生物技術與工程（滿分：100分時間：75分鐘）一、選擇題（共20個小題，每小題2分，共40分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．[2023·遼寧模擬]“踏漿發酵釀酒法”是唐朝的一種主流紅酒釀造工藝。踏漿發酵即是碾碎葡萄，用葡萄汁單純發酵。“十年味不敗”說明唐朝紅酒技術的優良之處。下列相關說法錯誤的是（）A．在葡萄酒釀制的整個過程中需要先通氣后密封B．酒精生成過程合成ATP所需能量來自于葡萄糖中的化學能C．“踏漿”有利于葡萄皮表面的酵母菌與葡萄汁液充分混合D．“十年味不敗”主要與酵母菌發酵生成的酒精的消毒作用有關2．[2023·福建漳州一模]唐代蘇敬的《新修本草》云：“凡作酒醴須曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒獨不用曲”。葡萄不僅可以釀造果酒，還可以釀造果醋，制作過程如下圖。下列分析正確的是（）A．“蒲桃、蜜等酒獨不用曲”說明葡萄釀制果酒不需要微生物B．取新鮮葡萄制作果酒、果醋時應先去梗再沖洗C．制作果酒、果醋的后期都需要密閉處理D．圖中①過程比②過程產生的氣體多3．[2023·東北高三模擬]屠宰場廢棄血污不經過處理直接排放，會對環境造成污染。傳統的處理方法有填埋法和焚燒法等。填埋法易造成地表環境、地下水資源污染。焚燒法處理也會造成大氣污染，且廢棄物中所含的蛋白資源不能得到有效利用。研究人員以屠宰場血污堆積土壤為分離基質，利用血平板培養基（添加了動物血液），分離出了高效降解血紅蛋白的菌株，并初步用于降解廢棄血液、生產氨基酸液態肥料。下列敘述正確的是（）A．上述菌株分離純化過程中用到了稀釋涂布平板法和平板劃線法B．對分離純化得到的菌株培養后進行計數，只能采用稀釋涂布平板法C．血平板培養基上透明水解圈小的菌落分泌的蛋白酶的活性往往較高D．實驗中廢棄培養基因含有降解血污的微生物，可以直接填埋4．[2023·湖北十堰市模擬]進行垃圾分類收集可以減少垃圾處理時間，降低處理成本。科研小組欲分離及培養若干種微生物用于對濕垃圾（包括剩菜剩飯、骨頭、菜根菜葉、果皮等食品類廢物）的處理。下列有關敘述正確的是（）A．在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和操作者的雙手進行滅菌B．培養過程需要向培養基通入無菌空氣并進行攪拌，目的是使菌體充分接觸營養物質和溶解氧，促進細菌繁殖C．科研小組若從生活垃圾中分離分解尿素的微生物，可在培養基中加入酚紅指示劑，如果有尿素分解菌存在，則培養基中該菌落的周圍會出現黑色D．衛生紙類垃圾可采用焚燒的方式處理，有效減少對環境的污染5．[2023·浙江模擬]對酵母菌活菌進行計數時，下列做法可導致統計的活菌數高于實際值的是（）A．用同一只移液管配制一系列一定濃度梯度的稀釋液B．用直接計數法對臺盼藍染色后的活酵母菌進行計數C．用稀釋涂布平板法計數時，酵母菌的培養時間不足D．用倒平板接種酵母菌時，培養基的溫度過高6．[2023·四川綿陽鹽亭中學校考一模]利用微生物分解纖維素對廢棄物污染的減輕和作物秸稈再利用具有重要意義。某興趣小組從富含纖維素的土壤中取樣，加入選擇培養基中進行振蕩培養，之后接種于鑒別培養基上進行培養，篩選出能夠分解纖維素的微生物。下列敘述錯誤的是（）A．選擇培養的目的是促進纖維素分解菌生長，抑制其他微生物的生長B．振蕩培養可以增加溶氧量，促進微生物對營養物質的充分接觸和利用C．鑒別培養基上涂布接種時，將1mL菌液滴到培養基表面再用涂布器涂布均勻D．加入剛果紅的鑒別培養基上出現透明圈的菌落，可能是能夠分解纖維素的微生物7．[2023·浙江模擬]下列關于植物細胞工程的說法錯誤的是（）A．圖中的“馬鈴薯番茄”目前沒有什么生物技術可以成功獲得，是人們處理圖片偽造出來的B．“馬鈴薯番茄”通過植物體細胞雜交技術獲得了成功，但沒有獲得人們預期的性狀C．成功培養原生質體是植物體細胞雜交技術的基礎D．通過植物體細胞雜交技術，能克服遠緣雜交不親和的障礙，獲得新品種8．[2023·湖南郴州一模]科學家利用馬鈴薯和西紅柿葉片分離原生質體并進行細胞雜交，最終獲得了雜種植株，相關過程如圖所示。有關分析正確的是（）A．過程①應將葉片上表皮向上，置于含纖維素酶和果膠酶的等滲或略高滲溶液中B.