PAGEPAGE21第32講生物技術在食品加工中的應用、植物的組織培育考試標準必考加試考試標準必考加試1.果酒及果醋的制作√3.植物的組織培育√2.泡菜的腌制和亞硝酸的測定√考點一果酒及果醋的制作1．用葡萄制作葡萄酒(1)試驗原理：葡萄酒是酵母利用葡萄糖進行酒精發酵(乙醇發酵)的產物。酵母菌只有在無氧條件下才能進行酒精發酵，即將葡萄糖氧化成乙醇。但是當培育液中乙醇的濃度超過16%時，酵母菌就會死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反應式：C6H12O6→2CO2＋2C2H5OH。(2)試驗步驟：沖洗(用鮮紅紫色的高錳酸鉀溶液浸泡葡萄，用清水沖洗)→榨汁→制作酵母懸液(干酵母＋水＋少許蔗糖)→裝入發酵瓶(裝量不要超過2/3)→酒精發酵(在25～30℃的條件下放置2～3天，當發酵瓶中停止出現氣泡，即表示發酵完畢)→過濾、分裝、保存(用兩層紗布過濾發酵液)。2．用果汁制作果酒(1)試驗原理：用葡萄制作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低(平均的體積分數為8%)，而用果汁制作的果酒，其酒精含量較高(體積分數約為15%)，含糖量也較高。(2)試驗步驟：選擇材料(最好選擇蘋果)→制取果汁→配料(200g蔗糖＋1L果汁＋酵母懸液)→發酵→靜置→用虹吸法取出。3．用果酒制作果醋(1)試驗原理：醋化醋桿菌在有氧條件下將乙醇氧化為醋酸，反應式為C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O。(2)試驗步驟：連接發酵裝置→加入醋化醋桿菌→發酵并檢測pH→調整活塞，限制流量→測定pH，監控發酵狀況。思索探討1．視察A、B發酵菌種，駕馭它們的區分，并歸納參加傳統發酵的微生物。(1)圖中A可表示酒精發酵菌種的細胞模式圖，該菌種主要來自附著在葡萄皮上的野生型酵母菌，A不同于B最顯著的特征是A具有細胞核。(2)圖中B可表示醋酸發酵菌種的細胞模式圖，該菌種可從變酸的酒表面的菌膜中獲得，B沒有線粒體(細胞器)，故需氧呼吸的場所是細胞溶膠和細胞膜。2．酒精發酵和醋酸發酵的區分和聯系區分酒精發酵醋酸發酵微生物酵母菌醋化醋桿菌溫度25～30℃/18～25℃30～35℃氧氣前期需氧，后期不需氧始終需氧發酵時間2～3d/10～12d7～8d聯系eq\x(選擇葡萄)→eq\x(沖洗)→eq\x(榨汁)→eq\x(酒精發酵)→eq\x(醋酸發酵)eq\x(果酒)eq\x(果醋)1．(2024·學軍中學期末)下面是果酒和果醋制作的試驗流程和某同學設計的果酒和果醋的發酵裝置。下列相關敘述中，錯誤的是()A．依據圖1可知，利用葡萄制作果醋時，必需先進行酒精發酵然后再進行果醋發酵B．沖洗葡萄時不能次數過多，否則果酒的制作會失敗C．圖2的裝置中排氣口彎曲可防止被空氣中的雜菌污染D．制作果酒要關閉充氣口、打開排氣口，制作果醋時充氣口和排氣口都要打開答案A解析圖1中的流程是酵母菌發酵產生果酒及醋化醋桿菌利用果酒發酵產生果醋的過程，但醋化醋桿菌也可以在糖源和氧氣足夠的條件下干脆利用糖類進行果醋發酵，A項錯誤；個人用簡易裝置制作果酒時，所利用的酵母菌來自葡萄皮的表面，所以不能將葡萄沖洗次數過多，以免沖洗掉野生型酵母菌，B項正確；圖2中的排氣口彎曲可避開被空氣中的雜菌污染，C項正確；由于酵母菌在需氧呼吸階段利用的氧氣來自裝置中的空氣，且厭氧呼吸階段須要保持無氧狀態，所以無需打開充氣口，而發酵過程中會有二氧化碳產生，所以要打開排氣口；醋化醋桿菌屬于需氧菌，所以要始終將充氣口打開，D項正確。2．如圖為果酒和果醋的制作流程，請回答下列問題：eq\x(選擇葡萄)→eq\x(沖洗)→eq\x(榨汁)→eq\x(酒精發酵)→eq\x(醋酸發酵)eq\x(果酒)eq\x(果醋)(1)清洗葡萄時應特殊留意不能反復沖洗，以防止。(2)從自然菌樣中篩選較志向的醋化醋桿菌進行純化培育，通常采納(方法)接種，接種之前要對接種工具進行，避開接種工具上可能存在的微生物污染培育基。(3)果酒的制作離不開酵母菌，在酵母菌的酒精發酵過程中，通常將溫度限制在。由果酒轉變成果醋的制作時，須要變更的環境條件是和溫度限制在30～35℃。寫出由果酒釀制成果醋過程的總反應式：。(4)若果汁中含有醋化醋桿菌，在果酒發酵旺盛時，醋化醋桿菌(填“能”或“不能”)將果汁中的糖發酵為醋酸，理由：。