目 目 錄引 言…… 1第一部分文獻綜述……41生物學研究……4.1細胞學研究……4.2種子的PAGE分析……52化學成分研究……52.1黃酮類化合物……52.2揮發油類……72.3氨基酸……72.4無機鹽和微量元素……82.5酚酸類……83鬼針草的藥理作用研究……83.1抗菌、抑菌作用……83.2抗炎癥作用……93.3對胃液酸度和分泌量的作用……93.4對中樞神經系統的作用……93.5對心臟的作用……93.6對血壓的影響…… 03.7對血脂及血栓的影響…… 03.8對血小板聚集功能的影響…… 03.9對上呼吸道感染作用…… 03.0對體外血病細胞的抑制作用…… 03.H 抗痢疾作用…… 03.2保肝作用…… H3.3對血糖的影響…… H4鬼針草的臨床研究…… H4.1預防感冒、流感…… H44.2治療闌尾炎…… H4.3治療急性黃疽型肝炎…… H4.4治療慢性前列腺炎…… H4.5治療原發性高血壓…… H5開發前景…… H第二部分本草學考證…… 31名稱考證…… 32基源考證…… 33功能主治考證…… 44性味歸經考證…… 5第三部分生藥學研究…… 61原植物鑒定…… 6.1實驗儀器…… 6.2實驗方法與結果…… 6.2.1植物形態…… 6.2.2植物檢索表…… 92性狀鑒別…… 92.1實驗儀器…… 92.2實驗方法與結果…… 92.3小結……03顯微鑒別……23.1實驗儀器與試劑……23.2實驗方法與結果……23.3小結……34理化鑒別……54.1乙醚提取物化學成分試驗……54..1實驗儀器與試劑……54..2實驗方法與結果……54..3小結……544.2乙醇提取物化學成分試驗……64.2.1實驗儀器與試劑……64.2.2實驗方法與結果……64.2.3小結……64.3水提取物化學成分試驗……64.3.1實驗儀器與試劑……64.3.2實驗方法與結果……74.3.3小結……74.4討論……8第四部分常規檢查……91水分測定……9.1實驗儀器……9.2實驗方法與結果……9.3討論……02灰分測定……02.1實驗儀器與試劑……02.2總灰分測定……02.3酸不溶性灰分測定……12.4討論……1第五部分含量測定……31浸出物含量測定……3.1水浸出物含量測定……3..1實驗儀器與試劑……31.1.2冷浸法……31.1.3熱浸法……4..4討論……5.2醇溶性浸出物含量測定……5.2.1實驗儀器與試劑……5.2.2實驗方法與結果……6..2.3討論……7.3揮發性醚浸出物含量測定……7.3.1實驗儀器與試劑……7.3.2實驗方法與結果……7.3.3討論……82總黃酮提取工藝研究與含量測定……82.1實驗儀器與試劑……82.2測定方法依據……82.3實驗方法與結果……82.3.1總黃酮含量的測定……82.3.1.1標準溶液的配制……82.3.1.2最大吸收波長測定……92.3.1.3標準曲線的制作……92.3.1.4樣品總黃酮含量測定……02.3.2提取方法的選擇……02.3.3提取溶劑的選擇……12.3.4提取次數的選擇……22.3.5單因素考察實驗……32.3.5.1乙醇濃度對鬼針草總黃酮提取率的影響……32.3.5.2液料比對鬼針草總黃酮提取率的影響……42.3.5.3超聲時間對鬼針草總黃酮提取率的影響……52.3.5.4提取溫度對鬼針草總黃酮提取率的影響……62.3.6正交試驗……72.3.6.1正交試驗因素水平確實定……72.3.6.2正交試驗結果……72.3.7最佳提取工藝驗證……82.3.8精密度實驗……82.3.9重復性試驗……92.3.0穩定性試驗……92.2.3.H 加樣回收試驗……92.3.2樣品含量測定……02.3.3討論……13總糖的含量測定……13.1實驗儀器與試劑……13.2實驗方法與結果……13.2.1對照品溶液的制備……13.2.2可溶性糖供試品溶液的制備……13.2.3粗多糖供試品溶液的制備……13.2.4顯色劑的配制……13.2.5最大吸收波長的測定……13.2.6穩定性試驗……23.2.7精密度試驗……23.2.8標準線的繪制……33.2.9加樣回收試驗……33.2.0樣品多糖含量測定……33.2.101可溶性糖的測定……43.2.10 粗多糖的測定……43.2.10.3總多糖的計算……43.2.H 討論……54揮發油含量測定與成分分析……64.1揮發油含量測定……64..1實驗材料……64..2實驗儀器與試劑……64..3試驗方法與結果……64..4討論……74.2揮發油成分分析……74.2.1實驗儀器與試劑……74.2.2實驗條件……844.2.2.1氣相色譜條件……84.2.2.2質譜條件……84.2.3實驗方法與結果……84.2.4討論……25HPLC法測定鬼針草藥材中蘆丁、棚皮昔、金絲桃昔的含量……35.1實驗儀器與試劑……35.2實驗方法與結果……35.2.1色譜條件……35.2.2溶液的制備……45.2.2.1對照品溶液的制備……45.2.2.2供試品溶液的制備……45.2.3含量測定……45.2.4供試品溶液制備條件的考察……45.2.4.1提取溶劑的選擇……45.2.4.2提取方法的選擇……65.2.5系統適用性實驗……85.2.6線性關系考察……95.2.7重復性試驗……15.2.8精密度試驗……15.2.9加樣回收試驗……25.2.0穩定性試驗……25.2.H 藥材含量測定結果……35.3討論……7第六部分同工酶電泳圖譜分析……91材料、儀器與試劑……9.1實驗材料……9.2實驗儀器……9.3實驗試劑……92實驗方法……92.2.1凝膠制備……92.2供試品溶液制備……12.3點樣……12.4染色……13結果……14討論……2第七部分結論與建議……4第八部分山東省鬼針草藥材質量控制規范(草案)及起草說明……7結 語……3創新點……94參考文獻……5附錄……9致謝…… H4論文著作…… 1巧引 言鬼引 言鬼針草類藥材來源于菊科(Compoe)管狀花亞科鬼針草屬BdnSLnn(文中均簡稱為idnSL)一年生草本植物。藥用歷史悠久，始載于唐陳藏器本草拾遺?，具有清熱解毒活血散疲等功效藥材資源非常豐富全世界約20余種廣泛分布于全球熱帶和溫帶地區，尤以美洲種類最為豐富。我國有9個種2個變種，產于華東華中華南西南各省區幾乎遍布全國各地生于村旁路邊及荒地中。經過調查研究及查閱文獻可知山東省有5個種1個變種文獻記載鬼針草用治感冒發熱、咽喉腫痛痔瘡、跌打損傷、凍瘡毒蛇咬傷、狀腺腫、腸炎、闌尾炎、慢性盆腔炎、附件炎、前列腺炎、慢性氣管炎肺氣腫、冠心病、慢性胃潰瘍、子宮脫垂、神經衰弱等。國內外藥理研究發現鬼針草具有抗菌抑菌抗炎、防治胃炎[、中樞抑制、抗心律失常[防止血栓形成促進血小板聚集[治療上呼吸道感染抑制體外血病細胞保肝的作用尤其對消化系統中樞神經系統及心血管系統顯示較強的藥理作用[對于急慢性胃潰瘍神經衰弱及心血管病的治療顯示較強的療效。