過程②中的原生質體由細胞膜、液泡膜及兩層膜之間的細胞質構成C．④過程常用滅活病毒誘導法，目的是促進原生質體融合D．⑤進行脫分化和再分化過程，雜種植株一定具有馬鈴薯和西紅柿的優良性狀9．[2023·浙江一模]用愈傷組織中的胚性細胞獲得轉基因植株的流程如下圖所示，其中①、②、③表示過程。下列敘述錯誤的是（）eq\a\vs4\al(胚性,細胞)eq\o(→,\s\up7(①))eq\a\vs4\al(原生,質體)eq\o(→,\s\up7(②))eq\a\vs4\al(含目的,基因的,原生質體)eq\o(→,\s\up7(③))eq\a\vs4\al(轉基因,植株)A．①過程去除細胞壁可提高②過程中目的基因導入的成功率B．相比①過程，③過程需降低培養基的滲透壓C．除了上圖所示途徑，植物體細胞雜交也可打破遠緣雜交不親和的障礙D．原生質體無細胞壁呈球形，③過程中胞質分裂的方式與動物細胞相同10．[2023·山東泰安模擬]馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，能為人體提供豐富的熱量，且富含蛋白質、氨基酸及多種維生素、礦物質，尤其是其維生素含量是所有糧食作物中最全的，因此成為全球第四大重要糧食作物。馬鈴薯普通栽培種是同源四倍體，這使得馬鈴薯的雜交育種變得十分困難。若要通過二倍體馬鈴薯雜交來改良品種，則必須破解馬鈴薯單倍體、二倍體和四倍體的基因組，實現難度同樣很大。但植物細胞工程技術為馬鈴薯育種提供了可行的育種方案。下列相關植物細胞工程的說法，不合理的是（）A．利用植物組織培養可以高效、快速地實現種苗的大量繁殖B．利用莖尖分生組織培養脫毒苗，使植株具備抗病毒的能力，產品質量得到提高C．利用原生質體融合實現體細胞雜交，可以克服雜交不親和的障礙，充分利用遺傳資源D．利用培養的愈傷組織進行誘變育種，可以顯著提高變異頻率，獲得有用的突變體11．[2022·湖北卷]某興趣小組開展小鼠原代神經元培養的研究，結果發現其培養的原代神經元生長緩慢，其原因不可能的是（）A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B．為了防止污染將培養瓶瓶口密封C．血清經過高溫處理后加入培養基D．所使用的培養基呈弱酸性12．[2022·山東卷]如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯后重新偶聯可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）A．雙抗可同時與2種抗原結合B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產雙抗的漿細胞13．[2023·山東煙臺市模擬]單基因遺傳病可以通過核酸雜交技術進行早期診斷。有一對夫婦被檢測出均為鐮狀細胞貧血基因的攜帶者，為了能生下健康的孩子，每次妊娠早期都進行產前診斷。下圖為其產前核酸分子雜交診斷和結果示意圖，有關敘述不正確的是（）A．根據凝膠電泳帶譜分析，這對夫婦4次妊娠的胎兒中需要停止妊娠的是Ⅱ1和Ⅱ4B．將正常的血紅蛋白基因導入患者的骨髓造血干細胞中，可以達到治療的目的C．檢測突變基因的RNA分子探針的核糖核苷酸序列為—UGCACAA—D．正常人群中鐮狀細胞貧血基因攜帶者占1/10000，Ⅰ2若與一正常女性再婚，生出患病兒子的概率為1/8000014．[2023·山東青島一模]我國大陸首例由試管嬰兒分娩的“試管嬰兒二代寶寶”在北京大學第三醫院誕生，他的母親是我國大陸首例試管嬰兒。試管嬰兒技術的不斷進步，為許多不孕不育患者實現了做父母的心愿。下列相關敘述錯誤的是（）A．試管嬰兒技術所獲得的胚胎必須通過胚胎移植給受體才能獲得后代B．胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移C．精子接觸透明帶時，卵細胞膜會發生反應阻止多精子入卵細胞D．采集的卵母細胞和精子都要進行相應的處理才能完成體外受精過程15．[2023·江蘇揚州校考模擬]胚胎工程中各種胚胎操作技術如圖所示。下列分析正確的是（）A．從良種公牛體內獲得的精子可以直接與獲能的卵細胞結合受精B．早期囊胚a、b、c基因型相同，但發育得到的個體表型不一定相同C．