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文檔簡介
第十三章凝集反應制作人:和燕早在1896年,Widal就利用傷寒病人的血清與傷寒桿菌發生特異性凝集的現象,有效地診斷傷寒病。--肥達試驗至1903年,Landsteiner在特異性血凝現象的基礎上發現了人類ABO血型,并于1930年獲得了諾貝爾醫學獎。
--血型鑒定凝集反應的發現凝集反應的定義凝集反應:
顆粒性抗原(細菌、紅細胞等)與相應抗體特異性結合,或可溶性抗原(或抗體)與載體顆粒結合成致敏顆粒(紅細胞、聚苯乙烯乳膠顆粒、炭粒)后,它們與相應抗體(或抗原)發生特異性反應,在適當電解質存在下,形成肉眼可見的凝集現象。可見反應形成陰性?陽性?凝集反應的分型凝集反應直接凝集反應間接凝集反應抗球蛋白試驗第一節直接凝集反應直接凝集反應:
顆粒性抗原直接與抗體結合,在電解質的作用下,出現肉眼可見的凝集現象。凝集原(agglutinogen):凝集反應中的抗原。凝集素(agglutinin):凝集參與反應的抗體(一)玻片凝集試驗方法評價:定性試驗簡便和快速敏感度低應用:菌種鑒定血清學分型血型鑒定
在試管內顆粒性抗原直接與抗體結合,在電解質的作用下,出現肉眼可見的凝集現象。(二)試管凝集試驗0.50.50.50.50.5棄掉0.5
試管凝集試驗原理結果
1234567菌液
結果+很小的凝集顆粒混濁-無凝集現象與對照相同++小、部分凝集塊中等混濁+++大多凝集管底輕度混濁++++大的凝集塊清亮凝集程度沉淀上清管底沉淀凝集程度方法評價:半定量試驗簡便、快速敏感度低可有假陽性臨床應用:肥達試驗外斐試驗交叉配血試驗第二節間接凝集反應間接凝集反應:
將可溶性抗原或抗體吸附于顆粒性載體表面,然后與相應的抗體或抗原反應,在電解質的作用下,出現肉眼可見的凝集現象.載體可溶性抗原致敏致敏顆粒NS凝集顆粒
間接凝集試驗示意圖常用載體紅細胞--間接血凝試驗聚苯乙烯乳膠--膠乳凝集試驗1、正向間接凝集試驗2、反向間接凝集試驗3、間接凝集抑制試驗4、協同凝集試驗間接凝集反應的類型用抗原致敏載體--檢測抗體正向間接凝集試驗反向間接凝集試驗用抗體致敏載體----檢測抗原間接凝集抑制試驗用抗原致敏載體--檢測抗原間接凝集抑制試驗待測抗原已知抗體特異結合抗原抗體復合物NS+致敏顆粒無凝集顆粒陽性間接凝集抑制試驗待測抗原已知抗體無結合抗原抗體分散NS+致敏顆粒有凝集顆粒陰性SPA:SPA-IgG
Fc;SPA抗體致敏------測抗原協同凝集試驗
原理圖IgGSPASPA-IgG
待測抗原SPA-IgG-待測抗原凝集顆粒混合加入間接凝集反應的應用抗原的檢測
反向間接凝集試驗可用于檢測病原體的可溶性抗原,也可用于檢測各種蛋白質成分。抗體的檢測
檢測細菌、病毒、寄生蟲等感染后產生的抗體。
抗球蛋白試驗又稱Coombs試驗第三節
抗球蛋白試驗(一)直接Coombs試驗不完全抗體檢測紅細胞上抗體(二)間接Coombs試驗檢測血清中的抗紅細胞抗體臨床應用:在輸血上的應用血型抗原抗體的檢查對新生兒溶血性貧血性疾病的診斷對溶血性貧血的研究對細菌或立克次體的不完全抗體檢查
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