…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線(xiàn)※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線(xiàn)…………○…………第=page22頁(yè)，總=sectionpages22頁(yè)第=page11頁(yè)，總=sectionpages11頁(yè)2024年華東師大版選修3生物下冊(cè)階段測(cè)試試卷346考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、某目的基因兩側(cè)的DNA序列所含的限制酶酶切位點(diǎn)如圖所示；下列可作該目的基因最佳載體的是。

A.B.C.D.2、限制酶a、限制酶b能將某線(xiàn)性DNA分子片段切割；其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.限制酶a與限制酶b發(fā)揮作用的化學(xué)鍵完全相同B.限制酶a與限制酶b切出的黏性末端能相互連接C.所有限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列都由6個(gè)核苷酸組成D.限制酶將該DNA分子切成2個(gè)片段需消耗2個(gè)水分子3、下列關(guān)于基因操作工具的敘述，正確的是A.并非所有目的基因都可用PCR方法獲取B.通常以抗生素合成基因作為標(biāo)記基因C.限制酶識(shí)別并在特定位置斷開(kāi)氫鍵D.DNA連接酶可將脫氧核苷酸連接成長(zhǎng)鏈4、羊瘙癢病是感染性蛋白粒子PrPSc引起的。某些羊體內(nèi)存在蛋白質(zhì)PrPc，但不發(fā)病。當(dāng)羊感染了PrPSc后，PrPSc將PrPc不斷地轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，導(dǎo)致PrPSc積累，從而發(fā)病。把患瘙癢病的羊組織勻漿接種到小鼠后，小鼠也會(huì)發(fā)病。下列分析合理的是（）A.動(dòng)物體內(nèi)的PrPSc可全部被蛋白酶水解B.患病羊體內(nèi)存在指導(dǎo)PrPSc合成的基因C.產(chǎn)物PrPSc對(duì)PrPc轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc具有反饋抑制作用D.給PrPc基因敲除小鼠接種PrPSSc，小鼠不會(huì)發(fā)病5、某同學(xué)在學(xué)習(xí)“細(xì)胞工程”時(shí)，列表比較了動(dòng)植物細(xì)胞工程的有關(guān)內(nèi)容，你認(rèn)為有幾處不正確（）。植物細(xì)胞工程動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段植物組織培養(yǎng)、植物體細(xì)胞雜交等動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和融合等特殊處理酶解法去除細(xì)胞壁胃蛋白酶處理得到細(xì)胞懸浮液融合方法物理方法、化學(xué)方法、生物方法物理方法、化學(xué)方法和生物方法典型應(yīng)用無(wú)病毒植物的培育、人工種子、種間植物雜交等單克隆抗體的制備等培養(yǎng)基區(qū)別所用的糖必須為葡萄糖所用的糖為葡萄糖且動(dòng)物血清不可缺少

A.0B.1C.2D.36、有性生殖過(guò)程中，一個(gè)卵細(xì)胞與一個(gè)精子成功融合后，通常不再與其他精子融合。我國(guó)科學(xué)家最新研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)卵細(xì)胞與精子融合后，卵細(xì)胞會(huì)特異性表達(dá)和分泌BF1和BF2這兩種蛋白質(zhì)，這兩種蛋白質(zhì)能避免受精卵再度與精子融合。下列敘述正確的是（）A.精子與卵細(xì)胞的識(shí)別和融合，與細(xì)胞膜的選擇透過(guò)性有關(guān)B.受精過(guò)程中，精子和卵細(xì)胞的隨機(jī)結(jié)合會(huì)導(dǎo)致基因重組C.多精入卵會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生雙胞胎甚至多胞胎D.BF1和BF2有利于維持受精卵中染色體數(shù)目的穩(wěn)定7、中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所首席科學(xué)家、動(dòng)物克隆與受精生物學(xué)學(xué)科帶頭人陳大元，曾主持科研攻關(guān)項(xiàng)目—“攀登”，進(jìn)行大熊貓的異種克隆。他們將大熊貓的體細(xì)胞核放入兔子的去核卵母細(xì)胞中，得到重構(gòu)胚，并使其成功發(fā)育成囊胚，標(biāo)志著異種核質(zhì)相容的問(wèn)題得到解決，異種克隆大熊貓邁過(guò)了第一道“坎”；然后至關(guān)重要的是選擇一種合適的“代孕母體”。如圖是該研究的理論流程圖。下列說(shuō)法正確的是（）

A.步驟甲、乙分別是指大熊貓?bào)w細(xì)胞核移植、胚胎收集B.誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素為促性腺激素釋放激素C.重構(gòu)胚發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于培養(yǎng)液D.步驟甲中的供體不需要同期發(fā)情處理8、下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎工程的敘述，正確的是A.乳腺細(xì)胞比乳腺癌細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)B.細(xì)胞核移植主要在同種動(dòng)物、同種組織的細(xì)胞之間進(jìn)行C.采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的D.牛胚胎移植時(shí)選擇有健康體質(zhì)和正常繁殖能力的供體牛9、以下不屬于利用物質(zhì)的良性循環(huán)技術(shù)的生態(tài)工程的是（）A.將農(nóng)作物秸稈“過(guò)腹還田”B.南方的桑基魚(yú)塘生態(tài)工程C.治坡、治溝與修梯田D.庭院中“蔬菜－雞－沼氣”循環(huán)評(píng)卷人得分二、填空題(共5題，共10分)10、生物學(xué)家利用基因工程技術(shù)通過(guò)生物反應(yīng)器生產(chǎn)人的血清蛋白。請(qǐng)根據(jù)相關(guān)知識(shí)回答下列問(wèn)題：

（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”是_______________________________

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是________

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是______

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)，說(shuō)明人和牛______11、自然條件下；奶牛的繁殖率非常低，一般一頭奶牛一年只能繁殖一頭牛犢。通過(guò)胚胎工程技術(shù)可以快速繁育優(yōu)良個(gè)體，其主要步驟如圖所示。回答下列問(wèn)題：

（1）從供體奶牛獲得的精子，需對(duì)其進(jìn)行___________處理才具有受精能力。

（2）通常奶牛每次只排出一枚卵母細(xì)胞，為使其超數(shù)排卵常使用____________激素處理；采集到卵母細(xì)胞后，在體外將其培養(yǎng)到___________期；使其成熟。