d可直接移植給受體，得到小牛的途徑屬于有性生殖D．胚胎移植時因代孕牛幾乎對胚胎無免疫排斥，因此無需使用免疫抑制劑16．[2023·河北廊坊市第一中學校考一模]大多數哺乳動物的早期胚胎具有調節發育的功能，去掉早期胚胎的一半，仍可以發育成一個完整的胎兒，調節能力隨發育進程逐漸減弱甚至消失。晚期桑葚胚分割后分離的卵裂球仍具有調整發育的能力，重新致密化使卵裂球重新分布而發育至囊胚。下列說法不正確的是（）A．桑葚胚前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能B．囊胚期不同部位的細胞致密化程度不同C．胚胎分割屬于無性繁殖或克隆的范疇D．胚胎發育到原腸胚階段，可將其取出向受體移植17．[2023·江蘇無錫一模]基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質粒，以便于重組和篩選。已知限制酶Ⅰ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GATC－)，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GGATCC－)。根據圖示判斷下列操作正確的是（）A．目的基因和質粒均用限制酶Ⅱ切割B．目的基因和質粒均用限制酶Ⅰ切割C．質粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割D．質粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割18．SOD是一種廣泛分布于各種細胞中的抗氧化酶，它能催化超氧陰離子自由基形成H2O2，增強植物的抗逆性。下圖為培育能夠產生SOD農作物新品種的一種方式，有關敘述正確的是（）eq\o(\s\up7(植物細胞),\s\do5(（二倍體）))eq\o(→,\s\up7(\o(\s\up7(SOD基因)),\s\do5(\s\do5(↓)),①))新細胞eq\o(→,\s\up7(),\s\do5(②))eq\o(\s\up7(愈傷),\s\do5(組織))eq\o(→,\s\up7(),\s\do5(③))胚狀體→新品種A．①過程中最常用的方法是采用顯微注射技術將SOD基因導入植物細胞B．②、③分別表示脫分化、再分化過程，無需嚴格的無菌操作C．該育種方式利用了細胞工程和基因工程，能體現細胞的全能性D．利用植物組織培養生產SOD時，需要將外植體培養到胚狀體19．[2023·浙江模擬]蛋白質工程是當前的新興分子生物學技術，通過改造或合成基因，來改造現有的蛋白質或制造新的蛋白質，以滿足人類生產、生活的需求。下列關于蛋白質工程的說法錯誤的是（）A．蛋白質工程技術會改變組成蛋白質的氨基酸的種類、數目和排列順序B．蛋白質工程獲得的蛋白質都是自然界已存在的蛋白質（天然蛋白質）C．蛋白質工程不直接改造蛋白質的原因是改造基因易于操作且改造后可遺傳D．蛋白質工程生產出來的蛋白質的活性與天然蛋白質相似，而且穩定性更高20．基因工程是一種DNA操作技術，其表達載體的構建和檢測篩選是兩個重要步驟。下圖1為某種質粒簡圖，箭頭所指分別為限制酶EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位點。已知目的基因X的兩端分別有包括EcoRⅠ、BamHⅠ在內的多種酶的酶切位點。圖2表示運用影印培養法（指在一系列平板培養基的相同位置上接種并培養出相同菌落的一種微生物培養方法）檢測表達載體是否導入大腸桿菌。下列有關敘述錯誤的是（）A．同時使用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質粒，可避免酶切后質粒的自身環化B．轉化方法是將質粒表達載體溶于緩沖液后與經Ca2＋處理的大腸桿菌混合C．培養基A和培養基B分別含有四環素和青霉素D．從篩選結果分析，含目的基因X的菌落是4、6二、非選擇題（共5小題，共60分）21．（12分）葡萄酒是葡萄汁經酵母菌發酵而成的。釀制葡萄酒的兩個簡易裝置如圖所示。回答下列問題：（1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優點是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________（答出兩點即可）。