國內外一系列藥理活性和臨床研究也表明該屬植物在治療原發性高血壓抗瘧、調節血糖、預防癌癥等方面具有很好的作用，人們已經將其開發成制劑應用于臨床;在我國民間人們也改變了視其為一種雜草的認識開始大量采收利用，同時在臺灣和本等地也相繼開始將其作為一種代茶飲期達到抗炎和預防癌癥等疾病的效果。研究發現鬼針草全草含有黃酮昔氨基酸莖葉含揮發油皂昔生物堿靴質、膽堿無機鹽和微量元素等]從中分離得到的活性成分主要包括黃酮多炔昌體、生物堿、靴質、蔥酮類等。黃酮類化合物是鬼針草中的主要有效成分具有活血化疲通脈降壓功效用于原發性高血壓心腦血管疾病具有抗血栓形成的作用對動脈硬化血管栓塞有預防和治療的作用。前從鬼針草中已經分離到多個黃酮類化合物其中查爾酮類的奧卡寧類最多有5種、噢瞬類化合物有8種、黃酮醇類化合物8種、二氫黃酮類5種黃酮類4種研究發現水提聚酞胺吸附分離法提取鬼針草中的總黃酮方法可行。同時從鬼針草的正丁醇、乙酸乙酷部分首次得到多種黃酮類化合物。分析得出在鬼針草揮發油中共分離出9種成分鑒定出3種化合物。主要成分為為炔類、菇烯化合物及其衍生物。研究發現一些炔類化合物具有抗腫瘤的作用分析結果表明鬼針草揮發油含有豐富的多炔化合物具有深入研究開發利用的價值。鬼針草水提取液測出6種氨基酸其中8種為人體必需的氨基酸總氨基酸含量達39599kg其氨基酸含量相當于牛99479g羊肉97499kg豬肉06859kg)的13一14倍是鯉魚的55539kg16倍對蝦76099kg)的18倍雞蛋5849kg)的23倍小麥粉39239kg稻米33399kg的4倍牛奶3.659kg的0倍因此鬼針草是應用價值很高的植物藥材。鬼針草在民間驗方有小兒參之稱該藥草可治小兒瘡積，營養不這與鬼針草中含有豐富的氨基酸和維生素有關尤其與組氨酸有密切關系，因為組氨酸是兒童的必須氨基酸而成人可以在體內合成組氨酸另外含量最高的谷氨酸具有促進細胞生成改善腦細胞營養活躍思想的作用除了可治療神經衰弱和記憶力減退外還是很好的胃酸調節劑。由此可見鬼針草所含有的氨基酸具有十分廣闊而誘人的開發前景。植物染色體的數目形態等是最穩定的細胞學特征之一在不同的種間染色體有不相同的數目核型及體積等特征區別植物染色體的核型類型等也表明該種系統演化位置以及和相近種的親緣關系的重要依據。在對中草藥進行深入研究的同時，對每種系藥用植物染色體進行系統的研究在中藥的生藥鑒定、種培育及馴化等方面具有重要的意義葛氏王冰等對鬼針草屬細胞學領域進行了研究得到染色體核心公式，發現染色體的數量、形態清晰，為進一步的深入研究打下了基礎。石俊英等采用聚丙烯酞胺凝膠電泳法對山東鬼針草屬植物小花鬼針草等六種植物種子進行電泳分析結果顯示各樣品的蛋白電泳圖譜明顯不同為該屬藥用植物的化學分類和鑒定提供了科學依據5。鬼針草作為一種常用的民間藥應用非常廣泛具有好的應用價值和廣闊的發展前景已經受到越來越廣泛的關注國內外對于它們的化學成分和藥理活性方面的研究也很多但是前該植物在我國除了一些地方標準之外在中國藥典?中并未收載。作為民間草藥，中國藥典?977年版對鬼針草屬藥材狼把草從來源、性狀、炮制性味功能主治用法用量貯藏幾個方面進行了簡單的描述記載但是在中國藥典?修訂時，因為狼把草資源貧乏無法確定質量好產量高的產地對采收利用無法進行有效的指導，因此在之后的中國藥典?中并未對其進行收載，而民間不同的地方對鬼針草的使用品種非?；靵y調查發現鬼針草屬中有數種都作為鬼針草草藥材以供藥用為了控制其藥材質量開發應用價值規范應用標準對鬼針草屬藥材進行科學系統的鑒定和質量評價建立規范科學的鬼針草質量標準評價系統已成為函待解決的問題。本課題主要采用傳統經驗與現代技術相結合的方法，對鬼針草進行了原植物鑒定性狀鑒別顯微鑒別理化鑒別等系統的生藥學研究;對鬼針草名稱演化植物來源等進行了本草考證;并對其水分灰分浸出物常規項進行了檢查;采用分光光度法對總黃酮、總糖含量進行了測定;對揮發油進行了含量測定并采用GCMS進行了成分分析選擇同工酶物質來進行種間的品質評價研究采用同工酶電泳技術對不同種鬼針草進行了分析;采用高效液相色譜法對三種黃酮昔類成分進行了含量測定為鬼針草的品種鑒定和質量評價提供科學的依據以期為臨床用藥和鬼針草的產業化規范化種植提供指導和依據為高新技術產業發展做好技術成果儲備為鬼針草制定質量標準以及規范應用提供可靠的理論依據。第一部分第一部分文獻綜述鬼針草類藥材來源于菊科Compote管狀花亞科鬼針草屬idnsL一年生草本植物又名婆婆針鬼釵草小鬼針粘身草等藥用歷史悠久始載于唐陳藏器本草拾遺?鬼釵草味苦平無毒主蛇及蜘蛛咬桿碎傅之亦桿絞汁服。生地畔有婭方莖子作釵腳著人如衣針北方呼之為鬼針2中藥大辭典載鬼針草苦平無毒。功能:清熱解毒、散疲消腫。主治:瘧疾、腹瀉、痢疾、肝炎、急性腎炎、胃痛、噎隔、腸癰、咽喉腫痛、跌打損傷、蛇蟲咬傷3。文獻記載用治感冒、狀腺腫、前列腺炎慢性氣管炎肺氣腫、冠心病慢性胃潰瘍慢性盆腔炎、附件炎、子宮脫垂、神經衰弱等對原發性高血壓有較好療效。鬼針草屬藥材資源非常豐富約230種我國有9個種和2個變種遍布全國各地山東有六個種，一個變種]作者經過大量文獻考證，以及實地調研分析，確定山東省有五個種一個變種而分類中所述的鬼針草和婆婆針屬于異名同種并非兩個不同的品種。文中為了與鬼針草商品相區別，鬼針草這一種用婆婆針這一命名表述。1生物學研究11細胞學研究植物染色體的數目、形態等是最穩定的細胞學特征之一在不同的種間染色體有不同的數目核型及體積等特征區別植物染色體的核型類型等是判斷該種系統演化位置以及和相近種的親緣關系的重要依據。在對中草藥進行深入研究的同時對每種系藥用植物染色體進行系統的研究在中藥的生藥鑒定、種培育及馴化等方面具有重要的意義。葛氏研究了婆婆針根尖中期制成的染色體其核心公式為KZ3x367m+3+6sAT染色體相對長度Zn366L+9M2+N+35核型為ZA型染色體體積變化范圍在18m3一42m間全組染色體總體積為77m3。證明此種在進化上處于較原始的狀態染色體存在核Zn243682和4的倍性變異沒有發現非整倍性變異。小花鬼針草染色體存在Zn=4、36、8、2、4和6的二倍體、三倍體、四倍體、六倍體、七倍體和八倍體多倍體系列。狼把草也存在多倍體。通過研究葛氏認為作為原始的二倍體祖先有可能將逐漸消失多倍體現象在植物中普遍存在它是物種然進化的一個重要途徑。雖然鬼針草染色體數存在如此大的倍體差異但在個體發育的表現上沒有大的明顯差異。王冰等王冰等4采用常規制片方法結合顯微攝影對染色體進行檢測分析對鬼針草、小花鬼針草染色體核型等進行了系統研究鬼針草染色體除觀察到正常的n2外還發現有Zn70的非整倍體核型公式是KZ6X236m+8m++染色體相對長度組成為Zn72SL+26M+34M+45屬于ZB型全組染色體總長是834m長臂總長32m核型不對稱系數為23%染色體總體積77m3小花鬼針草體細胞染色體數目Zn8核型公式是KZ4X484mlsm+6染色體相對長度組成為Zn486L+6M+22M+45屬于ZB型。