（3）步驟甲、乙分別指___________、___________。為篩選出具有優(yōu)良性狀的母牛，步驟乙之前應(yīng)鑒定胚胎中與___________有關(guān)的基因。

（4）進(jìn)行步驟乙時(shí)，受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生___________，這為胚胎在代孕母牛體內(nèi)的存活提供了可能。12、基因治療：基因治療是指用正常基因_______或______患者細(xì)胞中有缺陷的基因，從而達(dá)到治療疾病的目的。13、今年年初；爆發(fā)了全球性新型肺炎疫情。初步研究表明，新型冠狀病毒通過(guò)其表面的S-蛋白與人細(xì)胞膜上的ACE2相互識(shí)別，感染人的呼吸道上皮細(xì)胞。請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為_(kāi)________剌激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生_________性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是_________。

（2）感染病毒后，免疫系統(tǒng)對(duì)肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎，此時(shí)可通過(guò)適度使用_________對(duì)病人進(jìn)行治療；使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）科學(xué)家采集了感染新型冠狀病毒并已康復(fù)的甲、乙兩人的血液，檢測(cè)相關(guān)抗體的水平，結(jié)果如圖1。據(jù)此分析，應(yīng)選取_________的B淋巴細(xì)胞用以制備單克隆抗體（單抗）。

（4）將制備的多種單抗分別與病毒混合，然后檢測(cè)病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率，結(jié)果如圖2。據(jù)此分析，對(duì)病毒抑制效果最好的單抗是__________號(hào)。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間，若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的__________細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。14、下圖表示哺乳動(dòng)物精子和卵細(xì)胞發(fā)生和成熟的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）③過(guò)程中精子頭部的頂體是由__________發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程在__________內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶。為了阻止多精入卵，會(huì)發(fā)生__________反應(yīng)和__________反應(yīng)。

（3）精子的發(fā)生開(kāi)始的時(shí)期是__________；雌性動(dòng)物卵泡的形成的時(shí)期是__________。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行Ⅰ過(guò)程是在__________時(shí)期完成的，Ⅱ過(guò)程是在__________過(guò)程中完成的。評(píng)卷人得分三、判斷題(共5題，共10分)15、一般情況下一個(gè)卵細(xì)胞只能由一個(gè)精子發(fā)生融合形成受精卵()A.正確B.錯(cuò)誤16、精子入卵后形成雄原核；同時(shí)卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核()A.正確B.錯(cuò)誤17、受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段，在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在子宮內(nèi)完成。（選擇性必修3P56）()A.正確B.錯(cuò)誤18、下圖表示哺乳動(dòng)物發(fā)育過(guò)程的幾個(gè)階段；請(qǐng)判斷下列題的敘述是否正確？

（_____）（1）從A到C的過(guò)程中有機(jī)物的含量減少。

（_____）（2）A；B時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞。

（_____）（3）胚胎移植必須使用處于B或C時(shí)期的胚胎。

（_____）（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變。A.正確B.錯(cuò)誤19、在生態(tài)工程建設(shè)中，只能遵循“先污染、破壞、再治理”的發(fā)展思路______A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分四、非選擇題(共3題，共15分)20、中國(guó)科學(xué)家通過(guò)構(gòu)建攜帶人類(lèi)自閉癥基因MeCP2的轉(zhuǎn)基因猴模型及對(duì)MeCP2轉(zhuǎn)基因猴進(jìn)行分子遺傳學(xué)與行為學(xué)分析；發(fā)現(xiàn)MeCP2轉(zhuǎn)基因猴表現(xiàn)出類(lèi)似人類(lèi)自閉癥的刻板與社交障礙等行為。回答下列問(wèn)題：

（1）MeCP2基因表達(dá)的MeCP2蛋白主要通過(guò)與DNA特定部位結(jié)合從而抑制某些基因的表達(dá)；推測(cè)MeCP2蛋白的作用機(jī)理是抑制相關(guān)基因的_____

（2）將目的基因?qū)氩溉閯?dòng)物受精卵最有效的方法是_____。研究人員使用動(dòng)物病毒作為載體將MeCP2基因轉(zhuǎn)入食蟹猴的基因組中；一般作為基因工程載體的動(dòng)物病毒應(yīng)為_(kāi)____。源病毒（如腺病毒）或具有_____功能的RNA病毒。

（3）研究人員利用_____技術(shù)檢測(cè)，確認(rèn)MeCP2基因能在神經(jīng)系統(tǒng)中成功表達(dá)。基因在生物體內(nèi)選擇性表達(dá)主要是由位于基因首端的_____決定的，它是_____識(shí)別和結(jié)合的部位。研究人員對(duì)轉(zhuǎn)基因猴進(jìn)行了體征記錄以及多項(xiàng)行為學(xué)測(cè)試，這屬于_____的鑒定。21、科研人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建蜂鳥(niǎo)的基因組文庫(kù)；研究β-球蛋白基因的功能，流程如圖1所示。

（1）首先需要用同種__________處理蜂鳥(niǎo)的DNA和質(zhì)粒；并用DNA連接酶處理，得到__________，再與經(jīng)__________處理得到的感受態(tài)大腸桿菌混合。將混合物接種到添加__________的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，一段時(shí)間后，選擇顏色為_(kāi)_________（填“白色”或“藍(lán)色”）的菌落進(jìn)一步培養(yǎng)，獲得導(dǎo)入蜂鳥(niǎo)DNA片段的大腸桿菌。用上述方法可以獲得導(dǎo)入蜂鳥(niǎo)不同基因的大腸桿菌，構(gòu)建出蜂鳥(niǎo)的__________。

（2）科研人員可從獲得的大腸桿菌中提取__________；利用圖2中的__________引物組合進(jìn)行PCR，以進(jìn)一步研究蜂鳥(niǎo)β-球蛋白基因的功能。

（3）導(dǎo)入大腸桿菌的蜂鳥(niǎo)β-球蛋白基因并未表達(dá)正常功能的蛋白質(zhì)，可能的原因是__________。（寫(xiě)出一項(xiàng)即可）22、如圖甲表示質(zhì)粒pBR322上含有青霉素抗性基因(XR)和四環(huán)素抗性基因(YR)。其中，XR內(nèi)部含有限制酶KasI識(shí)別序列，YR內(nèi)部含有限制酶FseI；HpaII識(shí)別序列。如圖乙表示生產(chǎn)人抗凝血酶Ⅲ的過(guò)程；利用人工合成的人抗凝血酶Ⅲ對(duì)治療抗凝血酶缺失癥有顯著效果。

