學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精學必求其心得，業必貴于專精課后集訓基礎達標1。凝膠色譜法中所用的凝膠的化學本質大多是……(）A。糖類化合物B。脂質C.蛋白質D。核酸解析：凝膠實際上是一些微小的多孔球體,這些微小的球體,大多是由多糖類化合物構成的.答案:A2.分離血紅蛋白溶液時,離心后試管中的溶液分四層，血紅蛋白在第_______層(）A。一B。二C.三D。四解析：離心后的第一層是有機溶劑，第二層是脂類物質，第三層是血紅蛋白，第四層是紅細胞破碎物。答案：C3.凝膠色譜法分離蛋白質的依據是（）A。對其他分子的親和力B.溶解度C。所帶電荷多少D.相對分子質量的大小解析:凝膠色譜法分離蛋白質的依據是相對分子質量的大小。相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內部通道，路程長，移動慢。答案：D4.血紅蛋白由條肽鏈組成（）A.2B。4C.3D。5解析:血紅蛋白由四條肽鏈組成，即兩條α肽鏈和兩條β肽鏈.答案:B5.將攪拌好的混合液轉移到離心管中,離心后，可以明顯看到試管中的溶液分為4層，其中第3層是…（）A。無色透明的甲苯層B.脂溶性物質的沉淀層C.血紅蛋白的水溶液D.其他雜質的暗紅色沉淀物解析：試管中的第一層是有機溶劑，第二層是脂類物質，第三層是血紅蛋白溶液，第四層是紅細胞破碎物沉淀.答案:C6。的蛋白質能進入凝膠內部通道…（）A.相對分子質量大的B.吸附性高的C.相對分子質量小的D。溶解度低的解析：當相對分子質量不同的蛋白質通過凝膠時,相對分子質量較小的蛋白質容易進入凝膠內部的通道。答案：C7.透析時取血紅蛋白溶液裝入透析袋內，放入緩沖溶液中（）A。2mLB.1。5mLC.0。5mLD.1mL解析：考查樣品處理的操作。透析時，取1mL的血紅蛋白溶液裝入透析袋中。答案：D8.洗滌紅細胞時,分離所用方法為（）A.低速長時間離心B.低速短時間離心C。高速長時間離心D.高速短時間離心解析：洗滌紅細胞的目的是去除雜蛋白，以利于后續步驟的分離純化，分離時采取低速短時間離心.答案：B9.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法中加入SDS的作用是（）A。增大蛋白質的相對分子質量B。改變蛋白質的形狀C。掩蓋不同種蛋白質間的電荷差別D。減少蛋白質的相對分子質量解析：SDS（十二烷基硫酸鈉）-聚丙烯酰胺凝膠電泳法加入SDS的目的是使蛋白質完全變性，SDS所帶負電荷的量大大超過了蛋白質分子原有的電荷量,因而掩蓋了不同蛋白質間的電荷差別。答案：C10.制作凝膠色譜柱時，橡皮塞頂部凹穴內插入的移液管的部位及長度是（）A.移液管頭部5cmB.移液管尾部5cmC。移液管頭部3cmD.移液管尾部3cm解析:凝膠色譜柱制作時,將橡皮塞上部用刀切出鍋底狀的凹穴，將0。5mL的移液管頭部切下5cm長的一段，插入橡皮塞孔內。答案：A綜合運用11。科學家研究發現,人的血液pH通常在7。35～7。45之間變化，其變化范圍很小，這是由于血液中含有許多對緩沖物質，如H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4等，其中H2CO3/NaHCO3在血液中濃度最高,緩沖能力最強，對維持血液正常最重要。(1)當人體內堿性物質(如Na2CO3）增加時,H2CO3/NaHCO3緩沖對中的_______就與之作用，生成_______，過多的該物質可由腎臟排出,從而維持pH基本不變。（2)若人體內酸性物質（如無氧呼吸產物乳酸）增加時,則該緩沖對中的_______就會與乳酸作用，從而維持pH基本不變.解析:生物體內進行的各種生物化學反應都是在一定的pH下進行的，血液的pH之所以保持在7.35～7.45之間，是因為血液中存在緩沖物質，從而調節血液的pH.答案：（1)H2CO3NaHCO3(2）NaHCO312.對血紅蛋白的研究結果表明，血紅蛋白實際上是由珠蛋白、原卟啉和二價鐵離子(Fe2+）所組成的結合蛋白質。有4條肽鏈各結合一個輔基即血紅素,O2結合于Fe2+上，血紅蛋白與氧疏松結合形成氧合血紅蛋白(HbO2），這種氧合作用于氧分壓高時容易進行，于氧分壓低時易于解離。紅細胞結合和攜帶O2的過程并不影響二價鐵離子,也就是說不使之氧化為三價鐵離子（Fe3+無攜帶O2的能力）。