶液,有較強殺菌作用。主要用于熏蒸消毒,用
量為250ml/n?空間。還有固體福爾馬林,置容器上加熱熏蒸消毒。
二、畜、禽舍的消毒
畜、禽舍的消毒分兩個步驟進行,第一步先進行機械清掃,第二步是化學消毒液消毒。
機械清掃是搞好畜、禽舍環境衛生最基本的一種方法。據試驗,采用清掃方法,可以使
雞舍內的細菌數減少21.5%,如果清掃后再用清水沖洗,則雞舍內細菌數即可減少54%?
60%;清掃;沖洗后再用藥物噴霧消毒,雞舍內的細菌數即可減少90%。
用化學消毒液消毒時,消毒液的用量,?般是以畜、禽舍內每平方米面積用1L藥液。消
毒時,先噴灑地面,然后墻壁,先由離門遠處開始,噴完墻壁后再噴天花板,最后再開門窗
通風,用清水刷洗飼槽,將消毒藥味除去。在進行聲、禽舍消毒時也應將附近場院以及病畜、
禽污染的地方和物品同時進行消毒。
1.畜、禽舍的預防消毒在一般情況下,每年可進行兩次(春秋各一次)。在進行畜、
禽舍預防消毒的同時.,凡是家畜(禽)停留過的處所都需進行消毒。在采取“全進全出”管理
方法的機械化養畜(禽)場,應在全出后進行消毒。產房的消毒,在產仔前應進行一次,產仔
高峰時進行多次,產仔結束后再進行一次。
畜、禽舍預防消毒忖常用的液體消毒劑有10%?20%的石灰乳和5%?10%的漂白粉溶
液。
畜、禽舍預防消毒也可用氣體消毒。所用藥品是福爾馬林和高缽酸鉀。方法是按照畜、
禽舍面積計算所需用的藥品量。一般每立方米空間,用福爾馬林25ml,水12.5ml,高鈦酸
鉀25g(或以生石灰代替)。計算好用量以后將水與福爾馬林混合。畜、禽舍的室溫不應低于
正常的室溫(15?18℃)。將畜、禽舍內的管理用具、工作服等適當地打開,箱子與柜櫥的門
都開放。再在畜、禽舍內放置幾個金屑容器,然后把福爾馬林與水的混合液倒人容器內,將
牲畜遷出,畜、禽舍門窗緊閉,其后將高缽酸鉀倒人,用木棒攪拌,經幾秒鐘即見有淺藍色
刺激眼鼻的氣體蒸發出來,此時應迅速離開畜、禽舍,將門關閉。經過12?24h后方可將門
窗打開通風。倘若急需使用畜、禽舍,則需用氨蒸氣來中和甲醛氣。按畜、禽舍每lOOn?
取500g氯化筱,1kg生石灰及750ml的水(加熱到75℃)。將此混合液裝于小桶內放人畜、禽
舍。或者用氨水來代替,即按每lOOn/畜、,禽舍用25%氨水1250mL中和20?30min后,
打開畜、禽舍門窗通風20?30min,此后即可飼養畜、禽。
在集約化飼養場,為了預防傳染病平時可用消毒劑進行“帶畜消毒二如用0.3%過氧乙
酸對雞舍進行氣霧消毒,對雞舍地面、墻壁、雞被羽表面上常在菌和腸道菌有較強的殺滅作
用。如0.3%過氧乙酸按30ml/nd劑量噴霧消毒,對雞群和產蛋雞均無不良影響。“帶畜消
毒”法在疫病流行時,可作為綜合防制措施之一,及時進行消毒對撲滅疫病起到一定作用。
0.5%以下濃度的過氧乙酸對人畜無害,為了減少對工作人員的刺激,在消毒時可配戴口罩。
2.畜、禽舍的臨時消毒和終末消毒發生各種傳染病而進行臨時消毒及終末消毒時,
用來消毒的消毒劑隨疫病的種類不同而異,?般腸道菌、病毒性疾病可選用上述所介紹的幾
種消毒劑,如5%漂白粉乳劑,1%?2%氫氧化鈉熱溶液。但如發生細菌芽胞引起的傳染病
(如炭疽、氣腫疽等)時,則需使用10%?20%漂白粉乳劑、10%?20%氫氧化鈉熱溶液或其
他強力消毒劑。在消毒畜、禽舍的同時,在病畜、禽舍、隔離舍的出入口處應放置,設有消
毒液的麻袋片或草墊。
三、地面土壤的消毒
被病畜(禽)的排泄物和分泌物污染的地面土壤,可用5%?10%漂白粉溶液、百毒殺或