(1)圖甲中質(zhì)粒pBR322的本質(zhì)是_______；限制酶KasI；FseI、HpaII的作用是________。

(2)圖乙中；人抗凝血酶Ⅲ基因稱(chēng)為_(kāi)_____，獲取該基因后常用______技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

(3)質(zhì)粒pBR322作為運(yùn)輸基因的載體；除了要具有一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn)；標(biāo)記基因外，還要能夠______________。

(4)人抗凝血酶Ⅲ基因與質(zhì)粒pBR322結(jié)合后構(gòu)建的基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是_____。這一過(guò)程中通常以受精卵作為受體細(xì)胞的原因是__________________。

(5)目的基因是否表達(dá)，還需要檢測(cè)和鑒定。檢測(cè)轉(zhuǎn)基因羊是否產(chǎn)生人抗凝血酶Ⅲ的方法是___________________。評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共8分)23、如圖為人類(lèi)“治療性克隆”大概過(guò)程；請(qǐng)根據(jù)圖回答：

(1)人類(lèi)“治療性克隆”屬于生物工程的________技術(shù)。

(2)科學(xué)家將患者的體細(xì)胞核植入去核的卵細(xì)胞中，而不是直接用體細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的原因是_________。

(3)“治療性克隆”的結(jié)果說(shuō)明高度分化的體細(xì)胞核仍然具有________。相同的胚胎干細(xì)胞“克隆”的結(jié)果各種各樣，如有的是胰島細(xì)胞，有的是血細(xì)胞，有的是心肌細(xì)胞，究其本質(zhì)原因是基因________的結(jié)果。上述“克隆”過(guò)程是建立在胚胎細(xì)胞的________和________基礎(chǔ)上的。

(4)如將上述技術(shù)用于“克隆人”則需要進(jìn)行________過(guò)程，目前世界上絕大多數(shù)國(guó)家反對(duì)進(jìn)行“克隆人”實(shí)驗(yàn)的原因是________________________。24、回答下列有關(guān)胚胎工程的相關(guān)問(wèn)題；

（1）1890年；英國(guó)劍橋大學(xué)的生物學(xué)家將純種的安哥拉兔的兩個(gè)4細(xì)胞胚胎移入一只純種的比利時(shí)兔的輸卵管內(nèi)，成功地得到兩只純種的安哥拉子兔。這個(gè)實(shí)驗(yàn)首次證實(shí)了_____________________的可能性。

（2）哺乳動(dòng)物卵子發(fā)生過(guò)程中；減數(shù)第二次分裂是在____________過(guò)程中完成的，哺乳動(dòng)物卵子和精子在發(fā)生上的重要區(qū)別是_______________。在實(shí)施體外受精時(shí)，獲能的精子與培養(yǎng)成熟的卵子，通常都可以在_________中完成受精作用，在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查_(kāi)____________。

（3）胚胎移植需收集胚胎；收集胚胎時(shí)沖卵的生理學(xué)基礎(chǔ)是___________。胚胎分割時(shí)用分割針取樣的滋養(yǎng)層的用途是___________。

（4）ES細(xì)胞是研究細(xì)胞分化的理想材料，ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上，或在_______的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)。評(píng)卷人得分六、綜合題(共2題，共20分)25、如圖1為利用生物技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體的過(guò)程；圖2為經(jīng)體外受精培育優(yōu)質(zhì)奶牛的過(guò)程，圖3為羊水檢查的主要過(guò)程。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

(1).與植物細(xì)胞融合相比細(xì)胞A的形成過(guò)程中特有的誘導(dǎo)因素是______

(2).在圖1制備單克隆抗體的過(guò)程中，包括______________和________________兩個(gè)過(guò)程。直接產(chǎn)生的A細(xì)胞可能有______種，經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行________________________；經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞，進(jìn)而進(jìn)行體內(nèi)或體外培養(yǎng)。

(3).單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，其最大的優(yōu)越性是__________________________。

(4).圖2過(guò)程優(yōu)質(zhì)奶牛的培育過(guò)程需要進(jìn)行胚胎移植，移植后的胚胎能在受體子宮中存活，其生理基礎(chǔ)是__________________________。

(5).若要同時(shí)獲得多頭與此優(yōu)質(zhì)奶牛相同的小牛，可對(duì)圖2中囊胚進(jìn)行____________，操作過(guò)程需要特別注意的問(wèn)題是____________。

Ⅱ.產(chǎn)前診斷是優(yōu)生的主要措施之一；檢查羊水和羊水中的胎兒脫落細(xì)胞，能反映胎兒的病理情況。圖3是羊水檢查的主要過(guò)程，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

(6).圖3中，在羊水細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常在合成培養(yǎng)基中加入適量________以補(bǔ)充合成培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，同時(shí)還應(yīng)控制培養(yǎng)基的__________、溫度、pH和溶解氧等外界環(huán)境條件。在出現(xiàn)細(xì)胞的接觸抑制時(shí)，應(yīng)用____________處理。

(7).圖3中，在染色體分析時(shí)，通常選用處于____________（填時(shí)期）細(xì)胞的染色體進(jìn)行觀(guān)察。26、為增加油菜種子的含油量；研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。

（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用____技術(shù)從陸地棉基因文庫(kù)中獲取酶。

D基因，從擬南芥基因文庫(kù)中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因，所含三種限制酶（ClaI、SacI、XbaI）的切。

點(diǎn)如下圖所示。則用____和____酶處理兩個(gè)基因后，可得到____端與。

____端（填圖中字母）相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右上圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建____并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含____的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)得到含融合基因的單菌落；再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。

（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過(guò)程的目的是____。

（4）進(jìn)一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜細(xì)胞，該細(xì)胞通過(guò)____技術(shù)，可培育成轉(zhuǎn)基因油菜植株。用____法在分子水平上可檢測(cè)轉(zhuǎn)基因油菜植株中的融合基因是否成功表達(dá)。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

