中藥抗乙型肝炎藥物的研究進展

民族主義是世界公共衛(wèi)生的一個問題。全球約有20億人感染過乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV),慢性肝炎患者超過了3.5億。每年約有50萬人死于由HBV感染引起的急性肝炎、肝硬化及肝癌等疾病。盡管HBV疫苗的出現(xiàn)在一定程度上緩解了HBV感染人群的增加,但仍有大量已感染HBV的患者急需得到有效的治療。抗病毒治療是治療HBV感染的關(guān)鍵。目前臨床上廣泛應(yīng)用的抗病毒藥物主要有α-干擾素及拉米夫定。然而,因其不良反應(yīng)嚴(yán)重,價格昂貴,且病毒易產(chǎn)生耐藥性,難以在臨床廣泛應(yīng)用。因此,對治療HBV感染新型藥物的開發(fā),仍是人們研究的熱點。傳統(tǒng)中醫(yī)雖然沒有乙型肝炎的病名,但與其相類似的癥狀、體征,如:黃疸、脅痛、積聚、臌脹、肝瘟等卻早有記載,可見,中藥用于HBV感染的治療已有悠久的歷史。在我國,中藥制劑仍然應(yīng)用于HBV感染的臨床治療。然而,傳統(tǒng)中藥雖然在臨床實踐中取得一定療效,但是大多數(shù)中藥的有效成分尚不明了,作用機理也不清楚,使其推廣應(yīng)用受到限制。近年來,隨著HBV轉(zhuǎn)染的細(xì)胞模型的應(yīng)用,許多中藥及其有效成分的體外抗病毒作用得到證明,為抗HBV中藥的進一步研究與開發(fā)提供了理論基礎(chǔ)。本文就近年來報道的具有體外抗HBV活性的復(fù)方制劑、單味中藥、中藥有效成分及中藥單體化合物等進行歸納總結(jié),旨在為今后抗HBV中藥的研究和開發(fā)提供參考。1復(fù)方六月雪及其主要成分的體外抗hbv活性1982年,Thyagarajan等首次證實苦味葉下珠具有抗HBV的活性。其后,對中藥復(fù)方制劑及單味中藥抗病毒治療乙肝病毒的研究逐漸受到人們的廣泛關(guān)注。小柴胡湯作為中藥復(fù)方,已經(jīng)被證明具有免疫調(diào)節(jié)、提高肝臟機能以及抗HIV-1復(fù)制等多種藥理活性。Chang等測定了小柴胡湯對HepG2.2.15細(xì)胞HBV的抑制作用。結(jié)果表明,小柴胡湯對病毒HBsAg、HBeAg及HBVDNA均具有明顯的抑制作用,其中對HBsAg的半數(shù)抑制率濃度(IC50)為55.76mg/ml。復(fù)方六月雪為雙子葉植物藥茜草科植物白馬骨或六月雪的全草,具有祛風(fēng)、利濕、清熱、解毒等功效。張士軍等對復(fù)方六月雪及其主要成分六月青體外抗HBV的活性進行了一系列的研究。結(jié)果表明,復(fù)方六月雪在體外具有顯著的抗HBsAg、HBeAg及HBVDNA的活性,且毒性較低;而作為復(fù)方六月雪主要成分之一的六月青,在體外同樣具有顯著的抗HBV的作用,且毒性較低。此外,向毓明等還對復(fù)方大黃的體外抗HBV活性進行了測定,結(jié)果復(fù)方大黃雖然可抑制HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBeAg,但對HBsAg卻無明顯抑制作用。除了中藥復(fù)方,許多單味中藥也具有明顯的抑制HBV的作用。姜黃(CurcumalongaLinn)屬姜科植物姜黃屬植物,研究表明,姜黃水提物作用9d,對HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg的抑制率可以達(dá)到80%,并且,姜黃水提物還可以明顯地抑制HBVDNA的復(fù)制。Wu等的研究表明,鹿角草(GlossogynetenuifoliaCass.)醇提物具有明顯的體外抗HBV的作用,其對HBsAg的IC50為0.093mg/ml。楊雄志等研究了三葉青不同極性提取組分對HBV的抑制作用,結(jié)果表明,三葉青各提取組分均具有明顯的抑制HBsAg及HBeAg的作用,其中乙酸乙酯部分還能明顯降低HBV的DNA復(fù)制水平。唐慶年等的研究發(fā)現(xiàn),雪靈芝醇提物和水提物體外均有明顯的抗乙肝病毒作用,但醇提物細(xì)胞毒性較大,而水提物作用確切且毒性較低,雪靈芝水提取物作用96h后,對HBsAg和HBeAg的最大抑制率分別為52.5%和72.8%。此外,人們還對人銜草、檳榔、黃芪等提取物的體外抗HBV活性進行了研究。結(jié)果表明,除檳榔提取物毒性較大,且無明顯體外抗病毒活性外,其余幾種提取物均具有明顯的抗HBsAg及HBeAg的活性,其中,黃芪對HBsAg和HBeAgIC50分別為115.4μg/ml和317.2μg/ml。2抗hbv的植物源左國營等曾經(jīng)對藥用植物體外抗HBV的活性成分進行了總結(jié)和歸納,發(fā)現(xiàn)具有抗HBV作用的植物源天然產(chǎn)物主要包括木脂素、酚性成分、生物堿、萜類、黃酮和香豆素等類化合物。近年來,隨著對中藥抗病毒有效成分及單體化合物研究的不斷深入,又有許多新的有效成分及化合物被證實具有體外抗HBV的活性。2.1槐定堿與槐果堿體外抗hbv活性的比較苦參堿及氧化苦參堿是目前研究最為深入的一類具有抗HBV活性的生物堿類化合物。聶紅明等的研究表明,苦參堿與氧化苦參堿在濃度為0.1~1000μmol/L時,對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg的抑制率均高于50%,抑制效果甚至優(yōu)于拉米夫定,但對HBeAg的抑制作用較弱。