10%氫氧化鈉溶液消毒。停放過芽胞菌所致傳染病(如炭疽、氣腫疽等)病畜尸體的場所,或
者是此種病畜倒斃的地方,應嚴格加以消毒,首先用10%?20%漂白粉乳劑或5%?10%優
氯凈噴灑地面,然后將表層土壤掘起30cm左右,撤上千漂白粉并與土混合,將此表土運出
掩埋。在運輸時應用不漏土的車以免沿途漏撒,如無條件將表土運出,則應多加干漂白粉的
用量(In?面積加漂白粉5kg),將漂白粉與土混合,加水濕潤后原地壓平。
四、糞便的消毒
傳染病病畜、禽糞便的消毒有多種方法,如焚燒法、化學藥品消毒法、掩埋法和生物熱
消毒法等。實踐中最常用的是生物熱消毒法,此法能使非芽胞病原微生物污染的糞便變為無
害,且不喪失肥料的應用價值。
糞便的生物熱消毒法通常有兩種,一種為發酵池法,另一種為堆糞法。
1.發酵池法此法適用于飼養大量家畜的農牧場,多用于稀薄糞便(如牛、豬糞)的發
酵。其設備為距農牧場200?250m以外無居民、河流、水井的地方挖筑兩個或兩個以上的
發群池(池的數量與大小決定于每天運出的糞便數量)。池的邊緣與池底用磚砌后再抹以水
泥,使不透水。待倒人池內的糞便快滿時.,在糞便表面鋪一層干草,上面蓋一層泥土封嚴,
經1?3個月即可掏出作肥料用。兒個發酵池可依次輪換使用。
2.堆糞法此法適用于干固糞便(如馬、羊、雞糞等)的處理。在距農牧場100?200m
以外韻地方設一堆糞場。堆糞的方法如下:在地面挖?淺溝,深約20cm,寬約1.5?2m,
長度不限,隨糞便多少而定。先將非傳染性的糞便或蒿稈等堆至25cm厚,其上堆放欲消毒
的糞便、墊草等,高達1?L5m,然后在糞堆外面再鋪上10cm厚的非傳染性的糞便或谷香
草,并覆蓋10cm厚的沙子或泥土。如此堆放3個星期到3個月,即可用以肥田。
當糞便較稀時,應加些雜草,太干時倒人稀糞或加水,以促其迅速發酵。處理牛糞時,
因牛糞較稀不易發酵,可以摻馬糞或干草,其比例為4份牛糞加1份馬糞或干草。
五、污水的消毒
被原體污染的污水,可用沉淀法、過濾法、化學藥品處理法等進行消毒。比較實用
的是化學藥品處理法。方法是先將污水處理池的出水管用一木閘門關閉,將污水引入6水池
后,加入化學藥品(如漂白粉或生石灰)進行消毒。消毒藥的用量視污水量而定(一般
1L污水用2?5g漂白粉)。消毒后,將閘門打開,使污水流人滲井或下水道。
六、皮革原料和羊毛的消毒
皮革原料和羊毛的消毒,通常是用福爾馬林氣體在密閉室中蒸熏,但此法可損壞皮毛品
質,且穿透力低,較深層的物品難于達到消毒的目的。目前廣泛利用環爭乙烷氣體來進行消
毒。此法對細菌、病毒、立克次氏體及霉菌均有良好的消毒作用,對皮毛等畜產品中的炭疽
桿菌芽胞也有較好的消毒效果。消毒時必須在密閉的專用消毒室或密閉良好的容器(常用聚
乙烯或聚氯乙烯薄膜制成的蓬布)內進行。環氧乙烷的用量,如消毒病原體繁殖型,每立方
米用300?400g,作用8h;如消毒芽胞和霉菌,每立方米用700?950g左右,作用24h。環
氧乙烷的消毒效果與濕度、溫度等因素有關,一般認為,相對濕度為30%?50%,溫度在
18℃以上,38?54℃以下,最為適宜。環氧乙烷的沸點為10.TC,沸點m766溫度為易揮
發的液體,遇明火易燃易爆,對人有中等毒性,應避免接觸其液體和吸入其氣體。
七、消毒質量的檢查
為了驗證消毒的效果,可對消毒對象進行細菌學檢查。方法是在消毒以后由地面(在
畜、禽舍的家畜后腳停留的地方)、墻壁上、畜、禽舍墻角以及飼槽上取樣品,用小解剖月
