DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

法醫(yī)物證學內容

親子關系鑒定個體識別DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用親子關系鑒定親權糾紛（離婚案）移民案強奸致孕案拐賣丟失兒童案（醫(yī)院中）嬰兒錯抱案（計劃生育中）超生與否的鑒定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

個體識別

兇殺案強奸案碎尸案石蠟包埋組織塊調錯案DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用法醫(yī)物證學鑒定方法血清學方法檢驗紅細胞血型、白細胞血型、紅細胞酶型、血清型DNA檢驗技術

DNA指紋技術、PCR擴增技術DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用血清學方法的局限性檢材需要量大，且對時限要求較高（HLA分型要求采血后16--24小時內必須檢驗）不適用于陳舊、微量檢材鑒別能力有限，不宜用于同一認定只能否定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA檢驗DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA核DNA

線粒體DNADNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用核DNA與線粒體DNA

NucleusMitochondriaDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用mtDNA結構D-loopDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用D-環(huán)區(qū)

（displacementloop)HV1HV2在線粒體DNA基因組中占5-7%長約1100bpHV1:29-408bp

HV2:15996-16401bpDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用母系遺傳DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

mtDNA毛發(fā)骨骼牙齒DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用細胞細胞核

核DNADNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA多態(tài)性序列多態(tài)性

(mtDNA、DQ、PM）片段長度多態(tài)性（VNTR、STR）DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用片段長度多態(tài)性VNTR位點（小衛(wèi)星）重復單位17-170bpSTR位點（微衛(wèi)星）重復單位2-7bp長度相差1個重復單位就構成一個等位基因DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用重復序列

(在人類基因組所占比例為20-30%)

散在重復序列:

單拷貝DNA序列散布于基因組中在人類基因組中占10%

串聯(lián)重復序列:

多個特定序列首尾相連而成(衛(wèi)星DNA)在人類基因組中占

15-20%倒位重復序列DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用56可變串聯(lián)重復數(shù)目41234123DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA多態(tài)性檢測方法DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA多態(tài)性檢測方法RFLP（DNA指紋技術）（VNTR位點）PCR

PCR產(chǎn)物序列多態(tài)性檢測（DQ、PM）

PCR產(chǎn)物長度多態(tài)性檢測（VNTR、STR）DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA檢測方法比較

RFLP

信息量大費時（1~2周）費力>50ngDNADNA不能降解

PCR

快速省力<1ngDNA適用于降解DNA復合擴增檢測自動化DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用RFLP技術

DNA指紋

DNA紋印DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA指紋使用一個含有多拷貝數(shù)核心序列的多基因座DNA探針（如33.6探針或33.15探針），在低強度條件下（較低溫度、較高鹽濃度）同時與許多VNTR基因座（約1000個）雜交，經(jīng)電泳顯示其中50-100個基因座的雜交結果，獲得由一系列DNA片段譜帶組成的圖像，稱DNA指紋。可進行同一認定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA紋印使用位點特異性探針，在高強度條件下（較高溫度、較低鹽濃度）與特定的位點進行雜交，獲得DNA紋印。雜合子顯示2條譜帶，純合子顯示1條譜帶。

DNA紋印特異性強，4-6個單位點探針可達到同一認定的目的。DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用操作流程限制酶DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PolymeraseChain

ReactionDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PCR檢測序列多態(tài)性 (斑點)DQPolymarker長度多態(tài)性 （電泳條帶)VNTR’s(D1S80,amelogenin)STR’sDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DQa特征DQa定位于第6號染色體擴增片段長242bp人群中存在7個等位基因1.1,1.2,1.3234.1,4.2/4.3DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DQa基因型1.1,1.11.2,1.21.3,1.32,23,34.1,4.14.2/4.3,4.2/4.31.1,1.21.21.31.3,22,33,4.14.1,4.2/4.31.1,1.31.2,21.3,32,4.13,4.2/4.31.1,21.2,31.3,4.12,4.2/4.31.1,31.2,4.11.3,4.2/4.31.1,4.11.2,4.2/4.31.1,4.2/4.328種DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用反向斑點雜交DQa分型1234C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3樣本DNA的擴增產(chǎn)物與互補序列探針在膜上雜交,顯示藍色斑點DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DQa1234C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3基因型:2,3DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DQa1234C1.11.21.341.3Allbut1.34.14.2/4.3基因型:1.2,4.1DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Multiplexing復合PCR擴增DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Polymarker(PM)LocusAllelesGenotypesLDLRA,BAA,AB,BBGypAA,BAA,AB,BBHBGGA,B,CAA,BB,CCAB,AC,BCD7S8A,BAA,AB,BBGcA,B,CAA,BB,CCAB,AC,BC972種可能的基因型DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PM檢測試劑條SABABABCABABCPOLYMARKERLDLRGcD7S8HBGGGypADNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用POLYMARKERLDLRBB,GYPAAA,HBGGABD7S8BB,GcBBSABABABCABABCDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用辛普森（OJSimpson）被控殺人案

