0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察藥學專業_第1頁
0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察藥學專業_第2頁
0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察藥學專業_第3頁
0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察藥學專業_第4頁
0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察藥學專業_第5頁
已閱讀5頁,還剩1頁未讀 繼續免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

#0.05%環孢素滴眼液穩定性的長期試驗考察1.前言環孢素(Cyclosporine,CS)是一種真菌源性、由11個氨基酸組成的親脂性環狀多肽類物質,也是一種高效免疫抑制劑。它廣泛地應用于器官移植和多種自身免疫性疾病的治療中[1],也是國際上認可的可以治療干眼癥的處方藥[2]。其藥理作用主要通過選擇性、可逆性地抑制T淋巴細胞而實現,通過轉導作用,作用于T細胞活化過程中信號,抑制神經鈣蛋白,進而抑制T細胞增長與分化⑶,最終達到免疫抑制效果。在臨床上多用于治療器官移植后的免疫排斥反應、類風濕性關節炎[4]等自身免疫疾病,并且可提高存活率。環孢素用于眼表疾病也具有顯著的療效。其在眼科的應用分為全身用藥和局部用藥兩種方式。然而全身用藥受到血-眼屏障等因素不易進入眼內,并且會帶來嚴重的不良反應[5],因此多為眼局部用藥。角膜移植排斥反應是由供體角膜的特殊抗原引起的一種炎性反應。環孢素作為一種強效免疫抑制劑,可有效抑制角膜移植后的免疫排斥反應[6],在臨床的治療方面仍以糖皮質激素和環孢素為主,但是長時間應用激素會產生多種不良反應。環孢素抑制T細胞由G0期向G1期轉變,從而抑制T淋巴細胞的抗原呈遞并抑制白介素2和Y-干擾素的產生,減輕術后的排斥反應⑺。蠶蝕性角膜潰瘍又名Mooren's潰瘍,是一種慢性、進行性、疼痛性角膜潰瘍,初發于角膜周邊部位,沿角膜周邊部延伸,并向角膜中央匍行發展,最終累及全角膜。術后常規應用激素和環孢素滴眼液及環磷酰胺等免疫抑制劑藥物治療。該術后藥物維持治療研究結果[8]證明局部環孢素滴眼液單獨或聯合板層角膜移植術可以有效治療難治性蠶蝕性角膜潰瘍。腺病毒感染引起的流行性角膜結膜炎(Epidemickeratitisconjunctivitis,EKC)是一種世界性廣泛流行的眼部傳染病,但可通過自身免疫系統的建立,很快自愈。其臨床特點是急性濾泡性或假膜性結膜炎,伴有角膜上皮下浸潤,常由免疫反應所引起。通常需要歷時一定時間才會吸收,長達數月、甚至數年潰瘍不會形成[9],如果瞳孔區發生了病變,定會對該病人的視力造成的傷害較為嚴重。Jeng[10]等報道應用環孢素聯合糖皮質激素點眼對其進行治療較為理想,應用環孢素進行治療會顯得更加有效、安全、無副作用。止匕外,環孢素多用于治療臨床中常見的干眼癥(DES)[11],干眼癥多為種復雜原因所致淚液質和量及動力學的異常從而導致淚膜不穩定性和或眼表面異常、并伴有眼部不適癥狀的一類疾病。在臨床方面用藥效果較好,可以有效緩解干眼等不適癥狀,且不良反應小,可以長期使用。干眼癥又名角結膜干燥癥(KCS),是因為眼表淚液減少、黏液分泌異常等原因引發的淚液蒸發較多,分布異常的綜合征。