在上述各部位劃出大小為lOcmXIOcm的正方形數塊,每個正方形都用滅菌的濕棉簽(干棉簽
的重量為o.25~o.33g)擦拭I?2min,將棉簽置于中和劑(30ml)中并沾上中和劑然后壓出、
沾上、壓出,如此進行數次之后,再放入中和劑內5?lOmin,用躡子將棉簽擰干,然后把
它移人裝有滅菌水(30ml)的罐內。
當以漂白粉作為消毒劑時,可應用30ml的次亞硫酸鹽中和之;堿性溶液用0.01%醋
酸30ml中和;福爾馬林用氫氧化鏤(1%?2%)作為中和劑。當以克遼林、來蘇兒及其他藥
劑消毒時,沒有適當的中和劑,而是在滅菌的水中洗滌2次,時間為5?lOmin,依次地把棉
簽從一個罐內移人另一個罐內。
送到實驗室去的滅菌水里的樣品在當天把棉簽擰干和將液體攪拌之后,將此洗液的樣品
接種在遠藤氏培養基上。為此,用滅菌的刻度吸管由小罐內吸取0.3ml的材料傾入瓊脂.平
皿表面,用巴氏吸管作成的“刮”,在瓊脂平皿表面涂布,然后仍用此“刮”涂布第二個瓊
脂平皿表面。將接種了的平皿置于37℃溫箱內,24h檢查初步結果,48h后檢查最后結果。
如在遠藤氏培養基上發現可疑菌落時,即用常規方法鑒別這些菌落。如無腸道桿菌培養物存
在時,證明所進行的消毒質量是良好的,有腸道桿菌生長,說明消毒質量不良。
復習題與作業
1.試述消毒的種類和意義。
2.分別列舉適用于殺滅芽胞菌、非芽胞菌和病毒的化學消毒藥。
3.糞便生物熱消毒的原理為何?
4.如何進行畜、禽舍消毒質量的微生物學檢查?
實驗三傳染病病畜(禽)尸體的處理
目的
結合生產實踐,掌握尸體的運送及處理方法。
內容及方法
一、尸體的運送
尸體運送前,工作人員應穿戴工作服、口罩、風鏡、膠鞋及手套。運送尸體應用特制的
運尸車(車的內壁襯釘鐵皮,以防漏水)。裝車前應將尸體各天然孔用蘸有消毒液的濕紗布、
棉花嚴密填塞,小動物和禽類可用塑料袋盛裝,以免流出糞便、分泌物、血液等污染周圍環
境。在尸體躺過的地方,應用消毒液噴灑消毒,如為土壤地面,應鏟去表層土,連同尸體一
起運走。運送過尸體的用具、車輛應嚴加消毒,工作人員用過的手套、衣物及膠鞋等亦應進
行消毒。
二、處理尸體的方法
尸體的處理方法有多種,各具優缺點,在實際工作中應根據具體情況和條件加以選
擇。
1.掩埋法這種方法雖不夠可靠,但比較簡單,所以在實際工作中仍常應用。
(1)墓地的選擇選擇遠離住宅、農牧場、水源、草原及道路的僻靜地方;土質宜干而
多孔(沙土最好),以便尸體加快腐敗分解:地勢高、地下水位低,并避開山洪的沖刷;墓地
應筑有2m高的圍墻,墻內挖一個4m深的圍溝,設有大門,平時落鎖。
(2)挖坑坑的長度和寬度以能容納側臥之尸體即可,從坑沿到尸體表面不得少于
1.5?2mo
(3)掩埋坑底鋪以2?5cm厚的石灰,將尸體放入,使之側臥,并將污染的土層、捆尸
體的繩索一起拋入坑內,然后再鋪2?5cm厚的石灰,填土夯實。尸體掩埋后,上面應作0.5m
高的墳丘。
2.焚燒法這是毀滅尸體最徹底的方法,可在焚尸爐中進行。如無焚尸爐,則可挖掘
焚尸坑。焚尸坑有以下幾種:
(1)十字坑按十字形挖兩條溝,溝長2.6m,寬0.6m,深0.5m。在兩溝交叉處坑
底堆放干草和木柴,溝沿橫架數條粗濕木棍,將尸體放在架上,在尸體的周圍及上面再放上
木柴,然后在木柴上倒以煤油,并壓以磚瓦或鐵皮,從下面點火,直到把尸體燒成黑炭為止,
并把它掩埋在坑內。
(2)單坑挖一長2.5m,寬1.5m,深0.7m的坑,將取出的土堵在坑沿的兩側。坑
內用木柴架滿,坑沿橫架數條粗濕木棍,將尸體放在架上,以后處理如⑴法。