(5)在用果汁制作果酒的過程中，發酵瓶溶液中pH的變更是。A．增大 B．不變C．減小 D．先減小后增大答案(1)菌種流失(2)劃線分別法(或涂布分別法)灼燒(滅菌)處理(3)25～30℃有氧(通入無菌空氣或通入氧氣)C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O(4)不能在果酒發酵旺盛時，發酵環境中無氧(5)C解析(1)果酒制作中利用的酵母菌來自葡萄皮上的野生型酵母菌，清洗葡萄時應特殊留意不能反復沖洗，以防止菌種流失。(2)從自然菌樣中篩選較志向的醋化醋桿菌進行純化培育，通常采納劃線分別法或涂布分別法接種，接種之前要對接種工具進行灼燒滅菌處理，避開接種工具上可能存在的微生物污染培育基。(3)果酒的制作離不開酵母菌，在酵母菌的酒精發酵過程中，通常將溫度限制在25～30℃，醋化醋桿菌是需氧菌，因此由果酒轉變成果醋的制作時，須要變更的環境條件是通入氧氣。由果酒釀制成果醋過程的總反應式為：C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O。(4)若果汁中含有醋化醋桿菌，在果酒發酵旺盛時，醋化醋桿菌不能將果汁中的糖發酵為醋酸，因為果酒發酵是在缺氧環境中進行的，而醋化醋桿菌是好氧細菌，果酒發酵的缺氧環境能抑制醋化醋桿菌生長。(5)在用果汁制作果酒的過程中，由于產生C2H5OH的同時產生CO2，因此發酵瓶溶液中的pH減小。

發酵條件的限制(1)酵母菌的繁殖需大量氧氣，而發酵過程進行厭氧呼吸，故果酒制作的前期應通入氧氣，而后期應保證嚴格的無氧環境。(2)果醋制作過程中要求始終通氧，缺氧時醋化醋桿菌的生長、增殖都會受到影響，醋酸的生成也會受到影響。考點二泡菜的腌制和亞硝酸鹽的測定1．泡菜的制作(1)菌種：主要是假絲酵母和乳酸菌。(2)原理：在無氧條件下，微生物將蔬菜中的糖和其他養分物質發酵成有機酸和醇類物質等。(3)制作流程2．亞硝酸鹽的測定(1)測定原理亞硝酸鹽可與對氨基苯磺酸發生重氮化反應，這一產物再與N-1-萘基乙二胺偶聯，形成紫紅色產物，可用光電比色法定量測定。(2)亞硝酸鹽的定量測定流程①樣品處理：泡菜25g制勻漿過濾后調pH到8.0→加25mL硫酸鋅溶液→加氫氧化鈉溶液至產生白色沉淀→水浴加熱至60°C→過濾取濾液和洗滌液定容至500mL。②測定：10mL樣品溶液＋4.5mL氯化銨緩沖液＋2.5mL60%乙酸溶液＋5mL顯色液→定容至25mL→暗處靜置25min→在550nm處測定光密度值(以10mL水為空白比照)。③標準曲線的繪制：以亞硝酸鈉質量為橫坐標，以光密度值(OD值)為縱坐標，繪制標準曲線。④計算：公式：X1＝eq\f(m2×V1,m1×V2)X1：樣品中亞硝酸鹽含量，單位mg/kg；m1：樣品質量，單位g；m2：通過標準曲線得到的亞硝酸鹽質量，單位μg；V1：樣品處理液總體積；V2：測定用樣品液體積。3．泡菜制作的關鍵點(1)防止雜菌污染：每次取樣用具要洗凈，要快速封口。(2)氧氣需求①泡菜壇要選擇氣密性好的容器，以創建無氧環境，有利于乳酸菌發酵，防止蔬菜腐爛。②泡菜壇內要注滿水，以保證乳酸菌發酵所須要的無氧環境，并留意在發酵過程中常常補水。(3)溫度：發酵過程溫度限制在室溫即可，最好在26～36℃。溫度過高，則易滋生雜菌；溫度過低，則發酵時間延長。思索探討1．如何營造泡菜制作中的“無氧環境”？提示(1)選擇的泡菜壇要密封性好；(2)加入蔬菜后要注入煮沸冷卻的鹽水，使鹽水沒過全部菜料；(3)蓋上壇蓋后要在壇蓋邊沿的水槽中注滿清水。2．在泡菜制作過程中亞硝酸鹽的含量有怎樣的變更規律？為什么要測定亞硝酸鹽的含量？提示在泡菜制作過程中，亞硝酸鹽的含量先增加后削減。測定亞硝酸鹽含量的目的是駕馭取食泡菜的時機。3．熱圖解讀：下表中甲～丙為泡菜、果醋、果酒等發酵食品的制作裝置圖，請據圖分析：食品①②③主要微生物④⑤⑥制作裝置或操作步驟(1)圖中①～③分別是哪種發酵食品？提示①－果酒、②－果醋、③－泡菜。(2)圖中④～⑥分別是哪種菌種？分別是真核生物還是原核生物？提示④—酵母菌、⑤—醋化醋桿菌、⑥—乳酸菌，其中酵母菌為真核生物，醋化醋桿菌、乳酸菌為原核生物。(3)甲～丙裝置或者步驟是否存在缺陷？試詳細分析指出。提示甲裝置中排氣管不應插入到發酵液內。

