動物細胞融合與單克隆抗體雜種植株融合的原生質體AB再生出細胞壁脫分化愈傷組織再分化植物細胞的融合植物組織培養植物細胞A原生質體B原生質體A雜種細胞AB去壁去壁人工誘導方法？促進融合的方法？融合完成的標志植物細胞B植物體細胞雜交技術過程2021/4/272成果和未解決的問題

成果：克服不同生物遠緣雜交的障礙，出現自然界沒有的新品種。未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們的需要表現出親代的優良。2021/4/273如果將牛的細胞與植物細胞雜交，得到綠色的小奶牛，那豈不是只要曬曬太陽就可以擠出牛奶啦！動物細胞也能融合嗎？2021/4/274一、動物細胞融合細胞A細胞B雜交細胞滅活的病毒物理法化學法仙臺病毒皰疹病毒新城雞瘟病毒2021/4/275不同DNA的兩個細胞滅活病毒誘導細胞融合融合后的細胞進行有絲分裂1、動物細胞融合過程2021/4/276思考題1、植物體細胞雜交前做何處理？怎么處理？去壁

酶解法，如纖維素酶或果膠酶2、動物細胞融合時需要進行去壁處理嗎？為什么？無需，因為動物細胞無細胞壁3、植物體細胞雜交誘導原生質體融合常用的方法有哪些？離心、振動、電激等物理方法；PEG等化學方法2021/4/2774、動物細胞融合能利用上述兩類方法嗎？還有其他方法？能還可以利用滅活的病毒進行誘導5、植物體細胞雜交過程應先進行原生質體融合再進行組織培養形成完整的個體，動物細胞融合后能形成雜種動物個體嗎？不能6、你能歸納出什么叫做動物細胞融合嗎？思考題2021/4/2782、動物細胞融合的概念

動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞形成一個細胞的過程。2021/4/2797、你推測一下動物細胞融合有哪些方面的應用嗎？思考題

利用動物細胞融合技術誘導形成雜交瘤細胞8、在生產實際中雜交瘤細胞有怎樣的應用？

生產單克隆抗體2021/4/2710細胞融合與融合誘導細胞融合物質：誘導劑：仙臺病毒、聚乙二醇

誘導細胞融合的仙臺病毒必須滅活。

思考討論：為什么細胞融合過程中使用的病毒需要滅活？不滅活行嗎？

因為滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白質分子和脂質分子重新排布，細胞膜打開，細胞發生融合，不滅活的話會感染細胞，而不能誘導細胞融合。

細胞融合技術應用于哪些方面？

細胞學、遺傳學、免疫學及制備單克隆抗體。2021/4/27111.抗體是由何種細胞產生的？2.如何得到抗體？提問？二、單克隆抗體2021/4/2712

抗體1、抗原動物體內刺激漿細胞

抗原動物體內刺激漿細胞

抗體抗原不純抗體不純篩選單一漿細胞不能增殖產生大量抗體2、特異性差、純度低；產量低、反應不夠靈敏二、單克隆抗體2021/4/2713設計方案：一個B淋巴細胞－－只分泌一種特異性抗體小鼠骨髓瘤細胞－－能無限增殖如何獲得化學性質單一、特異性強的抗體？雜種細胞二、單克隆抗體2021/4/2714

？

？誘導其融合的方法有哪些？

抗原漿細胞2.制備過程：

二、單克隆抗體2021/4/2715BBBB瘤瘤瘤瘤細胞融合后培養液中有幾種細胞？篩選（特定的選擇性培養基）雜種細胞2021/4/2716整個制備過程要經過幾次篩選?（第一次篩選得到雜交瘤細胞（多種），第二次需先在多孔培養板上，在每孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始培養，然后再篩選出能產生特異性抗體的細胞群。由于該細胞群是單個雜交瘤細胞克隆得來的，所以產生的抗體必然是化學性質單一的，特異性強的單克隆抗體。這里的單克隆確有單個細胞克隆的含義，只不過克隆的不是B淋巴細胞，而是雜交瘤細胞。）2021/4/27173.單克隆抗體的應用：①作為診斷試劑②用于治療疾病和運載藥物生物導彈