(3)雙層坑先挖一長、寬各2m,深0.75m的大溝,在溝的底部再挖一?長2m、寬1m、
深0.75m的小溝,在小溝溝底鋪以干草和木柴,兩端各留出18?20cm的空隙,以便吸人
空氣,在小溝溝沿橫架數條粗濕木棍,將尸體放在架上,以后處理如(1)法。
3.化制法這是一種較好的尸體處理方法,因它不僅對尸體作到無害化處理,并保留
了有價值的畜產品,如工業用油脂及骨、肉粉。此法要求在有一定設備的化制廠進行。化制
尸體時,對烈性傳染病,如鼻疽、炭疽、氣腫疽、羊快疫等病畜尸體可用高壓滅菌;對于普
通傳染病可先切成4?5kg的肉塊,然后在水鍋中煮沸2?3h。
4.發酵法這種方法是將尸體拋入專門的尸體坑內,利用生物熱的方法將尸體發酵分
解以達到消毒的目的。這種專門的尸體坑是貝卡里氏設計出來的,所以叫做貝卡里氏坑。建
筑貝卡里氏坑應選擇遠離住宅、農牧場、草原、水源及道路的僻靜地方。尸坑為圓井形,深
9?10m,直徑3m,坑壁及坑底用不透水材料作成(可用水泥或涂以防腐油的木料)。坑口高
出地面約30cm,坑口有蓋,蓋上有小的活門(平時落鎖),坑內有通氣管。如有條件,可在
坑上修一小屋。坑內尸體可以堆到距坑口1.5m處。經3?5個月后,尸體完全腐敗分解,
此時可以挖出作肥料。
如果土質干硬,地下水位又低,加之條件限制,可以不用任何材料,直接按上述尺寸挖
一深坑即可,但需在距坑口1m處用磚頭或石頭向上砌一層坑緣,上蓋木蓋,坑口應高出地
面30cm,以免雨水流入。
復習題與作業
1.運送尸體時應注意哪些事項?
2.常用的處理尸體方法共有幾種?各述其優缺點。
實驗四免疫接種
目的
1.結合生產實踐掌握免疫接種的方法和步驟。
2.熟悉獸醫生物制品的保存、運送和用前檢查方法。
內容及方法
一、免疫接種的方法
免疫接種的方法很多,主要有注射免疫法、經U免疫法、氣霧免疫法等。
1.注射免疫法注射免疫法中可分為皮下接種、皮內接種、肌肉接種和靜脈接種等四
種。
(1)皮下接種法對馬、牛等大家畜皮下接種時,一律采用頸側部位,豬在耳根后方,
家禽在胸部、大腿內側。根據藥液的濃度和家畜的大小而異,一般用16?20號針頭,長約
1.2~2.5cm。家禽則應采用針孔直徑小于20號的針頭。
皮下接種的優點是操作簡單,吸收較皮內接種為快,缺點是使用劑量多。而且同一疫苗,
應用皮下接種時,其反應較皮內為大。大部分常用的疫苗和免疫血清,一般均采用皮下接種。
(2)皮內接種法馬的皮內接種采用頸側、眼瞼部位。牛及羊除頸側外,可在尾根或肩
胛中央部位。豬大多在耳根后。雞在肉髯部位。
現用獸醫生物制品用作皮內接種的,僅有羊痘弱毒菌苗、豬瘟結晶紫疫苗等少數制品,
其他均屬于診斷液方面。一般使用專供皮內注射的注射器(容量2?10ml),0.6~1.2cm長
的螺旋針頭(針孔直徑19-25號),也可使用藍心注射器(容量1ml)和相應的注射針頭。
皮內接種的優點是使用藥液少,同樣的疫苗皮內注射較之于皮下注射反應小。同時,真
皮層的組織比較致密,神經末梢分布廣泛,特別是豬的耳根皮內比其他部位容易保持清潔。
同量藥液皮內注射時所產生的免疫力較皮下注射為高。
皮內接種的缺點是手續比較麻煩。提高工作人員的操作技術,可以克服這一缺點。
(3)肌肉接種法馬、牛、豬、羊的肌肉接種,一律采用臀部和頸部兩個部位。雞可在
胸肌部接種。
現有獸醫生物制品,除豬瘟弱毒疫苗、牛肺疫弱毒疫苗以及在某些情況下接種血清采用
肌肉接種外,其他生物制品一?般都不應用此法進行接種。一般使用16?20號針頭,長約2.5?