(4)說明丙裝置中“放水”的作用。提示裝置中“放水”的作用在于為泡菜壇營造無氧環境。(5)下圖為丙裝置乳酸菌的數量、乳酸和亞硝酸鹽的含量隨時間變更的曲線，請將三幅圖分別填上“縱軸標識”。①～③縱軸標識依次為乳酸菌數量、亞硝酸鹽含量、乳酸含量。1．(2024·嘉興模擬)家庭中制作泡菜的方法：簇新的蔬菜經過整理、清潔后，放入徹底清洗并用白酒擦拭過的泡菜壇中，然后向壇中加入鹽水、香辛料及一些“陳泡菜水”，密封后置于溫度相宜的地方。下列與此過程相關的敘述，不正確的是()A．用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒B．加入“陳泡菜水”的作用是供應乳酸菌菌種C．制作泡菜的過程中，有機物的干重和種類將削減D．若制作的泡菜咸而不酸最可能的緣由是大量的食鹽抑制了乳酸菌的發酵過程答案C解析用白酒擦拭泡菜壇的目的是消毒，A正確；“陳泡菜水”中含有大量的乳酸菌菌種，制作泡菜時加入“陳泡菜水”可以實現接種乳酸菌菌種的目的，B正確；制作泡菜的過程中，由于呼吸作用的消耗，有機物的干重將削減，但壇內有機物的種類將增加，C錯誤；若放入的食鹽過多，抑制了乳酸菌的發酵，就會使制作的泡菜“咸而不酸”，D正確。2．(2024·寧波模擬)下圖是泡菜的制作及測定亞硝酸鹽含量的試驗流程示意圖，請據圖回答下列問題：(1)制作泡菜時加入已腌制過的泡菜汁的目的是。(2)泡菜在腌制時，抑制有害菌繁殖是關鍵。下列與此無關的敘述是()A．白菜在開水中浸1min，熱水洗壇內壁兩次B．加入適量糖和調味品C．壇口用水封好，防止空氣進入D．加入適量的鹽水、白酒(3)亞硝酸鹽與顯色劑會生成色產物。對亞硝酸鹽的定量測定可以用法測出光密度值，利用預先建立的估算出樣品中的亞硝酸鹽含量。在進行樣品測定時，要取等量水進行同樣的測定，目的是。分析下圖的曲線可知，食用泡菜的最佳時間是點。(4)若要分別出變質泡菜中的細菌，下列敘述錯誤的是()A．取變質泡菜汁用無菌水配制成懸液B．用劃線分別法更易獲得單菌落C．須要配制合適的培育基D．培育用具、培育基必需是無菌的答案(1)接種已經擴增的發酵菌，加速發酵過程(2)B(3)紫紅光電比色標準曲線作為空白比照C(4)B1．泡菜腌制的留意事項(1)材料的選擇及用量①蔬菜應簇新，若放置時間過長，亞硝酸鹽含量增多。②清水和鹽的質量比為4∶1，鹽水要煮沸后冷卻。煮沸有兩大作用，一是除去水中的O2，二是殺滅鹽水中的其他微生物。(2)防止雜菌污染：每次取樣用具要洗凈，要快速封口。(3)O2需求：泡菜壇要選擇透氣性差的容器，泡菜壇壇蓋邊緣的凹槽內注滿水，在發酵過程中常常補水，以創建無氧環境，有利于乳酸菌發酵，防止蔬菜腐爛。(4)溫度：發酵過程溫度限制在室溫即可，溫度過高易滋生雜菌，溫度過低會使發酵時間延長。2．泡菜腌制過程中，乳酸菌、乳酸和亞硝酸鹽的變更發酵時期乳酸菌數量乳酸含量亞硝酸鹽含量發酵初期少(有O2，乳酸菌活動受抑制)少增加(硝酸鹽還原菌的作用)發酵中期最多(乳酸抑制其他菌的活動)積累、增多、pH下降下降(硝酸鹽還原菌受抑制，部分亞硝酸鹽被分解)發酵后期削減(乳酸接著積累，pH接著下降，抑制乳酸菌的活動)接著增多，pH接著下降下降至相對穩定(硝酸鹽還原菌被完全抑制)考點三植物的組織培育1．組織培育的概念取一部分植物組織，在無菌的條件下接種在三角瓶中的瓊脂培育基上，賜予肯定的溫度和光照，使之產生愈傷組織，或進而生根發芽。2．組織培育的原理植物細胞的全能性。3．培育基中加入的激素(1)激素種類：生長素和細胞分裂素，兩者的摩爾濃度比確定組織是生根，還是生芽。(2)激素的運用比例比例結果細胞分裂素和生長素的比例高誘導芽的生成細胞分裂素和生長素的比例大致相等愈傷組織接著生長而不分化細胞分裂素和生長素的比例低會趨于長根4.試驗中運用的激素人工合成的萘乙酸(NAA)代替生長素，人工合成的芐基腺嘌呤(BA)代替細胞分裂素。5．菊花的組織培育的試驗內容(1)發芽培育基和生根培育基的比較①發芽培育基：細胞分裂素摩爾濃度大于生長素摩爾濃度的培育基。②生根培育基：生長素摩爾濃度大于細胞分裂素摩爾濃度的培育基。(2)試驗內容以菊花為材料進行組織培育，首先，用細胞分裂素相對較多和生長素相對較少的培育基(發芽培育基)進行培育，使其長出較多的叢狀苗；然后將叢狀苗分株培育。分株后，再移入含有較多生長素的培育基(生根培育基)中，使其生根；將生根的苗從三角瓶中移至草炭土或蛭石中接著生長，2～3天后打開玻璃罩漸漸降低濕度進行熬煉，直到將罩全部打開處于自然濕度下為止；苗健壯后再移至土中。