分析題圖：目的基因的左側(cè)有限制酶NheⅠ與AluⅠ的識(shí)別序列；右側(cè)有限制酶SmaⅠ與AluⅠ的識(shí)別序列。若僅用限制酶AluⅠ切割，能獲得目的基因，但可能導(dǎo)致目的基因自身環(huán)化或與載體反向連接。若用NheⅠ與AluⅠ切割，可能獲得不含目的基因的DNA片段。若用NheⅠ與SmaⅠ切割，則既能獲得目的基因，又能防止目的基因自身環(huán)化或與載體的反向連接。

【詳解】

A；目的基因兩側(cè)與A項(xiàng)的質(zhì)粒上都含有限制酶NheⅠ與SmaⅠ的識(shí)別序列；用限制酶NheⅠ與SmaⅠ同時(shí)切割，既能獲得目的基因，又能防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化及目的基因與載體的反向連接，A正確；

B；目的基因兩側(cè)及B項(xiàng)中的質(zhì)粒上都含有限制酶AluⅠ的識(shí)別序列；用AluⅠ切割，能獲得目的基因，但可能導(dǎo)致目的基因的自身環(huán)化和目的基因與載體的反向連接，B錯(cuò)誤；

C；目的基因兩側(cè)與C項(xiàng)的質(zhì)粒上都含有限制酶NheⅠ與AluⅠ的識(shí)別序列；用這兩種酶同時(shí)切割，可能獲得不含目的基因的DNA片段，C錯(cuò)誤；

D；限制酶NheⅠ的識(shí)別序列只存在于目的基因的左側(cè)；用NheⅠ切割不能獲得目的基因，D錯(cuò)誤。

故選A。

【點(diǎn)睛】

解答此題的關(guān)鍵是明確限制酶的內(nèi)涵及其作用，基因工程操作的基本程序，據(jù)此分析圖示中目的基因兩側(cè)及各選項(xiàng)質(zhì)粒上的限制酶的分布情況，進(jìn)而選出最合適的運(yùn)載體。2、C【分析】【分析】

分析題圖，限制酶a與限制酶b識(shí)別的脫氧核苷酸序列不同；但切割后產(chǎn)生的黏性末端相同。

【詳解】

A；限制酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二脂鍵；A正確；

B、由圖可以看出限制酶a與限制酶b切割后產(chǎn)生的粘性末端相同；它們之間能相互連接，B正確；

C；大多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶識(shí)別的序列由6個(gè)核苷酸組成；少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4、5或8個(gè)核苷酸組成，C錯(cuò)誤；

D；限制酶將一個(gè)DNA分子片段切成兩個(gè)片段需切斷兩個(gè)磷酸二酯鍵；因此需要消耗兩個(gè)水分子，D正確。

故選C。3、A【分析】【分析】

【詳解】

用PCR技術(shù)獲取取目的基因需要已知目的基因兩端核苷酸序列，以便制備引物，而并非所有的目的基因都已知其核苷酸序列，A正確；通常以抗生素抗性基因作為標(biāo)記基因，B錯(cuò)誤；限制酶識(shí)別并在特定位置斷開(kāi)磷酸二酯鍵，C錯(cuò)誤；DNA連接酶可將DNA片段連接起來(lái)，D錯(cuò)誤。4、D【分析】【分析】

基因敲除是用含有一定已知序列的DNA片段與受體細(xì)胞基因組中序列相同或相近的基因發(fā)生同源重組；整合至受體細(xì)胞基因組中并得到表達(dá)的一種外源DNA導(dǎo)入技術(shù)。它是針對(duì)某個(gè)序列已知但功能未知的序列，改變生物的遺傳基因，令特定的基因功能喪失作用，從而使部分功能被屏蔽，并可進(jìn)一步對(duì)生物體造成影響，進(jìn)而推測(cè)出該基因的生物學(xué)功能。

【詳解】

A、由題干可知PrPSc可將PrPc不斷地轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，導(dǎo)致PrPSc在羊體內(nèi)積累，說(shuō)明PrPSc不會(huì)被蛋白酶水解；A錯(cuò)誤；

B、患病羊體內(nèi)不存在指導(dǎo)PrPSc合成的基因，但存在指導(dǎo)蛋白質(zhì)PrPc合成的基因，PrPc合成后，PrPSc將PrPc不斷地轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，導(dǎo)致PrPSc積累；從而使羊發(fā)病，B錯(cuò)誤；

C、由題干可知當(dāng)羊感染了PrPSc后，PrPSc將PrPc不斷地轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，導(dǎo)致PrPSc積累，從而使羊發(fā)病，說(shuō)明產(chǎn)物PrPSc對(duì)PrPc轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc不具有反饋抑制作用；C錯(cuò)誤；

D、小鼠的PrPc基因敲除后，不會(huì)表達(dá)產(chǎn)生蛋白質(zhì)PrPc，因此小鼠接種PrPSSc后，不會(huì)出現(xiàn)PrPc轉(zhuǎn)變?yōu)镻rPSc，也就不會(huì)導(dǎo)致PrPSc積累；因此小鼠不會(huì)發(fā)病，D正確。

故選D。5、D【分析】【分析】

植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段主要有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交；其中植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)；動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)手段主要有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合、單克隆抗體的制備、胚胎移植和核移植，其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)。動(dòng)、植物細(xì)胞工程的原理和技術(shù)手段有相似之點(diǎn)，但也存在不同之處，需要考生在平時(shí)的學(xué)習(xí)過(guò)程中注意列表比較。

【詳解】

技術(shù)手段：植物細(xì)胞工程的技術(shù)手段包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交；動(dòng)物細(xì)胞工程的技術(shù)包括動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)；動(dòng)物細(xì)胞融合等，正確；

特殊處理：植物體細(xì)胞雜交時(shí)；需要用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需要用胰蛋白酶處理制備細(xì)胞懸浮液，錯(cuò)誤；

融合方法：誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理方法和化學(xué)方法；而誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法還包括生物方法，錯(cuò)誤；

典型應(yīng)用：植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于無(wú)病毒植物的培育；制備人工種子；植物體細(xì)胞雜交技術(shù)可用于種間植物雜交等；而動(dòng)物細(xì)胞融合和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于制備單克隆抗體，正確；

培養(yǎng)液區(qū)別：植物組織培養(yǎng)過(guò)程中利用的是蔗糖；錯(cuò)誤。

即D符合題意；ABC不符合題意。

故選D。6、D【分析】【分析】

細(xì)胞膜上有特異性受體；與細(xì)胞的識(shí)別和信息交流有關(guān)；減數(shù)分裂和受精作用有利于維持受精卵中染色體數(shù)目的穩(wěn)定。

