演示文稿基因工程概念本文檔共25頁；當前第1頁；編輯于星期一\17點3分基因工程概念本文檔共25頁；當前第2頁；編輯于星期一\17點3分1、原理：2、操作水平：3、又稱：4、優點：基因重組DNA分子水平DNA重組技術或基因拼接技術⑴定向改造生物性狀⑵克服遠緣雜交不親和的障礙⑶育種周期短本文檔共25頁；當前第3頁；編輯于星期一\17點3分基因工程的別名操作環境操作對象操作水平基本過程實質結果基因拼接技術或DNA重組技術生物體外基因DNA分子水平人類需要的基因產物剪切→拼接→導入→表達基因重組一、基因工程的概念本文檔共25頁；當前第4頁；編輯于星期一\17點3分二、基因工程的基本工具看書，思考以下問題：1、基因工程中三種基本工具的作用分別是什么？2、工具酶的作用部位分別在哪？3、具備什么條件才能充當“分子運輸車”？本文檔共25頁；當前第5頁；編輯于星期一\17點3分解決培育抗蟲棉的關鍵步驟需要哪些工具？關鍵步驟一的工具：關鍵步驟二的工具：關鍵步驟三的工具：基因的剪刀——限制酶基因的針線——DNA連接酶基因的運載工具——運載體本文檔共25頁；當前第6頁；編輯于星期一\17點3分（一）“分子手術刀”——限制性核酸內切酶1、來源：主要來自原核生物2、特點：具有專一性（特異性）表現在兩方面：(1)識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列(2)從特定部位的兩個核苷酸之間切開3、作用：特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開4、結果：產生黏性末端或平末端本文檔共25頁；當前第7頁；編輯于星期一\17點3分本文檔共25頁；當前第8頁；編輯于星期一\17點3分SmaⅠ平末端平末端本文檔共25頁；當前第9頁；編輯于星期一\17點3分

EcoRⅠ黏性末端黏性末端本文檔共25頁；當前第10頁；編輯于星期一\17點3分黏性末端和平末端本文檔共25頁；當前第11頁；編輯于星期一\17點3分限制酶所識別的序列有什么特點

限制酶所識別的序列，無論是6個堿基還是4個堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側的雙鏈DNA上的堿基是反向對稱重復排列的。本文檔共25頁；當前第12頁；編輯于星期一\17點3分（二）“分子縫合針”——DNA連接酶1、種類：⑴E·coliDNA連接酶⑵T4DNA連接酶2、作用：本文檔共25頁；當前第13頁；編輯于星期一\17點3分

可把黏性末端之間的縫隙“縫合”起來，E·coliDNA連接酶或T4DNA連接酶即恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵本文檔共25頁；當前第14頁；編輯于星期一\17點3分

DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？T4DNA連接酶還可把平末端之間的縫隙“縫合”起來，但效率較低本文檔共25頁；當前第15頁；編輯于星期一\17點3分DNA連接酶DNA聚合酶連接DNA鏈雙鏈單鏈連接部位在兩DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個核苷酸加到已存在的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵本文檔共25頁；當前第16頁；編輯于星期一\17點3分

常用的運載體：質粒、噬菌體和動、植物病毒等（三）“分子運輸車”——運載體本文檔共25頁；當前第17頁；編輯于星期一\17點3分載體必須具備的條件如果載體對受體細胞有害將怎樣？目的基因是否進入受體細胞，沒有標記基因我們能否鑒定？假如目的基因導入受體細胞后不能復制將怎樣？作為載體沒有切割位點將怎樣？本文檔共25頁；當前第18頁；編輯于星期一\17點3分作為載體的必要條件1、能夠在宿主細胞中復制并穩定地保存；2、具有多個限制酶切點，以便與外源基因連接；3、具有某些標記基因，便于進行篩選。（如抗菌素的抗性基因、產物具有顏色反應的基因等）4、對受體細胞無害本文檔共25頁；當前第19頁；編輯于星期一\17點3分（三）“分子運輸車”——運載體2、種類：1、需要具備的條件：（1）在受體細胞中穩定存在，能自我復制（2）有一個或多個切割位點（3）有標記基因（4）對受體細胞無害質粒、噬菌體、動植物病毒等本文檔共25頁；當前第20頁；編輯于星期一\17點3分以下是兩種限制酶切割后形成的DNA片段，試分析：①GC…②AATTC…③…GC④…CTTAACG…G…

…CG…G

(1)其中①和

是由一種限制酶切割形成的

末端，（2）

和

是由另一種限制酶切割形成的

末端，反饋練習：本文檔共25頁；當前第21頁；編輯于星期一\17點3分在基因工程中，切割運載體和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同種限制酶B.兩種限制酶同種連接酶D.兩種連接酶基因工程常用的受體細胞有（）(1)大腸桿菌（2）枯草桿菌（3）支原體（4）動植物細胞A.（3）（4）B.（1）（2）（4）C.（2）（3）（4）D.（1）（2）（3）本文檔共25頁；當前第22頁；編輯于星期一\17點3分不屬于質粒被選為基因運載體的理由是

A、能復制(）

B、有多個限制酶切點

C、具有標記基因

D、它是環狀DNAD本文檔共25頁；當前第23頁；編輯于星期一\17點3分1、下列不適合用于基因工程的運載體是（）

A、質粒B、噬菌體

C、細菌D、病毒選我C2、下列說法正確的是：（）

A、限制酶的切口一定是GAATTC堿基序列

B、質粒是基因工程中唯一的運載體

C、重組技術所用的工具酶是限制酶、連接酶、運載體

D、利用運載體在宿主細胞內對目的基因進行大量復制的過程可稱為“克隆”選我D審題本文檔共25頁；當前第24頁；編輯于星期一\17點3分3、下列黏性末端屬于同種內切酶切割而成的是（）

A、①②B、①③C、①④D、②③TCGAGCTTAAAGGTTCCAAGCTTCAGAATTC