6．菊花的組織培育的試驗步驟(1)配制MS培育基：由大量元素、微量元素和有機成分組成。(2)取外植體：在超凈臺上將無菌培育的菊花幼苗切段，每段至少有1張葉片。(3)生芽培育：在生芽培育基中放入2～3段幼莖切段，日光燈下保持18～25℃的溫度培育，每天的光照時間不少于14.5h。(4)生根培育：2～3周后，將生長健壯的叢狀苗在無菌條件下轉入生根培育基中，在上述條件下接著培育。(5)適應熬煉：將苗移至草炭土或蛭石中，用玻璃罩或塑料布保持80%以上的濕度，2～3天后打開玻璃罩漸漸降低濕度進行熬煉，直至將罩全部打開處于自然濕度下為止。(6)定植：將苗轉移到土中培育。(7)自然生長的莖進行組織培育的步驟：可取一段莖在70%乙醇中浸泡10min，再放入5%次氯酸鈉溶液中浸泡5min，然后用另一5%次氯酸鈉溶液浸泡5min，最終在超凈臺中用無菌水清洗，將莖的切段培育在生芽培育基中。思索探討1．生長素和細胞分裂素在植物組織培育中的作用運用依次不同，結果不同：運用依次試驗結果先加生長素，后加細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先加細胞分裂素，后加生長素細胞既分裂又分化同時運用分化頻率提高2.熱圖解讀：圖甲是植物組織培育過程示意圖，圖乙是植物激素對愈傷組織分化影響的示意圖。據圖回答下列問題：(1)植物組織培育的原理是植物細胞具有全能性。(2)在圖甲A過程中，為了有利于嫩枝組織細胞啟動細胞分裂形成愈傷組織，常常須要在配制好的培育基中添加植物激素。嫩枝組織細胞接種后2～5d時，若發覺其邊緣局部污染，緣由可能是嫩枝組織細胞消毒不徹底。(3)在圖甲過程B中，若愈傷組織沒有形成根，但分化出了芽，其緣由可能是培育基中生長素較少，細胞分裂素較多；若要獲得更多的愈傷組織，培育基中兩種激素的含量應當是細胞分裂素的量中等，生長素較少。(4)切取若干經光照一段時間后的幼苗芽尖處的組織塊，消毒后，接種到誘導再分化的培育基中培育，該培育基中兩種植物激素濃度相同。從理論上分析，分化的結果是生根；緣由是培育基中細胞分裂素與生長素的濃度相等，而經光照后的幼苗芽尖處組織塊中含較多生長素，因此組織塊處的細胞分裂素相對較少，生長素相對較多，故誘導生根。3．在植物組織培育再分化階段中，漸漸變更培育基中植物激素X和植物激素Y的濃度比，細胞群的變更狀況如下圖所示。若培育基中植物激素X的濃度為a、植物激素Y的濃度為a＋0.2，則細胞群分化的結果最可能是C試管，分析圖可知，植物激素X的濃度小于植物激素Y的濃度時，有利于根的分化。1．為了探究6－BA和IAA對某菊花品種莖尖外植體再生叢芽的影響，某探討小組在MS培育基中加入6－BA和IAA，配制成四種培育基(見下表)，滅菌后分別接種數量相同、生長狀態一樣、消毒后的莖尖外植體，在相宜條件下培育一段時間后，統計再生叢芽外植體的比率(m)，以及再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)，結果如下表。培育基編號濃度/mg·L－1m/%n/個6－BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0請回答下列問題：(1)依據植物的需求量，培育基中無機鹽的元素可分為和兩類。上述培育基中，6－BA屬于類生長調整劑。(2)在該試驗中，自變量是，因變量是，自變量的取值范圍是。(3)從試驗結果可知，誘導叢芽總數最少的培育基是號培育基。(4)為了誘導該菊花試管苗生根，培育基中一般不加入(填“6－BA”或“IAA”)。答案(1)大量元素微量元素細胞分裂素(2)IAA濃度再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)0～0.5mg·L－1(3)1(4)6－BA解析植物組織培育所用培育基的主要成分有無機鹽(大量元素和微量元素)、有機物，常常還須要添加植物激素。依據試驗結果可知，本試驗所用培育基中加入的6－BA屬于細胞分裂素類生長調整劑。依據表中所列數據及試驗結果可知，本試驗自變量是IAA濃度，其取值范圍是0～0.5mg·L－1，因變量是再生叢芽外植體的比率(m)和再生叢芽外植體上的叢芽平均數(n)。當生長素用量與細胞分裂素用量的比值高時，有利于根的分化，所以為了誘導菊花試管苗生根，培育基中一般不加入6－BA。