全組染色體總長是3503m長臂總長253m核型不對稱系數為432%染色體總體積13四3認為染色體的數量形態清晰可為進一步的深入研究打下基礎。12種子的AGE分析石俊英等采用聚丙烯酞胺凝膠電泳PAGE)對山東鬼針草屬植物小花鬼針草等6種植物種子進行電泳分析結果顯示各樣品的蛋白電泳圖譜明顯不同為該屬藥用植物的化學分類和鑒定提供了科學依據。2化學成分研究在本草拾遺?中記載鬼針草可主治蛇及蜘蛛咬。另外泉洲本草?也有消疲鎮痛斂金瘡。〞等記載。經現代研究發現鬼針草全草含有黃酮昔、氨基酸莖葉含揮發油、皂昔、生物堿、靴質、膽堿、無機鹽和微量元素等。21黃酮類化合物黃酮類化合物具有活血化淤、通脈降壓功效用于原發性高血壓心腦血管疾病，具有抗血栓形成的作用對動脈硬化血管栓塞有預防和治療的作用。據中華本草?記載鬼針草屬植物中含有的活性成分有黃酮類中查爾酮類的奧卡寧類最多有25種、噢瞬類化合物有8種、黃酮醇類化合物8種、二氫黃酮類5種、黃酮類4種黃酮類化合物是鬼針草中的主要有效成分。前從鬼針草中已經分離到多個黃酮類化合物。中藥大辭典?中收載有金絲桃昔腳tse)、異奧卡寧70葡萄糖昔(0oknn7OpDgaopynod·奧卡寧Oknn、海生菊昔Mnn。李帥匡海學等采用硅膠ODs柱色譜分離并結合ephdxLH0和PLc分離純化通過理化鑒定和波譜分析。從鬼針草的正丁醇部位得到2個化合物，其中十種化合物首次得到，包括黃酮化合物606乙酞基pD毗喃葡萄糖基6734四輕輕基噢瞬、棚皮素3pD毗喃葡萄糖昔、棚皮素3aL鼠李糖昔。姜濤等采用硅膠sPhdxLH0柱色譜等方法對鬼針草乙醇提取物的乙酸乙酷萃取部分進行化學成分研究并利用RHNMRcNMRMs等光譜技術鑒定其化學結構首次從鬼針草中分離得到了6個黃酮類化合物經鑒定分別為5輕基67二氧基黃酮、山奈70aL鼠李糖昔2棚皮素70葡萄糖昔3、棚皮素30aL鼠李糖昔45734四輕基3氧基黃酮5和p谷昌醇6)針對分離得到的化合物進行測定小鼠血清MDA水平SOD和GSHZPx活性研究發現化合物2)(3)(4)和(5)具有較強的抗脂質過氧化作用。黃敏珠等2對鬼針草具有降血糖作用的活性部位的化學成分進行了研究采用0%乙醇滲流提取硅膠反相硅膠ephadxLH0柱層析分離純化化學反應和波譜分析鑒定其化學結構首次從鬼針草乙酸乙酷萃取部分分離得到棚皮素棚皮素70-鼠李糖昔6734四輕基橙酮45雙咖啡g酞奎寧酸豆昌醇3葡萄糖昔34-二輕基苯甲酸乙酷、木犀草素7個化合物。蔣海強等]采用乙醇提取，硅膠柱、聚酞胺柱層析分離純化，波譜分析鑒定其結構，研究了鬼針草乙酸乙酷提取物與正丁醇提取物的化學成分，得到5個化合物，首次從本屬植物中得到棚皮素70pD葡萄糖昔。鐘明媚8等采用L3正交設計對從鬼針草中提取鬼針草總黃酮的工藝進行優化。以總黃酮含量為考察指標考察乙醇濃度、提取時間、乙醇用量、提取次數4個因素對提取的影響得到最佳提取工藝為2倍量0%乙醇提取2次次夏勤等采用正交設計法及聚酞胺吸附分離法以提取物中總黃酮含量為指標考察鬼針草的提取工藝并應用分光光度法測定提取物中總黃酮含量，結果每次加0倍量的水提取2次每次提取0m所得提取液中的總黃酮含量最高并應用聚酞胺吸附分離其中的總黃酮，所得提取物中總黃酮的相對含量為最高認為應用水提聚酞胺吸附分離法提取鬼針草中總黃酮的方法可行。馮強等以蘆丁為標準品采用比色法對鬼針草全草不同部位所含黃酮量進行了比擬分析實驗結果表明鬼針草花果期在葉片和花序中總黃酮含量較高果實中偏低，而莖中總黃酮含量很低。薛德華等對鬼針草莖葉和果實中總黃酮含量進行了測定，結果表明，花果期全草的總黃酮含量比莖葉期高25655%。所以建議鬼針草中黃酮類成分開發利用重點選擇葉片部位。陳豪陳豪對鬼針草不同生長期葉片的總黃酮含量進行了測定，結果表明三葉鬼針草莖葉期葉片和結果期葉片總黃酮含量差異不顯著。莖葉期植株葉片繁茂莖枝例低相反到了結果期葉片黃化稀疏果實極易脫落莖枝木質化全草重量的絕大部分。故筆者建議假設以三葉鬼針草中黃酮類成分為目的那么應采收莖葉期植株為佳。22揮發油類近幾年來研究發現一些炔或炔化合物具有抗腫瘤的作用我們的分析結果表明鬼針草揮發油含有豐富的多炔化合物具有深入研究開發利用的價值?，F在對鬼針草中的揮發油類經儀器分析得出在鬼針草揮發油中共分離出69種成分鑒定出53種化合物。主要成分為炔類、菇烯化合物及其衍生物，含量較高的化合物有Z1十三二烯3579四炔94%一376%石竹烯568%一662%大牛兒烯D552%一550%等。采用GCMS聯用對鬼針草的全草進行揮發油成分分析時得到以下數據峰面積相對百分含量占揮發油總量的百分數分別為莖中占78%葉中占74%花果中占50%主要為揮發性炔類化合物、菇稀化合物及其衍生物等?；ü膿]發油含量最高而且其組分也較多，其中含量有高沸點化合物例如十六酸、植醇等)但其揮發油的率最低。鬼針草全草揮發油成分主要有脂肪烷和脂肪酸類另外含有少量的醛、酮烯睛等成分其中脂肪酸類化合物比例較高而十六酸含量最高76%)其次是804三基十五酮21567%和十五酸56%。23氨基酸鬼針草在民間驗方有小兒參之稱該草藥可治小兒瘡積營養不這與鬼針草中含有豐富的氨基酸和維生素有關尤其與組氨酸有密切關系因為組氨酸是兒童的必須氨基酸而成人可以在體內合成組氨酸但兒童時期只能由外界提供另外含量最高的谷氨酸具有促進細胞生成改善腦細胞營養活躍思想的作用除了可治療神經衰弱和記憶力減退外鬼針草還是很好的胃酸調節劑。由此可見鬼針草所含有的氨基酸具有十分廣闊而誘人的開發前景。鬼針草全草水提取液測出6種氨基酸其中8種為人體必需的氨基酸總氨基酸含量高達999g其氨基酸含量相當于牛肉9479kg)、羊肉7499kg)、豬肉06859kg)的13一14倍是鯉魚的85539kg16倍對蝦76099kg)的18倍雞蛋5849kg的23倍小麥粉39239kg、稻米33399kg)的4倍牛奶3659kg的0倍，是應用價值是應用價值很高的植物藥材。24無機鹽和微量元素鬼針草中的常量元素中以鈣的含量最高鈣在血液凝固和維持心臟內肌神經的興奮性膜的通透性方面及其在心血管病的治療和預防方面都起重要作用這與鬼針草可以治療原發性高血壓有著密切的聯系]磷的含量也很豐富這對調節神經催眠鎮靜等有一定的作用3。微量元素以鐵的含量最高其次是銅、鋅、埋、艷。現代研究證明這些微量元素均參與人體各種生理活動過程起到防病、治病的作用如鐵能促進血紅細胞和血色素的形成銅參與造血系統從而加速鐵的吸收鋅對生物體有清熱生肌之功效艷對腫瘤的預防和抑制作用被驗證。鬼針草含鉻和鎳很少所以說明其藥材中毒性很小可以在臨床上應用3因此，鬼針草所含的這些人體必須無機元素與該藥具有的各種生理活性及治療功效有密切的關系]。砷是中草藥中常見的微量元素一般把它視為有害元素但假設只從總砷量上來評價中草藥的毒副作用是不恰當的。王亮等應用離子交換樹脂和溶劑萃取相結合的分離技術分離了云南中草藥鬼針草中微量砷的四種形態化合物:無機的AI、As(V)和有機的一甲基砷MMA)、二基砷DMA)。