醫學微生物學

MedicalMicrobiology（第三講：細菌感染與免疫、診療與防治、消毒與滅菌）細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第1頁目錄細菌感染與免疫第一部分細菌致病機制第二部分抗細菌免疫機制細菌感染試驗室診療與防治標準第一部分細菌感染試驗室診療第二部分細菌感染防治標準消毒與滅菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第2頁一、基本概念（一）細菌感染（bacterialinfection）或傳染

細菌侵入宿主機體后，進行生長繁殖、釋放毒性物質等，引發不一樣程度病理損傷過程（二）致病菌或病原菌（pathogen）：能使宿主致病細菌

非致病菌或非病原菌（nonpathogenicbacterium,nonpathogen）

（三）正常菌群（normalflora)：

正常人體表和同外界相通口腔、鼻咽腔、腸道、泌尿生殖道等腔道中都借居著不一樣種類和數量微生物。當人體免疫功效正常時，這些微生物對宿主無害，有些對人還有利，是為正常微生物群，通稱正常菌群細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第3頁乳桿菌、大腸桿菌、類白喉桿菌、白假絲酵母菌陰道葡萄球菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌尿道大腸桿菌、產氣桿菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、葡萄球菌、糞鏈球菌、類桿菌、產氣莢膜梭菌、破傷風梭菌、雙歧桿菌、真細菌、乳桿菌、白假絲酵母菌腸道普通無菌胃葡萄球菌、干燥棒狀桿菌、奈瑟菌眼結膜葡萄球菌、類白喉桿菌、銅綠假單胞菌、非致病性分枝桿菌外耳道葡萄球菌、甲型和丙型鏈球菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、類桿菌鼻咽腔葡萄球菌、甲型和丙型鏈球菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、乳桿菌、類白喉棒狀桿菌、梭菌、放線菌、螺旋體口腔葡萄球菌、類白喉桿菌、銅綠假單胞菌、非致病性分枝桿菌、丙酸桿菌、白假絲酵母菌皮膚主要菌類部位人體常見正常菌群細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第4頁鼻咽腔葡萄球菌、甲，丙型鏈球菌肺炎球菌、奈氏菌、類桿菌等外耳道葡萄球菌、類白喉桿菌綠膿桿菌、非致病性分枝桿菌表皮葡萄球菌口腔甲，丙型鏈球菌類白喉桿菌、肺炎球菌奈氏菌、乳桿菌、梭桿菌螺旋體、放線菌、白念珠菌腸道大腸桿菌、產氣桿菌、變形桿菌綠膿桿菌、葡萄球菌、厭氧性細菌真菌、乳桿菌，雙歧桿菌等陰道大腸桿菌、乳桿菌白念珠菌、類白喉桿菌非致病性分枝桿菌等皮膚葡萄球菌、綠膿桿菌、白念珠菌丙酸桿菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌人體內正常菌群分布眼結膜白色葡萄球菌、干燥桿菌尿道白色葡萄球菌、類白喉桿菌、非致病性分枝桿菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第5頁正常菌群生理學意義：

1．生物拮抗——作屏障2．營養作用——產營養3．免疫作用——有免疫4．抗衰老作用——除廢物

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第6頁（四）條件致病菌（conditionedpathogen)機會致病菌（opportunisticpathogen)

有些細菌在正常情況下并不致病，在一些條件改變特殊情況下能夠致病。致病條件借居部位改變免疫功效低下菌群失調（dysbacteriosis）

菌群失調癥或菌群交替癥（microbialselectionandsubstitution）二重感染：金黃色葡萄球菌、白假絲酵母菌等細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第7頁（五）醫院取得性感染（hospitalacquiredinfection）病人在住院期間發生感染，通稱醫院內感染（nosocomialinfection）。1.交叉感染:由醫院內病人或醫務人員直接或間接傳輸引發感染。2.內源性感染:或稱本身感染，由病人自己體內正常菌群引發感染。3.醫源性感染:在治療、診療或預防過程中，因所用器械等消毒不嚴而造成感染。細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第8頁二、細菌致病機制（一）基本概念：1.細菌能引發感染能力稱為致病性（pathogenicity）或病原性。(質)2.致病菌致病性強弱程度稱為毒力（virulence），即致病性強度。(量)3.半數致死量（medianlethaldose,LD50）4.半數感染量（medianinfectivedose,ID50）（二）致病菌致病作用主要影響原因：1.細菌毒力強弱2.侵入宿主機體菌量3.侵入部位是否適當細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第9頁（三）細菌毒力物質：侵襲力、毒素(物質基礎)細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第10頁1、侵襲力（invasiveness）

