引言第一節(jié)遺傳密碼第二節(jié)蛋白質(zhì)的合成第三節(jié)蛋白質(zhì)合成后的折疊和修飾第四節(jié)蛋白質(zhì)的運(yùn)輸?shù)谖骞?jié)蛋白質(zhì)的降解本章主要內(nèi)容：Proteinsynthesis1本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第1頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分引言Proteinsynthesis--------Introduction中心法則CentralDogmaDNARNAProteins2本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第2頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Introduction蛋白質(zhì)合成是細(xì)胞內(nèi)最復(fù)雜的生物學(xué)事件之一。真核細(xì)胞中，總共有超過(guò)300種不同的大分子來(lái)參與蛋白質(zhì)的合成。3本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第3頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Introduction蛋白質(zhì)合成消耗的能量占細(xì)胞內(nèi)化學(xué)合成能量消耗的90%以上。在一個(gè)典型的細(xì)菌中，含有20,000核糖體,100,000相關(guān)蛋白和酶;200,000tRNAs。這些成分占細(xì)胞干重的35%以上！4本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第4頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Introduction蛋白質(zhì)的合成速度非常快，37℃時(shí)大腸桿菌平均每15分鐘分裂繁殖一次，平均每秒中合成20個(gè)氨基酸！蛋白質(zhì)的合成受到精密調(diào)節(jié)。蛋白質(zhì)的合成、運(yùn)輸和降解處于一種動(dòng)態(tài)平衡。5本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第5頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分第一節(jié)遺傳密碼1.1遺傳密碼的破譯1.2遺傳密碼的特點(diǎn)Proteinsynthesis--------GeneticCode6本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第6頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分遺傳密碼是利用人工合成的mRNA作為模板破譯的。Proteinsynthesis--------GeneticCode1.1遺傳密碼的破譯20世紀(jì)60年代遺傳密碼破譯之前，人們通過(guò)一系列的實(shí)驗(yàn)就發(fā)現(xiàn)：(1)遺傳密碼的讀法是從mRNA的靠近5‘端的地方開(kāi)始，按照順序依次讀取的。翻譯是沿著mRNA從5’到3‘端的方向進(jìn)行的，與蛋白質(zhì)的N端到C端相對(duì)應(yīng)。7本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第7頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode(2)密碼子由3個(gè)核苷酸組成的三聯(lián)體組成。(3)由4種核苷酸分子所組成的所有64種可能組合均用來(lái)編碼氨基酸。由于氨基酸只有20種，所以密碼子具有簡(jiǎn)并性。8本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第8頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分20世紀(jì)60年代，Nirenberg將大腸桿菌細(xì)胞用DNase處理后得到的細(xì)胞裂解物設(shè)計(jì)成一種無(wú)細(xì)胞蛋白質(zhì)合成體系。這種體系中，如果在這個(gè)體系中加入天然的或人工合成的mRNA，就可以合成出一定量的蛋白質(zhì)。Proteinsynthesis--------GeneticCode9本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第9頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode利用一種酶，叫做多核苷酸磷酸化酶來(lái)生成模板，結(jié)果產(chǎn)生四種模板，即poly(A),poly(C),poly(U)和poly(G)。(同聚化mRNA模板)。Nirenberg用放射性同位素標(biāo)記了1種氨基酸，做了20組平行實(shí)驗(yàn)。10本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第10頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分結(jié)果，poly(U)的模板產(chǎn)生了多聚苯丙氨酸，poly(A)產(chǎn)生多聚賴氨酸，poly(C)產(chǎn)生了多聚脯氨酸，poly(G)沒(méi)有起作用。Proteinsynthesis--------GeneticCode這樣歷史上第1次破譯出的3個(gè)遺傳密碼子。11本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第11頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分用兩種不同的核苷酸（例如U核G）混合物作為底物，利用多核苷酸磷酸化酶（polynucleotidephosphorylase