3.7cm。
肌肉接種的優點是藥液吸收快,注射方法也較簡便。其缺點是在一個部位不能大量注射。
同時臀部接種如部位不當,易引起跛行.
(4)靜脈接種法馬、牛、羊的靜脈接種,一律在頸靜脈部位,豬在耳靜脈部位。雞則
在翼下靜脈部位。
現用獸醫生物制品中的免疫血清,除了皮下或肌肉接種外,亦可采用靜脈接種,特別在
急于治療傳染病患畜時。疫苗、菌苗、診斷液一般不作靜脈注射。馬、牛、羊的靜脈接種部
位在左右頸側均可,一般以右側較方便。根據家畜的大小和注射劑量的多寡,一般使用14~
20號針頭,長約2.5~3.7cm。豬的靜脈接種在耳朵正面下翼的兩則。一般使用19?23
號針頭,長約2.5?5cm。
靜脈接種的優點是可使用大劑量,奏效快,可以及時搶救病畜。缺點是手續比較麻煩,
如設備與技術不完備時,難以進行。此外,如所應用的血清為異種動物者,可能引起過敏反
應(血清病)。
2.經口免疫法分飲水免疫和喂食免疫兩種。前者是將可供口服的疫苗混于水中,畜、
禽通過飲水而獲得免疫,后者是將可供口服的疫苗用冷的清水稀釋后拌人飼料,'畜、禽通
過吃食而獲得免疫。疫苗經口免疫時,應按畜、禽頭數和每頭畜、禽平均飲水量或吃食量,
準確計算需用的疫(菌)苗劑量。免疫前,應停水或停料半天,夏季停水或停料時間可以縮短,
以保證飲喂疫(菌)苗時,每頭畜、禽都能飲入一定量的水或吃入一定量的料。飲水免疫時,
一定要增加飲水器,讓每頭畜、禽同時都能飲到足夠量的水。稀釋疫(菌)苗應當用清潔的水,
禁用含漂白粉的自來水。混有疫(菌)苗的飲水和飼料一般不應超過室溫。已稀釋的疫(菌)苗,
應迅速飲喂。本法具有省時、省力的優點,適用規模化養畜、禽場的免疫。缺點是由于畜、
禽的飲水量或吃食量有多有少,因此進人每頭畜、禽體內的疫(菌)苗量不同,出現免疫后畜、
禽的抗體水平不均勻,較離散,不能象其他免疫法那樣準確一致。
3.氣霧免疫法此法是用氣泵產生的壓縮空氣通過氣霧發生器(即噴頭),將稀釋疫苗
噴出去,使疫(菌)苗形成直徑1?10/um的霧化粒子,均勻地浮游在空氣之中,畜、禽通
過呼吸道吸人肺內,以達到免疫。雞感染支原體病時禁用氣霧免疫,因為免疫后往往激發支
原體病發生,雛雞首免時使用氣霧免疫應慎重,以免發生呼吸道疾病而造成損失。
氣霧免疫的裝置由氣霧發生器(即噴頭)及動力機械組成。可因地制宜,利用各種氣泵或
用電動機、柴油機帶動空氣壓縮泵。無論以何種方法做動力,都要保持每平方厘米有2kg
以上的壓力,才能達到疫(菌)苗霧化的目的。
霧化粒子大小與免疫效果有很大關系。一般粒子大小在1?10/lUm為有效粒子。氣
霧發生器的有效粒子在70%以上者為合格。測定霧化粒子大小時,用一拭好的蓋玻片,周
圍涂以凡士林汕,在蓋玻片中央滴一小滴機油,用拇指印食指持蓋玻片,機油液面朝噴頭,
在距噴頭10?30cm處迅速通過,使霧化粒子吹于機油面上,然后將蓋玻片液面朝下放于凹
玻片上,在顯微鏡下觀察,移動視野,用目測微尺測量其大小(方法與測量細菌大小相同),
并計算其有效粒子率。
(1)室內氣霧免疫法此法需有一定的房舍設備。免疫時,疫(菌)苗用量主要根據房舍
大小而定,可按下式計算:
疫(菌)苗用量=;DXA/TXV
式中:D——計劃免疫劑量;
A——免疫室容積(I);
T------免疫時間(分鐘);
V——呼吸常數,即動物每分鐘吸人的空氣量(L),如對綿羊免疫,即為3?6。
疫(菌)苗用量計算好以后,即可將動物趕人室內,關閉門窗。操作者將噴頭由門窗縫伸
