實(shí)驗(yàn)生理實(shí)驗(yàn)基本操作_第1頁
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實(shí)驗(yàn)生理實(shí)驗(yàn)基本操作第1頁/共76頁動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)

第2頁/共76頁一、動(dòng)物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課目的掌握生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)驗(yàn)證某些生理學(xué)基本理論學(xué)會(huì)科學(xué)的思維方法,提高分析問題和解決問題的能力,培養(yǎng)嚴(yán)肅認(rèn)真的態(tài)度、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鞣椒ê蛯?shí)事求是的工作作風(fēng)。第3頁/共76頁二、實(shí)驗(yàn)報(bào)告的寫作與要求學(xué)號(hào)、姓名、班級(jí)、組別、日期

實(shí)驗(yàn)序號(hào)及實(shí)驗(yàn)題目實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)方法:簡要描述實(shí)驗(yàn)結(jié)果:報(bào)告之關(guān)鍵——真實(shí)討論和結(jié)論:報(bào)告之核心——根據(jù)已知的理論知識(shí)對(duì)結(jié)果進(jìn)行解釋和分析※按時(shí)上交,勿抄襲!!!第4頁/共76頁三、實(shí)驗(yàn)室規(guī)則守時(shí)守紀(jì),有事請假實(shí)驗(yàn)前——預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)中——有條不紊、嚴(yán)肅認(rèn)真、節(jié)約;仔細(xì)觀察、認(rèn)真思考分析實(shí)驗(yàn)后——器材整理、器械擦洗、實(shí)驗(yàn)室的清潔整理;整理實(shí)驗(yàn)記錄,得出實(shí)驗(yàn)結(jié)論、認(rèn)真撰寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告第5頁/共76頁成績組成1.實(shí)驗(yàn)報(bào)告:40分(前7次實(shí)驗(yàn))2.實(shí)驗(yàn)過程:40分(課堂隨時(shí)記錄打分)3.考

勤:10分4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):10分合計(jì):100分第6頁/共76頁識(shí)別常用手術(shù)器械并掌握其使用方法;學(xué)習(xí)常用生理實(shí)驗(yàn)儀器的基本原理與操作注意事項(xiàng);掌握動(dòng)物的正確抓握、麻醉、固定、采血方法實(shí)驗(yàn)一.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)第7頁/共76頁第8頁/共76頁第9頁/共76頁坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備,閾刺激,閾上刺激與最大刺激,骨骼肌的單收縮與復(fù)合收縮,心肌收縮記錄與心肌特性實(shí)驗(yàn)二.肌肉收縮的特性第10頁/共76頁第11頁/共76頁第12頁/共76頁第13頁/共76頁第14頁/共76頁紅細(xì)胞比容測定血沉的測定,血紅蛋白含量的測定;紅細(xì)胞計(jì)數(shù),白細(xì)胞計(jì)數(shù),實(shí)驗(yàn)三.血液的基本特性第15頁/共76頁第16頁/共76頁第17頁/共76頁1.學(xué)習(xí)蛙心灌流方法2.觀察鈣離子,鉀離子,腎上腺素,乙酰膽堿等體液因素對(duì)心臟活動(dòng)的影響。