（1994-1995，“世紀審判”）基因座第29號血痕辛普森辛普森前妻GoldmanDQa1.1,1.2,41.1,1.21.1,1.11.3,4LDLRA、BABABABGYPAA、BBBABAAHBGGA、B、CBCABAAD7S8A、BABABBBGCA、B、CBCACAADNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PCR檢測長度多態(tài)性位點RepeatPolymorphismsDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用擴增片段長度多態(tài)性D1S80VNTR(核心重復單元為16bp)電泳分離擴增產(chǎn)物等位基因梯度標準378種可能的基因型DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

D1S80

K1

Q1-M Q1-FQ3

K3(Suspect)

(Cig.butt)

(Victim)24232221201918171614YX24232221201918171614YX17,18DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用STRsDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用ShortTandemRepeats

2-7bp核心序列的串聯(lián)重復

>30,000個每10kb存在一個STR位點擴增片段為100-400bpDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用重復單元的長度Dinucleotides:Trinucleotides:Tetranucleotides:Pentanucleotides:2CA3AAT4AGAT5AATGTDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用法醫(yī)學上使用

四核苷酸重復序列

二、三核苷酸重復序列會出現(xiàn)非特異性PCR產(chǎn)物三核苷酸重復序列與疾病有關四核苷酸重復序列位點比二、三核苷酸重復序列的等位基因更容易彼此區(qū)分DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用TH01位點

(AATG)5-115169bp*6173bp7177bp8181bp9185bp10189bp11193bp等位基因:*AmpFlSTRDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用13核心

STR位點FGA VWA TH01 TPOX CSF D3S1358 D5S818 D7S820 D8S1179D13S317 D16S539 D18S51 D21S11

DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用STR位點檢測步驟檢材DNA的提取STR位點復合擴增對擴增產(chǎn)物進行電泳分析，用GeneScan軟件掃描通過Genotyper軟件分析擴增產(chǎn)物的基因型DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用D18S51D21S11D8S1179Amelogenin13個STR位點復合擴增體系AmpFlSTRProfilerPlusFGAvWAD3S1358D7S820D13S317D5S818D7S820CSF1P0TPOXTH01AmelogeninD16S539D3S1358AmpFlSTRCOfilerDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用STR位點檢測結果的存檔DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用STR位點識別概率(PI)n=200U.S.CaucasianAfricanAmericann=195ProfilerPlus1/96billion1/68billionCOfiler1/840,0001/3.2millionProbabilityofIdentity1/1014DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PCR技術在法醫(yī)學上的應用

（檢材類型）血液、血痕、肌肉、毛發(fā)、羊水、精液、精斑、混合斑、骨骼、唾液斑、牙齒、石蠟包埋組織塊、尿液DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用PCR技術在法醫(yī)學上的應用

（案件類型）刑事案件的鑒定（兇殺案、強奸案、拐賣兒童案、碎尸案、搶劫案、盜竊案）民事案件的鑒定（親權糾紛、移民案、嬰兒錯抱案、石蠟包埋組織塊調錯案、超生與否的鑒定）其它：骨髓移植成功與否的鑒定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用強奸致孕案

（血痕檢材)DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用強奸致孕案

（血液、羊水檢材)

受害人(孕婦)胎兒羊水嫌疑人(父?)

D3S135816，1616，1616，17VWA17，1816，1716，16

FGA20，2423，2419，23D8S117914，1413，1413，16D21S1128，3029.2,3029.2，29.2

D18S5117，2113，1712，13D5S81810，1010，119，11D13S3178，118，99，10D7S82012，128，128，10D16S5399，1210，1210，11THO19，96，96，8TPOX9，118，98，8CSF1PO11，1212，1310，13DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用強奸案

（混合斑檢材)DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用兇殺案

水果刀上的血跡嫌疑人血液D3S135814，1714，17VWA14，1814，18FGA20，2220，22D8S117913，1613，16D21S1128,3228,32D18S5116，1916，19D5S81811，1211，12D13S3178，118，11D7S82012，1212，12D16S53911，1311，13THO16，86，8TPOX8，118，11CSF1PO9，109，10