（2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________（答出兩點即可）。（3）某同學若用乙裝置進行發酵，并設置兩個不同處理組（乙A和乙B），乙A裝置中保留一定量的氧氣，乙B裝置中沒有氧氣。在其他條件相同且適宜的情況下，測得一段時間內乙A和乙B中酒精含量的變化趨勢及乙A中氧氣含量的變化趨勢如曲線圖所示。圖中曲線①、②、③依次表示、、含量的變化趨勢。（4）從異化作用的類型看，酵母菌屬于生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于（填“自養型”或“異養型”）生物。22．（12分）[2023·天津市高三三模]綠水青山就是金山銀山，污水治理是生態文明建設的一項重要任務，利用微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一種難以降解的大分子有機物，PVA分解菌能產生PVA酶分解PVA，PVA與碘作用時能產生藍綠色復合物，當PVA被分解時藍綠色復合物消失，形成白色透明斑。請回答下列問題：成分MgSO4蛋白質X物質水瓊脂用量5g10g7g1000mL20g（1）表中是篩選出能高效分解PVA的細菌的培養基配方，表中X物質最可能為。（2）若圖中污水取樣是從聚乙烯醇（PVA）污染的水體中采集，通過圖示過程分離出分解聚乙烯醇（PVA）的菌落，則進行過程1的作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（3）若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋104倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養基表面，測得菌落數的平均值為160個，空白對照組平板上未出現菌落，則100mL原菌液中有PVA分解菌個，該接種方法是，通過該方法測量的菌落數值與實際值相比一般會（填“偏大”“偏小”或“相等”）。（4）要鑒定分離出的細菌是否為PVA分解菌，培養PVA分解菌的培養基中除了加入必需的營養物質外還需要加入用于鑒別PVA分解菌，若菌落周圍，則該菌為PVA分解菌。23．（12分）W是一種具有特定功能的人體蛋白質。某研究小組擬仿照制備乳腺生物反應器的研究思路，制備一種膀胱生物反應器來獲得W，基本過程如圖所示。回答下列問題：（1）步驟①中需要使用的工具酶有。步驟②和③所代表的操作分別是和。步驟④稱為________________________________________________________________________。（2）與乳腺生物反應器相比，用膀胱生物反應器生產W的優勢在于不受轉基因動物的（答出2點即可）的限制。（3）一般來說，在同一動物個體中，乳腺上皮細胞與膀胱上皮細胞的細胞核中染色體DNA所含的遺傳信息（填“相同”或“不同”），原因是。（4）從上述流程可知，制備生物反應器涉及胚胎工程，胚胎工程中所用到的主要技術有（答出2點即可）。24．（12分）[2022·遼寧卷]某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發過程中，需要表達N蛋白胞外段，制備相應的單克隆抗體，增加其對N蛋白胞外段特異性結合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備，流程如圖1eq\x(\a\al(N蛋白胞外,段基因重組,慢病毒質粒))eq\o(→,\s\up7(脂質體),\s\do5(導入))eq\x(\a\al(病毒包,裝細胞))eq\o(→,\s\up7(組裝),\s\do5(釋放))eq\x(\a\al(收集,病毒))eq\o(→,\s\up7(\a\vs4\al(感染海,拉細胞)),\s\do5())eq\x(\a\al(N蛋白胞外,段表達、純化))圖1（1）構建重組慢病毒質粒時，選用氨芐青霉素抗性基因作為標記基因，目的是。