其大致可分為四種類型:①由于淚腺功能低下所致的水樣夜缺乏性干眼病;②由于沙眼、化學傷所致的黏性蛋白缺乏性干眼病;③由于眼瞼缺損、配帶角膜接觸鏡等導致淚液分布不均勻而引起淚液動力學異常;④由于瞼板腺功能障礙引起脂質缺乏性干眼癥;在普通人群中的發病率為0.3%[12],干眼癥的治療應著手于去除病因,減少眼表和淚腺的炎癥,改善淚膜的結構和功能。DES的發病率與多種因素有關,,其中50歲以上女性患病率約為男性的2倍。在某些疾病中,其發病率更高,如在糖尿病患者和風濕性關節炎患者中分別為54.3%和46.7%[13]。環孢素滴眼液療效好,且無全身性不良反應,近年來在歐美國家臨床得到了廣泛應用。對于斯耶格倫氏綜合征(Sjorgren'ssyndrome)這類與炎癥相關的干眼癥,可使用環孢素等消炎藥進行治療[14]。各類臨床試驗也證明,使用環孢素滴眼液能增加患者眼淚量。環孢素較人造眼淚的療效要好,某些患者經人造眼淚治療數月無效,但使用環孢素后效果顯著,且增強了患者角膜及結膜知覺的敏感度[15]。患有家族性淀粉樣多發性神經病變的患者,通過環孢素治療后干眼癥狀明顯減輕,且無任何不良反應[16]。環孢素的作用是有效緩解慢性干眼癥潛在的炎癥過程,局部應用環孢素能阻止某些患者干眼進程,對治療干眼癥有良好的療效。滴眼劑是眼病治療常用途徑。環孢素具有脂溶性,易溶于植物油中,現如今環孢素的眼用劑型為普通乳劑型滴眼劑。由于環孢素的相對分子質量大且呈疏水性,眼內通透性差,難以達到治療水平,影響療效。微乳(microemulsion,ME)系指粒徑為10?100nm的乳滴分散在另一種液體介質形成的熱力學穩定的膠體溶液。微乳一般在一定條件下可自發(或輕度振搖)形成,其乳滴多為大小比較均勻的球形,呈透明或半透明狀。微乳是由油相、表面活性劑(SF)、助表面活性劑(CoSF)以及水相組成的,在一定溫度長時間放置或離心(1300r/min,30min)均較穩定。我們按照《中國藥典》關于溶液顏色檢查法的方法、澄清度檢查法以及制劑穩定性指導原則的要求對該制劑的穩定性進行長期試驗考察。按藥物制劑穩定性重點考察項目,考察滴眼液性狀、可見異物、含量、PH值、有關物質及無菌情況。為0.05%環孢素滴眼液的生產、包裝、貯存、使用條件提供科學依據。

2儀器與試藥儀器數顯無極恒速攪拌器 (鞏義市英峪予華儀器廠)日本島津產LC-10AVP型高效液相色譜儀SPD-10AVP型紫外檢測器LC-10AVP泵CTO-10AVP柱溫箱Class-up工作站Shim-packvp-ODS色譜柱(150mm*4.6mm)日本島津產紫外分光光度計UV-2450隔膜真空泵GM-0.33 (天津市津騰實驗設備有限公司)電子分析天平AG135 (梅特勒-托利多儀器有限公司)實驗室pH計FE20ModelC3860A超聲儀滲透壓摩爾濃度測定儀SMC30B針頭式微孔濾膜過濾器一次性使用無菌注射器燈檢裝置實驗室pH計FE20ModelC3860A超聲儀滲透壓摩爾濃度測定儀SMC30B針頭式微孔濾膜過濾器一次性使用無菌注射器燈檢裝置A.B.C.D.(梅特勒-托利多儀器有限公司)(天河醫療儀器有限公司)(天津市雙吉色譜儀器經營部)(浙江京環醫療用品有限公司)帶有遮光板的日光燈光源不反光的黑色背景;不反光的白色背景和底部反光的白色背景(指遮光板內側)。溫度XMTA908光照強度XMTA808(重慶漢瞻儀器有限(天津天宇機電有限公司)藥品光照試驗箱公司)調溫調濕箱2.2試藥環孢素環孢素對照品大豆油聚乙二醇PEG400聚山梨酯80羥苯乙酯甲醇乙腈(福建科瑞藥業有限公司,批號:140201(N))(中國藥品生物制品鑒定所,含量為98.8%)(新興(鐵嶺)藥業有限公司,批號:15050106-2-01藥品光照試驗箱公司)調溫調濕箱2.2試藥環孢素環孢素對照品大豆油聚乙二醇PEG400聚山梨酯80羥苯乙酯甲醇乙腈磷酸 (化學純,石家莊市試劑廠冀都化學試劑有限公司)水為純化水三乙胺為分析純0.05%環孢素滴眼液(自制三批:160203,160204,160205)色譜用試劑為色譜純,其他試劑為分析純,水為注射用水。