致病菌能突破宿主皮膚、黏膜生理屏障，進入機體并在體內定植、繁殖和擴散能力莢膜黏附素侵襲性物質細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第11頁2、毒素（toxin）（1）外毒素（exotoxin）多數革蘭陽性菌和少數革蘭陰性菌在生長繁殖過程中釋放到菌體外蛋白質。外毒素特征分子結構：A-B模式A：活性亞單位B：結合亞單位可提純制疫苗ToxicBindingACellsurfaceB細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第12頁外毒素種類神經毒素

破傷風痙攣毒素、肉毒毒素細胞毒素

白喉毒素、葡萄球菌表皮剝脫毒素、葡萄球菌毒性休克綜合征毒素、A群鏈球菌致熱外毒素腸毒素

霍亂腸毒素、ETEC腸毒素、產氣莢膜梭菌腸毒素、葡萄球菌腸毒素細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第13頁（2）內毒素（endotoxin）

革蘭陰性菌細胞壁脂多糖,菌體死亡崩解時游離出來內毒素毒性作用發燒反應

白細胞反應

內毒素血癥與內毒素休克Shwartzman現象與DIC

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第14頁內毒素與外毒素比較弱，能刺激機體形成抗體，但無中和作用，甲醛處理后不能形成類毒素強，能刺激機體形成抗毒素，經甲醛脫毒后能形成類毒素抗原性較弱、各種內毒素作用大致相同，引發休克，發燒，DIC等強、對機體組織器官有選擇性，引發特殊臨床表現毒性作用好、160℃2～4小時破壞差、60～80℃30分鐘破壞穩定性脂多糖蛋白質化學成份細胞壁成份、細菌裂解后釋出活菌分泌或細菌溶解后散出存在部位革蘭陰性菌革蘭陽性菌及部分革蘭陰性菌起源內毒素外毒素種類細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第15頁目錄細菌感染與免疫第一部分細菌致病機制第二部分抗細菌免疫機制細菌感染試驗室診療與防治標準第一部分細菌感染試驗室診療第二部分細菌感染防治標準消毒與滅菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第16頁一、宿主免疫防御機制人體免疫系統組成：免疫器官和組織免疫細胞免疫分子免疫應答類型：天然免疫取得性免疫（一）天然免疫（innateimmunity）（非特異性免疫nonspecificimmunity）屏障結構、免疫細胞、免疫分子

1.屏障結構（1）皮膚與黏膜機械性阻擋與排除作用分泌殺菌物質正常菌群拮抗作用（2）血腦屏障（3）胎盤屏障

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第17頁2.吞噬細胞小吞噬細胞外周血中中性粒細胞大吞噬細胞血中單核細胞和各種組織中巨噬細胞（單核吞噬細胞系統）

吞噬過程接觸吞入殺滅吞噬后果完全吞噬不完全吞噬細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第18頁3.體液原因補體是正常血清中一組蛋白質溶菌酶（lysozyme）主要起源于吞噬細胞

防御素細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第19頁1.體液免疫：由特異抗體起主要作用免疫應答IgG、IgM、IgA、IgD、IgE抗菌抗體（調理素）抗外毒素抗體2.細胞免疫：以T細胞為主免疫應答CD4Th1細胞CTL(二)取得性免疫（acquiredimmunity）（特異性免疫,specificimmunity）細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第20頁3.胞外菌感染免疫機制（1）胞外菌（extracellularbacteria）：借居在宿主細胞外組織間隙和血液、淋巴液、組織液等體液中葡萄球菌、鏈球菌、志賀菌、霍亂弧菌、破傷風梭菌等（2）致病機制：產生毒性物質、引發炎癥反應（3）免疫機制中性粒細胞吞噬、殺滅產生抗體IgG抗體調理細菌促進吞噬（調理素）抗體中和細菌外毒素（抗毒素）激活補體經典路徑SIgA阻擋致病菌定植