用脂質體將重組慢病毒質粒與輔助質粒導入病毒包裝細胞，質粒被包在脂質體（填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”）。（2）質粒在包裝細胞內組裝出由組成的慢病毒，用慢病毒感染海拉細胞進而表達并分離、純化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備，流程如圖2eq\x(\a\al(N蛋白,胞外段))eq\o(→,\s\up7(免疫小鼠),\s\do5(取脾組織))eq\x(\a\al(B淋巴細,胞懸液))eq\o(→,\s\up7(骨髓瘤細胞),\s\do5(融合))eq\x(多種雜交細胞)選擇性培養基eq\x(\a\al(N蛋白胞,外段抗體))eq\o(→,\s\up7(擴大培養))eq\x(\a\al(單克隆雜交,瘤細胞株))eq\o(→,\s\up7(96孔板))eq\x(雜交瘤細胞)圖2（3）用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后，取小鼠脾組織用酶處理，制成細胞懸液，置于含有混合氣體的中培養，離心收集小鼠的B淋巴細胞，與骨髓瘤細胞進行融合。（4）用選擇性培養基對融合后的細胞進行篩選，獲得雜交瘤細胞，將其接種到96孔板，進行培養。用技術檢測每孔中的抗體，篩選既能產生N蛋白胞外段抗體，又能大量增殖的單克隆雜交瘤細胞株，經體外擴大培養，收集，提取單克隆抗體。（5）利用N蛋白胞外段抗體與藥物結合，形成，實現特異性治療。25．（12分）[2023·湖北黃岡市模擬]丙肝病毒（HCV）是一種RNA病毒，人們將得到的HCV的多個抗原基因首尾相連，連接在同一調控元件下，可構成融合基因。對HCV感染的診斷步驟是：首先進行抗HCV抗體檢測，若檢測結果呈陽性則還需要進行HCV核酸檢測。HCV融合抗原可用于制作第三代HCV抗體檢測試劑。請回答下列問題：（1）首先需要獲得融合基因。即通過相關的RNA合成cDNA然后拼接起來，這個過程主要需要酶和DNA連接酶等。其次要利用PCR技術擴增融合基因。即先根據融合基因的核苷酸序列，設計并合成引物，若該融合基因的序列為（虛線處省略了部分核苷酸序列），則PCR設計應選用的兩種引物（部分）序列應分別為：①5′－AACTAT－3′，②。引物能與變性的融合基因單鏈結合，在催化作用下延伸，如此循環多次。（2）構建融合基因表達載體。如圖所示，表達載體上除了標注的DNA片段外，在融合基因上游還必須擁有的DNA片段（箭頭所示）是，其作用是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。（3）用融合基因表達載體轉化大腸桿菌感受態細胞。用含硫酸卡那霉素的培養基篩選出能生長的菌落，從而得到能產生HCV融合抗原的工程菌，原非感受態受體大腸桿菌細胞內應（填“含有”或“不含有”）硫酸卡那霉素抗性基因。（4）某人體內HCV抗體檢測結果呈陽性，但進行HCV核酸檢測時結果呈陰性，最可能的原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。模塊清通關卷生物技術與工程1．D在利用酵母菌發酵時最好是先通入足夠的無菌空氣，在有氧環境下使其繁殖，再隔絕氧氣進行發酵，A正確；酒精生成過程只在第一階段能合成ATP，故合成ATP所需能量來自葡萄糖中的化學能，B正確；踏漿發酵即是碾碎葡萄，有利于酵母菌與葡萄汁液充分混合，充分發酵，C正確；發酵過程中產生的酒精對其他微生物的生長有一定抑制作用，但主要在于葡萄酒制成后，在缺氧、呈酸性的發酵液中，絕大多數微生物無法適應這一環境而受到抑制，故“十年味不敗”，D錯誤。2．D葡萄釀制果酒需要葡萄果皮上的野生酵母菌，A錯誤；沖洗葡萄時，果皮難免會有破損，果肉會被水中的微生物污染，增加發酵失敗可能。因此取新鮮葡萄制作果酒、果醋時應先沖洗再去梗，B錯誤；制作果酒是利用酵母菌發酵，后期密閉處理、利于酵母菌無氧呼吸產生酒精；制作果醋是利用醋酸菌發酵，醋酸菌是好氧菌，不需要密閉處理，C錯誤；圖中①過程表示酒精發酵，酵母菌無氧呼吸產生CO2，圖中②過程表示醋酸菌利用乙醇轉化為乙醛，再將乙醛轉化為醋酸和水，不產生氣體，D正確。3．