)，可以合成這種模板。2種核苷酸相對(duì)濃度不同，產(chǎn)生的模板類型也不同。例如U/G=0.76/0.24時(shí)，形成的產(chǎn)物三聯(lián)體中，UUU數(shù)量最多，有2U和1G的模板次之，1U和2G的模板第三多。GGG最少。Proteinsynthesis--------GeneticCode隨機(jī)共聚物模板（Randomco-polymers）12本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第12頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode隨機(jī)共聚物模板（Randomco-polymers）通過(guò)這種方法，測(cè)定了許多氨基酸的密碼子的組成。但是不能知道密碼子的精確順序。13本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第13頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分20世紀(jì)60年代，人們發(fā)現(xiàn)使用的合成的三核苷酸可以吸附到核糖體上，并且結(jié)合在特殊的氨酰-tRNA上形成復(fù)合物。使用一種特殊的濾膜，只有核糖體、三聯(lián)體密碼和氨酰tRNA形成的復(fù)合物才能被滯留在膜上。Proteinsynthesis--------GeneticCode人工合成的三核苷酸14本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第14頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分這樣，通過(guò)使用化學(xué)方法合成的三核苷酸作為模板，大約有50個(gè)密碼子得到破譯。Proteinsynthesis--------GeneticCode15本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第15頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分有確定重復(fù)順序，長(zhǎng)度為2-4個(gè)的多聚核苷酸模板模板(UUC)n,(AAG)n,(UUG)n,……(UAUC)n,(UUAC)n,……..產(chǎn)物(Phe)n,(Ser)n,(Leu)n(Lys)n,(Arg)n,(Glu)n(Leu)n,(Cys)n,(Val)n……(Tyr-Leu-Ser-Ile)n;(Leu-Leu-Thr-Tyr)n……通過(guò)這種實(shí)驗(yàn)，最終確定了61個(gè)密碼子的確定的精確的序列。另外的3個(gè)密碼子是終止密碼子。Proteinsynthesis--------GeneticCode16本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第16頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分標(biāo)準(zhǔn)遺傳密碼表Proteinsynthesis--------GeneticCode破解遺傳密碼*17本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第17頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCodeDNA與蛋白質(zhì)的共線性18本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第18頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCodeDNA與蛋白質(zhì)的共線性19本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第19頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分1.2遺傳密碼的特點(diǎn)（1）沒(méi)有標(biāo)點(diǎn)符號(hào)（2）一般沒(méi)有重疊（3）密碼子具有簡(jiǎn)并性（同義密碼子）（4）密碼子的第3位堿基具有擺動(dòng)性。（5）起始密碼子一般是AUG（6）密碼子在生物中幾乎是通用的（7）不同生物使用密碼子有“偏愛(ài)性”Proteinsynthesis--------GeneticCode20本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第20頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode三聯(lián)體密碼子沒(méi)有標(biāo)點(diǎn)符號(hào)，堿基的插入或缺失會(huì)導(dǎo)致結(jié)果產(chǎn)物蛋白質(zhì)的不同21本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第21頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode線粒體內(nèi)的非標(biāo)準(zhǔn)密碼22本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第22頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode密碼子的簡(jiǎn)并性23本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第23頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode病毒基因組中重疊基因的重疊密碼子24本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第24頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode噬菌體φX174具有重疊基因25本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第25頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分噬菌體中的重疊基因噬菌體φX174的基因組全長(zhǎng)為5386bp，編碼10種不同的蛋白質(zhì)，分別命名為A到K,大小如下所示。計(jì)算一下，編碼這樣的10種蛋白質(zhì)需要的DNA是多少？結(jié)果與噬菌體的基因組所含有的DNA進(jìn)行比較，如何解釋？Proteinsynthesis--------GeneticCode蛋白質(zhì)氨基酸數(shù)目蛋白質(zhì)氨基酸數(shù)目