實(shí)驗(yàn)四.離體蛙心灌流實(shí)驗(yàn)第18頁/共76頁第19頁/共76頁第20頁/共76頁學(xué)習(xí)和掌握兔動(dòng)脈血壓的直接測定方法學(xué)習(xí)血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)機(jī)理實(shí)驗(yàn)五.兔動(dòng)脈血壓的直接測定方法第21頁/共76頁第22頁/共76頁第23頁/共76頁學(xué)習(xí)胸內(nèi)負(fù)壓的測定方法,觀察在呼吸周期中胸內(nèi)負(fù)壓的變化規(guī)律2.學(xué)習(xí)肺牽張反射的機(jī)理,分析影響呼吸運(yùn)動(dòng)的因素實(shí)驗(yàn)六.胸內(nèi)負(fù)壓測定,呼吸運(yùn)動(dòng)調(diào)節(jié)第24頁/共76頁第25頁/共76頁第26頁/共76頁1.觀察動(dòng)物在體胃腸運(yùn)動(dòng)的形式(蠕動(dòng)、分節(jié)運(yùn)動(dòng)、擺動(dòng))及調(diào)節(jié)2.學(xué)習(xí)離體器官灌流的方法,理解哺乳動(dòng)物離體腸段的一般生理特性3.影響小腸吸收的因素實(shí)驗(yàn)七.腸胃運(yùn)動(dòng)的直接觀察和小腸吸收第27頁/共76頁第28頁/共76頁利用學(xué)過的生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù),自己命題設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),此節(jié)課以PPT形式展示,講解,同學(xué)互相討論。實(shí)驗(yàn)八.設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)及討論第29頁/共76頁識(shí)別常用手術(shù)器械并掌握其使用方法;學(xué)習(xí)常用生理實(shí)驗(yàn)儀器的基本原理與操作注意事項(xiàng);掌握動(dòng)物的正確抓握、麻醉、固定、采血方法實(shí)驗(yàn)一.生理學(xué)實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)知識(shí)第30頁/共76頁動(dòng)物生理學(xué)常用器械及用法介紹(一)手術(shù)刀1.執(zhí)握式2.執(zhí)筆式3.全握式4.反挑式第31頁/共76頁手術(shù)刀片的安裝第32頁/共76頁執(zhí)握式第33頁/共76頁全握式第34頁/共76頁直圓手術(shù)剪、彎圓手術(shù)剪直尖手術(shù)剪、彎尖手術(shù)剪直眼科剪、彎眼科剪(二)手術(shù)剪第35頁/共76頁(三)剪毛剪(彎圓手術(shù)剪)(四)止血鉗(大、中、小)有齒直止血鉗、有齒彎止血鉗無齒直止血鉗、無齒彎止血鉗蚊嘴鉗(蚊式止血鉗)第36頁/共76頁常用手術(shù)器材第37頁/共76頁第38頁/共76頁動(dòng)物生理學(xué)手術(shù)操作訓(xùn)練:

——家兔頸動(dòng)脈插管及動(dòng)脈血采集(一)兔抓握方法(二)麻醉(三)背位交叉固定(四)頸動(dòng)脈插管手術(shù)操作第39頁/共76頁(一)家兔的捉拿與保定第40頁/共76頁(二)混合麻醉劑注射Nembutal混合麻醉劑麻醉方法:全身麻醉靜脈注射——耳緣靜脈注射(兔)吸入式麻醉——小動(dòng)物局部麻醉皮下注射肌肉注射第41頁/共76頁Nembutal混合麻醉劑戊巴比妥鈉5克丙二醇40ml乙醇10.5ml蒸餾水49.5ml第42頁/共76頁耳緣靜脈注射速眠新0.2ml/kg第43頁/共76頁注意:

請不要直接注射麻醉劑先注射生理鹽水進(jìn)行練習(xí)第44頁/共76頁(三)背位交叉固定打活結(jié)背位交叉固定第45頁/共76頁背位交叉固定第46頁/共76頁(四)頸動(dòng)脈放血手術(shù)操作剪毛銳性剖開頸部皮膚鈍性分離肌肉直至暴露氣管鈍性分離頸動(dòng)脈(辨認(rèn)動(dòng)脈、靜脈、神經(jīng))用玻璃分針分離頸動(dòng)脈血管表面結(jié)締組織,暴露血管4-5cm長度鈍性分離迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)第47頁/共76頁7.穿雙線8.結(jié)扎離心端,用動(dòng)脈夾夾住向心端9.用眼科剪在離心端與頸動(dòng)脈成45度角剪一小口10.插入頸動(dòng)脈插管,結(jié)扎插管與血管結(jié)合部位11.松開動(dòng)脈夾,進(jìn)行頸動(dòng)脈放血。(四)頸動(dòng)脈放血手術(shù)操作第48頁/共76頁第49頁/共76頁第50頁/共76頁第51頁/共76頁第52頁/共76頁第53頁/共76頁第54頁/共76頁第55頁/共76頁第56頁/共76頁第57頁/共76頁第58頁/共76頁動(dòng)脈血壓的測定

(兔)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目血壓變化原因刺激減壓神經(jīng)降低刺激減壓神經(jīng)中樞端降低

減壓神經(jīng)為傳入神經(jīng)刺激減壓神經(jīng)外周端

無變化刺激迷走神經(jīng)中樞端無變化

迷走神經(jīng)為傳出神經(jīng)刺激迷走神經(jīng)外周端降低第59頁/共76頁返回第60頁/共76頁*家兔的主動(dòng)脈神經(jīng)為獨(dú)立的一條神經(jīng),也稱