同時采用電感禍合等離子體發射光譜(CPAE)進行含量測定，其含量大小順序為:AI>A(V>MMA>DMA無機砷含量大于有機砷含量就四種形態化合物毒性而言無機AI大于AV有機砷中MMA毒性大于DMA無機砷毒性大于有機砷4。其研究為從分子水平準確認識中草藥中微量元素與中草藥的藥理生理活性關系提供了新思路。郝海玲等6對不同時期的兩種鬼針草樣品中維生素K的含量了進行定性和定量研究發現鬼針草中維生素K的含量是變化的隨著生長期的增長而增加這些為鬼針草在醫學上的臨床應用提供了依據和參考。25酚酸類酚酸類具有抗菌止血利膽和升高血球的數量的功效鬼針草全草含有水楊酸、原兒茶酸、沒食子酸及脂肪酸類化合物。3鬼針草的藥理作用研究31抗菌、抑菌作用鬼針草的乙醇浸液在體外對革蘭氏陽性細菌有好的抑菌作用李國利等網的研究也發現并證實了其對金黃色葡萄球菌枯草桿菌結核桿菌和真菌有較好的抑菌作用;其水煎用;其水煎劑對分枝桿菌有較強的抗菌作用最低抑菌濃度為smgm;Khn等的實驗結果表明三葉鬼針草的乙醇提取物具有廣譜抗菌作用;Ge等四通過實驗證明了三葉鬼針草的乙醇提取物能有效的抑制枯草桿菌和結核桿菌具有很好的抗菌作用;主治泌尿性疾病、霉菌性陰道炎、足癬、毒蛇咬傷。32抗炎癥作用將等量的鬼針草與海洲常山混合制成的水煎劑或酒精浸制劑與大鼠服實驗結果表明鬼針草與海州常山混合水煎劑或酒精浸制劑對醛性及蛋清性關節炎均有明顯的消炎癥狀但單用鬼針草與海洲常山對其均無明顯作用]。王建平等通過5種抗炎試驗模型篩選發現從鬼針草中分離到的新天然成分鬼針聚炔昔對急慢性炎癥均有很強的抗炎效果這種抗炎作用與劑量呈正相關其中某些抗炎效果與地塞米松組相當或略強于地塞米松組黃酮類成分通過三種實驗模型的初步篩選也顯示有較好的抗炎作用充分證明鬼針聚炔昔為該植物的抗炎有效成分之一。主治感冒、肝炎、闌尾炎、急性腎炎。33對胃液酸度和分泌量的作用注射鬼針草生藥注射液0一59kg能明顯減少大鼠胃液分泌量和降低胃液酸度，且對離體胃平滑肌無影響而對在體平滑肌的運動有抑制作用。主治胃潰瘍、胃痛。34對中樞神經系統的作用鬼針草有較好的中樞抑制作用其作用部位似在腦干的網狀結構而對骨髓作用不明顯。小白P腹腔注射鬼針草注射液5一09生藥kg可延長戊比妥鈉的睡眠時間，減少小白鼠主活動可對抗苯丙胺興奮有主活動協同氯丙嗦抑制主活動對骨髓興奮藥硝酸士的寧引起的強制性驚厥無作用小P鬼針草注射液5一69生藥g，扭體反應次數明顯減少且隨劑量增大有增效趨勢鎮痛試驗對小鼠熱板法的痛閩有提高作用。主治頭痛。35對心臟的作用經主動脈插管分別給予不同濃度的鬼針草提取液結果均使兔離體心臟出現心律減慢心肌收縮力減慢心肌收縮力減弱mn后心律恢復正常心肌收縮力增強]。主治慢性心臟病。36對血壓的影響烏拉坦麻醉大鼠頸動脈插管給藥159生藥l的鬼針草水和醇提取浸液能分別使大鼠血壓下降5516Pa和6519P與給藥前相比差異顯著<00)并均持續Omn左右。主治高血壓低血壓。37對血脂及血栓的影響大白9(灌胃給藥)鬼針草29生藥kg無論是預防給藥還是治療給藥均有降低膽固醇和p脂蛋白的作用與生理鹽水對照組相比有顯著差異P<00;大白鼠頸總動脈和頸外動脈、股靜脈給藥鬼針草浸膏69及39生藥kg對實驗性血栓形成有明顯的抑制作用抑制率分別為6%及6%對照組9乙酞水楊酸50mgkg時血栓形成抑制率為40%較有非常顯著性差異P<000]。主治高血脂、血栓。38對血小板聚集功能的影響鬼針草濃度為2smgmL生藥和65mgmL生藥時能明顯抑制大鼠血小板聚集反應且隨劑量加大作用加強呈劑量依賴關系[。主治促進血小板聚集的功能的作用。39對上呼吸道感染作用鬼針草煎劑混入飼料中)治療鵝傳染性上呼吸道卡他療效明顯高于氨苯磺胺治療組混入飼料和飲水中和青鏈霉素治療組混入飼料中其療程短抗霉抗菌作用強，無毒副作用是治療上呼吸道卡他的理想藥物]。主治感冒、咳嗽。30對體外血病細胞的抑制作用鬼針草五種提取成分對體外培養的二種不同血病細胞HL0、V均有較強的抑制作用尤其對人組織淋巴瘤細胞v7的抑制作用其中聚炔昔混晶和鬼針聚炔昔為最佳。主治對血病有一定功能。31抗痢疾作用Bnao等對9種Bnao等對9種鬼針草屬植物提取物進行抗痢疾試驗其中7種具有體外抑制寄生蟲生長作用以三葉鬼針草抗痢疾活性最強活性成分為苯基3二炔5烯7醇-乙酸酷。小花鬼針草和金盞銀盤不具有抗痢疾活性2。主治:家畜腸炎、腹瀉、尿血、跌打損傷。32保肝作用鬼針草提取液可用四氯化碳對乙酞氨基酚誘發肝損傷使大鼠升高的SGOT和SPT水平下降表明其有明顯的保肝作用。主治保肝護肝。33對血糖的影響鬼針草5種提取物以0%的濃度按09kg劑量給高血糖小鼠和正常小鼠灌胃乙酸乙酷、正丁醇提取物能使高血糖小鼠和正常小鼠血糖下降其余提取物小鼠血糖無顯著下降作用。主治:糖尿病。4鬼針草的臨床研究]41預防感冒、流感野菊花39鬼針草69每周劑可以降低感冒的發生率。臨床上在治療外感之藥中加用鬼針草效果更佳。42治療闌尾炎鬼針草單味藥39煎服治療闌尾炎35例亞急性2例結果痊愈5例有效8例無效2例。43治療急性黃疽型肝炎黃牛木葉69鬼針草69每日1劑0天為一療程治療黃疽型肝炎治愈率為9017%。44治療慢性前列腺炎0%一40%鬼針草液采用直流電透入法0m/次1次天7一4天為1療程治療06例慢性前列腺炎患者結果痊愈6例其余有不同程度好轉。45治療原發性高血壓用鬼針草制成的悅年片治療原發性高血壓9例結果顯效。5開5開發前景鬼針草含有多種化學成分具有多方面的藥理活性尤其對心血管系統、消化系統顯示較強的藥理作用。鬼針草屬植物氨基酸含量高可作為提取氨基酸的原料其所含的黃酮類成分是抗菌消炎的活性成分而其對中樞神經系統的鎮痛作用、抑制血小板聚集作用防血栓和膽固醇作用等的生理活性成分尚需進行深入的研究鬼針草還可應用于急、慢性胃潰瘍神經衰弱及心血管病的治療也顯示較強的療效值得進一步研究與探討。第二部分第二部分本草學考證1名稱考證本草拾遺?:陳藏器曰生池畔，方莖，葉有婭，子作釵腳，著人如衣服。北人謂之鬼針南人謂之鬼釵鬼針之名便被大多文獻沿用下來但隨著人類對于醫藥認識的進一步發展，由于其在全國分布較廣故別名較多實際應用中品種也較混亂，閩東本草?名勃身草; 全國中草藥匯編?名刺針草; 中國植物志?名婆婆針;福建民間草藥?名鬼黃花、山東老鴉草; 江蘇植物藥志?名鬼骨針; 浙江民間草藥?名引線包針包草、一把針; 中國藥用植物圖鑒?名刺兒鬼、鬼疾黎; 泉州本草名烏藤菜清胃草跟人走;閩東本草?名粘花衣鬼菊;江蘇藥材志?名脫力草、小鬼針; 江西草藥?名索人衣、一包針; 上海常用中草藥?名家脫力草; 全國中草藥匯編?名刺針草; 中藥大辭典?