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Coombs試驗概述直接Coombs試驗原理及方法直接Coombs試驗臨床意義

直接Coombs試驗專題知識專家講座第1頁一.Coombs試驗概述1945年，英國免疫學家Coombs等人創造一個能檢測紅細胞表面抗體新試驗，故稱之Coombs試驗，亦稱抗人球蛋白試驗。抗人球蛋白試驗是抗人球蛋白參加一個間接血凝試驗，利用抗人球蛋白抗體作為第二抗體起到橋梁作用，連接與紅細胞表面抗原結合不完全抗體，使紅細胞凝集。直接Coombs試驗專題知識專家講座第2頁不完全抗體能夠與對應抗原牢靠結合,但因其分子量較小,體積小,不能起到橋聯作用,在普通條件下不出現可見反應。Coombs試驗用于檢測不完全抗體直接Coombs試驗：檢驗紅細胞上有沒有不完全抗體。間接Coombs試驗：檢驗血清中有沒有游離不完全抗體。

直接Coombs試驗專題知識專家講座第3頁二.直接Coombs試驗（一）直接Coombs試驗基本原理

若紅細胞在體內被不完全抗體吸附，因為不完全抗體分子量小，體積小，不能起到橋聯作用，僅使紅細胞處于致敏狀態，在普通條件下不出現可見反應。加入抗球蛋白試劑，與紅細胞上吸咐不完全抗體結合，在致敏紅細胞之間搭橋，出現肉眼可見凝集。直接Coombs試驗專題知識專家講座第4頁待檢紅細胞不完全抗體抗人球蛋白直接coombs試驗原理示意圖直接Coombs試驗專題知識專家講座第5頁（二）直接Coombs試驗方法1.洗滌紅細胞：取50μL受檢者全血，以0.9%生理鹽水洗滌3次（1500r/min離心1min）；2.配制3%-5%紅細胞鹽水懸液；3.編號：分別取三個試管，標識為IgG、C3d、IgG/C3d；4.三管中分別加入50μL3%-5%紅細胞鹽水懸液，加入兩滴對應抗人球蛋白試劑（抗IgG、C3d、IgG/C3d）；5.輕輕混勻后3000r/min離心15s，輕輕搖動試管，觀察結果。直接Coombs試驗專題知識專家講座第6頁（三）直接Coombs試驗結果判讀

陽性結果-出現紅細胞凝集，表示紅細胞上有對應抗體存在；陰性反應-紅細胞不凝集，表示紅細胞上沒有對應抗體存在。直接Coombs試驗專題知識專家講座第7頁（四）注意事項1.標本采集后應馬上進行試驗，延遲試驗可使抗體從細胞上丟失；2.受檢紅細胞一定要洗滌充分，不然紅細胞懸液中混雜血清蛋白會中和抗人球蛋白；3.直接抗人球蛋白試驗在初讀結果后，放在室溫中5-10分鐘，再次離心觀察。這么孵育之后，若紅細胞被C3d致敏時，重新離心觀察結果可使陰性結果轉變為陽性結果，而IgG致敏紅細胞在孵育后反應更弱。直接Coombs試驗專題知識專家講座第8頁三.直接Coombs試驗臨床意義本身免疫性溶血性貧血新生兒溶血癥溶血性輸血

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