（偶合率小于10-9

）DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用碎尸案

位點頭顱

失蹤者之父失蹤者之子失蹤者之兄失蹤者之姐

D3S135816，1715，1615，1715，1715，15VWA15，1814，1815，1814，1616，18FGA21，2625，2623，2624，2624，25D8S117914，1511，1414，1411，1513，14D21S1129，32.229，2930，32.229，3029，30D18S5115，2213，1515，2213，1713，17D13S3179，108，910，129，109，10D7S8208，118，1211，118，118，12D16S5399，119，1011，1110，1110，11THO19，99，9.39，108，9.38，9TPOX8，98，88，98，98，8CSF1PO10，1210，1010，1010，1210，12DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用盜竊、拐賣嬰兒案

兒子？父親D3S135814，1715，16VWA14，1814，17FGA20，2423，23

D8S117912，1413，15D21S1130,3130,32.2D18S5114，14

16，19D5S81812，1311，11D13S3178，89，11D7S82010，1211，11D16S5399，1112，13THO16，99，9TPOX8，98，8CSF1PO12，129，10DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用嬰兒錯抱案母親孩子？父親D3S135816，1716，1615，15VWA16，1818，1916，17FGA22，24

19，23

20，25

D8S117912，1412，1411，13D21S1129,31.229,31.228，30D19S43314，1513，1314，15.2

D18S5113，2219，2016，19D2S133820，2417，2019，19D7S8208，11

10，128，10D16S5399，1110，129，13

THO19，9

8，88，9TPOX8，118，811，11CSF1PO12，1211，1210，13

DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用被燒尸體肌肉塊鑒定

母親肌肉塊(兒子?)父親D3S135815，1817，1816，17VWA16，1818，18

17，18FGA22，2522，2323，26D8S117912，1210，1210，10D21S1130,31.2

30,33.230,33.2D18S5114，1916，19

13，16D5S81810，1210，1212，12D13S31710，128，108，8D7S8208，1211，1210，11D16S5399，109，1210，12THO17，97,9.36，9.3TPOX8，99,118，11CSF1PO12，1310，1210，10DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用離體牙的檢驗(個體識別案)

牙1、牙2、牙3受害人D3S135816，1616，16VWA18，1918，19FGA22，2422，24D8S117912，1412，14D21S1129,31.229,31.2D18S5113，1313，13D5S81811，1211，12D13S3178，98，9D7S8208，88，8D16S53910，1010，10THO17，87，8TPOX8，118，11CSF1PO11，1211，12DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

雙親家庭的親子鑒定

母親兒子父親D3S135815，1817，1817，20VWA14，1717，18

14，17FGA22，2523，2523，25D8S117913，1614，1615，15D21S1130.2,31.228,31.230,31D18S5119，1919，2413，14D5S81810，1110，1012，12D13S31712，1212，128，12D7S82011，1212，1210，11D16S5399，1111，1210，13THO17，88，99，9.3TPOX9，1111，118，11CSF1PO12，1212，1210，12DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用

單親家庭的親子鑒定

(檢測系統(tǒng)的非父排除率宜達到99.95%以上)女兒父親D3S135814，1616，16VWA14，1717，17FGA22，2323，24D8S117915，1614，14D21S1128,3030,32D18S5114，1512，13D5S81811，119，10D13S3179，1110，11D7S8208，1110，12D16S53911，1310，11THO16，77，8TPOX9，118，11CSF1PO12，1211，13DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA檢驗用于骨髓移植

(若親子鑒定的當事人曾接受過骨髓移植，取樣時宜采用口腔拭子作為檢材）父親兒子（移植前）兒子（移植后）D3S135815，1814，18

15，18

VWA17，1816，18

17，18

FGA23，2622，23

23，26

D8S117912，1212，1412，12

D21S1129，3229,3029，32

D18S5113，1614，16

13，16

D5S81811，1211，1111，12

D13S3178，88

，108，8

D7S82011，128，11

11，12

D16S53911，1311，1211，13

THO16，96，86，9

TPOX8，88，118，8

CSF1PO12，1311，1212，13DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用性別染色體上STR位點的檢測

（X-STR）以下18個X-STR位點在法醫(yī)學上有重要應用價值（認親）DXS6807（GATA52B03）DXS9895（GATA124B04）DXS8378（GATA119E07）DXS9902（GATA175D03）DXS7132（GATA72E05）ARADXS6800（GATA31D10）DXS9898（GATA126G01）DXS6789（GATA31F01）DXS101DXS7424（btk5）DXS7133（GATA81B07）GATA172D05HPRTBDXS7423DXS8377DXS11001DXS981DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用性別染色體上STR位點的檢測