名粘身草而同時其在民間的叫法也有很多別名如江西安徽名一包針索人衣跟人走、小鬼針;北京混稱稀簽草、小葉稀簽草、北山稀簽草、大黃袍;山東名鍋釵;江蘇名鬼骨針、止血草鬼葛草粘花衣草脫力草;上海名家脫力草;浙江名引線包針包草一把針竭力草、刺兒鬼鬼蕉黎針線包;江西名叉子草;福建名鬼黃花、山東老鴉草、盲腸草跳虱草粘花衣鬼菊糯粘草老鴉草、山虱母粘衣草、咸豐草、金絲苦令、針刺草燭臺草、內月紅黃花老鴉草家蚤刺、大頭鎖、山苦令;湖南名餓螞蝸、攀倒顫、鴉婆針、斑頭顫;四川名豆渣菜、豆渣草;貴州名錐叉菜、毛錐子草、鋼叉草、叉婆子、烏藤菜、清胃草、跟人走、粘花衣、鬼菊、刺針草?？芍?，現代文獻中常用的鬼針草、婆婆針的命名與歷代本草名稱基本一致，但是民間的用藥及名稱比擬混亂。2基源考證鬼針草始載自本草拾遺?，其中對鬼針草有詳細的描述方莖，葉有婭，子作釵腳，著人衣如針〞植物名實圖考?卷十四亦載有鬼針草并有附圖，其附圖特征與三葉鬼針草idnspsaL相符。本草綱拾遺?云:鐵憲帚，山間多有之，綠莖而方，上有紫線紋，葉似紫頂龍芽，微有毛，七月開小黃花，結實似憲帚形，能刺入手。故又名千條針。其特征與菊科鬼針草屬植物金盞銀盤相似。山東省中藥材標準?:本品莖略成方形，幼莖有短柔毛。葉對生或互生，紙狀分裂小裂片三角狀或菱狀披針形邊緣具不規那么細齒或鈍齒兩面略有短毛，質而質而脆多皺縮破碎頭狀花序直徑5一Om，總花柄長2一cm總苞片條狀橢圓形，先端尖或鈍，被細短毛，舌狀花黃色，通常有1一3朵不發育，筒狀花黃色，發育，長約smm。氣微，味淡。，中華人民共和國藥典?977年版:本品根呈圓柱形，灰黃色，多分枝，有須根。莖圓柱形，長0一6cm，表面暗綠色或暗紫色，有縱紋。葉對生，多皺縮或破碎完整葉片展平后呈橢圓形或長圓狀披針形長6一2m;上部葉常3裂下部葉常5裂綠色邊緣有鋸齒，葉柄有狹翅頭狀花序頂生或腋生，總苞片多數外層葉狀，有毛。管狀花黃色。瘦果扁平，兩側邊緣各有一列倒鉤刺，冠毛芒狀，多為2枚。氣微，味苦。以色綠、葉多、有花者為佳7。可見現在所用鬼針草與歷代所用鬼針草的植物來源基本一致。3功能主治考證本草拾遺?:主蛇及蜘蛛咬，桿碎敷之，亦桿絞汁服本草綱目?:涂蝎蠶傷。藥性考?:療蟲傷，風熱煩躁。福建民間草藥?:散?；钛?，消癰解毒。江蘇省植物藥材志?:搗汁敷，止血。中國藥用植物圖鑒?:煎服，治痢疾，咽喉仲痛，噎隔反胃，責門痙攣及食道擴張等癥。有解毒，止瀉，解熱功效。近用治盲腸炎。泉州本草?:消疲，鎮痛，斂金瘡。治心腹結痛，產后疲血，月經不通，金瘡出血，腸出血，出血性下痢，尿血。閩東本草?:治腸癰，淋濁，瘧疾，黃疽，小便不利，跌打損傷。中國植物志?:為我國民間常用草藥，有清熱解毒、散?；钛墓π?，主治上呼吸道感染、咽喉腫痛、急性闌尾炎、急性黃疽型肝炎、胃腸炎、風濕關節疼痛、瘧疾，外用治瘡癤、毒蛇咬傷、跌打腫痛。杭州藥用植物志?:強壯劑，活血，通經。沙漠地區藥用植物?:祛風濕。全國中草藥匯編?:清熱解毒，祛風活血。主治上呼吸道感染，咽喉腫痛，急性闌尾炎，急性黃疽型傳染性肝炎，胃腸炎，消化不良風濕關節疼痛瘧疾;外用治瘡癤，毒蛇咬傷，跌打腫痛。浙江浙江藥用植物志?:主治肺炎，肝炎?？梢姡F代鬼針草的應用與古代鬼針草功能主治基本一致。4性味歸經考證本草拾遺?:味苦，平，無毒。泉州本草?:性溫，味苦，無毒。藥性考?:寒。青島中草藥手冊?:微寒?？芍磲槻菪晕⒑犊?，無毒。第三部分生藥第三部分生藥學研究本實驗中所用鬼針草屬藥材，經山東中醫藥大學生藥教研室彭艷麗教授鑒定為菊科(Compote)管狀花亞科鬼針草屬idnsL一年生草本植物。鬼針草屬藥材實驗材料見表1。表1鬼針草屬實驗藥材編號 樣品名稱 產地 生長環境 采收時間 加工方法1 鬼針草商品 建聯藥店 購買 2008年8月 未知2 大狼把草 濟南長清 校園內 2008年9月 陰干3 金盞銀盤 臨沂蒙山 山上低海拔 2008年9月 陰干4 小花鬼針草 臨沂蒙山 山上高海拔 2008年9月 陰干5 婆婆針 臨沂蒙山 半山腰 2008年9月 陰干6 狼把草 菏澤 路邊 2008年9月 陰干7 矮狼把草 菏澤 路邊 2008年9月 陰干1原植物鑒定11實驗儀器數碼相機、放大鏡、直尺等12實驗方法與結果對野外的原植物進行觀察用直尺進行測量并用數碼相機進行拍照各品種的特征分述如下121植物形態大狼把草:一年生草本，高0一15Om。莖直立，分枝，常帶紫色，被疏毛或無毛。葉對生，葉柄有狹翅;一回羽狀復葉，小葉3一5枚，披針形，長3一0m，寬1一3m先端漸尖邊緣有粗鋸齒通常背面被稀疏短柔毛頂生葉具明顯的柄。頭狀花序頂生或腋生，直徑1一3m;總苞片鐘狀或半球形，外層苞片5一0枚，通常8枚，披針形或匙狀倒披針形，葉狀，邊緣具緣毛，花為兩性管狀花，花冠冠檐5裂。瘦果較寬，扁平，倒卵狀狹楔形，長5一0mm，頂端芒刺2枚，少有3一4枚，有側刺毛。(附圖1)金盞銀盤:一年生草本，高0一OOm莖直立呈四棱形無毛或被稀疏卷曲短柔毛。葉對生;一回羽狀復葉，下部的葉有時為單葉，頂生小葉3枚，有時5枚，具具柄，卵形或卵狀橢圓形，長2一cm，寬1一2sm，先端漸尖，基部楔形，邊緣具稍密的鋸齒;頭狀花序花序梗長1一cm總苞綠色基部被細柔毛外層苞片7一8枚，線形，先端漸尖，背面密被短柔毛，內層苞片長圓狀披針形，背面褐色，有深色條紋被短柔毛;花雜性舌狀花通常3一5朵不育舌片色或黃色先端3~5齒裂，或有時無舌狀花;管狀花兩性，黃褐色，冠檐5齒裂。瘦果條形，略扁，色，具4棱，先端漸狹，多少被硬毛，頂端芒刺3一4枚，具倒刺毛。(附圖2)小花鬼針草:一年生草本，高0一7Om。莖直立，多分枝，下部圓柱形，有條紋，中上部常為鈍四方形，常帶暗紫色，無毛或被稀疏短柔毛。葉對生;葉柄長2一3m，背面微凸或扁平，腹面有溝槽，槽內及邊緣有疏柔毛;葉片長6一0m，二至三回羽狀分裂裂片條形或條狀披針形有齒或全緣先端銳尖上面被短柔毛下面無毛或沿葉脈被稀疏柔毛上部葉2回羽狀全裂最上部葉線形不分裂頭狀花序近圓柱形，具細長梗;總苞筒狀2一3層黃褐色基部被柔毛外層苞片綠色，4一5枚，線狀披針形，邊緣被疏柔毛，內層常僅1枚，托片狀;托片邊緣透明;無舌狀花;管狀花兩性花冠筒狀冠檐4齒裂瘦果條形略具4棱長3一6mm，先端漸狹，有小剛毛，頂端芒刺2枚，有倒刺毛。(附圖3)婆婆針:一年生草本，高0一8cm莖直立，下部略帶淡紫色，四棱形無毛，或于上部的分枝上略具細毛。中部和下部葉對生;具長柄;葉片長5一4m二回羽狀深裂裂片再次羽狀分裂小裂片三角形或菱狀披針形先端尖或漸尖邊緣具不規那么細齒或鈍齒兩面略具短毛;上部葉互生，較小，羽狀分裂。頭狀花序直徑5一0mm;總花梗長2一0m;總苞杯狀，苞片線狀橢圓形，先端尖或鈍，被細短毛;花雜性，邊緣舌狀花黃色，通常有1一3朵不發育;中央管狀花黃色，兩性，全育，長約smm，裂片5枚;瘦果條形，長1一cm，寬約mm，具3一4棱，有短毛;頂端冠毛芒狀，3一4枚，長2一smm。(附圖4)狼把草:一年生草本，高0一9cm。莖直立，圓柱狀或具鈍棱而稍呈四方形，綠色或帶紫色無毛，上部分枝。葉對生，下部的較小不分裂，邊緣具鈍齒通常于花期枯萎;中部葉具柄，柄長08一2sm，有狹翅，葉片長橢圓狀披針形，長4一3m，不分裂或深裂，裂片3一5枚，裂片披針形至狹披針形，頂生裂片較大，兩端漸狹具鋸齒;上部葉較小披針形三裂或不裂頭狀花序頂生具較長的花序梗;總苞盤狀，外層苞片5一9枚，線形或匙狀倒披針形，先端鈍，葉狀，具緣毛。