2．(2024·溫州選考模擬)鐵皮石斛是一種珍貴的中藥材，有生津養胃、降血糖和增加免疫力等作用，有效成分為石斛多糖、石斛堿等，溫州雁蕩山素有“中國鐵皮石斛之鄉”的美譽。請回答下列問題：(1)用優良品種自然生長的莖快速繁殖鐵皮石斛時，給莖消毒時無需運用的是(A.乙醇B．無菌水C．甘露醇D．次氯酸鈉)。在細胞分裂素相對較多和生長素相對較少的培育基中培育莖的切段，待長出較多的，將其進行(處理)后再轉入培育基中接著培育，直至長成幼苗。這種通過組織培育技術快速繁殖植物的方法，也稱為。(2)探討發覺，鐵皮石斛的生長發育與其體內的內生菌親密相關。為進一步探討內生菌的作用，須要大量內生菌進行相關試驗。分別內生菌時最好采納(A.G6玻璃砂漏斗過濾法B．血細胞計數法C．劃線分別法D．涂布分別法)，再將純化的內生菌轉移到液體培育基中進行。(3)探討發覺，200mg/L濃度的卡那霉素能有效抑制鐵皮石斛細胞的增殖與分化。科學家欲利用卡那霉素，采納農桿菌轉化法對現有鐵皮石斛品種進行基因改良。在基因工程操作中，導入受體細胞的分子應同時帶有目的基因和基因，這樣才能利用含有卡那霉素的培育基將勝利導入目的基因的受體細胞篩選出來。(4)鑒定鐵皮石斛的品質，可通過苯酚－濃硫酸法測定石斛多糖的含量。其原理是：石斛多糖水解成單糖并脫水生成糖醛衍生物后，與苯酚縮合生成橙黃色化合物，在490nm處測定光密度值，以不同濃度的葡萄糖溶液為標準溶液建立標準曲線，便可知道樣品的石斛多糖含量。這種方法類似于泡菜汁中含量的測定，稱之為法。(5)為高效提取石斛多糖，可在提取液中加入，以提高鐵皮石斛的出汁率。答案(1)C叢狀苗分株/分株培育生根植物克隆(2)D擴大培育(3)重組DNA/重組質粒卡那霉素抗性/抗卡那霉素(4)亞硝酸鹽光電比色(5)果膠酶/果膠酶和果膠甲酯酶/果膠酶和纖維素酶/果膠酶、果膠甲酯酶和纖維素酶解析(1)植物組織培育須要運用乙醇、次氯酸鈉和無菌水。細胞分裂素比例偏高，有利于生芽，將其分株后轉入生根培育基。這種快速繁殖植物的方法，稱為植物克隆。(3)重組DNA分子應具有目的基因和標記基因，標記基因據題意是卡那霉素抗性基因。(5)為高效提取石斛多糖，可在提取液中加入纖維素酶和果膠酶，分解細胞壁，以提高出汁率。模擬演練1.某同學設計了如圖所示的發酵裝置來制作果酒、果醋，下列有關敘述錯誤的是()A．甲用來制作果酒，乙用來制作果醋B．乙裝置須要的溫度條件高于甲C．該裝置便于發酵中產生氣體的排出D．甲、乙裝置中排液管排出液體的pH都下降答案C解析甲裝置密閉，可用來進行酵母菌的發酵制作果酒，酒精進入乙裝置中，在有氧條件下，可用來制作果醋，A項正確；酵母菌的發酵溫度一般為25～30℃，而醋化醋桿菌的最適生長溫度為30～35℃，B項正確；甲到乙、乙到丙流入的都是發酵液，甲裝置中沒有氣體的排出口，該裝置不便于發酵中產生氣體的排出，C項錯誤；甲裝置中產生酒精和CO2，導致排出液體的pH下降；乙裝置將乙醇轉變為醋酸，導致排出液體的pH也下降，D項正確。2．下列關于植物組織培育中植物激素運用的說法，不正確的是()A．植物組織培育中的關鍵性激素是生長素和細胞分裂素B．先運用生長素，后運用細胞分裂素，有利于細胞分裂和分化C．先運用細胞分裂素，后運用生長素，細胞既分裂又分化D．同時運用生長素和細胞分裂素時，兩者摩爾濃度的比例影響植物細胞的發育方向答案B解析用于植物組織培育的培育基中除養分成格外，還需添加植物激素，一般包括生長素和細胞分裂素；外植體脫分化、再分化的誘導方向取決于二者的比例。先運用生長素，后運用細胞分裂素，有利于細胞分裂，但細胞不分化；先運用細胞分裂素，后運用生長素，對細胞的分裂和分化均有利。

3．(2024·紹興模擬)某探討小組用梨釀制醋酸，詳細流程如圖所示，請回答下列問題：eq\x(梨)eq\o(→,\s\up7(甲))eq\x(渾濁的梨汁)eq\o(→,\s\up7(乙))eq\x(澄清的梨汁)eq\o(→,\s\up7(丙))eq\x(酒精發酵)eq\o(→,\s\up7(丁))eq\x(醋酸發酵)(1)圖中乙過程可加入酶，為證明該酶的效果，可分別取等量渾濁的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的，預料后者出現的沉淀物比較少。(2)相宜條件下進行酒精發酵，發酵完畢的標記是，待沉淀后，可用(方法)將上清液(即果酒)取出。