實驗細菌的接種及分離培養第一頁，共二十二頁，2022年，8月28日目的要求1、學習和掌握細菌分離與培養的各種基本技術；2、進一步熟悉和掌握無菌操作技術。第二頁，共二十二頁，2022年，8月28日實驗材料標本和菌種：咽拭子、葡萄球菌培養物、變形桿菌培養物；實驗器材：接種環、接種針、酒精燈；培養基：普通瓊脂平板、試管斜面、液體培養基、半固體培養基；第三頁，共二十二頁，2022年，8月28日常用的有接種針、接種環、接種鉤、接種圈、接種鏟或接種鋤、玻璃涂棒等（見圖－6）。圖－6接種工具第四頁，共二十二頁，2022年，8月28日細菌接種的基本程序滅菌接種環沾取標本接種滅菌接種環殺滅接種環沾染的細菌，以免污染標本殺滅接種環沾染的細菌，以免污染環境第五頁，共二十二頁，2022年，8月28日（一）細菌的分離方法培養基：固體平板培養基分離方法：劃線分離法意義：該法主要是借助劃線而將混雜的細菌在瓊脂表面分散開，使單個細菌能固定在某一點，生長繁殖后形成單個菌落，以達到分離純種的目的。細菌的分離培養方法第六頁，共二十二頁，2022年，8月28日微生物的分離—平板劃線法1.分區劃線法：2.連續劃線法：第七頁，共二十二頁，2022年，8月28日微生物的分離—平板劃線法第八頁，共二十二頁，2022年，8月28日第九頁，共二十二頁，2022年，8月28日分區劃線法第一區劃線滅菌接種環第二區劃線滅菌接種環第三區劃線滅菌接種環第十頁，共二十二頁，2022年，8月28日連續劃線法第十一頁，共二十二頁，2022年，8月28日（二）細菌的接種法當細菌分離成純種后，常需要接種到相關的培養基中，以測試其各種生物學性狀。一般可用斜面、半固體、液體培養基來檢驗細菌的培養特性，相應培養基的接種方法有三種。第十二頁，共二十二頁，2022年，8月28日斜面接種法培養基：斜面固體培養基；接種方法：斜面培養基接種法；用途：擴增細菌、保存菌種；或用于觀察其某些生化特性。第十三頁，共二十二頁，2022年，8月28日瓊脂斜面培養基接種法第十四頁，共二十二頁，2022年，8月28日穿刺接種半固體培養基：接種方法：穿刺接種法。用接種針垂直地穿入培養基中心至底部然后沿著原接種線將針拔出用途：檢驗細菌的運動性或觀察細菌的生化反應。第十五頁，共二十二頁，2022年，8月28日液體培養基接種法培養基：液體培養基：接種方法：液體接種法從斜面菌種接入液體培養液從液體培養液接入液體培養液用途：擴增細菌，用于觀察細菌的生長特性或測定其生化特性。第十六頁，共二十二頁，2022年，8月28日細菌培養法一般培養（需氧培養）：★培養溫度：37℃（采用恒溫培養箱）★培養時間：18～24h二氧化碳培養法：燭缸法、二氧化碳培養箱厭氧培養法：厭氧培養箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養法、硫乙醇酸鹽法等第十七頁，共二十二頁，2022年，8月28日細菌在固體培養基中的生長現象菌落：★定義：指單個細菌在平板培養基上生長繁殖，形成單一肉眼可見的細菌集團。★菌落特征：大小、形狀、邊緣、顏色、表面、透明度、濕潤度、黏度、溶血性★菌落類型：光滑型（S）、粗糙型（R）、黏液型（M）菌苔：指多個菌落融合在一起形成的細菌堆積物。第十八頁，共二十二頁，2022年，8月28日菌落第十九頁，共二十二頁，2022年，8月28日菌落與菌苔第二十頁，共二十二頁，2022年，8月28日細菌在液體培養基中的生長現象混濁沉淀：多見于