CtDNA液體活檢技術(shù)平臺介紹機密材料，非允勿轉(zhuǎn)MCA-qASA血漿突變檢測技術(shù)目錄

MCA-qASA體系組成MCA-qASA血漿突變檢測體系：

Mag@MutiCollect血漿游離DNA靶向捕獲技術(shù) ACA-qMCA熒光定量PCR技術(shù)Mag@MutiCollectACA-qMCAassay

ACA-qMCA設(shè)計原理：Blocker+AMRS+qMCA突變偏向擴增系統(tǒng)〔AMRS〕PCR引物的3'端位必須和突變擴增子匹配，而野生不匹配實時偏向PCR反響熔解曲線分析〔MeltingCurveAnalysis〕熒光vs溫度作圖得到DNA熔解曲線DNA溶解曲線是DNA序列的“指紋〞核酸blocker阻滯野生擴增設(shè)計野生匹配blocker阻滯對野生片段擴增MCA-qASA：三種已有技術(shù)的有機結(jié)合。MCA-qASA檢測技術(shù)簡介

1、獨家知識產(chǎn)權(quán)的血漿突變檢測技術(shù)平臺；2.樣本前處理的獨家技術(shù)，包括自有ctDNA提取，效果是Roche或Qiagen同類試劑盒2-3倍，靶向富集技術(shù)等；3、國內(nèi)唯一經(jīng)大規(guī)模雙盲臨床驗證的血漿突變檢測技術(shù)平臺。

MCA-qASA特點優(yōu)勢高效率的ctDNA靶向富集提取體系：Mag@MutiCollect

特異性引物3端的特異性修飾等獨特設(shè)計，具有比ARMS更高的特異性；

Blocker可以偏向性阻滯野生型片段的擴增，進一步提高特異性和靈敏度；引物擴增區(qū)域在60-90bp范圍內(nèi)，更適合碎片化的ctDNA；靈敏度在0.05%~0.1%。技術(shù)示意圖〔局部〕

Mag@MutiCollect：大大提高靶向ctDNA富集效率Mag@MutiCollect原理利用氧化復原法制備得到粒徑均一的磁性納米微粒，修飾功能基團，依據(jù)靶向DNA，針對性在磁性納米微粒藕聯(lián)相輔DNA制備磁性納米微球探針，可以直接從血漿中快速高效富集靶向DNA片段。納米磁珠探針修飾方案

Mag@MutiCollect血漿游離DNA靶向捕獲技術(shù)實驗方案：取4個人的血漿，每個血漿平均分為2份，每份血漿500uL，1份使Mag@MutiCollect靶向捕獲，1份使用BloodVirusMiniKit〔Qiagen〕提取。Mag@MutiCollect靶向捕獲技術(shù)>>Qiagen試劑盒引物設(shè)計:與ARMS引物相比，極大提高靈敏度和特異性與ARMS原理不同，MCA-qASA體系中，引物3端除末端是突變特異點外，不引入第二個突變，而是進行特殊修飾；普通Taq酶5-3Exo+根底上，引入3-5Exo+；同時，引物的Tm比退火Tm值低5-10度，來提高特異性。與ARMS相比，極大提高了特異性和靈敏度。

野生型阻滯Blocker：LNA修飾PPT模板下載：行業(yè)PPT模板：節(jié)日PPT模板：素材下載：PPT背景圖片：圖表下載：優(yōu)秀PPT下載：教程：Word教程：教程：資料下載：課件下載：范文下載：試卷下載：教案下載：

EGFR（血漿樣本）臨床數(shù)據(jù)陰性符合率96.18%陽性符合率81.93%總體符合率91.09%靈敏度0.1%血漿EGFR突變檢測試劑盒2021年7月1日新獲CFDA注冊批準；國內(nèi)第一個大規(guī)模臨床研究獲批血漿ctDNA突變檢測產(chǎn)品；世界第2個獲批產(chǎn)品，相比阿斯利康在歐洲批準的的第1個血漿EGFR突變檢測，準確度有顯著提高〔下表〕。1007例組織肺癌樣本中，檢出T790M〔原發(fā)性耐藥〕13例；該13例T70M陽性的組織樣本中，與之配套的血漿樣本中檢出T790M11例，陽性符合率84.6%。臨床價值：適用無法獲取組織樣本人群；適用手術(shù)時間與藥物治療時間跨度較大的人群；治療過程耐藥性突變檢查；臨床用量數(shù)倍組織檢測量；提取、捕獲及檢測均屬于自有，大幅度降低試劑本錢。血漿EGFR突變試劑盒北京協(xié)和醫(yī)院局部臨床試驗統(tǒng)計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為96.53%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為90.35%青醫(yī)附院臨床實驗局部數(shù)據(jù)統(tǒng)計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為95.61%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為94.15%臨床實驗局部數(shù)據(jù)統(tǒng)計〔浙大附一〕試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為99.17%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為90.08%江蘇省腫瘤臨床實驗局部數(shù)據(jù)統(tǒng)計表試劑盒檢測組織和測序方法檢測組織的總符合率為97.44%試劑盒檢測血液樣本與測序方法檢測組織的總符合率為92.31%競爭產(chǎn)品1.凱杰檢測靈敏度遠低于本公司產(chǎn)品——靈敏度在0.05%~0.1%。特定儀器2.廈門艾德艾德-檢測靈敏度〔1%〕組織sanger測序1061例檢出率100%。艾德EGFR突變檢測試劑盒一共檢測了205例血漿與組織配套樣本，其陽性符合率為52.27%，其他數(shù)據(jù)暫時未知。阿斯利康相比阿斯利康〔1162例組織與血漿配套樣本〕在歐洲批準的的第1個血漿EGFR突變檢測，準確度