A455F427B120G175C86H328D152J38E91K5626本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第26頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode密碼子的擺動(dòng)性27本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第27頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode密碼子的擺動(dòng)性28本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第28頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode大腸桿菌中GUA既是終止密碼子，有時(shí)又編碼一種特殊的氨基酸－硒代半胱氨酸。這是發(fā)現(xiàn)的第21種氨基酸。29本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第29頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode第22種氨基酸---吡咯賴氨酸（pyrrolysine)2002年，科學(xué)家從一種產(chǎn)甲烷的細(xì)菌巴氏甲烷八疊球菌（Methanosarcinabarkeri）發(fā)現(xiàn)這種特殊的氨基酸。這種細(xì)菌將本來(lái)該是終止密碼子的UAG翻譯成一種氨基酸。30本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第30頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism第二節(jié)蛋白質(zhì)的合成2.1翻譯相關(guān)知識(shí)復(fù)習(xí)原核細(xì)胞多順?lè)醋悠鹗济艽a子前有SD序列真核細(xì)胞單順?lè)醋訜o(wú)SD序列5’端多有帽子結(jié)構(gòu)3‘端多有polyA31本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第31頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismSD序列32本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第32頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism細(xì)菌中基因轉(zhuǎn)錄和蛋白質(zhì)翻譯是連續(xù)的33本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第33頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分多聚核糖體(polysome)可提高翻譯效率Proteinsynthesis--------Mechanism34本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第34頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismtRNA的三葉草型結(jié)構(gòu)35本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第35頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismtRNA的三級(jí)結(jié)構(gòu)36本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第36頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismtRNA中的反密碼子與mRNA密碼子的配對(duì)方式是反平行方式。37本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第37頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------GeneticCode密碼子與反密碼子配對(duì)時(shí)，在密碼子的第3位上進(jìn)行的堿基配對(duì)可能不完全遵守Watson-Crick定律。反密碼子密碼子

AUCGGUCUGAIACU38本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第38頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism細(xì)胞中rRNA的種類原核細(xì)胞真核細(xì)胞39本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第39頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分原核細(xì)胞中，16SrRNA在識(shí)別mRNA上的蛋白質(zhì)合成起始位點(diǎn)方面有重要作用。Proteinsynthesis--------Mechanism回憶一下，有什么重要的作用？40本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第40頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分核糖體由許多種類的蛋白質(zhì)和rRNA組成Proteinsynthesis--------Mechanism41本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第41頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism細(xì)菌核糖體的組成42本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第42頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism橢圓球形，30S象一個(gè)胚胎，50S象一個(gè)有扶手的椅子，結(jié)合后接觸的面有一個(gè)大的空隙，蛋白質(zhì)的合成可能就在其中核糖體特點(diǎn)43本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第43頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism核糖體的結(jié)構(gòu)一直是結(jié)構(gòu)生物學(xué)家的主要研究焦點(diǎn)之一，經(jīng)過(guò)30年不懈的努力，核糖體的結(jié)構(gòu)終于得到了解決。44本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第44頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism45本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第45頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism50S亞基46本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第46頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism47本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第47頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism48本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第48頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism49本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第49頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism50本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第50頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分核糖體是一個(gè)核酶Proteinsynthesis--------Mechanism√最早提出者————Crick1968年√

Noller’s(Bartaetal.,1984)進(jìn)行的親和標(biāo)記實(shí)驗(yàn)表明，23SrRNA的一個(gè)保守環(huán)中的U2584和U2585距離P位點(diǎn)的CCA末端很近。√核糖體除去含有的許多蛋白質(zhì)之后，仍然具有肽酰轉(zhuǎn)移酶（peptidyl-transferase）活性。√

核糖體結(jié)構(gòu)顯示，在多肽合成的附近（18?距離之內(nèi)）沒(méi)有蛋白質(zhì)分子出現(xiàn)。51本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第51頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分2009年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)美國(guó)和以色列三位科學(xué)家因“對(duì)核糖體結(jié)構(gòu)和功能的研究”（forstudiesofthestructureandfunctionoftheribosome）而獲諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。VenkatramanRamakrishnan