A由圖中兩個培養基中菌落的分布可知，上述菌株分離純化過程中用到了稀釋涂布平板法和平板劃線法，A正確；對分離純化得到的菌株培養后進行計數，可以采用稀釋涂布平板法，也可以采用顯微鏡計數法，B錯誤；血平板培養基上透明水解圈大的菌落分泌的蛋白酶的活性往往較高，C錯誤；實驗中廢棄培養基因含有降解血污的微生物，需要進行滅菌處理后再填埋，避免污染環境，D錯誤。4．B在微生物培養操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養基和培養皿進行滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法；操作者的雙手需要進行清洗和消毒，避免操作者受到傷害，A錯誤；進行培養的微生物大多為需氧型，在培養過程中向培養基通入無菌空氣并攪拌，可以增加溶氧量并使菌體充分接觸營養物質，以促進細菌生長繁殖，B正確；鑒別尿素分解菌時，可在培養基中加入酚紅指示劑，尿素分解菌代謝會產生氨，使pH升高，菌落周圍會出現紅色，C錯誤；衛生紙類垃圾不可回收且富含纖維素，可采用衛生填埋的方法，利用環境中的纖維素分解菌將其降解，可有效減少對環境的污染，D錯誤。5．A若用同一只移液管配制一系列一定濃度梯度的稀釋液，由于每次吸液后移液管中都有菌液殘留，這種做法會導致統計的活菌數高于實際值，A符合題意；直接計數法計數酵母菌活菌數量時，可用臺盼藍對酵母菌進行染色，能被染色的是死酵母菌，不能被染色的是活酵母菌，不會導致統計結果高于實際值，B不符合題意；用稀釋涂布平板法計數時，通常計數的結果都會比實際值低，若酵母菌的培養時間不足，統計的活菌數會比實際值更低，C不符合題意；用倒平板接種酵母菌時，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度約為28℃，若培養基的溫度過高，會殺死酵母菌，導致統計的活菌數低于實際值，D不符合題意。6．C選擇培養的原理是人為提供有利于目的菌生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長，因此選擇培養的目的是促進纖維素分解菌生長，抑制其他微生物的生長，A正確；振蕩培養可以增加溶氧量，促進微生物對營養物質和氧氣的充分接觸和利用，B正確；鑒別培養基上涂布接種時，將0.1mL菌液滴到培養基表面再用涂布器涂布均勻，C錯誤；加入剛果紅的培養基上所出現的有透明圈的菌落，可能是分解纖維素的細菌或依賴剛果紅而生存的真菌繁殖而成，D正確。7．A圖中的“馬鈴薯番茄”目前可以通過無性繁殖嫁接技術獲得成功，A錯誤；“馬鈴薯番茄”通過植物體細胞雜交技術獲得了成功，但沒有獲得人們預期的性狀，這與基因的相互作用及雜交細胞容易丟失染色體有關，B正確；細胞融合需要去除細胞壁，因此成功培養原生質體是植物體細胞雜交技術的基礎，C正確；植物體細胞雜交能克服遠緣雜交不親和的障礙，獲得新品種，D正確。8．A過程①應將葉片下表皮的一面朝下（能與溶液接觸），置于含有纖維素酶和果膠酶的溶液中去除細胞壁，原生質體沒有細胞壁，為避免原生質體吸水漲破，將葉片置于等滲或略高滲溶液中，A正確；原生質層是由細胞膜、液泡膜以及這兩層膜之間的細胞質組成，而原生質體是指植物細胞去除細胞壁后的剩余部分，B錯誤；誘導原生質體融合的化學法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2＋－高pH融合法等，滅活病毒是用于誘導動物細胞融合的方法，C錯誤；由于基因的選擇性表達，獲得的雜種植株不一定能夠表現親本的優良性狀，如番茄－馬鈴薯雜種植物，地上沒有結番茄，地下也沒有長馬鈴薯，D錯誤。9．D原生質體沒有細胞壁，①過程去除細胞壁可提高②過程中目的基因導入的成功率，A正確；由于①過程去除細胞壁，需提高培養基滲透壓，避免原生質體吸水漲破，③過程已長出細胞壁，可降低滲透壓，B正確；植物體細胞雜交是將不同種的植物體細胞原生質體在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成完整植物體的技術，可以打破遠緣雜交不親和的障礙，C正確；原生質體無細胞壁而呈球形，融合后的原生質體具有生物活性，但不具有細胞壁，無法表現優良的性狀，需要再生出細胞壁后才能進行分裂，因此③過程細胞分裂時會形成細胞板，進而形成細胞壁，與動物細胞的細胞膜向內凹陷的分裂方式不同，D錯誤。10．