（Y-STR）應用價值廣泛：強奸案中混合斑的鑒定認親（祖孫、叔侄、兄弟等）Europeanloci:19,385I/II,389I,389II,390,391,392,393,YCAIIa/bAdditionalloci:426,A7.1,H4,388,437,438,439,447,448DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Yfiler在同胞兄弟關系和強奸案鑒定中的應用

DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Y-STR檢測的意義

Y-STR：呈父系遺傳特征適合于：同胞關系鑒定父-子單親鑒定祖孫關系鑒定叔侄關系鑒定混合斑中男性組份的鑒定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Y-STR復合擴增體系DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Yfiler各基因座特征

五核苷酸重復序列

六核苷酸重復序列

四核苷酸重復序列

三核苷酸重復序列基因座DYS438DYS448DYS437DYS390DYS635DYS19YGATAH4DYS439DYS391DYS389IDYS458DYS393DYS456DYS389IIDYS385DYS392DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用家系調查結果

（文獻資料）*突變率：2.8×10-3DYS458-16單倍型（父）DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DYS458-17單倍型（子）DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Locus父子DYS4561414DYS38911212DYS3902222DYS389II2828DYS4581617DYS191515DYS38513,1413,14DYS3931313DYS3911010DYS4391111DYS6352222DYS3921111YGATAH41111DYS4371616DYS4381010DYS4482020若僅發(fā)現(xiàn)一個基因座不吻合，不可作出排除結論。DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Y-STR基因座遺傳差異度

(GD)GD=1-∑p2（中國漢族）Y-PLEX5+Y-PLEX6：TGD=0.999996Yfiler：

TGD=0.999999996DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Y-STR基因座的法醫(yī)學價值

混合斑檢驗父-子單親鑒定同胞關系鑒定祖孫關系鑒定叔侄關系鑒定DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用案例委托事由:同胞關系鑒定案情:

當事人為兩名男性(不同母親所生)，一名為韓國國籍,一名為中國國籍,彼此以兄弟相稱,無其他兄弟姐妹。現(xiàn)因移民需要，兩人委托進行DNA檢驗,以證明兩人為同父兄弟。DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用常染色體STR檢測鑒定同胞關系的局限性

——相關文獻報道用Identifiler試劑盒對50對同胞和50對非同胞進行檢測，計算累積的同胞關系指數(shù)（combinedsibshipindices,CSIs)。結果發(fā)現(xiàn):

兩個同胞之間的CSIs值有的小至10以下，有的大至10億以上。非同胞之間的CSIs值則為4.5×10-8~0.12。存在同胞關系的兩個個體約在40%的基因座具有相同的基因型，約在10%的基因座具有完全不同的等位基因。兩個無關個體約在6%的基因座具有相同的基因型，約在45%的基因座具有完全不同的等位基因。兩名個體無論是否具有同胞關系，約在50%的基因座具有一個相同的等位基因。DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用檢測系統(tǒng)弟兄共同的等位基因的頻率同胞關系指數(shù)D8S117912,1612,150.12871.22D21S1130,3130,31.20.27930.70D7S82011,128,90.25CSF1PO12,1210,120.36860.93D3S135814,1616,170.32770.63THO16,76,90.09931.51D13S3178,1111,120.23680.78D16S5399,119,120.2840.69D2S133818,2318,250.14381.12D19S43313,13.213,150.23130.79vWA17,1814,160.25TPOX9,99,110.132.17D18S5113,1613,190.19040.91D5S8189,1111,120.3220.64FGA23,2322,230.22371.37累積同胞關系指數(shù)0.04

同胞關系概率0.03703本案例STR檢測分析結果DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用基因座弟兄ControlDNA007DYS456161615DYS389I121213DYS390242424DYS389II272729DYS458171717DYS19141415DYS385a/b13-1913-1911-14DYS393121213DYS391101011DYS439111112DYS635202024DYS392141413YGATAH4121213DYS437151515DYS438111112DYS448202019本案例Y-STR檢測結果DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用檢測結果（FAM標記）DYS456DYS389ⅠDYS390DYS389ⅡDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用檢測結果（VIC標記）DYS458DYS19DYS385a/bDNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用檢測結果(NED標記)DYS393DYS391DYS439DYS635DYS392DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用檢測結果（PET標記）YGATAH4DYS437DYS438DYS448DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用Y-STR位點檢測結果的存檔DNA分析技術在法醫(yī)物證學上的應用DYS438DYS392DYS385a/bDYS391DYS392DYS438DYS390DY