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第21頁4.胞內菌感染免疫（1）胞內菌（intracellularbacteria）：兼性（facultative）和專性（obligate）專性胞內菌立克次體、衣原體兼性胞內菌結核分枝桿菌、麻風分枝桿菌、傷寒沙門菌、布魯菌、嗜肺軍團菌、產單核細胞李氏菌（2）致病機制：慢性病理性免疫損傷（3）胞內菌感染免疫：T細胞為主細胞免疫CD4Th1細胞產生細胞因子，活化巨噬細胞、CTL、引發遲發型超敏反應CD8CTL穿孔素、粒酶破壞感染細胞細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第22頁5.感染發生和發展

（1）感染起源外源性感染（exogenousinfection）起源于宿主體外 病人帶菌者攜帶有一些致病菌健康人，傳染病恢復期仍排菌者（主要傳染源）病畜和帶菌動物人畜共患病

內源性感染（endogenousinfection）起源于宿主體內或體表大多為正常菌群，少數為致病菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第23頁（2）傳輸方式與路徑呼吸道感染消化道感染創傷感染接觸感染節肢動物叮咬感染多路徑感染細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第24頁（3）感染類型(結局)①不感染②隱性感染(inapparentinfection)

當宿主體抗感染免疫力較強，或侵入病菌數量不多、毒力較弱，感染后對機體損害較輕，不出現或出現不顯著臨床癥狀，或稱亞臨床感染。特點：機體取得足夠特異免疫力傳染源③潛伏感染(latentinfection)

當宿主與致病菌在相互作用過程中暫時處于平衡狀態時，病菌潛伏在病灶內或一些特殊組織中，普通不出現在血液、分泌物或排泄物中。一旦機體免疫力下降，則潛伏致病菌大量繁殖，使疾病復發。結核分枝桿菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第25頁④顯性感染(apparentinfection)(傳染病)

宿主細胞受到不一樣程度損害，生理功效發生改變，并出現一系列臨床癥狀和體征

I.按疾病發生急緩分

急性感染（acuteinfection）慢性感染（chronicinfection）

II.按感染累及部位范圍分

局部感染（localinfection）全身感染（generalizedinfection；systemicinfection）細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第26頁III.全身感染可引發各種不一樣全身癥狀：毒血癥（toxemia）：

致病菌侵入宿主體后，只在機體局部生長繁殖，病菌不進入血循環，但其產生外毒素入血。外毒素經血抵達易感組織和細胞，引發特殊毒性癥狀。比如白喉、破傷風等。內毒素血癥（endotoxemia）:

革蘭陰性菌侵入血流，并在其中大量繁殖、崩解后釋放出大量內毒素；也可由病灶內大量革蘭陰性菌死亡、釋放內毒素入血所致。細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第27頁菌血癥（bacteremia）：致病菌由局部侵入血流，但未在血流中生長繁殖，只是短暫一過性經過血循環抵達體內適宜部位后再進行繁殖而致病。比如傷寒早期。敗血癥（septicemia）：致病菌侵入血流后，在其中大量繁殖并產生毒性產物，引發全身性中毒癥狀。鼠疫耶氏菌、炭疽芽胞桿菌等。膿毒血癥（pyemia）：化膿性病菌侵入血流后，在其中大量繁殖，并經過血流擴散至宿主其它組織或器官，產生新化膿性病灶。比如金黃色葡萄球菌膿毒血癥，常造成多發性肝膿腫、皮下膿腫和腎膿腫等。細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第28頁⑤帶菌狀態