B利用植物組織培養技術的優點之一是可以高效、快速地實現種苗的大量繁殖，A正確；利用莖尖分生組織培育脫毒苗是因為莖尖分生組織細胞中不含病毒，而不是因為其含有抗病毒基因，所以，此方法不一定能使植株具備抗病毒的能力，B錯誤；利用原生質體融合實現體細胞雜交，可以克服遠緣雜交不親和，擴大親本范圍，充分利用遺傳資源，C正確；愈傷組織具有分裂旺盛的優點，適于誘變育種的取材，能提高突變頻率，D正確。11．A小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經元，細胞增殖能力強，不會造成生長緩慢，A符合題意；培養瓶瓶口密封會使培養液中缺氧，影響細胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使細胞生長緩慢，B不符合題意；血清經過高溫處理后，其中活性成分變性，失去原有功能，細胞生存環境嚴重惡化，可能使細胞生長緩慢，C不符合題意；小鼠內環境為弱堿性，所使用的培養基呈弱酸性，使細胞生存環境惡劣，可能造成細胞生長緩慢，D不符合題意。12．D根據題意，雙抗具有雙特異性，即可同時與2種抗原發生特異性結合，A正確；根據抗體與抗原特異性結合的原理，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物作用于特定的靶細胞，B正確；雙抗是由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子經過解偶聯后重新偶聯形成的，故而篩選時需要使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原—抗體檢測，從而篩選出具有雙特異性的抗體，C正確；同時注射2種抗原會刺激B細胞分化形成不同的漿細胞，進而產生兩種抗體，一種漿細胞只能產生一種抗體，并不能產生雙抗，D錯誤。13．A根據電泳條帶分析，假設患病基因用b表示，則夫婦基因型均為Bb，四個胎兒基因型分別依次是BB、bb、Bb、BB，應該終止妊娠的是2號胎兒，A錯誤；鐮狀細胞貧血是由基因突變導致的，屬于遺傳病，將正常血紅蛋白的基因導入患者的骨髓造血干細胞中可達到治療目的，B正確；據圖可知，突變基因的核苷酸序列－ACGTGTT－，按照堿基互補配對的原則，則作為探針的核糖核苷酸序列為－UGCACAA－，C正確；男性基因型為Bb，若與正常女子Bb（正常人群中鐮狀細胞貧血基因攜帶者占1/10000）再婚，則生出患病兒子的概率為1/10000×1/4×1/2＝1/80000，D正確。14．C核移植、轉基因或體外受精等技術獲得的胚胎均需通過胚胎移植給受體才能獲得后代，A正確；胚胎移植實質上是早期胚胎在相同生理環境條件下空間位置的轉移，B正確；在精子觸及卵細胞膜的瞬間，會產生阻止后來的精子進入透明帶的生理反應，這個反應稱作透明帶反應，C錯誤；體外受精之前，要對精子進行獲能處理，采集的卵母細胞，都要在體外經人工培養成熟后，才能與獲能的精子受精，D正確。15．D從良種公牛體內獲得的精子在體外獲能后才可以與培養到MⅡ期的卵母細胞結合受精，A錯誤；據圖可知，三種早期囊胚由不同受精卵發育而來，故a、b、c細胞核中的遺傳物質不一定相同，B錯誤；d是經過胚胎分割形成的兩個健康的胚胎，可直接移植給受體，該過程屬于無性生殖，C錯誤；受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發生免疫排斥反應，不需要注射免疫抑制劑，D正確。16．D桑葚胚前的每一個細胞都具有發育成完整胚胎的潛能，因為都含有相同的一套遺傳物質，A正確；囊胚期不同部位的細胞數目不同，其致密化程度不同，B正確；胚胎分割后形成的胚胎是相同的，屬于無性繁殖或克隆的范疇，C正確；胚胎發育到桑葚胚或囊胚階段，可將其取出向受體移植，D錯誤。17．