ThomasA.Steitz

AdaE.Yonath

52本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第52頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分氨酰-tRNA合成酶（Amino-acyl-tRNASynthetase）反應(yīng)分2步:1氨基酸與ATP反應(yīng),形成氨酰-AMP2氨酰-AMP的氨酰基轉(zhuǎn)移到tRNA的3’端的CCA,形成氨酰-tRNA氨基酸+ATP+tRNA氨酰-tRNA+AMP+PPi每活化一個(gè)氨基酸,消耗掉2個(gè)高能鍵Proteinsynthesis--------Mechanism53本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第53頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism氨基酸與ATP反應(yīng)54本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第54頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism氨酰-AMP的氨酰基轉(zhuǎn)移到tRNA的3’端的CCA,形成氨酰-tRNA55本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第55頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism攜帶了氨基酸的tRNA叫做氨酰-tRNA56本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第56頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分2對(duì)相應(yīng)tRNA的特異性更高,如L-Ile-tRNASynthetase可以激活Val(纈氨酸),但是不能與tRNAIle結(jié)合.Proteinsynthesis--------Mechanism氨酰-tRNA合成酶的特點(diǎn)1對(duì)氨基酸有非常高的特異性3只能激活L-氨基酸。57本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第57頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism在蛋白質(zhì)合成過(guò)程中沒(méi)有校對(duì)步驟，這里的氨酰-tRNA合成酶對(duì)氨基酸和tRNA之間的嚴(yán)格配對(duì)，是保證蛋白質(zhì)正確合成的關(guān)鍵。有人將這種氨酰tRNA合成酶與tRNA之間的這種相互作用關(guān)系，稱為蛋白質(zhì)合成過(guò)程中的“第二遺傳密碼”。這種關(guān)系比第一密碼還要復(fù)雜。58本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第58頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分a每個(gè)氨基酸必須連接在tRNA分子上才可以用于蛋白質(zhì)的合成。Proteinsynthesis--------Mechanism氨基酸的活化具有重要意義b氨基酸與tRNA之間的連接鍵是高能鍵,用于氨基酸加入到新生的肽鏈末段形成肽鍵時(shí)使用。59本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第59頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismfMet-tRNAfMet

Met-tRNAmMet細(xì)菌的起始密碼子AUG合成的氨基酸是甲酰化的甲硫氨酸，肽鏈中的AUG蛋合成的氨基酸是非甲酰化的甲硫氨酸。60本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第60頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分蛋白質(zhì)的合成可分為幾個(gè)階段：（1）氨基酸的活化（2）起始（3）延伸（4）肽鏈的終止和釋放（5）新生肽的折疊和加工Proteinsynthesis--------Mechanism2.2蛋白質(zhì)合成的機(jī)制61本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第61頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分（1）氨基酸的活化Proteinsynthesis--------Mechanism由氨酰-tRNA合成酶催化完成，反應(yīng)在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行62本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第62頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分1

IF1和IF3與30S亞基結(jié)合30S亞基與mRNA結(jié)合(16SRNA可以識(shí)別起始密碼子前的SD序列)IF2與GTP結(jié)合，再與30S亞基結(jié)合，形成一個(gè)復(fù)合物。4攜帶起始氨基酸的tRNA與上述復(fù)合物結(jié)合，同時(shí)將IF3釋放，由此形成30S起始復(fù)合物。（復(fù)合物中有那些成份？30S,mRNA,fMet-tRNAfMet,andIF1,IF2,GTP).50S亞基與30S起始復(fù)合物結(jié)合形成70S起始復(fù)合物。釋放F1andIF2，水解GTP。Proteinsynthesis--------Mechanism（2）起始63本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第63頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分IF1和IF3與30S亞基結(jié)合30S亞基與mRNA結(jié)合(16SRNA可以識(shí)別起始密碼子前的SD序列)

