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文檔簡介

實驗三組織分離法組織分離法（離析法）組織分離法：是利用物理（機械）的方法或化學的方法（如藥品或者酶的作用）把生物細胞間的胞間層溶解，使生物組織間的細胞分離開來，從而得到單個完整細胞，以便在顯微鏡下觀察細胞的立體形態結構。缺點：由于組織的細胞間彼此分離，細胞間的關系無法顯示，也就不可能了解整個組織的結構。一、實驗目的學習物理（機械）分離制片方法；學習化學分離制片方法。二、實驗材料及用品實驗材料：葉片（新鮮和固定）、南瓜莖。實驗用具：載、蓋玻片；顯微鏡；鑷子；離心機等。實驗藥品：蒸餾水、梯度酒精、?二甲苯+?純酒精，Naocl，?10%鉻酸+?10%硝酸離析液，二甲苯，I-KI染液，1%番紅水溶液，1%番紅酒精溶液、加拿大樹膠。三、實驗步驟（一）——表皮制片步驟臨時裝片法選材

撕取下表皮

染色

封固

鏡檢

新鮮材料，靠近中脈部分1（I-KI染色2min）加蓋玻片置載玻片，加一滴水，充分展開三、實驗步驟（一）——表皮制片步驟永久制片法選材固定（FAA固定液，24h）清洗Naocl撕取下表皮染色（1%番紅水溶液30min-1.5h）水洗（洗去浮色，一次即可）

（I-KI染色）分色（用鹽酸水）水洗（洗去酸液）粘片、烘片脫水（50%，70%，80%，95%，100%，?二甲苯+?100%酒精，各2min）透明（二甲苯）封固鏡檢

靠近中脈部分染色期間觀察如染色液干涸，再滴加載玻片上滴一滴蛋白黏貼劑，期間加入一滴水，移入葉表皮，水分吸干后放入烘箱烘干2345放入30-40度溫箱，周邊泛白三、實驗步驟（二）——離析制片步驟取材加熱離析（10%鉻酸：10%硝酸=1:1離析液）水洗染色（1%番紅的50%酒精溶液4-24h或更長）水洗（7%AL，1-2次）脫水（50%，70%，85%，95%AL各5min，100%AL，兩次，每次5min）透明（?二甲苯+?100%酒精，二甲苯各5min）封藏將莖切成1cm長，撕成細絲狀離析液為材料的20倍，30-40℃的溫箱中24-48h水洗數次，在離心管中進行四、實驗結果表皮制片：表皮細胞的形態？氣孔器的類型？離析制片：南瓜莖的導管及木纖維形態？氣孔器

氣孔器類型無規則型不等型平列型橫列型離析法楊莖的木纖維和導管分子五、作業實驗完畢

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