C限制酶Ⅰ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GATC－)，限制酶Ⅱ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GGATCC－)，可知限制酶Ⅰ能夠識別和切割限制酶Ⅱ切割后的黏性末端；目的基因的右端限制酶Ⅰ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GATC－)，目的基因左端是限制酶Ⅱ的識別序列和切點是eq\a\vs4\al(↓,,－GGATCC－)，只有用限制酶Ⅰ才能同時將目的基因切割下來；質粒上有GeneⅠ和GeneⅡ兩種標記基因，分別有限制酶Ⅰ的識別序列和限制酶Ⅱ的識別序列；如果用限制酶Ⅰ切割，則GeneⅠ和GeneⅡ都被破壞，造成重組質粒無標記基因；用限制酶Ⅱ切割，則破壞GeneⅡ，保留GeneⅠ，其黏性末端和切割目的基因所在DNA的黏性末端相同，可以連接形成重組DNA。18．C①過程中最常用的方法是采用農桿菌轉化法將SOD基因導入植物細胞，A錯誤；②、③分別表示脫分化、再分化過程，均需要在嚴格的無菌條件下完成，B錯誤；該育種方式利用了細胞工程和基因工程，從植物細胞培育成植物個體，能體現細胞的全能性，C正確；利用植物組織培養生產SOD時，只需要將外植體培養到愈傷組織即可，D錯誤。19．B蛋白質工程技術是根據人們對蛋白質功能的特定需求，對蛋白質的結構進行設計改造，會改變組成蛋白質的氨基酸的種類、數目和排列順序，A正確；基因工程獲得的蛋白質都是自然界已存在的蛋白質（天然蛋白質），而蛋白質工程是根據人們的需求獲得的蛋白質，所以都是非天然的蛋白質，B錯誤；由于基因決定蛋白質，因此要對蛋白質的結構進行設計改造，最終還必須通過改造或合成基因來完成，故蛋白質工程不直接改造蛋白質的原因是改造基因易于操作且改造后可遺傳，C正確；蛋白質工程生產出來的蛋白質在天然蛋白質的基礎上經過改造，品質更加優良，活性與天然蛋白質相似，而且穩定性更高，D正確。20．C為避免酶切后質粒的自身環化，可同時使用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質粒，A正確；轉化方法是將質粒表達載體溶于緩沖液后與經Ca2＋處理的大腸桿菌混合，B正確；用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種限制酶對質粒進行切割時，會破壞四環素抗性基因，但不會破壞青霉素抗性基因，因此導入重組質粒的大腸桿菌能在含有青霉素的培養基上生存，但不能在含有四環素培養基上生存，所以培養基A和培養基B分別含有青霉素、四環素，含目的基因X的菌落是4和6，C錯誤、D正確。21．答案：（1）不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染（2）為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發酵旺盛時汁液溢出（3）乙A中的氧氣乙B中的酒精乙A中的酒精（4）兼性厭氧型異養解析：（1）試管中的X溶液有助于維持甲裝置的瓶中氣壓相對穩定，與乙裝置相比，用甲裝置釀制葡萄酒的優點是不需要開蓋放氣；避免了因開蓋引起的雜菌污染。（2）葡萄汁裝入甲裝置時，要留有約1/3的空間，這種做法的目的是為酵母菌大量繁殖提供適量的氧氣；防止發酵旺盛時汁液溢出。（3）分析題意可知，圖中曲線①、②、③依次表示乙A中的氧氣、乙B中的酒精、乙A中的酒精含量的變化趨勢。（4）從異化作用的類型看，酵母菌屬于兼性厭氧型生物；從同化作用的類型看，酵母菌屬于異養型生物。22．答案：（1）聚乙烯醇（或PVA）（2）通過選擇培養增加PVA分解菌的數量（3）1.6×109稀釋涂布平板法偏小（4）碘出現白色透明斑解析：（1）表格是篩選出能高效分解PVA的細菌的培養基配方，即該培養基屬于選擇培養基，該培養基的配制過程中應該以PVA為唯一碳源，因此表中X物質最可能為聚乙烯醇（或PVA）。（2）若圖中污水取樣是從聚乙烯醇（PVA）污染的水體中采集，通過圖示過程分離出分解聚乙烯醇（PVA）的菌落，則進行的過程1為選擇培養，其作用是增加PVA分解菌的數量。（3）要測定土壤稀釋液中微生物的數目，可在顯微鏡下用血細胞（血球）計數板直接計數。若將100mL含有PVA分解菌的土壤樣品溶液稀釋104倍后，取0.1mL稀釋液均勻涂布在選擇培養基表面，測得菌落數的平均值為160個，空白對照組平板上未出現菌落（說明制備的平板合格，且實驗操作可靠），則100mL原菌液中有PVA分解菌＝160÷0.1×104×100＝1.6×109個；這種接種方法為稀釋涂布平板法，由于在涂布過程中會出現兩個或多個細菌聚集