減壓神經(jīng),易于分離和觀察其作用。*人、犬等動(dòng)物,主動(dòng)脈神經(jīng)與迷走神經(jīng)混為一條,不能分離。*反射的傳出神經(jīng)為心交感神經(jīng)、心迷走神經(jīng)和交感縮血管纖維.第61頁/共76頁迷走神經(jīng)減壓神經(jīng)交感神經(jīng)第62頁/共76頁

如何分離神經(jīng):

分離到可以看到頸總動(dòng)脈時(shí),不要急于分離神經(jīng),而應(yīng)該直接先觀察確定三根神經(jīng)所在的位置,三根神經(jīng)緊挨在一起,比較好辨認(rèn):最粗的為迷走神經(jīng);最細(xì)的為交感神經(jīng);居中的為減壓神經(jīng);

看清楚后再分離第63頁/共76頁RM6240生理信號(hào)采集處理系統(tǒng)介紹一.系統(tǒng)簡介1.集生物信號(hào)采集、放大、顯示、記錄與分析為一體,是傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(由放大器、記錄儀、刺激器和示波器組成)的換代產(chǎn)品。2.采用windows中文圖形界面,操作簡便易學(xué),可使用鼠標(biāo),可將圖形或?qū)嶒?yàn)數(shù)據(jù)導(dǎo)入Word、Excel中。3.系統(tǒng)功能更強(qiáng)大與靈活,可處理多種生理信號(hào),具有實(shí)時(shí)顯示、記錄、分析、處理、打印等多種功能。第64頁/共76頁二.軟件的使用

先開外置儀器,然后再進(jìn)入“實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)”,否則系統(tǒng)無法進(jìn)行“示波”或“記錄”,只能對(duì)以前記錄的波形進(jìn)行分析。第65頁/共76頁第66頁/共76頁采集頻率通道模式掃描速度時(shí)間常數(shù)靈敏度濾波頻率第67頁/共76頁采集頻率:系統(tǒng)采集數(shù)據(jù)的頻率,如采集頻率100kHz表示系統(tǒng)100000點(diǎn)/秒的速度采集數(shù)據(jù)。由于計(jì)算機(jī)畫一個(gè)波形是以若干點(diǎn)組成的,所以采集頻率應(yīng)高于信號(hào)頻率若干倍才能分辯出有效信號(hào)。信號(hào)頻率越高,需要的采集頻率就越高。通道模式:用來選擇放大器的工作模式,如:生物電放大器、血壓、張力、溫度、呼吸流量放大器等。掃描速度:計(jì)算機(jī)顯示波形的掃描速度,如1s/div表示水平方向一個(gè)大格代表1秒時(shí)間,相當(dāng)于描筆式記錄儀的走紙速度。靈敏度:物理意義與描筆式記錄儀的靈敏度相同,用于選擇放大器的放大倍數(shù)。相關(guān)參數(shù)第68頁/共76頁時(shí)間常數(shù):時(shí)間常數(shù)用于調(diào)節(jié)放大器高通濾波器的時(shí)間常數(shù),它與高通濾波器的低頻截止頻率成反比關(guān)系。如作神經(jīng)實(shí)驗(yàn)時(shí),因有效信號(hào)頻率高,應(yīng)該選擇小的時(shí)間常數(shù),將低頻成份隔離掉,以有助于基線的穩(wěn)定。有效信號(hào)頻率低時(shí),應(yīng)選擇高的時(shí)間常數(shù)或選擇直流,如作胃腸電實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇5s的時(shí)間常數(shù),作張力實(shí)驗(yàn)時(shí)選擇直流等等。時(shí)間常數(shù)代表放大器低頻濾波的程度,1s、0.1s、0.01s、0.001s分別對(duì)應(yīng)放大器的下限截止頻率為0.16Hz、1.6Hz、16Hz、160Hz。時(shí)間常數(shù)越小,下限截止頻率就越高,即對(duì)低頻成分的濾波程度越大。當(dāng)選擇直流時(shí),放大器不作高通濾波。第69頁/共76頁濾波頻率:用來濾除信號(hào)的高頻成分。當(dāng)信號(hào)有效成份頻率較低時(shí),應(yīng)選擇低的濾波頻率,以濾

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