若培育液酒精濃度超過時，酵母菌會死亡。(3)用相宜方法獲得優質醋化醋桿菌的菌種，若要擴大培育，相宜的培育基是()A．MS培育基B．添加蔗糖的豆芽汁C．含蛋白胨、酵母提取物、NaCl及其他相宜添加物的培育液D．尿素、葡萄糖、K2HPO4、NaCl、酚紅、瓊脂糖配制的培育基(4)下圖表示不同醋化醋桿菌接種量(5%、10%、15%)與醋酸發酵的關系，據圖推斷，下列敘述中錯誤的是()A．發酵液中的醋化醋桿菌進行需氧呼吸B．培育時間越長，培育液的pH越低C．接種后20h，接種量為5%的醋酸產量最少，主要是因為發酵速度較慢D．接種后70h，接種量為15%的醋酸產量最少，與菌體生長繁殖消耗較多養分物質有關答案(1)果膠95%乙醇(2)停止產生氣泡虹吸法16%(3)C(4)B解析(1)圖中乙過程可以用果膠酶分解果膠，有利于生產果汁。可分別取等量渾濁的梨汁和澄清梨汁，各加入等量的95%乙醇，溶解有機物。(2)酒精發酵，可以產生二氧化碳和酒精，因此發酵完畢的標記是停止產生氣泡。待沉淀后，可用虹吸法將果酒取出，培育液酒精濃度超過16%時，酒精濃度太高，酵母菌會死亡。(3)醋化醋桿菌屬于異養好氧菌，因此培育基中須要有有機碳源、有機氮源和無機鹽，要用液體培育基來培育該微生物。(4)醋化醋桿菌屬于需氧型細菌，A正確；隨著培育時間的延長，醋酸含量越來越高，會抑制醋化醋桿菌的活性，最終醋酸含量保持不變，培育液的pH保持不變，B錯誤；接種量為5%的醋酸，繁殖速度慢，因此發酵速度較慢，C正確；接種量為15%的醋酸，其發酵速度快，養分物質消耗快，因此接種后70h，接種量為15%的醋酸產量最少，D正確。

4．(2024·浙大附中全真模擬)我國水果生產發展快速，由于收獲的季節性強，易造成積壓，腐爛變質，為了解決上述問題且滿意不同人群的需求，可以將水果加工制作成果汁、果酒、果醋等。在果汁生產中要用到果膠酶，某生物探討小組為了探究果膠酶的某些特性，進行了如下試驗：試驗方法：按如圖所示的依次進行操作。試驗結果：比照組與試驗組進行了相同時間的試驗，結果如下圖所示：(1)①圖2中自變量是溫度，除此之外還可用來表示。A．酶的濃度 B．蘋果泥的量C．水的加入量 D．pH②圖中的縱坐標還可用來表示。③試驗小組變更了試驗條件后重復做以上試驗，得到曲線乙，蘋果汁的澄清度最高點對應的橫坐標是同一位置的緣由是。④步驟b中在果膠酶和蘋果泥混合前，將兩者分裝在不同試管中，恒溫的目的是。(2)甲、乙兩位同學將水果榨成汁后分別裝入相應的發酵瓶中，在溫度等相宜的條件下進行發酵，如下圖所示。①在排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連是為了。②請找出圖中試驗操作的錯誤：甲圖中的錯誤是，乙圖中的錯誤是。(3)用酵母菌使葡萄汁產生葡萄酒，當酒精含量達到12%～16%時，發酵就停止了。下列有關敘述不正確的是()A．酒精對酵母菌有毒害作用，后期細胞生命活動減弱B．產生酒精的同時也有CO2生成，所以發酵過程中需適時擰松瓶蓋放氣C．產物積累使pH值下降，同時養分物質削減，種群數量下降D．氧氣過少導致其無法呼吸，細胞中無法合成ATP答案(1)①D②蘋果汁的體積③同一種酶的最適溫度是肯定的，不會因酶的濃度、底物的量的不同而變更④保證底物和酶在混合時的溫度是相同的，避開底物和果膠酶混合時影響混合物的溫度，從而影響果膠酶的活性(2)①防止空氣中的微生物污染發酵瓶②未夾住發酵瓶的進氣管瓶中發酵液過多，沉沒了排氣管在瓶內的管口(3)D解析(1)①果膠酶的活性受溫度、pH等條件的影響，而與底物的量、酶的濃度和水的加入量沒有關系。②衡量試驗結果的指標有兩種：一是果汁的量，另一個是果汁的澄清度。③每一種酶都有一個最適溫度和最適pH值且該值恒定，因此變更了試驗條件后蘋果汁的澄清度最高點對應的橫坐標是同一位置。④為了保證明驗在相應溫度下進行，必需使酶和底物分別保溫達到要求后再混合。(2)①在排氣口通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連是為了防止空氣中的微生物污染發酵瓶。②由圖可知，甲圖沒有夾住發酵瓶的進氣口，乙圖瓶中發酵液過多，沉沒了排氣管管口，無法排氣。課時訓練一、選擇題1．下圖為某同學設計的釀制蘋果醋的基本流程圖和發酵裝置示意圖。下列相關分析正確的是()A．①過程要先切塊后清洗，以削減雜菌的污染B．