標(biāo)準(zhǔn)解讀
GB/T 17999.2-1999是一項中國國家標(biāo)準(zhǔn),全稱為《SPF雞血清中和試驗》。該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了使用SPF(無特定病原體)雞進行血清中和試驗的方法,旨在檢測抗病毒抗體的存在及其滴度,評估疫苗效果或研究動物對特定病毒的免疫反應(yīng)。以下是該標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容概覽:
標(biāo)準(zhǔn)適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于評價禽類疫苗效力及監(jiān)測動物群體中針對特定病毒的免疫狀態(tài),通過測定SPF雞血清中和病毒的能力來實現(xiàn)。
術(shù)語定義
- SPF雞:指無特定病原體的雞,用于確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。
- 血清中和試驗:一種生物測定方法,通過測定病毒與特異性抗體在體外反應(yīng)后失去感染力的能力,來評估血清中的中和抗體水平。
試驗材料與試劑
- 規(guī)定了所需SPF雞的來源、飼養(yǎng)條件及血清采集要求。
- 列出了用于試驗的標(biāo)準(zhǔn)病毒株、細胞培養(yǎng)條件、維持液及稀釋液的具體要求。
試驗步驟
- 病毒準(zhǔn)備:詳細說明了病毒的增殖、收獲、滅活及滴定過程。
- 血清準(zhǔn)備:包括血清的收集、處理及稀釋方法。
- 中和反應(yīng):描述了將病毒與不同稀釋度的血清預(yù)混合,然后加入敏感細胞培養(yǎng)的具體操作步驟。
- 觀察與判定:規(guī)定了觀察細胞病變效應(yīng)(CPE)的時間點及判定標(biāo)準(zhǔn),以確定血清的中和效價。
結(jié)果判定與計算
- 介紹了如何根據(jù)細胞培養(yǎng)的CPE情況,通過計算血清的中和指數(shù)或中和滴度(如50%中和滴度,NT50)來評價血清的中和能力。
精密度與準(zhǔn)確度
- 提供了重復(fù)性與再現(xiàn)性的要求及評估方法,確保不同實驗室間結(jié)果的一致性。
試驗報告
- 要求記錄詳細的試驗條件、所用材料、操作步驟、觀察結(jié)果及最終結(jié)論,確保試驗的可追溯性。
注意事項
- 強調(diào)了生物安全操作的重要性,以及在整個試驗過程中需遵循的無菌操作規(guī)范。
該標(biāo)準(zhǔn)為SPF雞血清中和試驗提供了一套標(biāo)準(zhǔn)化流程,確保了實驗結(jié)果的可靠性和可比性,是獸醫(yī)研究、疫苗開發(fā)及動物疾病防控領(lǐng)域的重要參考依據(jù)。
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- 被代替
- 已被新標(biāo)準(zhǔn)代替,建議下載現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)GB/T 17999.3-2008
- 1999-11-10 頒布
- 2000-04-01 實施



文檔簡介
TC5.65.020.30B41中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗SPFchicken-Serumneutralizationtest1999-11-10發(fā)布2000-04-01實施國家質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布
GB/T17999.2-1999前本標(biāo)準(zhǔn)參照美國SPAFAS公司的血清中和試驗(SN)操作規(guī)程編制而成。SPF雞微生物學(xué)質(zhì)量控制國家系列標(biāo)準(zhǔn),包括SPF雞微生物學(xué)監(jiān)測總則和9種SPF雞微生物學(xué)檢測方法。本標(biāo)準(zhǔn)為《SPF雞血清中和試驗》。SPF雞微生物學(xué)檢測方法還包括以下部分:GB/T17999.1-1999SPF雞紅細胞凝集抑制試驗;GB/T17999.3—1999SPF雞血清平板凝集試驗:GB/T17999.4-1999SPF雞瓊脂擴散試驗:GB/T17999.5—1999SPF雞酶聯(lián)免疫吸附試驗;GB/T17999.6—1999SPF雞旺敏感試驗;GB/T17999.7—1999SPF雞雞白喇沙門氏菌檢驗;GB/T17999.8—1999SPF雞試管凝集試驗;GB/T17999.9—1999SPF雞間接免疫熒光試驗本標(biāo)準(zhǔn)由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部、國家科學(xué)技術(shù)部提出。本標(biāo)準(zhǔn)由農(nóng)業(yè)部畜牧獸醫(yī)司歸口本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:農(nóng)業(yè)部實驗動物研究中心、山東省農(nóng)科院家禽研究所本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:趙立紅、陳德威、張秀美、秦卓明
中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T17999.2-1999SPF雞血清中和試驗SPFchicken--Serumneutralizationtest1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了血清中和試驗所用試劑、材料.操作程序及結(jié)果判定等本標(biāo)準(zhǔn)適用于SPF雞感染以下病毒后的中和抗體的監(jiān)測:禽腦脊髓炎病毒(AvianEncephalomyelitisVirus)、傳染性支氣管炎病毒(InfectiousBronchitisVirus)、傳染性喉氣管炎病毒(In-fectiousLaryngotracheitisVirus)、傳染性法氏襄病病毒(InfectiousBursalDiseaseVirus)。2原理中和試驗系指有生物活性的病毒與相應(yīng)的抗體結(jié)合后,可失去原有的生物活性的中和反應(yīng)。中和反應(yīng)不僅有高度特異性.且具有嚴(yán)格的量的關(guān)系。因此可用中和試驗鑒定病毒.也可用于相應(yīng)抗體的定量檢測3試劑和器材3.1試劑3.1.1蛋白際磷酸肉湯、3.1.2青霉素/鏈霉素(雙抗)液3.1.33%碘溶液。3.1.4SPF蛋。3.2器材3.2.1蛋鉆(打孔器)3.2.26針頭。3.2.37*針頭。3.2.4混合器3.2.5照蛋器、3.2.6常規(guī)實驗設(shè)備4操作程序4.1試驗準(zhǔn)備4.1.1血清樣品處理被檢血清和陽性對照血清經(jīng)56C30min~45min滅活,保存于-20C條件下備用4.1.2SPF蛋準(zhǔn)備4.1.2.1共需12枚蛋4.1.2.2照蛋檢查胚體活力.試驗只用健康胚4.1.2.3根據(jù)
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