有時致病菌在顯性或隱性感染后并未馬上消失，在體內繼續留存一定時間，與機體免疫力處于相對平衡狀態。帶菌者（carrier）是主要傳染源細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第29頁目錄細菌感染與免疫第一部分細菌致病機制第二部分抗細菌免疫機制細菌感染試驗室診療與防治標準第一部分細菌感染試驗室診療第二部分細菌感染防治標準消毒與滅菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第30頁一、細菌感染試驗室診療基本流程標本生化試驗血清學試驗動物試驗藥敏試驗直接涂片檢驗分離培養分子生物學技術（核酸雜交、PCR）其它(HPLC)細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第31頁注意無菌操作，盡可能防止雜菌污染。依據病程、細菌在體內分布及從人體排出路徑不一樣，采集對應標本。應在使用抗菌藥品前采集標本，不然在培養時應加入拮抗劑。盡可能采集病變顯著部位材料。標本必須新鮮，采集后盡快送檢。送檢過程中要采取適當保留方式。（一）標本采集與送檢標準細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第32頁1、顯微鏡觀察法——細菌形體微小，肉眼不能直接看到，必須借助顯微鏡（普通光學顯微鏡、電子顯微鏡）放大后才能觀察。（二）細菌形態學檢驗細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第33頁普通光學顯微鏡分辨率為0.25μm。普通細菌都大于0.25μm，故可用普通光學顯微鏡觀察。普通光學顯微鏡(lightmicroscope)細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第34頁電子顯微鏡分辨率為1nm。不但能看清細菌外形，內部超微結構可一覽無余。電子顯微鏡(electronmicroscope)肺炎鏈球菌莢膜莢膜細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第35頁透射電鏡掃描電鏡細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第36頁革蘭染色法：結晶紫碘液95%乙醇復紅抗酸染色：石炭酸復紅3%鹽酸酒精美蘭其它特殊染色（2）染色法——細菌體小半透明，經染色后才能觀察較清楚。1min1min1min脫色5min脫色

抗酸染色革蘭陽性菌革蘭陰性菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第37頁（三）細菌分離培養1、培養基（culturemedium）由人工方法配制而成，專供微生物生長繁殖使用混合營養物制品（1）培養基按營養組成和用途可分為：基礎培養基（basicmedium）增菌培養基（enrichmentmedium）選擇培養基（selectivemedium）判別培養基（differentialmedium）厭氧培養基（anaerobicmedium）（2）按物理狀態可分為：液體培養基、固體培養基、半固體培養基細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第38頁2、細菌在培養基中生長情況液體培養基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長A.均勻渾濁生長B.菌膜生長C.沉淀生長細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第39頁固體培養基：菌落，菌苔細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第40頁半固體培養基：無動力有動力細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第41頁3、培養基用途液體培養基：增菌固體培養基：純化，增菌半固體培養基：動力檢測，保種細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第42頁用已知細菌或其特異性抗原檢測患者體液中有沒有對應特異抗體和其效價動態改變。普通采取病人血清進行試驗，故稱為血清學診療(serologicaldiagnosis)。血清學診療試驗最好取患者急性期和恢復期雙份血清標本，當后者抗體效價比前者升高≥4倍時方有意義。慣用方法：直接凝集試驗、乳膠凝集試驗、沉淀試驗、補體結合試驗、中和試驗、ELISA。（四）血清學診療細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第43頁（五）細菌核酸檢測經過檢測細菌遺傳物質，包含細菌染色體DNA和染色體外遺傳物質，來確認細菌感染方法。也稱細菌基因診療。慣用方法：核酸雜交技術、多聚酶鏈反應技術細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第44頁目錄細菌感染與免疫第一部分細菌致病機制第二部分抗細菌免疫機制細菌感染試驗室診療與防治標準第一部分細菌感染試驗室診療第二部分細菌感染防治標準消毒與滅菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第45頁一、細菌感染防治（一）預防人工主動免疫：用于預防疫苗（vaccine）：

死疫苗（killedvaccine）

減毒活疫苗（liveattenuatedvaccine）

基因工程疫苗（geneticallyengineeringvaccine）

多肽疫苗（polypeptidevaccine）

亞單位疫苗（subunitvaccines）DNA疫苗（DNAvaccine）等

類毒素（toxoid）

人工被動免疫：用于治療或緊急預防抗毒素、抗菌血清、胎盤丙種球蛋白、免疫制劑

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第46頁（二）藥品治療細胞壁 青霉素 細胞膜 多粘菌素（作用于脂類）蛋白質合成 30S亞基 氨基糖苷類、四環素類 50S亞基 氯霉素、林可霉素、大內環酯類核酸代謝 喹諾酮類、利福平、磺胺類

細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第47頁目錄細菌感染與免疫第一部分細菌致病機制第二部分抗細菌免疫機制細菌感染試驗室診療與防治標準第一部分細菌感染試驗室診療第二部分細菌感染防治標準消毒與滅菌細菌感染和免疫診療和防治消毒和滅菌第48頁一、基本概念消毒(disinfection)殺死物體上病原微生物方