A室內,使噴頭保持與動物頭部同高,向室內四面均勻噴射。噴射完畢后,讓動物在自內停
留20?30min。操作人員要注意自身防護,戴上大而厚的口罩,如出現癥狀,應及時就醫。
(2)野外氣霧免疫法疫(菌)苗用量主要以動物數量而定。以羊為例,如為1000只,每
羊免疫劑量為50億活菌,則需50000億,如果每瓶疫苗含活菌4000億,則需12.5瓶,
月500ml滅菌生理鹽水稀釋。實際應用時,往往要比實際用量略高一些。免疫時,將畜群趕
入四周有矮墻的圈內。操作人員手持噴頭,站在畜群中,噴頭與動物頭部同高,朝動物頭部
方向噴射。操作人員要隨時走動,使每一動物都有吸人機會。如遇微風,操作者應站在上風
向,以免霧化粒子被風吹走。噴射完畢,讓動物在圈內停留數分鐘即可放出。野外氣霧免疫
時,操作者更應注意自身防護,要穿工作衣褲和膠靴,戴大而厚的口罩,如出現癥狀,應及
時就醫。
氣霧免疫時,如霧化粒子過大或過小,溫度過高,濕度過高或過低,野外免疫時風力過
大、風速過急,均可影響免疫效果。本法具有省時、省力的優點,適于大群動物的免疫,缺
點是需要的疫(菌)苗數量較多。
二、免疫接種用生物制品的保存、運送和用前檢查
1.保存獸醫生物制品應保存在低溫、陰暗、干燥的場所,滅活菌(死苗)、致弱的細
菌性菌苗、類毒素、免疫血清等應保存在2?15℃,防止凍結;致弱的病毒性疫苗,如豬瘟
弱毒疫苗、雞新城疫弱毒疫苗等,應置放在0℃以下,凍結保存。
2.運送要求包裝完善,盡快運送,運送途中避免日光直射和高溫。致弱的病毒性疫
苗應放在裝有冰塊的廣口瓶或冷藏箱內運送。
3.用前檢查獸醫生物制品在使用前,均需詳細檢查,如有下列情況之一者,不得使
用:沒有瓶簽或瓶簽模糊不清,沒有經過合格檢查的;過期失效的;制品的質量與說明書不
符,如色澤、沉淀有變化,制品內有異物、發霉和有臭味的;瓶塞不緊或玻璃破裂的;沒有
按規定方法保存的。不能使用的疫(菌)苗應立即廢棄,致弱的活苗應煮沸消毒或予以深埋。
三、家畜免疫接種前及接種后的護理與觀察
免疫接種前,應對家畜進行健康檢查(包括體溫檢查),根據檢查結果,作如下處理:完
全健康的家畜可進行自動免疫接種;衰弱、妊娠后期的家畜不能進行自動免疫接種,而應注
射免疫血清;疑似病畜和發熱病畜應注射治療量的免疫血清或給予其他治療。
經受自動免疫的家畜,應有較好的護理和管理條件,要特別注意控制家畜的使役,以避
免過分勞累和接種疫(菌)苗后出現的暫時性抵抗力降低而產生不良后果。有時,家畜接種疫
(菌)苗后可能會發生反應,故在接種后應詳細觀察7?10天。如有反應,可給予適當治療,
反應極為嚴重的,可予以屠宰。
四、免疫接種的組織及接種時的注意點
在某一地區或農牧場進行免疫接種時的組織工作好壞,決定著免疫接種的結果和成效,
其內容包括:對飼養人員講解有關接種工作的基本原理及其在防制家畜傳染病上的重要性、
接種后家畜的飼養管理條件等;準備適當的場地和保定工具;準備給家畜編號的器具;編訂
登記表冊。
接種時,應注意以下幾點:工作人員需穿著工作服及膠鞋,必要時戴口罩,工作前后均
應洗手消毒,工作中不準吸煙和吃食;注射器、針頭、鑲子等,臨用時煮沸消毒至少15分
鐘,注射時每頭家畜須調換一個針頭,如針頭不足,也應每吸液一次調換一個針頭;針筒排
氣溢出的藥液,應吸積于酒精棉花上,并將其收集于專用瓶內,用過的酒精棉花或碘酒棉花
和吸人注射器內未用完的藥液也應收集于或注入專用瓶內,集中后燒毀之。
復習題與作業
1.試述免疫接種在獸疫防治上的意義。
2.常用的免疫接種法有幾種,各有哪些優缺點?