內層苞苞片褐色，有縱條紋，具透明或淡黃色的邊緣;托片線狀披針形，背面有褐色條紋，邊緣透明;無舌狀花，管狀花兩性，冠檐4裂;花藥基部鈍，先端有橢圓形附屬器，花絲上部增寬。瘦果扁平，楔形或倒卵狀楔形，邊緣有倒刺毛，先端芒刺通常2枚，兩側有倒刺毛。(附圖5)矮狼把草:一年生草本高0一2cm莖直立，圓柱狀或具鈍棱而稍呈四方形，綠色或帶紫色無毛，上部分枝。葉對生，下部的較小不分裂，邊緣具鈍齒通常于花期枯萎;中部葉具柄柄長08一2sm有狹翅;葉片披針形長4一cm不分裂的單葉或3一5裂，兩側裂片披針形，頂生裂片長圓狀披針形，邊緣具不整齊的粗齒;上部葉較小披針形三裂或不裂頭狀花序單生，具較長的花序梗;總苞盤狀外層苞片5一9枚線形或匙狀倒披針形先端鈍，葉狀，具緣毛層苞片褐色，有縱條紋，具透明或淡黃色的邊緣;托片線狀披針形，背面有褐色條紋，邊緣透明;無舌狀花管狀花兩性冠檐4裂;花藥基部鈍先端有橢圓形附屬器花絲上部增寬。瘦果楔狀條形，長5一smm，先端寬約Zmm，邊緣光滑或僅具有纖細的疏刺毛，先端芒刺2一3枚，有倒刺毛。18122植物122植物檢索表1一回羽狀復葉2瘦果較寬扁平倒卵狀狹楔形頂端芒刺2枚少3一4枚具側刺毛……1大狼把草BondoaLnn.)2瘦果條形，具4棱，先端漸狹，頂端芒刺3一4枚，具倒刺毛?！?金盞銀盤(BdensbnaMe.tche)1葉羽狀分裂或3一5深裂3葉二至三回羽狀分裂;瘦果條形，有4棱，先端漸狹。4葉二至三回羽狀分裂，末回裂片寬1一Zmm;瘦果頂端芒刺2枚，有倒刺毛?！?小花鬼針草(Bdnspoawd)4葉二回羽狀分裂，末回裂片三角狀或菱狀披針形，寬3mm以上;瘦果頂端芒刺3一4枚?！?婆婆針BdnsbpnnaLnn)3葉3一5深裂，中上部葉常3深裂。5莖高0一9cm，瘦果較寬，扁平，楔形或倒卵狀楔形，邊緣有倒刺毛，頂端芒刺2枚，兩側有倒刺毛?！?狼把草idnsipiain)5莖高0一2cm瘦果楔形條狀邊緣光滑或僅具有纖細的疏刺毛頂端芒刺2一3枚有倒刺毛……6矮狼把草BdnspaLnnv.pnsoDon)Sef狼把草變種)由分種檢索表可以看出原植物的區分主要從葉形果實的形狀和芒刺數目植株高度三個方面進行區分鑒別。2狀鑒別21實驗儀器數碼相機、放大鏡、直尺等22實驗方法與結果對干燥后各不同種鬼針草屬藥材進行觀察用直尺進行測量并用數碼相機進行拍照，各品種的性狀鑒別特征分述如下大狼把草:表面灰褐色有縱條紋質硬而脆莖四棱多分枝長0一oom，直徑05一cm，易折斷，斷面黃色，中央有髓部。葉對生，多皺縮，質薄易碎，完整葉展開后為一羽狀復葉小葉披針形葉緣具粗鋸齒長3一7m寬1一2sm，先端先端漸尖背面被稀疏短柔毛;花序干枯瘦果易脫落而殘存圓形的花托瘦果較寬，扁平倒卵狀狹楔形長5一0mm頂端芒刺2枚少有3一4枚氣微味苦。(附圖6)金盞銀盤:表面棕褐色莖四棱，有棱線，長0一oom，直徑03一ocm完整葉展開后為羽狀復葉卵形或卵狀披針形葉緣具細齒長2一7m寬1一2sm，有葉柄先端漸尖瘦果條形，略扁，黑色，具4棱先端漸狹頂端芒刺3一4枚，氣微，味淡。(附圖7)小花鬼針草:表面暗褐色質脆莖下部圓柱形中上部常為鈍四方形長5一6om，直徑02一o3m，中央有髓部，有時中空。完整葉展開后為二至三回羽狀分裂小葉片條狀披針形，葉緣全緣稍向上翻卷上面被短柔毛下面無毛或沿中脈被稀疏柔毛長14一1cm寬5一o2m瘦果條形黑色略具4棱兩端漸狹，頂端芒刺2枚，氣微，味微苦。(附圖8)婆婆針:表面黃綠色質韌莖方形或圓柱形，幼莖有稀疏短柔毛尤以節處為多長0一IOOm，直徑2一cm，不宜易折斷，斷面黃綠色，中央有髓部完整葉展開后為二回羽狀深裂葉裂片三角狀或菱狀披針形葉緣具細齒或鈍齒上面無毛，下面主脈有稀疏毛，長1一3m，寬1一2sm。瘦果條形，具3一4棱，頂端芒刺3一4枚，氣微，味淡。(附圖9)狼把草:表面綠色略帶紫紅色，質硬。莖四棱，有棱線，長0一5om，直徑04一osm易折斷斷面黃棕色中央有髓部或老化中空完整葉展開后為羽狀葉，卵圓形或矩圓狀披針形，葉緣具鋸齒，長2一sm，寬05一1sm，有葉柄，葉柄具狹翅。瘦果扁，楔形，或倒卵狀楔形，頂端芒刺2枚，氣微，味微苦。(附圖0)矮狼把草:表面黃綠色質硬莖四棱有棱線長0一2cm直徑01一o3m，易折斷斷面黃棕色中央有髓部或老化中空完整葉展開后披針形或長圓狀披針形，葉緣具粗齒，長2一cm，寬05一1m，有葉柄，葉柄具狹翅。瘦果楔狀條形頂端芒刺2一3枚，氣微，味微苦。23小結為了便于比擬各品種之間藥材的性狀特點將上述藥材品種的主要性狀特征列于表2表表2鬼針草屬藥材性狀鑒別特征莖 葉 果實是 頂品 長 葉 否 端形狀 形狀 寬(m) 形狀 長~ )m) 緣 具 芒草 (門 05~色 四棱 羽狀 3~7 1~25 齒 短 平，狹 5一0 枚07毛 楔形草色 條形，03~ 齒 毛四棱 羽狀 2~7 1~25 略扁， 10~1806具4棱下部圓色 條狀 毛 條形，柱形中 45~ 02~ 005~ 緣披針 略具4 10~16 枚上部鈍 012形 棱四方形三角 齒針 色 狀或 毛 條形，方形或 2()門 02~菱狀 么氣 具3一4 10~17柱形 06披針 棱形帶卵圓扁，楔草 形或 齒04~ 05~ 毛 形，或四棱 矩圓 2~5 5~7 枚05 15 倒卵狀狀披楔形針形披針狼色 形或 粗10~ 住毛 楔狀條四棱 長圓 2~4 05~1 5~7形狀披針形由表2可知由表2可知干燥后不同品種的鬼針草的外觀性狀與原植物相差不大品種之間有所差別我們在鑒別的時候主要根據完整葉展開后形狀果實的形狀和芒刺的數等特征來進行初步的鑒別。3顯微鑒別31實驗儀器與試劑載玻片蓋玻片酒精燈水合氯醛牙簽oMwBAZOOVC顯微鏡MocmgesAvned32測量系統、Mic互動教室數碼顯微鏡(麥克奧迪實業集團有限公司)直J一。32實驗方法與結果取鬼針草屬樣品粉碎過4號篩混合均勻用水合氯醛加熱透化后裝片觀察粉末特征并且用數碼顯微鏡進行拍照用測量系統對顯微特征進行測量將鬼針草屬藥材的粉末顯微特征分述如下:大狼把草:可見非腺毛，1一5個細胞組成，先端較尖，表面具疵點，單細胞非腺毛壁多平直長06一08m;導管以具緣紋孔導管多見偶有螺紋導管和網紋導管，長00一00m，直徑00一0m;氣孔不等式;花粉粒圓形，直徑2一03m外壁表面有細密刺狀雕紋;纖維成束或單個散在兩端平截壁厚木化或微木化狹長胞腔線性;棕色塊可見直徑為01一04m;有時可見方晶針晶。(附圖11)金盞銀盤:非腺毛由2一0個細胞組成先端較尖長05一03卯m;導管以螺紋導管為主，長0巧一02m，直徑01一02m;氣孔多為不等式;花粉粒圓形，直徑02一03m外壁表面有細密刺狀雕紋;纖維多成束細長兩端平截胞腔線性;可見方晶。