【詳解】

A；細(xì)胞膜上有特異性受體；精卵結(jié)合與細(xì)胞膜的信息交流功能有關(guān)，A錯(cuò)誤；

B；受精過(guò)程中精子和卵細(xì)胞的隨機(jī)結(jié)合不是基因重組；基因重組發(fā)生在減數(shù)分裂過(guò)程中，B錯(cuò)誤；

C；多精入卵會(huì)導(dǎo)致子代有來(lái)自卵細(xì)胞和多個(gè)精細(xì)胞的染色體；破壞親子代之間遺傳信息的穩(wěn)定性，因此一個(gè)卵細(xì)胞與一個(gè)精子成功融合后通常不再與其他精子融合，C錯(cuò)誤；

D、BF1和BF2能避免受精卵再度與精子融合；有利于維持受精卵中染色體數(shù)目的穩(wěn)定，D正確。

故選D。7、D【分析】【分析】

分析題圖：步驟甲為核移植；步驟乙為胚胎移植，其中誘導(dǎo)超數(shù)排卵用的是促性腺激素。

【詳解】

A；步驟甲和步驟乙分別是指受精作用和胚胎移植；A錯(cuò)誤；

B；誘導(dǎo)超數(shù)排卵所注射的激素是促性腺激素；只能作用于特定細(xì)胞--性腺細(xì)胞，B錯(cuò)誤；

C；重組細(xì)胞發(fā)育成早期胚胎所需營(yíng)養(yǎng)主要來(lái)源于去核的卵母細(xì)胞；C錯(cuò)誤；

D；步驟乙需要進(jìn)行同期發(fā)情處理；甲不需要，D正確。

故選D。

【點(diǎn)睛】8、C【分析】【分析】

1；胚胎分割存在問(wèn)題：胚胎分割的分?jǐn)?shù)越多；操作的難度越大，移植的成功率也越低。

2；動(dòng)物體細(xì)胞核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中；使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為克隆動(dòng)物。

3；早期胚胎培養(yǎng)應(yīng)用發(fā)育培養(yǎng)基；其成分：無(wú)機(jī)鹽和有機(jī)鹽，還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營(yíng)養(yǎng)成分，以及血清等物質(zhì)。

【詳解】

A；癌細(xì)胞具有無(wú)限增殖的能力；因此乳腺癌細(xì)胞比乳腺細(xì)胞更容易進(jìn)行離體培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；

B；細(xì)胞核移植可以在不同動(dòng)物的不同組織間進(jìn)行；B錯(cuò)誤；

C；采用胚胎分割技術(shù)產(chǎn)生同卵多胚的數(shù)量是有限的；胚胎分割的分?jǐn)?shù)越多，操作的難度越大，移植的成功率也越低，C正確；

D；胚胎移植時(shí)；對(duì)供體、受體要進(jìn)行選擇，選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質(zhì)和正常繁殖能力的受體，D錯(cuò)誤。

故選C。9、C【分析】【分析】

生態(tài)工程依據(jù)的基本原理：。項(xiàng)目理論基礎(chǔ)意義實(shí)例物質(zhì)循環(huán)再生原理物質(zhì)循環(huán)可避免環(huán)境污染及其對(duì)系統(tǒng)穩(wěn)定和發(fā)展的影響無(wú)廢棄物農(nóng)業(yè)物種多樣性原理生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性生物多樣性程度高,可提高系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性,提高系統(tǒng)的生產(chǎn)力“三北”防護(hù)林建設(shè)中的問(wèn)題、珊瑚礁生態(tài)系統(tǒng)的生物多樣性非常好協(xié)調(diào)與平衡原理生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡生物數(shù)量不超過(guò)環(huán)境承載力,可避免系統(tǒng)的失衡和破壞太湖富營(yíng)養(yǎng)化問(wèn)題、過(guò)度放牧等整體性原理社會(huì)、經(jīng)濟(jì)、自然構(gòu)成復(fù)合系統(tǒng)統(tǒng)一協(xié)調(diào)各種關(guān)系,保障系統(tǒng)的平衡與穩(wěn)定林業(yè)建設(shè)中自然生態(tài)系統(tǒng)與社會(huì)、經(jīng)濟(jì)系統(tǒng)的關(guān)系問(wèn)題體統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理：分布式優(yōu)于集中式和環(huán)式改善和優(yōu)化系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)以改善功能桑基魚(yú)塘系統(tǒng)整體性原理：整體大于部分保持系統(tǒng)很高的生產(chǎn)力珊瑚礁、藻類(lèi)和珊瑚蟲(chóng)的關(guān)系

【詳解】

A；將農(nóng)作物秸稈“過(guò)腹還田”是一個(gè)物質(zhì)和能量多級(jí)利用工程；其運(yùn)用的生態(tài)工程基本原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理，A不符合題意；

B；我國(guó)南方的桑基魚(yú)塘是運(yùn)用系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能的典型實(shí)例；使物質(zhì)達(dá)到良性循環(huán)，B不符合題意；

C；治坡、治溝與修梯田主要利用了生態(tài)工程的整體性原理和協(xié)調(diào)與平衡原理；C符合題意；

D；庭院中“蔬菜－雞－沼氣”循環(huán)充分體現(xiàn)了物質(zhì)循環(huán)再生的原理；D不符合題意。

故選C。二、填空題(共5題，共10分)10、略

【分析】（1）在基因工程的操作中的“分子手術(shù)刀”即切割DNA的是限制核酸內(nèi)切酶簡(jiǎn)稱(chēng)限制酶；

（2）在基因工程的操作中的“分子縫合針”是DNA連接酶；

（3）基因工程中最常用的運(yùn)載體是質(zhì)粒；

（4）人的基因在牛體內(nèi)能表達(dá)；說(shuō)明人和牛共用一套遺傳密碼。

【考點(diǎn)定位】基因工程的基本工具【解析】限制酶DNA連接酶質(zhì)粒共用一套遺傳密碼11、略

【分析】【分析】

胚胎移植：

1；胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎；或者通過(guò)體外受精及其它方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其它雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)，其中提供胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“供體”，接受胚胎的個(gè)體稱(chēng)為“受體”。(供體為優(yōu)良品種，作為受體的雌性動(dòng)物應(yīng)為常見(jiàn)或存量大的品種)，如轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等任何一項(xiàng)胚胎工程技術(shù)所生產(chǎn)的胚胎，都必須經(jīng)過(guò)胚胎移植技術(shù)才能獲得后代，是胚胎工程的最后一道“工序”。