實驗五病料的取材和送檢
目的
結合病例診斷工作,學會被檢病料的采取、保存、包裝和記錄的方法
內容及方法
一、病料的采取
1.剖檢前檢查凡發現患畜(包括馬、牛、羊及豬等)急性死亡時,必須先用顯微鏡檢
查其末梢血液抹片中是否有炭疽桿菌存在。如懷疑是炭疽,則不可隨意剖檢,只有在確定不
是炭疽時方可進行剖檢。
2.取材時間內臟病料的采取,須于死亡后立即進行,最好不超過6h,否則時間過長,
由腸內侵入其他細菌,易使尸體腐敗,影響病原微生物的檢出。
3.器械的消毒刀、剪、鏡子、注射器、針頭等煮沸消毒30min。器皿(玻璃制品、陶
制品、法瑯制品等)可用高壓滅菌或-干烤滅菌。軟木塞、橡皮塞置于0.5%石炭酸水溶液中
煮沸10min?采取一種病料,使用一套器械和容器,不可混用。
4.病料采取應根據不同的傳染病,相應地采取該病常侵害的臟器或內容物。如敗血
性傳染病可采取心、肝、脾、肺、腎、淋巴結、胃、腸等;腸毒血癥采取小腸及其內容物;
有神經癥狀的傳染病采取腦、脊髓等。如無法估計是哪種傳染病,可進行全面采取。檢查血
清抗體時,采取血液,凝固后析出血清,將血清裝入滅菌小瓶送檢。為了避免雜菌污染,病
變檢查應待病料采取完畢后再進行。各種組織及液體的病料采取方法如下。
(1)膿汁用滅菌注射器或吸管抽取或吸出膿腫深部的膿汁,置于滅菌試管中。若為開
口的化膿灶或鼻腔時,則用無菌棉簽浸蘸后,放在滅菌試管中。
(2)淋巴結及內臟將淋巴結、肺、肝、脾及腎等有病變的部位各采取1?2cm3的小方
塊,分別置于滅菌試管或干皿中。若為供病理組織切片的材料,應將典型病變部分及相連的
健康組織一并切取,組織塊的大小每邊約2cm左右,同時要避免使用金屬容器,尤其是當
病料供色素檢查時(如馬傳貧、馬腦炎及焦蟲病等),更應注意。
⑶血液
血清:以無菌操作吸取血液10ml,置于滅菌試管中,待血液凝固(經1?2天)析出血清
后,吸出血清置于另一滅菌試管內,如供血清學反應時,可于每毫升中加入5%石炭酸水溶
液1?2滴。
全血:采取10ml全血,立即注入盛有5%檸檬酸鈉1ml的滅菌試管中,搓轉混合片刻
后即可。
心血:心血通常在右心房處采取,先用燒紅的鐵片或刀片烙燙心肌表面,然后用滅菌的
尖刃外科刀自烙燙處刺一小孔,再用滅菌吸管或注射器吸出血液,盛于滅菌試管中。
(4)乳汁乳房先用消毒藥水洗凈(取乳者的手亦應事先消毒),并把乳房附近的毛刷濕,
最初所擠的3-4股乳汁棄去,然后再采集10ml左右乳汁于滅菌試管中。若僅供顯微鏡直接
染色檢查,則可于其中加入0.5%的福爾馬林液。
(5)膽汁先用燒紅的刀片或鐵片烙燙膽囊表面,再用滅菌吸管或注射器刺人膽囊內吸
取膽汁,盛于滅菌試管中。
(6)腸用燒紅刀片或鐵片將欲采取的腸表面烙燙后穿一小孔,持滅菌棉簽插入腸內,
以便采取腸管粘膜或其內容物;亦可用線孔緊一段腸道(約6cm)兩端,然后將兩端切斷,置
于滅菌器皿內。
(7)皮膚取大小約lOcmXIOcm的皮膚一塊,保存于30%甘油緩沖溶液中,或10%飽
和鹽水溶液中,或10%福爾馬林液中。
(8)胎兒將流產后的整個胎兒,用塑料薄膜、油布或數層不透水的油紙包緊,裝入木