②過程加入果膠酶可以提高蘋果的出汁率C．③過程發酵所用酵母菌無具膜結構的細胞器D．④過程須要將發酵裝置中的充氣口開關關閉答案B解析①過程要先清洗后切塊，以削減雜菌的污染，A項錯誤；植物細胞有細胞壁的愛護，破壞細胞壁須要纖維素酶和果膠酶，B項正確；酵母菌是真核生物，含有具膜細胞器，如線粒體等，C項錯誤；醋化醋桿菌是好氧菌，因此發酵裝置中的充氣口開關應開啟，D項錯誤。2．用酵母菌釀酒的主要階段為：加料、接種、通氣培育、密封發酵。從接種后到密封前這一階段，酵母菌種群數量變更的曲線為()答案C解析接種后進行通氣培育，酵母菌在有氧條件下大量繁殖，密封發酵后酵母菌起先進行厭氧呼吸產生酒精，隨著酒精和二氧化碳等代謝產物的積累，酵母菌種群數量增長緩慢，故從接種后到密封前這段時間內酵母菌種群數量呈邏輯斯諦增長，C正確。3．(2024·溫州中學期末測試)亞硝酸鹽可與對氨基苯磺酸反應，再與N-1-萘基乙二胺偶聯，其產物顏色是()A．紅黃色 B．橙黃色C．紫紅色 D．藍色答案C解析在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺偶聯形成紫紅色產物。4．某愈傷組織在如圖甲所示的培育基中培育一段時間后得到如圖乙所示的結構。經分析可知該培育基中()A．細胞分裂素多，生長素少B．細胞分裂素少，生長素多C．細胞分裂素和生長素的用量相等D．只有生長素答案B解析從圖乙中可以看出，該培育基有利于生根且抑制芽的形成，所以可推斷該培育基中生長素多，細胞分裂素少。

二、非選擇題5．已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關。為了測定不同泡制天數泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學設計了一個試驗，試驗材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數的泡菜濾液等。請回答相關問題：(1)請完善下列試驗步驟。①標準管的制備：用和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管。②樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取肯定量的，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管。③將每個分別與系列標準管進行比較，找出與樣品管顏色深淺的標準管，該管中亞硝酸鈉含量即代表樣品管中的亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。(2)下圖表示的是泡菜中含量變更趨勢。(3)泡菜制作過程中產酸的細菌主要是(填“醋化醋桿菌”或“乳酸菌”)。(4)三壇泡菜分別在腌制過程中的第3、5、7、9、11、13天分別對食鹽濃度為4%、6%、8%的泡菜做了亞硝酸鹽含量的檢測，得到以下數據：食鹽濃度發酵天數1號壇4%2號壇6%3號壇8%第3天1.61.20.5第5天3.25.52第7天3.84.01.8第9天3.51.81.6第11天3.41.21.5第13天3.21.21.2發酵溫度：13～15℃單位：mg/kg請依據表中數據，對泡菜的制作提出兩條建議：。答案(1)①不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液②不同泡制天數的泡菜濾液③樣品管相同(相近)(2)亞硝酸鹽(3)乳酸菌(4)泡菜腌制時間最好長于13天；適當地增加食鹽的濃度6．天津獨流老醋歷史悠久、獨具風味，其生產工藝流程如下圖。eq\x(淀粉類原料)eq\o(→,\s\up7(糖化))eq\x(葡萄糖)eq\o(→,\s\up7(酒精發酵))eq\x(成熟酒醅)eq\o(→,\s\up7(醋酸發酵))eq\x(成熟醋醅)eq\o(→,\s\up7(處理))eq\x(成品醋)請回答下列問題：(1)在糖化階段添加酶制劑須要限制反應溫度，這是因為酶。(2)在酒精發酵階段，需添加酵母菌。在操作過程中，發酵罐先通氣，后密閉。通氣能提高的數量，有利于密閉時獲得更多的酒精產物。(3)在醋酸發酵階段，獨流老醋采納獨特的分層固體發酵法，發酵30天。工藝如下：①發酵過程中，定期取樣測定醋化醋桿菌密度變更，趨勢如下圖。