為了提高苦參堿的藥效,Li等制備了氧化苦參堿脂質(zhì)體,并研究了其體外抗HBV的活性,結(jié)果顯示,雖然苦參堿脂質(zhì)體對HBsAg的抑制活性略有降低,但對HBeAg的抑制活性升高,且毒性明顯降低,其作用11d后對HBsAg及HBeAg的IC50分別為0.078mg/ml和3.35mg/ml。槐定堿與槐果堿主要來源于豆科植物苦豆草(SophoraalopecuroidosL.)的地上部分,其在結(jié)構(gòu)上只相差兩個H原子。聶紅明等對槐定堿與槐果堿體外抗HBV的活性進行了一系列的研究,結(jié)果表明,槐定堿對HBsAg和HBeAg的IC50分別為0.339mmol/L和0.356mmol/L,且毒性較低,屬低毒有效藥物;而槐果堿對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg的IC50只有4.9μmol/L,雖其對HBeAg的抑制活性不高,但明顯優(yōu)于拉米夫定。此外,Romero等對小檗堿體外抗HBV的活性進行了研究,發(fā)現(xiàn)作用21d后,其對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg及HBVDNA的IC50分別為11μmol/L和90μmol/L,具有明顯的抑制作用。但小檗堿毒性相對較高,對細(xì)胞生長的半數(shù)抑制濃度(CC50)達(dá)到了50μmol/L,屬于毒性較高的活性化合物。2.2抗hbv活性分子林興等對中藥復(fù)方六月雪的主要成分六月青總皂苷體外抗HBV活性進行了一系列的研究,結(jié)果顯示,六月青總皂苷對HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg、HBeAg及HBVDNA的分泌均具有明顯的抑制作用,其中對HBsAg的IC50為9.45μg/ml,而對細(xì)胞的CC50為349.51μg/ml,屬于低毒有效成分。蔣澤偉等還對刺參糖胺聚糖和荔枝核總皂苷體外抗HBV的作用進行了研究,結(jié)果表明,刺參糖胺聚糖和荔枝核總皂苷均具有一定的抗HBV活性,其中荔枝核總皂苷對HepG2.2.15細(xì)胞分泌的HBsAg、HBeAg及細(xì)胞外HBVDNA的IC50分別為0.096、0.085和0.128mg/ml。黃芪甲苷(astragalosideⅣ)是中藥黃芪(Astragalusmongholicus)的主要活性分子,具有抗腫瘤、抗疲勞以及抗病毒等多種藥理作用。Wang等通過對黃芪提取物抗HBV活性分子的篩選,證實黃芪甲苷具有很好的體外抗HBV的活性,是黃芪抗HBV的主要活性分子,其在100μg/ml用藥9d后,對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制率分別為23.6%和22.9%,抑制作用優(yōu)于同組100μg/ml的拉米夫定,具有較好的開發(fā)前途。中藥大黃(RheumpalmatumL.)具有解毒消炎的功效,其醇提物已被證實具有很好的抗HBV的活性。Li等通過抗HBV活性分子篩選的方法,自大黃中分離獲得了一種活性化合物anthraquinonechrysophanol8-O-β-D-glucoside。研究顯示,其對HepG2.2.15細(xì)胞胞外HBVDNA的IC50為36.98μg/ml,遠(yuǎn)低于大黃醇提物的IC50(212.36mg/ml),具有較好的體外抗HBV的作用。2.3細(xì)胞活性化合物黃芩素(wogonin)是中藥黃芩(Scutellariabaicalensis)的主要有效成分,是目前研究較多的抗HBV的活性分子之一。Guo等通過研究,證實了黃芩素對HepG2.2.15細(xì)胞分泌HBsAg、HBeAg及HBVDNA的抑制作用,其對HBsAg及HBeAg的IC50均為0.4μg/ml,而50μg/mL黃芩素作用9d后,其對HBVDNA的抑制作用要優(yōu)于同組10μg/ml劑量拉米夫定。中藥水芹(Oenanthejavanica)具有很好的保肝抗炎作用,Wang等對其中的黃酮類化合物進行了提取。研究發(fā)現(xiàn),水芹黃酮提取物對HBV具有很好的抑制作用,低劑量作用9d,即可明顯抑制HepG2.2.15細(xì)胞HBsAg及HBeAg的分泌,其IC50分別為0.64mg/ml和0.30mg/ml。2.4對細(xì)胞生長的影響甘草甜素是從中藥甘草(Radixglycyrrhiza)分離出的單體化合物,李永偉等探討了甘草甜素對HepG2.2.15細(xì)胞上清液中HBsAg、HBeAg和HBVDNA的作用及對細(xì)胞存活率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn),甘草甜素在低劑量時對HBsAg、HBeAg及HBVDNA具有抑制作用;而高劑量卻反而出現(xiàn)HBeAg分泌增加及HBVDNA復(fù)制增強的現(xiàn)象。Han等研究了水芹總酚對HepG2.2.15細(xì)胞中HBV的作用。結(jié)果顯示,作用9d,水芹總酚對細(xì)胞HBsAg及HBeAg分泌的抑制率分別達(dá)到70.12%和72.61%,且無明顯的細(xì)胞毒性。Zhou等的研究發(fā)現(xiàn),提取自中藥丹參(Salviamiltiorrhiza)的化合物原兒茶酚(protocatechuicaldehyde)在體外具有很好的