川芎嗪芳酸衍生物的合成及抗血小板聚集活性研究

心腦血管疾病是人類健康中嚴重危害的常見病之一。隨著社會人口的增長，發(fā)病率也在增加。血栓形成是心腦血管疾病的一個重要因素之一。冠狀動脈疾病及其相應的缺血性并發(fā)癥可導致各種臨床癥狀，如中風、心絞痛或周圍動脈疾病。主要病因是動脈內(nèi)形成的血栓形成，導致嚴重的血管缺氧。中國也有以冠狀動脈血栓形成和血栓形成為核心的血栓形成和血栓形成問題。因此，預防高血壓也是心血管疾病領域最受歡迎的研究課題之一。阿魏酸(Ferulicacid,圖1)系當歸、川芎等傳統(tǒng)活血化淤中草藥的主要有效成分之一,現(xiàn)已人工合成.藥理學研究表明,具有抑制血小板聚集、抑制5-羥色胺從血小板中釋放、阻止靜脈旁路血栓形成、抗動脈粥樣硬化、抗氧化、增強免疫功能等作用奧扎格雷(Ozagrel)和Dazoxiben(圖2)為選擇性的TXA本文以奧扎格雷和Dazoxiben為模型化合物,川芎嗪和阿魏酸作為先導物,按照生物電子等排和藥物拼合原理,用川芎嗪基替代咪唑基,將川芎嗪與阿魏酸等芳酸通過醚鍵進行拼合,設計合成了6個全新結(jié)構(gòu)的川芎嗪芳酸類衍生物,并測定它們對ADP誘導的血小板聚集的抑制活性.合成路線見Scheme1.1實驗部分1.1gct-ms分析LCQADVANTAGEMAX液質(zhì)連用質(zhì)譜儀(FINNIGA公司);MicromassGCT-MS(英國質(zhì)譜公司);NicoletAvatar370DTGS型紅外光譜儀(Therm-Electroncorporation);Bruker300MHz超導核磁共振儀,TMS為內(nèi)標,CDCl1.22溶劑:及其他-氧甲基-甲基苯甲酰5.在250mL三頸瓶中依次加入原料川芎嗪(20.0g,0.147mol),NBS(26.8g,0.151mol),過氧化苯甲酰(50.0mg,0.206mmol),溶劑CCl1.3阿魏酸乙酯的合成dmf-3-甲基-4f-3-硫基苯基-4e5e-5-甲基-5-甲基苯磺酸酯3a4f的合成在100mL三頸瓶中依次加入2-溴甲基-3,5,6-三甲基吡嗪(0.65g,3.02mmol),阿魏酸乙酯(0.97g,4.37mmol),無水碳酸鉀(1.0g,7.25mmol),DMF(40mL),加熱至85℃,攪拌,反應10h,TLC[V(環(huán)己烷)∶V(乙酸乙酯)=3∶1]檢測顯示反應完全(原料R用類似方法得到了化合物4b~4f.1.4e-3-{4-，氨基丙烯酸-2-基-3-甲基苯基磺酸用類似方法得到了化合物1b~1f.1.5in離心檢測以3%戊巴比妥鈉靜脈麻醉家兔,手術分離頸總動脈插管取血,以3.8%枸櫞酸鈉(取檸檬酸鈉3.8g,加蒸餾水到100mL,溶解后過濾,裝瓶,121℃高壓滅菌15min)為抗凝劑(V∶V=1∶9),1000r/min,5min離心,以制備富血小板血漿(platelet-richplasma,PRP);3000r/min,15min離心,制備貧血小板血漿(platelet-poorplasma,PPP).將PRP移入硅化比色杯中37℃溫育5min,測其在600nm處吸光度(A),用PPP調(diào)PRP的A值在0.6~0.7,將1.7mL調(diào)好的PRP移入另一硅化比色杯中,加入受試藥200μL在600nm處測加入ADP前的A值,隨后加入ADP(100μL)(終濃度為4μmol/L),分別測定加入ADP后2,5min時600nm處A值,按以下公式計算血小板聚集率(aggregationrate,AR):用直線回歸法求出藥物的半數(shù)抑制濃度(50%inhibitoryconcentration,IC2結(jié)果與討論2.1adp誘導的血小板聚集活性川芎嗪芳酸醚類衍生物的抗血小板聚集實驗結(jié)果顯示,化合物1a,1b,1d對ADP誘導的血小板聚集具有較好的抑制活性,均強于奧扎格雷陽性藥.其中川芎嗪阿魏酸拼合物(1a)的抑制活性是奧扎格雷的5.7倍,是川芎嗪阿魏酸鹽的192倍2.2,5,6-三甲基吡嗪-2-基,5-二甲氧基苯甲酸3a1e的合成奧扎格雷和Dazoxiben從咪唑末端氮原子到羧基羰碳間隔11個原子,該分子長度正好適合插入到TXA4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]苯甲酸乙酯(4b):白色晶體,收率63.3%,m.p.75.0~75.7℃;4-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-3-甲氧基苯甲酸甲酯(4c):類白色晶體,收率69.3%,m.p.129.8~130.4℃;3-((3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基)-4-甲氧基苯甲酸乙酯(4d):類白色晶體,收率為60.7%,m.p.106~108℃;4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-3,5-二甲氧基苯甲酸乙酯(4e):淡黃色晶體,收率為61.6%,m.p.121.7~123.2℃;(E)-3-{4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-苯基}丙烯酸乙酯(4f):類白色晶體,收率76.7%,m.p.90~92℃;在100mL圓底瓶中加入水(20mL),NaOH(0.14g,3.5mmol),攪拌溶解后,加入95%乙醇(20mL),(E)-3-{4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-3-甲氧基苯基}丙烯酸乙酯(4a)(1.0g,2.8mmol),室溫攪拌,反應4h,TLC[V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=3∶1為展開劑]檢測顯示反應完全(原料R4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]苯甲酸(1b):白色晶體,收率89.8%,m.p.179~181℃;4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-3-甲氧基苯甲酸(1c):白色晶體,收率92.6%,m.p.183~185℃;3-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-4-甲氧基苯甲酸(1d):白色晶體,收率90.7%,m.p.190~192℃;4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-3,5-二甲氧基苯甲酸(1e):類白色晶體,收率95.4%,m.p.>218℃(dec);(E)-3-{4-[(3,5,6-三甲基吡嗪-2-基)甲氧基]-苯基}丙烯酸(1f):白色晶體,