3方法樣品的制備:取羥苯乙酯0.3g加入700ml純化水,加熱使之溶解,加入60ml聚乙二醇-400,攪拌,混勻;取0.5g環孢素至乳缽中,加10ml大豆油,80ml聚山梨酯80,充分研磨,倒入上述溶液中,快速攪拌,加純化水至1000ml,混勻,0.45pm微孔濾膜過濾,無菌分裝,即得。色譜條件及方法學研究:色譜條件:色譜柱: Shim-packvp-ODS色譜柱(150mm*4.6mm)流動相:乙腈:甲醇:水:三乙胺(200:600:200:0.5),用磷酸調pH至U2.93檢驗波長:210nm柱溫: 65°C流速: 1.2ml/min進流量: 飽和進樣進樣量: 20^L樣品預處理:取C&固相萃取小柱兩個,串聯使用并將其活化(活化順序為:甲醇-水-水18-甲醇,每次各5ml),用5ml的移液管精密吸取樣品5ml至小燒杯中,用注射器全部吸取并緩慢打入小柱,收集濾液,用注射器二次吸取完全,再次通過小柱,棄去濾液,后用5ml純化水沖洗雜質,再用乙腈、水的混合液(1:1)洗脫樣品于10ml的容量瓶中定容,混勻。過濾(孔徑0.45pm),作為供試品。系統適應性實驗:用移液管精密量取該樣品5ml,按照3.2.2的處理方法操作,再3.2.1的色譜條件下進樣,記錄色譜圖,計算理論塔板數,分離度。比較標準品、樣品和空白微乳的色譜圖。標準曲線的繪制:精密稱取環孢素對照品25mg于50ml容量瓶中,用乙腈溶解并稀釋至刻度使成儲備液。再分別精密移取儲備液3,4,5,6,7ml于10ml容量瓶中,用乙腈稀釋至刻度,配成0.15,020.25,0.3,0.35Ng/ml的溶液,并按上述色譜條件分別進樣,記錄對應的峰面積。以峰面積(Y)與對照品濃度(X)回歸,觀察其是否呈良好的線性關系,計算其回歸方程。制劑穩定性的長期試驗考察:溶液的性狀:本品為淡黃色澄明液體。照《中國藥典》溶液顏色檢查法,配制黃綠色調標準比色液。分別取6℃±2℃條件下,于0月,1月,2月,3月的環孢素滴眼液樣品直接與標準比色液比較,樣品與標準色體積相等,同置白色背景前,平視觀察。3.3.2鑒別在含量測定項下記錄的色譜圖中,供試品主峰的保留時間與對照品主峰的保留時間分別一致。無菌情況的檢測:取本品0.05%環孢素滴眼液,采用薄膜過濾法處理,用0.1%無菌蛋白胨水溶液沖洗(每膜不少于100ml),以金黃色葡萄球菌為陽性對照菌,依照法檢查(中國藥典),應符合規定。334PH和滲透壓的檢查:本品pH值應在5.0?6.5之間,滲透壓摩爾濃度應在290?430mOsmol/kg范圍內。分別取6℃±2℃條件下0月,1月,2月,3月的0.05%環孢素滴眼液樣品適量,測定其pH值、滲透壓并觀察制劑理化性質是否穩定。可見異物檢查:分別取6℃±2℃條件下0月,1月,2月,3月的環孢素滴眼液樣品20支,去除容器標簽,把容器外壁清潔干凈,調節光照度至2000~3000lx,將供試品置于遮光板邊緣處,并在人眼的清晰觀測距離內(約為25cm),分別置于黑色和白色背景下,手持供試品頸部輕輕旋轉和翻轉容器使藥液中可能存在的可見異物懸浮(但應避免產生氣泡),輕輕翻搖后即用目檢視,重復3次,總時限為20秒。樣品制劑在靜置一定時間后輕輕旋轉時應無煙霧、狀微粒柱,且沒有檢出

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業或盈利用途。
  • 5. 人人文庫網僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論