據圖分析，與顛倒前相比，B層醋化醋桿菌在顛倒前后密度變更的特點是，由此推想，影響醋化醋桿菌密度變更的主要環境因素是。②乳酸含量高是獨流老醋風味獨特的重要成因。發酵過程中，發酵缸中層的醋醅有利于乳酸菌繁殖，積累乳酸。③成熟醋醅中乳酸菌的種類明顯削減，主要緣由是發酵后期養分物質消耗等環境因素的變更，加劇了不同種類乳酸菌的，淘汰了部分乳酸菌種類。答案(1)在最適溫度條件下催化實力最強(2)酵母菌(3)①先快速增長后趨于穩定氧氣、養分物質、pH②顛倒前的B層和顛倒后的A(或不翻動，或下)③種間競爭(或競爭)解析(1)酶的活性受溫度影響，最適溫度下，酶的活性最高。(2)通氣會促進酵母菌需氧呼吸，促進酵母菌的繁殖，有利于密閉時獲得更多酒精產物。(3)①據圖，B層醋化醋桿菌為邏輯斯諦增長，變更趨勢為先快速增長后保持穩定。影響B層的主要環境因素為氧氣、pH和養分條件。②乳酸菌為厭氧菌，應當是下層有利于其繁殖，如A、B層顛倒前發酵缸的B層，A、B層顛倒后發酵缸中的A層。③不同種類乳酸菌之間為競爭關系。7．(2024·慈溪中學質檢)當今能源緊缺，污染嚴峻，酒精成為備受關注的“綠色能源”。利用玉米等植物秸稈生產燃料酒精已成為大勢所趨。請回答下列問題：(1)利用植物組織培育可實現玉米的大規模快速繁殖，圖解如下。由外植體通過植物組織培育技術培育成完整植株，這項技術利用了的原理。圖中A、B代表、；過程Ⅰ、Ⅱ分別表示和。eq\x(離體幼莖)eq\o(→,\s\up7(Ⅰ))eq\x(A)eq\o(→,\s\up7(Ⅱ))eq\x(B)→eq\x(植株)(2)在植物組織培育中關于消毒和滅菌操作的敘述，正確的是。A．只要不碰外植體，操作者的雙手可以不消毒B．離體幼莖可以用酒精消毒C．鑷子等器械需用酒精滅菌D．接種后培育基需用高壓蒸汽滅菌(3)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是志向的酒精發酵菌種，對野生酵母菌進行誘變后通過篩選可以得到具有這些特性的突變菌，誘變及篩選過程如下：第一步：野生菌液體培育一段時間后接受紫外線照耀誘變處理。其次步：制備選擇培育基。在基本培育基的基礎上，還需，加瓊脂后滅菌，制成固體平板。第三步：將紫外線照耀后的菌液稀釋涂布平板。第四步：依據篩選出突變菌。(4)隨著生物技術的發展，生物學家可以“創建”出某些特定的、以前從未自然存在過的生物體。有科學家將其他生物組織的基因植入細菌，設計并造出一種獨特的大腸桿菌，能夠將蔗糖轉化為石油燃料，這種可遺傳變異來源于。答案(1)植物細胞全能性愈傷組織胚狀體脫分化再分化(2)B(3)添加高濃度蔗糖(或葡萄糖)、調低pH(加酸)是否能在該培育基上生長(4)基因重組解析植物組織培育過程中要求一系列的消毒、滅菌處理，并且進行無菌操作，外植體可以用70%的酒精消毒；操作者的雙手必需用酒精消毒；鑷子等器械需用火焰灼燒滅菌；接種后的培育基不能再用高壓蒸汽滅菌，否則接種的組織細胞會死亡。8．(2024·舟山中學高三期中)微生物與人類的生活有著親密的聯系，請回答下列有關問題：(1)在果醋、泡菜和果酒的制作過程中，均利用相應微生物的代謝特點進行條件限制，其中始終須要供應氧氣的是制作；在楊梅酒的制備過程中，為了提高楊梅的出汁率，在壓榨前可加入肯定濃度的淀粉酶和果膠酶，其中果膠酶可來自；泡菜腌制過程中和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他養分物質進行發酵。(2)依據微生物的特點，可以利用相應的培育基進行分別或培育，例如用僅以尿素為氮源的培育基可分別能產生酶的微生物，在配制培育基時，要加入尿素和酚紅指示劑，其中尿素用滅菌，經培育后菌落四周會出現色環帶。(3)與LB全養分培育基中的菌落相比，以尿素為氮源的培育基中的菌落數。A．多 B．少C．相等 D．幾乎為零(4)利用固體培育基可以進行微生物培育和植物組織培育，兩者的培育基明顯不同的是后者。A．須要添加瓊脂 B．須要添加有機物C．須要添加激素 D．須要滅菌處理答案(1)果醋黑曲霉(或蘋果青霉)假絲酵母(2)脲G6玻璃砂漏斗紅(3)B(4)C解析(1)由于醋化醋桿菌是需氧型生物，因此其中始終須要供應氧氣的是果醋的制作；在楊梅酒的制備過程中，為了提高楊梅的出汁率，在壓榨前可加入肯定濃度的淀粉酶和果膠酶，其中果膠酶可來自黑曲霉(或蘋果青霉)等微生物；泡菜腌制