(附圖2)小花鬼針草:非腺毛由2一4個細胞組成，先端較尖，長00一05m;導管以螺紋導管多見，偶有網紋導管，長02一5m，直徑1一04m;氣孔為不等式或不定式表皮細胞表面有明顯的層紋;花粉粒圓形直徑01一005m外壁表面有細密刺狀雕紋;纖維多成束細長兩端平截壁厚平直胞腔線性;棕色塊可見，直徑為001一5m;可見方晶與針晶，針晶長Ol一007m。(附圖3)婆婆針:非腺毛由2一7個細胞組成先端較尖表面可見層紋長05一08m;導管主要為螺紋導管有時可見導管呈分枝狀長02一06m直徑01一02m;氣孔氣孔不等式;花粉粒多見，圓形直徑02一005m外壁表面有細密刺狀雕紋;纖維多成束細長兩端平截壁厚平直胞腔線性;棕色塊可見直徑為01一03m;可見大量針晶。(附圖4)狼把草:非腺毛單細胞，先端較尖，壁厚，胞腔明顯，長9一025m;導管以螺紋導管多見，偶有網紋導管，長02一07m，直徑05一015m;氣孔不等式;花粉粒圓形直徑01一02m外壁表面有細密刺狀雕紋;纖維多成束或單個散在兩端平截壁厚木化或微木化胞腔線性;棕色塊可見直徑為03一O5m;無晶體。(附圖5)矮狼把草:非腺毛由2一6個細胞組成，先端較尖，表面可見層紋，長1一003m;導管以螺紋導管多見，偶有網紋導管，有時可見導管呈分枝狀，長00一015m，直徑01一03m;氣孔不等式;花粉粒圓形，直徑02一03m，外壁表面有細密刺狀雕紋，具3孔溝;纖維多成束細長兩端平截壁厚平直胞腔線性;棕色塊可見，直徑為01一4m;可見方晶與針晶。(附圖6)33小結綜合以上各品種鬼針草屬藥材的粉末顯微特點將鬼針草屬藥材的主要粉末顯微特征列于表3。表表3鬼針草屬藥材粉末顯微特征非腺毛 導管 花粉粒表皮細細胞 晶胞 先 表 類 直徑 狀 直徑 壁及氣個 端 囪 長(m) _、長(m) (m) (m)L大 紋 晶式狼一 疵 006一 010~ 010~ 002~ 001~草 氣 點 08 050 030 003 004 晶針卜 005~ 紋 015~ 001~ 002~ 晶無1O 030 022 002 003細密紋 不等 晶日2一 尖 010~ 002~ 001~ 式、 001~狀4 015 025 004 不定 005 005 晶雕式紋2~ 層 005一 紋 002~ 001~ 002~ 001~ 晶7 紋 08 016 002 005 003紋草009~ 002~ 0005~ 001~ 003~無025 007 0015 002 005狼 方2~ 層 001一 010~ 001~ 002~ O1一 晶6 紋 003 015 003 003 004 針(1)表3可以看出鬼針草屬各品種藥材在粉末顯微特征方面有一定的差別，可以作為品種鑒別的依據。24(2)鬼針草屬(2)鬼針草屬各品種藥材的粉末顯微特征的相同點為:非腺毛先端較尖;導管大多為螺紋導管;表皮細胞及氣孔為不等式或不定式;花粉粒圓形表面有細密的刺狀雕紋;薄壁細胞圓形，木栓細胞多邊形。(3)鬼針草屬各品種藥材的粉末顯微特征的不同點為:非腺毛的細胞個數和長度不同，且有的表面有層紋;導管的長度和直徑不同;花粉粒的直徑不同。4理化鑒別41乙醚提取物化學成分試驗411實驗儀器與試劑試管、濾紙、硅膠板、乙醚、三氯化鋁、5%香草醛濃硫酸試液均為分析純412實驗方法與結果取各品種的鬼針草藥材各9分別加乙醚Om振搖提取h過濾濾液備用。4121取各濾液m，分別加%ALCL2滴進行試管反應。4122取各濾液分別點樣在濾紙、硅膠板上觀察熒光現象。4123取各濾液osm，分別滴入蒸發皿中，再滴加5%香草醛濃H504各1滴進行反應。結果見表4。表4 鬼針草屬藥材乙醚提取液成分試驗結果結果檢查項目 反應現象 鬼針草 大狼 金盞 小花鬼 婆婆 矮狼狼把草商品 把草 銀盤 針草 針 把草黃酮類化合物色混濁，片刻(l%ALCL:試管 + + + 色轉為無色澄清反應)熒光反應(點樣于 橙紅色周橙紅色或紅色 紅色 紅色 紅色 紅色 紅色濾紙上) 圍淡藍色熒光反應(點樣在 淡藍色或紅色熒淡藍色 紅色 紅色 紅色 淡藍色 紅色硅膠板) 光揮發油類(5%香草紫紅色沉淀 + + + + +醛濃HSO4)注:+表示陽性結果。413小結通過對不同品種的鬼針草乙醚提取液進行的成分預試驗結果表明:鬼針草屬各種藥材所含成分種藥材所含成分基本相似反應現象無明顯差別其乙醚浸出液中含有黃酮類化合物和揮發油類成分。42乙醇提取物化學成分試驗421實驗儀器與試劑試管、具塞錐形瓶、毛細管、濾紙、滴管、水浴鍋;5%乙醇、鹽酸、鎂粉、三氯化鋁、硅鎢酸試液均為分析純422實驗方法與結果取各品種的鬼針草屬藥材適量，剪碎，各稱取1克，置于具塞錐形瓶中，加0毫升5%乙醇，浸泡4小時，過濾，濾液備用。4221用毛細管吸取各濾液在濾紙上點樣，于365nm下用紫外燈觀察熒光。4222取以上各醇濾液各5滴分別置于試管中加%三氯化鋁醇溶液2滴進行試管反響。4223取以上各醇濾液各2m分別置于試管中加入鹽酸數滴及少量鎂粉置水浴中加熱，溶液顯棕紅色。(2002版山東省中藥材標準規定)4224加硅鎢酸試液2滴進行試管反響。實驗結果見表5。表5鬼針草乙醇提取液成分試驗結果檢查項目 反應現象 結果熒光反應 紅色熒光 均+%ALCL3試管反應 黃色 均+(狼把草稍顯紅色)多加三氯化鋁醇溶液 不變色 均+鹽酸鎂粉反應 棕紅色 均+硅鎢酸試液反應 淡紅色 均+423小結通過對不同品種的鬼針草屬藥材乙醇提取液進行的成分預試驗結果表明:鬼針草屬各種藥材所含成分相似反應現象無明顯差別其乙醇提取液中含有黃酮類化合物、生物堿、揮發油類成分。43水提取物化學成分試驗431實驗儀器與試劑試管、酸度計、毛細管、濾紙、滴管、水浴鍋;613項下樣品提取揮發油后的水溶液;鹽酸、鎂粉、荀三酮硫酸銅、酒石酸鉀鈉、嗅酚藍、氫氧化鈉、濃硫酸、醋配、三醋配、三氯化鐵三氯化鋁、碘、碘化鉀、碘化汞鉀、苦酸3，5二硝基甲苯、3，5二硝基苯甲酸均為分析純。432實驗方法與結果將揮發油含量測定項(第五部分)下各樣品揮發油提取后的水溶液過濾、濃縮，備用用常規特異顯色反應沉淀反響或熒光反應進行化學成分類別的鑒別實驗結果見表6。表6鬼針草水提取液化學成分試驗結果檢查項目 試驗名稱 反應現象 反應結果碘化汞鉀反應 色沉淀 ++生物堿碘碘化鉀反應 棕色沉淀三氯化鋁反應 黃綠色黃酮類化合物 鹽酸鎂粉反應 紅色熒光試驗 黃色熒光菲林(Fhng)試驗 紅色沉淀糖、多糖莫里希(Moh)試驗 界面有紫色環亞硝酸鐵氰化鉀試驗 未出現紅色 均強心昔 3，5二硝基苯酸試驗 無紫紅色沉淀堿性苦味酸試驗 未出現橙紅色堿液反應 出現紅色 ++蕙類3，5二硝基苯反應 紫紅色沉淀醋酸配濃硫酸反應 紫紅色皂昔 濃硫酸反應 藍紫色泡沫試驗 有三氯化鐵鐵氰化鉀反應 色酚類三氯化鐵反應 綠色氯化鈉明膠試驗 色沉淀靴質三氯化鐵反應 綠色澳酚藍反應 黃色有機酸PH值 5~6蛋質、氨基酸 荀三酮試驗 紫紅色:均表示各樣品都是陽性結果;均表示各樣品都是陰性結果。