CO與Hb的親和力大于O2，結合成HbCO后不能重新分離，致使Hb喪失運輸O2和CO2的機能,此稱一氧化碳中毒即煤氣中毒。（1)用凝膠色譜法分離出血紅蛋白時，待_________接近色譜柱底端時，才用試管收集。血紅蛋白因含_______而呈現紅色。（2)要使血紅蛋白從紅細胞中釋放出來，可選用_____________________________的方法。（3)紅細胞具有運輸氧的功能，是因為具有_________________________________的特性.(4)亞硝酸鹽為強氧化劑，進入人體后，可使血紅蛋白失去運輸氧的功能,導致組織缺氧，其可能的原因是。解析:考查的知識點包括：凝膠色譜法分離蛋白質的操作步驟和方法、血紅蛋白的分離與作用、亞硝酸鹽對人體的危害。答案：（1）紅色區帶血紅素(2)將紅細胞置于蒸餾水中,加體積分數為40%的甲苯，并攪拌使之破裂（3）紅細胞中的血紅蛋白與氧在氧分壓高時容易結合,在氧分壓低時又容易分離（4）亞硝酸鹽可使血中低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白13.(2006山東濰坊統考)凝膠色譜技術是20世紀60年代初發展起來的一種快速而又簡單的分離技術,由于設備簡單、操作方便、不需要有機溶劑、對高分子物質有很高的分離效果，目前已經被生物化學、分子生物學、生物工程學、分子免疫學以及醫學等有關領域廣泛采用，不但應用于科學實驗研究，而且已經大規模地用于工業生產。參照右上圖,完成問題：（1）a、b均為蛋白質分子，其中先從層析柱中洗脫出來的是________,原因是。(2）自己制作凝膠色譜柱時，在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結構可由______替代。(3)裝填凝膠色譜柱時，色譜柱內不能有氣泡存在，原因是________________________。（4）若選用SephadexG100，則“G"表示,100表示__________________。(5)洗脫用的液體應盡量與浸泡凝膠所用的液體______(相同/不同)，洗脫時，對洗脫液的流速要求是______。解析：考查凝膠色譜法分離蛋白質的原理、色譜柱的制作材料、裝填色譜柱的注意事項、洗脫液的使用等知識。答案：（1)aa相對分子質量大，無法進入凝膠內部的通道，只能在凝膠外部移動,路程較短，移動速度較快（2）尼龍網和尼龍紗（3）氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質的洗脫次序，降低分離效果（4)凝膠的交聯程度、膨脹程度及分離范圍凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸水10g（5)相同保持穩定14.（2006山東濟南統考)紅細胞含有大量血紅蛋白,紅細胞的機能主要是由血紅蛋白完成的,血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2,我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請完成下列有關問題：(1)血紅蛋白提取和分離的程序可分為四步：______、______、______和______.（2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進行離心,收集血紅蛋白溶液。①加入檸檬酸鈉的目的是________________________。②以上所述的過程即是樣品處理，它包括、______、______收集血紅蛋白溶液。（3)收集的血紅蛋白溶液在透析袋中可以經過透析,這就是樣品的粗分離。①透析的目的是______________________________。②透析的原理是______________________________。（4）然后通過凝膠色譜法將樣品進一步純化，最后經SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳進行純度鑒定。①樣品純化的目的是__________________.②血紅蛋白有什么特點？。這一特點對進行蛋白質的分離有什么意義？。解析：這是一道綜合題，考查的知識點包括：血紅蛋白提取和分離的程序、加入檸檬酸鈉的目的、樣品的處理、凝膠色譜法純化的目的、血紅蛋白