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文檔簡介
某培養基的配方是MS+BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L+2.5%蔗糖+0.7%瓊脂粉。MS母液的濃度分別是大量元素20倍,微量500倍,鐵鹽100倍,有機物50倍;BA母液濃度1.0mg/mL,NAA母液濃度0.1mg/mL,要配置400mL該培養基,需要吸取各種母液各多少mL?分別稱取蔗糖、瓊脂多少克?大量元素:1000/20*1*0.4=20mL微量1000/500*1*0.4=0.8mL鐵鹽1000/100*1*0.4=4mL有機物1000/50*1*0.4=8mLBA2.0*0.4=1.0*VBAVBA=0.8mLNAA0.5*0.4=0.1*VNAAVNAA=2mL蔗糖2.5%*400=10g瓊脂0.7%*400=2.8g簡述MS培養基的基本特點無機鹽濃度高,元素平衡較好,緩沖性能好,微量元素和有機成分含量齊全且較豐富簡述外植體消毒的一般步驟1、先用清水沖洗,茸毛較多的外植體用皂液洗滌后再用清水沖洗,用吸水紙吸干表面水分;2、將外植體浸泡在0.1%-0.2%的氯化汞溶液中2-19min,或先在70%酒精中浸泡數秒,然后再10%次氯酸鈣中浸泡10-20min,或先在70%酒精中浸泡數秒,再2%次氯酸鈉溶液中浸泡15-30min進行滅菌;3、滅菌后倒掉滅菌液,無菌水沖洗外植體3-5次,置外植體于無菌濾紙上吸干表面水分,適當分割后接種植物組織培養:在無菌和人工控制的條件下,利用適當的培養基,使植物的離體器官、組織、細胞及原生質體生長和發育的所有培養技術的總稱。細胞脫分化:離體培養條件下生長的細胞、組織或器官經過細胞分裂或不分裂逐漸失去原來的結構和功能而恢復分生狀態,形成無組織結構的細胞團或愈傷組織或成為未分化細胞特性的細胞的過程外植體:植物組織培養過程中使用的各種器官、組織和細胞人工種子:植物離體培養中產生的胚狀體或不定芽,被包裹在含有養分和保護功能的人工胚乳和人工種皮中,從而形成能發芽出苗的顆粒體胚狀體:在離體培養條件下,植物離體培養的細胞、組織、器官產生的類似胚的結構愈傷組織:外植體因受傷或在離體培養時,其未分化的細胞和已分化的細胞進行活躍的分裂增殖而形成的一種無特定結構和功能的組織植物細胞全能性:植物體的每個生活細胞都具有該植物機體的全部遺傳信息,具有發育完整個體的性能原球莖:是蘭花種子萌發形成的一種形態學構造,是短縮的,呈珠粒狀,類似嫩莖的器官再分化:離體培養的植物細胞和組織可以由脫分化狀態重新進行分化,形成一種或幾種類型的細胞、組織、器官,甚至形成完整植株的過程10叢生芽:指外植體攜帶的頂芽或腋芽在適宜培養環境中不斷發生腋芽而呈叢生狀態11培養基:是供微生物、植物和動物組織生長和維持用的人工配制的養料培養基制作程序并畫圖表示確定培養基配放用量---稱取蔗糖、瓊脂---熬培養基---定容---PH調整---分裝---封口---標識、記錄---高壓滅菌如何減輕植物組織中試管苗玻璃化現象1、兩個增加:增加瓊脂濃度,增加蔗糖含量2、連個增強:增強容器通風,增強光照3、連個加入:加入滲透劑,加入ABA4、一個減少:減少培養基氮素含量,特別是NH4-N試管苗繁殖的一般程序:初代培養-繼代培養-生根培養-移栽馴化植物組培中影響器官分化的因素有哪些?IAA和CTK的比值和絕對含量對器官分化的影響IAA/CTK高:有利于形成根適中:維持原組織生長而不分化低:有利于形成芽試敘述植物脫毒的機理,常用的脫毒方式有哪些?1、病毒在植物體內的分布是不均勻的,在莖尖中呈梯形分布2、植物病毒自身不具有主動轉移的能力,病毒的移動都是被動的3、在旺盛分裂的細胞中,代謝活性很高,使病毒無法進行復制4、在植物體內可能存在病毒鈍化系統5、在莖尖中存在高水平內源生長素可抑制病毒的增值方法:1、物理方法2、化學方法3、生物化學方法4、綜合脫毒法填空題脫毒苗的檢測方法有:(直接測定法)(指示植物法)(血清鑒定法)(核酸分析法)(電鏡鑒定法)培養基有(基本培養基)(完全培養基)外植體的選擇原則(再生能力強)(遺傳穩定性好)(外植體來源豐富)(外植體滅菌容易)植物離體培養細胞產生胚狀體的過程即(植物胚胎發生)植物快速繁殖初代培養物形成有5種類型(段枝發生型)(叢生芽發生型)(不定芽發生型)(胚狀體發生型)(原球莖發生型)造成組培過程中發生污染的原因有哪些?如何有效控制污染細菌污染原因:工具消毒不徹底,人呼吸引起,手接觸材料或器皿控制措施:戴口罩,不講話,用酒精棉球擦雙手真菌污染原因:接種室空氣污染,超凈工作臺運行不良所致控制措施:1、紫外燈照射接種室30min以上2、超凈工作臺提前20min開機3、培養瓶應拿成斜角,放在酒精燈火焰上方若以上三項措施無效,需對接種室進行熏蒸植物離體快速繁殖有哪些方面的應用1、良種的快速繁殖新育成的新引進的新發現的稀缺良種的快速繁殖2、少量脫毒良種苗的快速繁殖和無病毒苗的快速繁殖3、特殊育種材料的快速繁殖4、制種材料的快速繁殖5、基因工程植株的快速繁殖6、自然和人工誘變有用突變體的快速繁殖7、離體保存種質8、瀕危植物的繁殖植物組織培養的基本特點:1整個過程都是在無菌條件下進行的在多數情況下是利用完全確定的人工培養基進行的,在組織培養中的植物材料不需依靠自身,光合作用提供養分材料可以是植物的器官,組織,也可以是單個細胞,他們都處于離體狀態通過連續培養,可以不斷增殖,形成克隆在封閉的容器中進行,組培苗葉片表面一般都無角質層或蠟質層,氣孔始終張開環境濕度,光照強度和時間都是人為設定的應用:1植物離體快繁培育無病毒苗木培育新品種或創制新物種1)選育雜交品種2)離體選擇突變體3)單倍體育種(花藥培養)次生代謝物產生(天然有機化合物)植物種質自愿的離體保存人工種子用于基因工程組培過程中發生褐變現象的原因及防治方法原因:酚類在完整的細胞中單獨存在,不與多酚氧化酶接觸,較穩定,外植體切口受損
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