60Co誘變晉大78后代貯藏蛋白亞基相對含量的策略分析目前，世界上人類所得到的蛋白質80％來源于植物蛋白，其中16％來源于大豆［1。］大豆是蛋白質含量最高的作物之一，栽培大豆蛋白質含量一般為40％左右，野生大豆中有的材料蛋白質含量高達55％［2］。大豆種子中的蛋白絕大部分為貯藏蛋白，主要是11和球蛋白。因此，研究11和球蛋白就成為大豆蛋白質研究的主要內容。im等r和 i等4對11和 組分的亞基進行遺傳學研究，發現部分亞基是由顯性基因控制的。研究表明，增加11球蛋白的含量，降低球蛋白的含量，可以提高大豆蛋白的營養品質，調節11和 球蛋白的比例可以提高大豆的加工品質［5。］本研究以誘變后代為材料，對其大豆蛋白亞基相對含量進行檢測分析，探討誘變后代大豆品系的蛋白遺傳特性和變異規律，為通過誘變育種篩選大豆優質品種提供理論基礎和實踐依據。1材料和方法材料本試驗所用的材料是山西農業大學選育的農藝性狀好、品質優良的誘變親本——晉大及其誘變后代： 代。200年利用00劑量率為100R?min）對晉大號的風干種子進行輻照處理，得到1代共份材料；2010年收獲2弋后，2011年4月0日種植2弋與親本晉大，行長m行距0.5m，株距0.2m，二行區，重復3次。在生長期間按照當地水平進行管理，及時中耕鋤草，收獲后統一進行大豆貯藏蛋白的電泳分析。代寫論文方法貯藏蛋白的提取及電泳脫脂豆粉的制備：選取籽粒飽滿的大豆種子去皮，置于無菌的三層濾紙間用小鐵錘砸碎后放入研缽中研磨至粉末，分兩份分別放入1.5mL的離心管中，每管中加入1mL乙醚脫脂過夜。脫脂結束后倒去上清液，風干后-20℃保存備用。貯藏蛋白的提取：1.0脫脂豆粉加20mL50mmo1-L1的ri（值 ，0含0.01mo1?L|B巰基乙醇）提取液，室溫下提取1,離心（10000r-min，20min，4℃），取上清，用1mo1?L1調 值至4.5，離心（10000r?min，15min，4℃），棄掉上清，得到沉淀，經低溫干燥后得到大豆貯藏蛋白。電泳：采用不連續垂直板狀凝膠電泳，凝膠厚度1,濃縮膠濃度為,電流1 ,分離膠濃度為1，電流3,用考馬斯亮藍 染色，用蒸餾水漂洗?3次，再用甲醇、冰醋酸溶液(甲醇：冰醋酸：水=1：6：3)在脫色搖床上脫色，直至各亞基條帶清晰，最后冰醋酸固定。電泳完成后用 型凝膠成像分析系統拍照。1 數據分析蛋白譜帶用 型凝膠成像分析系統拍照，并用其自帶的軟件進行分析，各試驗數據采用 及 3軟件進行分析。□畢業論文□2結果與分析晉大及其誘變后代貯藏蛋白 譜帶劃分口部分誘變后代的大豆貯藏蛋白質 圖譜見圖1、圖，由此可以看出，大豆儲藏蛋白質都是由一系列亞基組成，其中包括含量較高的a,,a,p, 3和幾條未命名的譜帶，各條帶在凝膠上可以清晰分辨，含量差異較大。□這與國外的兩個 圖譜中 球蛋白的a,、a、p和11球蛋白的酸性亞基及堿性亞基的帶型位置完全吻合，進一步說明本試驗的 圖譜劃分是正確的。，.晉，大78及其誘變后代大豆球蛋白各亞基相對含量統計分析由表1可知，人工誘變晉大后代貯藏蛋白不同亞基含量變異較大，大豆球蛋白中的a,,a,p,y和球蛋白總量平均數分別為 ，11 31 6,6, ；1大豆11球蛋白中的3亞基、 亞基含量、 亞基和11組分平均含量分別為7.5,61冰7.6,0，冰5.9,53冰.3，。由冰各亞基平均含量分析可知，11球蛋白含量高于球蛋白含量；11組分中各亞基含量 亞基〉亞基〉3亞基；組分中各亞基含量p亞基〉a亞基〉a/亞基〉y亞基。□代寫論文□同時，表1中各個亞基的變異系數為a'( 3,a( 3、p( )3Y( 7、總球蛋白(323()、亞基()3亞基（）、總球蛋白（）和（3。其中變異系數最大的為Y亞基，達到，變異系數最小的是亞基，為，而且各亞基變異系數都大于20，%進一步說明了誘變后代的不穩定性和大豆貯藏蛋白的各個亞基在不同大豆品系間含量變異也很大。晉大及其誘變后代 和組分亞基含量的相關性分析口對誘變后代 和組分亞基含量的相關性分析（表2可知，球蛋白與總球蛋白在 水平上呈顯著負相關，相關系數為 ，說明和球蛋白之間彼此制約，此消彼長。