2；胚胎移植的意義：大大縮短了供體本身的繁殖周期；充分發(fā)揮雌性?xún)?yōu)良個(gè)體的繁殖能力。

【詳解】

（1）體外受精前要對(duì)精子進(jìn)行獲能處理；使其具有受精能力。

（2）要使動(dòng)物超數(shù)排卵；利用促性腺激素；需將卵子培養(yǎng)到MII中期后進(jìn)行體外受精。

（3）步驟甲是人工受精；將受精卵移入受體母牛，進(jìn)行的操作叫做胚胎移植（乙）；胚胎移植之前應(yīng)鑒定胚胎中與有關(guān)的優(yōu)良基因。

（4）胚胎移植實(shí)現(xiàn)的前提是受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。

【點(diǎn)睛】

胚胎移植的實(shí)質(zhì)：早期胚胎在生理狀態(tài)相同的條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。【解析】精子獲能促性腺M(fèi)Ⅱ中期人工受精胚胎移植優(yōu)良性狀受體母牛對(duì)移入子宮的胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。12、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】取代修補(bǔ)13、略

【分析】【分析】

分析圖1：表示多年前感染EV并已康復(fù)的甲；乙兩人的血液中抗EV-GP抗體的水平。根據(jù)曲線(xiàn)圖可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組。

分析圖2：表示單抗與病毒混合后病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率。根據(jù)柱形圖可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ；Ⅴ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率明顯低于其他組別。

【詳解】

（1）由題意可知；新型冠狀病毒表面的S-蛋白作為抗原刺激淋巴細(xì)胞，使機(jī)體產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，人細(xì)胞膜上的ACE2的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)。

（2）免疫系統(tǒng)對(duì)被新冠病毒感染后肺細(xì)胞強(qiáng)烈攻擊引發(fā)肺炎；此時(shí)可通過(guò)適度使用免疫抑制劑對(duì)病人進(jìn)行治療，使其免疫功能下降，以避免肺部嚴(yán)重受損。

（3）由圖1可知；多年前感染EV并已康復(fù)的甲的血液中抗EV-GP抗體水平明顯高于乙和對(duì)照組，故應(yīng)選取甲的B細(xì)胞用以制備單克隆抗體。

（4）由圖2可知；單克隆抗體和病毒混合，加入單抗Ⅲ后，病毒對(duì)宿主細(xì)胞的感染率較低。因此抑制效果最好的單抗是Ⅲ。

（5）患者康復(fù)后一段時(shí)間；若再次受到該病毒的攻擊，機(jī)體內(nèi)相應(yīng)的記憶細(xì)胞迅速增殖分化，產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞和細(xì)胞毒性T細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查病毒、單克隆抗體的制備等，要求考生識(shí)記病毒的結(jié)構(gòu)，明確病毒沒(méi)有細(xì)胞結(jié)構(gòu)；識(shí)記單克隆抗體的制備過(guò)程，掌握其優(yōu)點(diǎn)及相關(guān)應(yīng)用，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題【解析】①.抗原②.特異③.糖蛋白（或蛋白質(zhì)）④.免疫抑制劑⑤.甲⑥.Ⅲ⑦.記憶14、略

【分析】【分析】

1；分析題圖：①表示染色體復(fù)制；②是減數(shù)分裂，③是精細(xì)胞變形為精子過(guò)程，④是受精作用；

2；哺乳動(dòng)物精子和卵子發(fā)生的不同點(diǎn)：（1）精子的減數(shù)兩次分裂是連續(xù)的；場(chǎng)所唯一（MⅠ和MⅡ的場(chǎng)所都是睪丸）；而卵子的兩次分裂是不連續(xù)的，場(chǎng)所不唯一，（MⅠ場(chǎng)所在卵巢，MⅡ場(chǎng)所在輸卵管中）；（2）精子和卵子發(fā)生的時(shí)間不同：精子的發(fā)生是從初情期一直到生殖機(jī)能衰退；多數(shù)哺乳動(dòng)物卵子的形成和在卵巢內(nèi)的貯備是胎兒出生前完成的；MⅠ是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，MⅡ是在受精過(guò)程中完成的。

【詳解】

（1）精子變形③過(guò)程中精子頭部的頂體是由高爾基體發(fā)育來(lái)的；④過(guò)程是受精過(guò)程，在輸卵管內(nèi)完成。

（2）在④過(guò)程中發(fā)生頂體反應(yīng)；釋放頂體酶，溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì)和透明帶，透明帶反應(yīng)和卵細(xì)胞膜反應(yīng)是阻止多精入卵的兩道防線(xiàn)。

（3）雄性動(dòng)物精子產(chǎn)生的時(shí)期是初情期；雌性動(dòng)物卵泡細(xì)胞的形成是在胚胎期性別分化以后完成的，這是精子和卵子在發(fā)生上的重要區(qū)別。

（4）初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次分裂是在排卵前后時(shí)期完成的；減數(shù)第二次分裂是在受精作用過(guò)程中完成的。

【點(diǎn)睛】

本題考查卵細(xì)胞的形成過(guò)程和受精作用等相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記相關(guān)細(xì)節(jié)和解決問(wèn)題的能力。【解析】高爾基體輸卵管透明帶反應(yīng)卵細(xì)胞膜反應(yīng)初情期胚胎期性別分化以后排卵前后受精作用三、判斷題(共5題，共10分)15、A【分析】【詳解】

由于存在防止多精入卵的兩道屏障，故一個(gè)卵細(xì)胞一般只能同一個(gè)精子結(jié)合，形成受精卵，這句話(huà)是正確的。16、A【分析】【詳解】

受精過(guò)程為：頂體反應(yīng)→穿越放射冠→穿越透明帶（透明帶反應(yīng)）→卵細(xì)胞膜反應(yīng)（卵黃膜封閉作用）→卵子完成減數(shù)第二次分裂并釋放第二極體→雌雄原核的形成；核膜消失；雌、雄原核融合形成合子→第一次卵裂開(kāi)始。精子入卵后形成雄原核，同時(shí)被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核，雄、雌原核充分發(fā)育后，相向移動(dòng)，彼此靠近，核膜消失，形成受精卵，故此說(shuō)法正確。