IF2與GTP結(jié)合，再與30S亞基結(jié)合，形成一個(gè)復(fù)合物。攜帶起始氨基酸的tRNA與上述復(fù)合物結(jié)合，同時(shí)將IF3釋放，由此形成30S起始復(fù)合物。Proteinsynthesis--------Mechanism64本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第64頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分50S亞基與30S起始復(fù)合物結(jié)合形成70S起始復(fù)合物。釋放F1andIF2，水解GTP。起始tRNA位于P位點(diǎn)，A位點(diǎn)是空的，等待下一個(gè)密碼子。Proteinsynthesis--------Mechanism65本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第65頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism核糖體上至少有3個(gè)與tRNA結(jié)合的位點(diǎn)：Asitefor氨酰tRNA（aminoacyl-tRNA）Psitefor肽酰tRNA（peptidyl-tRNA）Esitefor卸載的tRNAs離開(kāi)核糖體66本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第66頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分a氨酰tRNA的結(jié)合除了起始的氨基酸外,所有的攜帶氨基酸的tRNA必須與延長(zhǎng)因子EF-Tu結(jié)合才能進(jìn)入A位點(diǎn).Proteinsynthesis--------MechanismTu和GTP結(jié)合,形成復(fù)合物,氨酰-tRNA與這個(gè)復(fù)合物結(jié)合,進(jìn)入A位點(diǎn),GTP水解,Tu-GDP離開(kāi)70S核糖體.Tu-GDP經(jīng)過(guò)與延長(zhǎng)因子Ts和GTP結(jié)合而恢復(fù)成Tu-GTP,準(zhǔn)備結(jié)合下一個(gè)氨酰-tRNA.（3）延伸67本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第67頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分b肽鍵的形成A位和P位上的氨基酸之間形成肽鍵，P位上的tRNA卸載。A位上的tRNA上攜帶有一個(gè)2肽。催化反應(yīng)的酶可能是23SrRNAProteinsynthesis--------Mechanism68本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第68頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分c移位（translocation)需要轉(zhuǎn)位因子EF-G和GTP.GTP水解,核糖體構(gòu)象發(fā)生改變,加上EF-G的作用使核糖體向著3‘方向移動(dòng)一個(gè)密碼子(3nt)的距離.原來(lái)P為上空載的tRNA移到E位,離開(kāi)核糖體,原來(lái)A位上攜帶2肽的tRNA移動(dòng)到P位,A位空出。Proteinsynthesis--------Mechanism69本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第69頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分3個(gè)終止因子(釋放因子):水解多肽鏈末段的肽-tRNA之間的鍵,將最后的tRNA和多肽鏈釋放,將70S復(fù)合物解離成30S和50S亞基準(zhǔn)備新一輪的合成.RF1識(shí)別UAG和UAARF2識(shí)別UGA和UAAProteinsynthesis--------Mechanism（4）肽鏈的終止和釋放70本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第70頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分（5）新生肽的折疊和加工（成熟）Proteinsynthesis--------Mechanism剛從核糖體上釋放出來(lái)的多肽鏈?zhǔn)菦](méi)有生物活性的，要經(jīng)過(guò)“成熟加工”的過(guò)程才能具備有生物活性。詳細(xì)內(nèi)容將在后面講述。71本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第71頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism蛋白質(zhì)的翻譯*蛋白質(zhì)合成之起始*蛋白質(zhì)合成之延伸*蛋白質(zhì)合成之終止*觀看蛋白質(zhì)合成動(dòng)畫72本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第72頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分2.3原核細(xì)胞和真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的區(qū)別Proteinsynthesis--------Mechanism真核生物和原核生物的蛋白質(zhì)合成中發(fā)生的主要事件是一致的，只是內(nèi)容方面有所差異。73本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第73頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分真核細(xì)胞比原核細(xì)胞有更多的起始因子參與,起始復(fù)合物更復(fù)雜,尋找起始密碼子的方式不同,起始氨基酸也不同。