總球蛋白與a亞基、Y亞基在水平上達極顯著正相關，相關系數分別為 和，與a,亞基在水平上達顯著正相關，相關系數為 ；球蛋白與亞基和亞基在水平上達到極顯著正相關，相關系數分別為 和，但是球蛋白與a亞基、Y亞基在0.0水，平上達到極顯著負相關，相關系數分別為和；與a亞基、a,亞基、 球蛋白在 水平上達到極顯著負相關，相關系數分別為 ， ， ，與亞基、亞基和總在水平上達到極顯著正相關，相關系數分別為， ， 。由此可知，大豆球蛋白各組分之間相互影響，改變其中任一組分的含量都會直接和間接的影響其它組分。作文/zuowen/□大豆球蛋白 比值分布口從表中可以看出，大豆球蛋白 比值最大值為 ，最小值為，平均值為。然而從圖誘變后代球蛋白 比值分布圖來看， 比值主要分布于 ?之間，為對照， 比值為 ，最高值達到 ，是人工誘變后代，2號材料，該材料較晚熟，株高適中，有效分枝較多，株型較好，產量也較高，是一個綜合性狀比較好的材料。 比值最低的品種是、、號誘變后代，其單株產量較低，而且 的比值也低，所以其蛋白的營養□開題報告/html/lunwenzhidao/kaitibaogao/□：品質不是很好，進而說明人工誘變后代大豆品種間 差異較大。□根據表中 比值的百分比分布可以將誘變后代分為個類群，其中有材料的 比值分布在 ?之間，其中包括的 比值4材料的比值在?之間，還有 材料的 比值小于，以及個蛋白品質比要好， 比值大于的材料。這為選育球蛋白含量高或 高的大豆品種提供了一定的依據。□誘變后代大豆貯藏蛋白 1 組分與其種子總儲藏蛋白和脂肪含量的相關性口表所示為誘變后代個品系的總蛋白質和脂肪含量結果， 組分與組分及比值與種子總蛋白和脂肪含量的相關性見表料結果表明： 與組分及 比值與誘變后代大豆種子的總蛋白和脂肪含沒有顯著相關性。□3討論3，大1豆貯藏蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳方法的探討大豆種子富含脂類物質，達20左的右。因此，脫脂的好壞直接影響電泳結果，脫脂越徹底，電泳圖譜也越清晰、穩定。本試驗采用乙醚脫脂過夜，基本上消除了脂肪對電泳結果的影響，效果比較理想。由于在分離膠濃度較低（?）時，組分亞基分辨效果較好；在分離膠濃度較高（3時， 組分蛋白亞基分辨效果較好；在既要考慮分辨率又要考慮 和組分亞基分離綜合效果時，大豆貯藏蛋白亞基電泳分離膠濃度以12為的佳。因此，本試驗采取的分離膠濃度以12最的佳。簡歷大全/html/jianli/□3，關2于亞基含量計算本試驗采用亞基百分含量作為分析數據。由于影響 凝膠的因素較多，掃描相同大豆品種兩次 凝膠得到的亞基含量數據可能差異很大。大豆貯藏蛋白亞基占大豆貯藏蛋白質百分比是大豆品種的遺傳特性，不易受其它因素的影響，即使在兩次電泳時相同亞基占總蛋白含量也是不變的。因此，采用亞基百分含量作為分析數據能夠取得比直接采用掃描亞基含量峰面積更可信、更準確的試驗結果。誘變后代蛋白質 組分與組分亞基變異的分析口誘變育種與常規育種方法相比，具有方法簡便、育種周期短、效果好等特點，變異譜也有很大的差異，不僅擴大了選擇范圍，而且提高了選擇效果。由于突變育種所觀察到的性狀通常是單個或少數基因的性狀，因此，在其保持原有親本特征、改良單一性狀上尤為優越材本研究結果表明， 誘變大豆親本與后代貯藏蛋白亞基組成基本相同，但是各亞基在兩種球蛋白中所占百分量在不同品系間差異較大，變異系數最大的為Y亞基，達到 ，變異系數最小的是亞基，為，而且各亞基變異系數都大于 0說明 對晉大進行誘變，效果非常明顯，誘變后后代具有明顯的遺傳多樣性，變異幅度較大。另外，通過、以及的比值與大豆總蛋白和脂肪含量的相關性分析表明，它們之間沒有顯著的相關性，說明通過降低，、組分的含量或者提高，，組、分的含量對大豆的總蛋白和脂肪含量沒有影響，由此說明可以從誘變后代中選育，，、/比，值、高的品種。作文/zuowen/□如果良好的變異能夠在后代中穩定遺傳，其在選育出良好營養價值和加工品質的大豆新品種具有重大的意義。所以由于本研究是在代的基礎上研究的，到底這些貯藏蛋白的變異能不能夠穩定遺傳，還要進行進一步研究。參考文獻：[，楊]春燕，姚利波，劉兵強，等．國內外大豆品質育種研究方法與最新進展[J．]華北農學報，20