433小結表6表6試驗結果表明，鬼針草屬藥材各樣品的水提液中均含有生物堿、黃酮、糖、多糖、蔥酮、皂昔酚類、靴質、有機酸、蛋質、氨基酸等化學成分，不含有強心昔等化學成分。44討論鬼針草屬藥材乙醚提取液試驗乙醇提取液試驗以及水提取液試驗表明:其含有生物堿、蔥酮、皂昔、酚類、靴質、有機酸以及大量的黃酮類化合物、糖、蛋質、氨基酸揮發油等物質可以將鬼針草屬藥材中的黃酮蛋質和氨基酸類成分變廢為寶充分加以開發利用同時可以進一步研究開發鬼針草藥材揮發油的藥理活性，開發其在抗腫瘤領域的應用。第四部分第四部分常規檢查1水分測定11實驗儀器A104電子天平(上海天平儀器廠)、扁形稱量瓶、烘箱、干燥器等。12實驗方法與結果照水分測定法(中國藥典210年版一部附錄XH)第一法(烘干法)測定:把樣品粉碎使能通過二號篩混合均勻取供試品粉末約29平鋪于干燥至恒重(連續兩次稱量差異在o3mg以下)的扁形稱量瓶中，厚度不超過smm，精密稱定，打開瓶蓋在05℃干燥5小時將瓶蓋蓋好移置于干燥器中冷卻0分鐘精密稱定，再在上述溫度干燥1小時，冷卻，稱重，至連續兩次稱重的差異不超過smg為止，根據減失的重量，計算供試品中含水量(%)。結果見表7、圖1。表7鬼針草屬藥材水分含量水分含量(%)編號 樣品 平均值(%) RSD(%)1組 2組 3組l 鬼針草 1051 104 109 108 0332 大狼把草 02 08 04 04 0283 金盞銀盤 982 90 987 986 044 小花鬼針草 934 94 939 939 0535 婆婆針 108 103 105 105 0286 狼把草 8051 81 855 856 0587 矮狼把草 90 92 91 91 03鬼針草水分鬼針草水分含量分析圖1鬼針草量 2大狼把草{:3金盞銀盤4小花鬼針草5婆婆針6狼把草7矮狼把草圖1鬼針草水分含量13討論(1)水分含量受干燥方法、貯存條件、運輸等影響。文中所測定樣品為相同采收期相同的干燥條件下平行進行處理樣品，減小了外在因素造成的影響。(2)不同品種鬼針草水分含量有差異，其中婆婆針水分含量最高，為05%，狼把草水分含量最低為86%其水分含量從高到低為婆婆針一鬼針草商品一大狼把草一金盞銀盤一矮狼把草一小花鬼針草一狼把草。2灰分測定中藥的總灰分包括中藥本身經過灰化后的不揮發性無機鹽類，又稱生理灰分，和外界的無機攙雜物灰化后遺留下的殘留物各種中藥在無外來摻雜物時總灰分應在一定的范圍之內如有變異那么說明該中藥的質量受到了影響灰分的測定可以從一定程度上反映中藥的質量。21實驗儀器與試劑柑禍A104電子天平(上海天平儀器廠)、馬福爐、電爐、干燥器、烘箱、漏斗、水浴鍋、表面皿、無灰濾紙等;蒸餾水、稀鹽酸等。22總灰分測定照灰分測定法(中國藥典200年版一部附錄XK)總灰分測定法測定:把鬼針草樣品粉碎，使能通過二號篩，混合均勻后，取供試品39，置熾灼至恒重的柑禍中，稱定重量(準確至19)，緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時，逐漸升高溫度至50度至500600℃，使完全灰化并至恒重根據殘渣重量，計算供試品中總灰分的含量%)，結果見表8。表8鬼針草屬總灰分含量總灰分含量%)編號 樣品 平均值(%) RSD(%)1組 2組 3組l 鬼針草 75 770 732 756 2722 大狼把草 95 92 90 96 073 金盞銀盤 774 758 71 74 1104 小花鬼針草 875 875 870 873 0345 婆婆針 92 939 930 937 0706 狼把草 66 621 635 634 1657 矮狼把草 72 711 76 76 0423酸不溶性灰分測定照灰分測定法(中國藥典200年版一部附錄XK)酸不溶性灰分測定法測定:取上項所得的灰分在柑禍中小心加入稀鹽酸約0m用表面皿覆蓋柑禍置水浴上加0mn，表面皿用熱水5ml沖洗洗液并入柑禍中用無灰濾紙濾過柑禍內的殘渣用水洗于濾紙上并洗滌至洗液不顯氯化物反應為止濾渣連同濾紙移置同一柑禍中干燥熾灼至恒重。根據殘渣重量，計算供試品中酸不溶性灰分的含量(%)，結果見表9。表9鬼針草屬藥材酸不溶性灰分含量酸不溶性灰分含量(%)編號 樣品 平均值(%) RSD(%)1組 2組 3組l 鬼針草 105 102 104 104 1052 大狼把草 O5 06 09 07 223 金盞銀盤 O1 02 03 02 084 小花鬼針草 128 123 111 121 7285 婆婆針 086 083 084 084 1866 狼把草 139 141 142 141 1047 矮狼把草 16 19 10 15 4924討論由表8、表9可得柱形圖進行，如圖2所示。定4…………… 酸分6 分目…… …………4號圖2鬼針草屬藥材灰分含量(1)不同品種鬼針草總灰分的含量有一定差別?？偦曳趾坑筛咧恋鸵来螢槠牌裴樢淮罄前巡菀恍』ü磲槻菀唤鸨K銀盤一鬼針草商品一矮狼把草一狼把草其中以婆婆針總灰分含量較高97%，狼把草含量最低，為64%?？梢?，生長環境和海拔對于不同品種灰分含量的影響較大。(2)不同品種鬼針草屬藥材酸不溶性灰分的含量由高至低依次為狼把草一小花鬼針草一矮狼把草一鬼針草商品一金盞銀盤一大狼把草一婆婆針其中酸不溶性灰分的含量以狼把草含量最高，為11%，金盞銀盤含量最低，為04%。(3)由灰分和酸不溶性灰分的排序，我們可以看出品種間的總灰分含量和酸不溶性灰分含量有一定的正相關性。第五部分含量測第五部分含量測定1浸出物含量測定11水浸出物含量測定111實驗儀器與試劑FA14電子天平(上海天平儀器廠)烘箱干燥器水浴鍋20l具塞錐形瓶、濾紙、減壓泵、布什漏斗、移液管、蒸發皿、球形冷凝管、電爐等;蒸餾水等。112冷浸法照浸出物測定法(中國藥典200年版一部附錄XA)水溶性浸出物測定法冷浸法測定:把鬼針草樣品粉碎，使能通過二號篩，混合均勻，取供試品約49，精密稱定置20ml的錐形瓶中精密加入蒸餾水0Om，密塞冷浸，前6小時內時時振搖再靜置8小時用干燥濾器迅速濾過精密量取續濾液0ml置已干燥至恒重的蒸發皿中在水浴上蒸干后，于5℃干燥h，置干燥器中冷卻0mn迅速精密稱定重量，除另有規定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量(%)，結果見表0、圖3。表0鬼針草屬水浸出物含量(冷浸法)水浸出物含量(%)編號 樣品 平均值(%) RSD(%)1組 2組 3組l 鬼針草 28 1515 303 355 1022 大狼把草 1174 58 357 36 253 金盞銀盤 2121 2275 2101 2166 4l4 小花鬼針草 2070 2304 2121 2165 5665 婆婆針 1502 178 166 1635 9176 狼把草 242 2552 246 2457 3357 矮狼把草 57 953 727 732 2O冷浸冷浸法30.000015U0000含0000門 門 共井00