故正確。17、B【分析】【詳解】

受精包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段；在自然狀態(tài)下，哺乳動(dòng)物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

故錯(cuò)誤。18、B【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖中A是桑椹胚，B是囊胚，C是原腸胚。圖B中1是滋養(yǎng)層，2是內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，3是透明帶，4是囊胚腔；圖C中5是外胚層，6是滋養(yǎng)層，7是原腸腔，8是內(nèi)胚層。

【詳解】

（1）從A到C的過(guò)程中細(xì)胞均需要消耗能量；故胚胎中有機(jī)物的含量均減少，（1）正確。

（2）桑椹胚之前所有細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能；屬全能細(xì)胞，故A時(shí)期胚胎中的細(xì)胞都是全能細(xì)胞，囊胚期時(shí)細(xì)胞出現(xiàn)分化，滋養(yǎng)層細(xì)胞不是全能細(xì)胞，（2）錯(cuò)誤。

（3）胚胎移植必須使用處于桑椹胚或囊胚時(shí)期的胚胎；處于A(yíng)或B時(shí)期的胚胎，（3）錯(cuò)誤。

（4）圖示過(guò)程細(xì)胞通過(guò)有絲分裂增殖；有絲分裂過(guò)程中可能發(fā)生突變，遺傳物質(zhì)可能會(huì)發(fā)生改變，（4）正確。

故分別為√、×、×、√。19、B【分析】【詳解】

生態(tài)系統(tǒng)的恢復(fù)力穩(wěn)定性是有一定限度的，導(dǎo)致了生態(tài)工程的局限性，使生態(tài)工程并不能解決所有的污染、破壞問(wèn)題，因此不能走“先污染、破壞，后治理”的老路，故錯(cuò)誤。四、非選擇題(共3題，共15分)20、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA﹣分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)﹣抗原﹣抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定；抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）基因表達(dá)包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個(gè)過(guò)程；其中轉(zhuǎn)錄是以DNA一條鏈為模板合成RNA的過(guò)程，翻譯是以mRNA為模板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程，因此MeCP2基因表達(dá)的MeCP2蛋白主要通過(guò)與DNA特定部位結(jié)合從而抑制某些基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄過(guò)程。

（2）將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；一般作為基因工程載體的動(dòng)物病毒應(yīng)為DNA病毒（如腺病毒）或具有逆轉(zhuǎn)錄功能的RNA病毒。

（3）檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)形成相應(yīng)的蛋白質(zhì)；應(yīng)該采用抗原-抗體雜交技術(shù)；基因在生物體內(nèi)選擇性表達(dá)主要是由位于基因首端的啟動(dòng)子決定的，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。研究人員對(duì)轉(zhuǎn)基因猴進(jìn)行了體征記錄以及多項(xiàng)行為學(xué)測(cè)試，這屬于個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。【解析】轉(zhuǎn)錄顯微注射法DNA逆轉(zhuǎn)錄抗原-抗體雜交啟動(dòng)子RNA聚合酶?jìng)€(gè)體生物學(xué)水平21、略

【分析】【分析】

質(zhì)粒中有氨芐青霉素抗性基因和L基因；前者讓受體細(xì)胞具有抗氨芐青霉素的能力，后者基因表達(dá)產(chǎn)物能使物質(zhì)X呈現(xiàn)藍(lán)色。在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，據(jù)圖可知，氨芐親霉素抗性基因完好，而L基因被破壞，因此使用添加了氨芐青霉素和物質(zhì)X的培養(yǎng)基培養(yǎng)經(jīng)經(jīng)感染大腸桿菌時(shí)，應(yīng)選擇白色的菌落克隆培養(yǎng)，就能獲得導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌。

【詳解】

（1）將蜂鳥(niǎo)的β-球蛋白基因?qū)氪竽c桿菌前，需先構(gòu)建基因表達(dá)載體，即先用同種限制酶處理蜂鳥(niǎo)的DNA和質(zhì)粒，并用DNA連接酶酶進(jìn)一步處理以得到重組質(zhì)粒；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用Ca2+處理微生物細(xì)胞；使其處于易于吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的感受態(tài)；由于重組質(zhì)粒中含有氨芐青霉素抗性基因，且L基因被破壞，因此應(yīng)使用添加了氨芐青霉素和物質(zhì)X的培養(yǎng)基培養(yǎng)經(jīng)上述處理的大腸桿菌，一段時(shí)間后，選擇白色的菌落克隆培養(yǎng)。用上述方法可以獲得導(dǎo)入蜂鳥(niǎo)各種基因的諸多大腸桿菌的克隆，形成蜂鳥(niǎo)的基因文庫(kù)。

（2）科研人員可從獲得的大腸桿菌中提取DNA；用圖2中的B和D兩種引物完成PCR擴(kuò)增（子鏈延伸的方向是5′→3′），以進(jìn)一步研究蜂鳥(niǎo)β-球蛋白基因的功能。

（3）導(dǎo)入大腸桿菌的蜂鳥(niǎo)β-球蛋白基因并未表達(dá)正常功能的蛋白質(zhì)；可能的原因是：大腸桿菌是原核生物，無(wú)法正常完成蜂鳥(niǎo)基因表達(dá)的肽鏈的加工過(guò)程。

【點(diǎn)睛】

本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問(wèn)題，能結(jié)合題中和圖中信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查。【解析】限制性核酸內(nèi)切酶重組質(zhì)粒Ca2+氨芐青霉素和X白色基因文庫(kù)DNAB和D大腸桿菌無(wú)法正常完成蜂鳥(niǎo)基因表達(dá)的肽鏈的加工22、略

【分析】【分析】

基因工程的基本工具：

1；“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）

來(lái)源：主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的。

功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列；并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專(zhuān)一性。

結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。

2；“分子縫合針”——DNA連接酶。

兩種DNA連接酶（E·coliDNA連接酶和T4-DNA連接酶）的比較：

相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。

區(qū)別：E·coliDNA連接酶來(lái)源于大腸桿菌；只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來(lái)；而T4DNA連接酶能縫合兩種末端，但連接平末端的之間的效率較低。