Proteinsynthesis--------Mechanism最大的區(qū)別在于合成過(guò)程的起始階段74本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第74頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分真核細(xì)胞的翻譯起始因子可以分為幾類,有些與原核的IF1、IF2、IF3有相似的功能.與mRNA結(jié)合,識(shí)別5‘端的帽子，除去mRNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)Proteinsynthesis--------Mechanism與核糖體亞基結(jié)合eIF6,eIF3,eIF4C(相當(dāng)于IF1和IF3)eIF4B,eIF4F,eIF4A,eIF4E75本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第75頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism取代其他起始因子如eIF5與輸送起始氨基酸有關(guān)如eIF2,eIF2B(相當(dāng)于IF2)76本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第76頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成起始從mRNA和游離的40S核糖體同時(shí)開(kāi)始。40S核糖體40S-eIF3-eIF4CeIF3、eIF4C＋攜帶起始氨基酸的tRNAeIF2、GTP＋tRNA-eIF2-GTP40S-eIF3-eIF4C-起始tRNA-eIF2-GTP77本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第77頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismmRNA依靠5’末端的帽子結(jié)構(gòu)eIF4F、eIF4BmRNA-eIF4F-eIF4B＋78本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第78頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism比較－原核細(xì)胞的翻譯起始事件的發(fā)生順序79本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第79頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------MechanismmRNA-eIF4F-eIF4B40S-eIF3-eIF4C-起始tRNA-eIF2-GTP形成起始復(fù)合物，然后通過(guò)掃描找到mRNA上的起始密碼子(密碼子掃描)。80本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第80頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism接著，起始因子eIF5取代eIF2和eIF3,并水解GTP，60S亞基與復(fù)合物結(jié)合之后，eIF4C被釋放，由此形成80S起始復(fù)合物，蛋白質(zhì)的翻譯起始結(jié)束。81本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第81頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism原核細(xì)胞與真核細(xì)胞在其它方面的區(qū)別原核細(xì)胞真核細(xì)胞起始因子延伸因子終止因子IF1,IF2,IF3多個(gè)EF-Tu,EF-Ts,EF-GeEF-1α/eEF-1β/eEF-1γRF1/RF2/RF31個(gè)82本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第82頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分Proteinsynthesis--------Mechanism原核細(xì)胞與真核細(xì)胞在其它方面的區(qū)別其它方面：核糖體大小、mRNA特點(diǎn)結(jié)構(gòu)上差異（SD序列、尾巴、帽子、單或多順?lè)醋咏Y(jié)構(gòu)）、起始氨基酸的差異等等。83本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第83頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分2.4蛋白質(zhì)合成的抑制劑Proteinsynthesis--------Mechanism多種抗生素的作用機(jī)理就是阻止或妨礙蛋白質(zhì)的合成。84本文檔共93頁(yè)；當(dāng)前第84頁(yè)；編輯于星期三\8點(diǎn)41分某些抗生素對(duì)蛋白質(zhì)合成的抑制位點(diǎn)作用階段抑制劑作用對(duì)象作用機(jī)理(位點(diǎn))起始鏈霉素細(xì)菌30S亞基的S12蛋白質(zhì)春雷霉素細(xì)菌16SrRNA延伸黃色霉素細(xì)菌EF-Tu-GTP不能釋放嘌呤霉素細(xì)菌氨酰tRNA類似物,進(jìn)入A位,形成肽鍵,使多肽提前釋放肽轉(zhuǎn)移紅霉素細(xì)菌,線粒體23SrRNA的修飾,抑制異位氯霉素細(xì)菌/線粒體50S蛋白質(zhì)/23SrRNA移位放線菌酮真核細(xì)胞抑制80S移位酶,對(duì)70S無(wú)效梭鏈霉素細(xì)菌EFG-GDP不能釋放