箱內,立即送往實驗室。
(9)小家畜及家禽將整個尸體包入不透水塑料薄膜、油紙或油布中,裝入木箱內,送
往實驗室。
(10)骨頭需要完整的骨頭標本時,應將附著的肌肉和韌帶等全部除去,表面撤匕食鹽,
然后包于浸過5%石炭酸水或0.1%升汞液的紗布或麻布中,裝于木箱內送到實驗室。
(11)腦、脊髓如采取腦、脊髓作病毒檢查,可將腦、脊髓浸入50%甘油鹽水液中或將
整個頭部割下,包人浸過0.1%升汞液的紗布或油布中,裝入木箱或鐵桶中送檢。
供顯微鏡檢查用的膿汁、血液及粘液;可用載玻片作成抹片;組織塊可作成觸片,然后
在兩塊玻片之間靠近兩端邊沿處各墊一根火柴棍或牙簽十以免抹片或觸片上的病料互相接
觸。如玻片有多張,可按上法依次墊火柴棍或牙簽重疊起來,最上面的一張玻片上的涂、抹
面應朝下,最后用細線包扎,玻片上應注明口碼,并另附說明。
二、病料的保存
病料采取后,如不能立即檢驗,或需送往有關單位檢驗,應當加入適量的保存劑,使病
料盡量保持新鮮狀態。
1.細菌檢驗材料的保存將采取的臟器組織塊,保存于飽和的氯化鈉溶液或30%甘油
緩沖鹽水溶液中,容器加塞封固。如系液體,可裝在封閉的毛細玻管或試管運送;飽和氯化
鈉溶液的配制法是:蒸儲水100ml,氯化鈉38?39g,充分攪拌溶解后,用數層紗布過濾,
高壓滅菌后備用。30%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:中性甘油30mL氯化鈉牛5g,堿性
磷酸鈉10g,加蒸儲水至100ml,混合后高,壓滅菌備用。
2.病毒檢驗材料的保存將采取的臟器組織塊,保存于50%甘油緩沖鹽水溶液或雞蛋
生理鹽水中,容器加塞封固,50%甘油緩沖鹽水溶液的配制法是:氯化鈉2.5g,酸性磷酸
鈉0.46g,堿性磷酸鈉10.74g,溶于100ml中性蒸儲水中,加純中性甘油150ml,中性蒸
儲水50ml,混合分裝后,高壓滅菌備用。雞蛋生理鹽水的配制法是:先將新鮮的雞蛋表面
用碘酒消毒,然后打開將內容物傾入滅菌容器內,按全蛋9份加入滅菌生理鹽水1份,搖勻
后用滅菌紗布過濾,再加熱至56?58℃,持續30min,第2天及第3天按上法再加熱一次,
即可應用。
3.病理組織學檢驗材料的保存將采取的臟器組織塊放人10%福爾馬林溶液或95%酒
精中固定;固定液的用量應為送檢病料的10倍以上。如用10%福爾馬林溶液固定,應在24h
后換新鮮溶液一次。嚴寒季節為防病料凍結,可將上述固定好的組織塊取出,保存于甘油和
10%福爾馬林等量混合液中。
三、病料的運送
裝病料的容器要一一標號,詳細記錄,并附病料送檢單(格式如表5)。病料包裝容器要
牢固,做到安全穩妥,對于危險材料?、怕熱或怕凍的材料要分別采取措施。一般病原學檢驗
的材料怕熱,應放入加有冰塊的保溫瓶或冷藏箱內送檢,如無冰塊,可在保溫瓶內放入氯化
鏤450?500g,加水1500ml,上層放病料?,這樣能使保溫瓶內保持達24h
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