與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端；形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。

3；“分子運(yùn)輸車(chē)”——載體。

載體具備的條件：能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)；供外源DNA片段插入。具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。

最常用的載體是：質(zhì)粒,它是一種裸露的；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核之外；并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。

其它載體：λ噬菌體的衍生物；動(dòng)植物病毒。

【詳解】

(1)圖甲中質(zhì)粒pBR322是基因工程常用的載體；是能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列的，故其本質(zhì)是環(huán)狀DNA，限制酶KasI；FseI、HpaII的功能是能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列并切割。

(2)圖乙中；通過(guò)向羊轉(zhuǎn)人抗凝血酶Ⅲ基因，使轉(zhuǎn)基因羊能夠分泌含人抗凝血酶的乳汁，故人抗凝血酶Ⅲ基因稱(chēng)為目的基因，獲取該基因后常用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。

(3)質(zhì)粒pBR322作為運(yùn)輸基因的載體；在進(jìn)入受體細(xì)胞后要能夠自我復(fù)制，才能使目的基因有表達(dá)的可能性。

(4)在對(duì)動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行基因表達(dá)載體導(dǎo)入時(shí)；所用方法是顯微注射。受精卵具有全能性，可使含目的基因的動(dòng)物細(xì)胞能夠成功表達(dá)目的基因。

(5)目的基因是否表達(dá)；還需要檢測(cè)和鑒定。人抗凝血酶是一種蛋白質(zhì)，故檢測(cè)轉(zhuǎn)基因羊是否產(chǎn)生人抗凝血酶Ⅲ的方法是抗原—抗體雜交。

【點(diǎn)睛】

熟悉基因工程的操作步驟及步驟需使用的“工具”是關(guān)鍵。【解析】小型環(huán)狀DNA識(shí)別DNA中特定的序列并切割目的基因PCR自我復(fù)制顯微注射法受精卵具有細(xì)胞的全能性（合理即可）抗原―抗體雜交五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共8分)23、略

【分析】【詳解】

試題分析：(1)“治療性克隆”是將經(jīng)核移植形成的重組細(xì)胞培育成胚胎干細(xì)胞；進(jìn)而培養(yǎng)成給患者進(jìn)行移植用的器官，屬于動(dòng)物細(xì)胞工程。

(2)高度分化的動(dòng)物體細(xì)胞核全能性受到很大的限制；而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中含有使體細(xì)胞核表現(xiàn)全能性的物質(zhì)。

(3)胚胎干細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞分裂；細(xì)胞分化形成不同的組織細(xì)胞；其本質(zhì)原因是基因的選擇性表達(dá)。

(4)胚胎干細(xì)胞僅通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能發(fā)育成完整個(gè)體；要使其發(fā)育成完整個(gè)體，需要經(jīng)過(guò)胚胎移植這道工序。由于“克隆人”違背人類(lèi)倫理道德，會(huì)引起倫理道德觀(guān)念的混亂，所以多數(shù)國(guó)家反對(duì)進(jìn)行“克隆人”實(shí)驗(yàn)。

考點(diǎn)：本題主要考查胚胎干細(xì)胞相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。【解析】細(xì)胞工程體細(xì)胞核在體細(xì)胞中不能表現(xiàn)全能性，而卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)可以給它提供表達(dá)全能性的環(huán)境全能性選擇性表達(dá)細(xì)胞分裂細(xì)胞分化胚胎移植“克隆人”會(huì)引起人類(lèi)社會(huì)的倫理道德觀(guān)念發(fā)生混亂24、略

【分析】【分析】

1；進(jìn)行胚胎分割時(shí)；應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚，胚胎分割后，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析進(jìn)行性別鑒定。

2；試管動(dòng)物是指通過(guò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過(guò)培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

3；胚胎干細(xì)胞。

（1）哺乳動(dòng)物的胚胎干細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng)ES或EK細(xì)胞；來(lái)源于早期胚胎或從原始性腺中分離出來(lái)。

（2）具有胚胎細(xì)胞的特性；在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細(xì)胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不發(fā)生分化，可進(jìn)行冷凍保存，也可進(jìn)行遺傳改造。

【詳解】

（1）將純種的安哥拉兔的兩個(gè)4細(xì)胞胚胎移入一只純種的比利時(shí)兔的輸卵管內(nèi)；成功地得到了兩只純種的安哥拉子兔。由于安哥拉兔和比利時(shí)兔為兩個(gè)不同的品種，故這個(gè)實(shí)驗(yàn)可證實(shí)同種動(dòng)物的胚胎在異體動(dòng)物體內(nèi)發(fā)育的可能性。

（2）哺乳動(dòng)物卵子發(fā)生過(guò)程中；減數(shù)第一次分裂是在雌性動(dòng)物排卵前后完成的，其結(jié)果產(chǎn)生一個(gè)次級(jí)卵母細(xì)胞和第一極體，進(jìn)入輸卵管，準(zhǔn)備與精子受精。減數(shù)第二次分裂是在精子和卵子結(jié)合過(guò)程中完成的，哺乳動(dòng)物卵泡的形成和在卵巢內(nèi)儲(chǔ)備，是在出生前（即胎兒時(shí)期）完成的，這是卵子和精子在發(fā)生上的重要區(qū)別。在實(shí)施體外受精時(shí)，獲能的精子與培養(yǎng)成熟的卵子，一般情況下都可以在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫饔茫隗w外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。

（3）哺乳動(dòng)物的早期胚胎形成后；在一定時(shí)間內(nèi)不會(huì)與母體子宮建立組織上的聯(lián)系，而是處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能。胚胎分割后，可取滋養(yǎng)層細(xì)胞做DNA分析進(jìn)行性別鑒定。

（4）ES細(xì)胞在飼養(yǎng)層細(xì)胞上；或在添加抑制因子的培養(yǎng)液中，能夠維持不分化的狀態(tài)，而在培養(yǎng)液中加入分化誘導(dǎo)因子，就可以誘導(dǎo)ES細(xì)胞向不同類(lèi)型的組織細(xì)胞分化。

【點(diǎn)睛】

?本題主要考查胚胎工程和基因工程的知識(shí)，解題關(guān)鍵是基因工程、胚胎工程的相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的掌握，把握知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系。【解析】（1）同種動(dòng)物的胚