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神經(jīng)干動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定一實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊徽莆兆巧窠?jīng)標(biāo)本的制備方法。二掌握引導(dǎo)神經(jīng)干復(fù)合動(dòng)作電位和測(cè)定其傳導(dǎo)速度的基本原理。二相關(guān)知識(shí)(一)興奮及興奮性的概念(二)動(dòng)作電位的潛伏期、動(dòng)作電位時(shí)程和幅值1、動(dòng)作電位:各種可興奮細(xì)胞在受到刺激而興奮時(shí),可以在細(xì)胞膜靜息電位的基礎(chǔ)上發(fā)生一次短暫的,可向周圍擴(kuò)布的電位波動(dòng)。這種電位波動(dòng)稱為動(dòng)作電位。(三)、動(dòng)作電位的傳導(dǎo)局部電流的形式(一)、細(xì)胞外記錄(二)、神經(jīng)干的動(dòng)作電位神經(jīng)干是由許多粗細(xì)不等的有髓和無髓神經(jīng)纖維組成的混合神經(jīng),故神經(jīng)干動(dòng)作電位與單根神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位不同,它是由許多神經(jīng)纖維的動(dòng)作電位合成的一種復(fù)合電位。四實(shí)驗(yàn)原理(一)、單根神經(jīng)纖維動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)1、記錄出了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位的原理當(dāng)神經(jīng)纖維未受刺激時(shí),膜外與電極所接觸的兩點(diǎn)之間沒有電位差,所以兩電極之間也無電位差存在,掃描線為一水平基線。在神經(jīng)干左端給予電刺激后,則產(chǎn)生一個(gè)向右傳導(dǎo)的沖動(dòng)(負(fù)電位),當(dāng)沖動(dòng)傳到1電極(負(fù)電極)下方時(shí),此處電位較2處為低,產(chǎn)生了電位差,掃描線向上偏轉(zhuǎn),記錄出一個(gè)向上的波形(在電生理實(shí)驗(yàn)中,為了便于觀察,習(xí)慣上規(guī)定負(fù)波向上)。隨后,沖動(dòng)繼續(xù)向右側(cè)傳導(dǎo),離開1電極傳向2電極處。當(dāng)它到達(dá)2電極(正電極)下方時(shí),因1電極處神經(jīng)差不多已恢復(fù)到原來的狀態(tài),于是2電極處又較1電極處為負(fù),引起掃描線向下偏轉(zhuǎn),記錄出一個(gè)向下的波形。這樣,在神經(jīng)沖動(dòng)向右傳導(dǎo)的過程中,就記錄出了一個(gè)先升后降的雙相動(dòng)作電位。負(fù)電極在前時(shí),它首先記錄到神經(jīng)干表面由正變負(fù)的電位變化,經(jīng)歷了由正到負(fù)再到正的過程,因此記錄出動(dòng)作電位的上相。當(dāng)在后的正電極記錄到這種同樣的電位變化過程時(shí),顯示相反的情況,記錄出動(dòng)作電位的下相。如果互換正、負(fù)電極的位置,則記錄到先降后升的雙相動(dòng)作電位。
C.
A點(diǎn)神經(jīng)纖維多于B點(diǎn)(次要原因)。(二)、神經(jīng)干動(dòng)作電位的引導(dǎo)及其傳導(dǎo)五實(shí)驗(yàn)步驟(一)、制備蛙類坐骨神經(jīng)-脛腓神經(jīng)標(biāo)本通過觀看錄象讓學(xué)生學(xué)習(xí)制作方法(二)、連接實(shí)驗(yàn)裝置注意電極的安裝,正負(fù)不要接反。(三)、實(shí)驗(yàn)參數(shù)設(shè)置:經(jīng)纖維在靜息狀態(tài)下受到有效刺激可產(chǎn)生動(dòng)作電位,同一條神經(jīng)干中不同的神經(jīng)纖維興奮性不完全相同,且在一次興奮后興奮性發(fā)生改變,興奮以一定的速度在神經(jīng)干表面?zhèn)鲗?dǎo),神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)依賴于神經(jīng)纖維的完整性。
二、興奮性不應(yīng)期的測(cè)定
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模毫私鉁y(cè)定不應(yīng)期的方法和原理,并加深對(duì)興奮性在興奮過程中的變化過程的理解。
實(shí)驗(yàn)原理:神經(jīng)纖維受到適宜刺激后,產(chǎn)生興奮,即動(dòng)作電位。一次興奮產(chǎn)生后,必須經(jīng)絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期、超常期等變化后,興奮性才能恢復(fù)。本實(shí)驗(yàn)中先給一個(gè)條件刺激,再用另一個(gè)檢驗(yàn)刺激在興奮的不同時(shí)期給予刺
激,檢查神經(jīng)對(duì)檢驗(yàn)性刺激反應(yīng)的興奮閾值及所引起動(dòng)作電位的幅度。即可觀察到神經(jīng)組織興奮性的變化過程。
實(shí)驗(yàn)步驟:
1.制備坐骨神經(jīng)-腓神經(jīng)標(biāo)本,并浸在任氏液中,待其興奮性穩(wěn)定后實(shí)驗(yàn)。
2.連接儀器,設(shè)置實(shí)驗(yàn)參數(shù),觀察并測(cè)量神經(jīng)干的不應(yīng)期。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(見圖)
分析討論:
1.
刺激引起組織興奮必須在三方面達(dá)一定值,即一定的刺激強(qiáng)度,一定刺激持續(xù)時(shí)間及強(qiáng)度/時(shí)間變化率,本實(shí)驗(yàn)固定時(shí)間和強(qiáng)度/時(shí)間變化率,用連續(xù)兩次同樣的刺激作用神經(jīng)干,觀察第二次刺激能剛好能引起動(dòng)作電位產(chǎn)生的時(shí)間即為絕對(duì)不應(yīng)期,第二次刺激剛好能引起相同大小的動(dòng)作電位則可測(cè)出相對(duì)不應(yīng)期.
2.
一條神經(jīng)干中有無數(shù)條神經(jīng)纖維,每條神經(jīng)纖維的直徑和長(zhǎng)度不同,膜特性也不完全一樣,故興奮性不同,閾值各異,而本實(shí)驗(yàn)記錄到的雙相動(dòng)作電位是神經(jīng)干中各條神經(jīng)纖維動(dòng)作電位的復(fù)合表現(xiàn),故隨著刺激強(qiáng)度的增大雙相動(dòng)作電位幅度也增大.
3.
神經(jīng)纖維傳導(dǎo)興奮需要神經(jīng)具有生理完整性,即結(jié)構(gòu)和功能完整,
4.
神經(jīng)干結(jié)扎棉線不要留得太長(zhǎng),以免引起干擾信號(hào),調(diào)整接地電極的位置可減小刺激偽跡的干擾作用,如果實(shí)驗(yàn)中未能引導(dǎo)出動(dòng)作電位曲線,可檢查以下項(xiàng)目::(1)坐骨神經(jīng)干在分離過程中是否損傷(2)刺激電極的極性是否接反(3)引導(dǎo)電極是否接上或神經(jīng)標(biāo)本是否與引導(dǎo)電極接觸良好(4)記錄系統(tǒng)靈敏度是否調(diào)到一定大小。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:興奮性的不應(yīng)期包括絕對(duì)不應(yīng)期、相對(duì)不應(yīng)期、超常期、低常期。(一)、備的標(biāo)本盡可能長(zhǎng)些,避免損傷。(二)、
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