特異性高、靈敏度高等優越性。2021/4/2718主要用于制備單克隆抗體獲得雜種植株用途物理、化學方法（同左）滅活的病毒物理（離心、振動、電刺激）化學（聚乙二醇）誘導方法使細胞分散后誘導細胞融合去除細胞壁后誘導原生質體融合細胞融合的方法細胞膜的流動性細胞膜的流動性、植物細胞全能性原理動物細胞融合植物體細胞雜交比較項目植物、動物細胞融合的比較2021/4/2719

下圖為某同學根據雜交瘤技術的方法，設計的生產破傷風桿菌的實驗方案3、圖中B為________過程，常用_________作為誘導劑，該細胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能___________。1、該實驗方案的目的是__________2、A是從小鼠的脾臟中取得_______,該細胞能夠產生______4、C過程指細胞培養，該過程包括_____培養和_____培養兩個階段。制備單克隆抗體B細胞抗體細胞融合滅活病毒雙親細胞分泌抗體無限增殖原代傳代B體外培養骨髓瘤細胞雜交瘤細胞足夠數量的細胞群注射到小鼠腹腔AC2021/4/2720下列屬于動物細胞培養與植物組織培養主要區別的是A.培養基成分不同B.動物細胞培養不需要在無菌條件下進行C.動物細胞可以傳代培養，而植物細胞不能D.動物細胞能夠大量培養，而植物細胞只能培養成植株下列與動物細胞培養有關的表述中，不正確的是A．培養液通常含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清B．原代培養的細胞一般傳至10代左右便會出現生長停滯C．動物細胞培養一般能夠傳到40～50代，但其遺傳物質發生了改變D．動物細胞培養可用于檢測有毒物質和獲得大量自身健康細胞AC2021/4/2721生物技術的發展速度很快，已滅絕生物的“復生”將不再是神話。如果世界上最后一只野驢剛死亡，以下較易成功“復生”野驢的方法是 A．將野驢的體細胞取出，利用組織培養技術，經脫分化、再分化，培育成新個體B．將野驢的體細胞兩兩融合，再經組織培養培育成新個體C．取出野驢的體細胞核移植到母家驢的去核卵細胞中，經孕育培養成新個體D．將野驢的基因導入家驢的受精卵中，培育成新個體C2021/4/2722一只羊的卵細胞核被另一只羊的體細胞核置換后，這個卵細胞經過多次分裂，再植入第三只羊的子宮內發育，結果產下一只羊羔。這種克隆技術具有多種用途，但是不能A．有選擇地繁殖某一性別的家畜B．繁殖家畜中的優秀個體C．用于保存物種D．改變動物的基因型D2021/4/2723下列哪—項屬于克隆 A．將雞的某個DNA片段整合到小鼠的DNA分子中B．將抗藥菌的某基因引入草履蟲的細胞內C．將鼠骨髓瘤細胞與經過免疫的脾細胞融合成雜交瘤細胞D．將某腫瘤細胞在體外培養繁殖成一個細胞系試管嬰兒、試管苗和克隆羊三者均屬于生物工程技術的杰出成果，下面敘述正確的是A.都屬于無性生殖能保持母本性狀B.都是細胞工程的技術范圍C.都充分體現了體細胞的全能性D.都不會發生基因重組和變異DB2021/4/2724下圖是動物細胞培養的基本過程示意圖。請據此回答：（1）A中放置的是動物器官或組織。它一般取自

。（2）容器A中的動物器官或組織首先要進行的處理是

，然后用

酶處理，使細胞分散開來，這樣做的目的是

。（3）培養首先在B瓶中進行，瓶中的培養基成分有___________________________________等。在此瓶中培養一段時間后，有許多細胞衰老死亡，這是培養到第

代，到這時的培養稱為

。（4）為了把B瓶中的細胞分裝到C瓶中，用

處理，然后配置成

，再分裝。（5）在C瓶中正常培養了一段時間后，發現細胞全部死亡，原因是

。2021/4/2725CCTV一2于2005年4月7日報道，衛生部4月6日發布了《蘇丹紅危險性報告評估》，報道中提到蘇丹紅一號是一種人工色素(工業染料)，它在人體內代謝生成相應的胺類。科研人員欲采用一定的技術手段探究蘇丹紅是否對人體有危害。請回答：（1）根據所學的動物細胞工程知識，你認為采取下列哪種技術手段最合適：

A．動物細胞融合B．動物細胞培養C．胚胎移植D．核移植2021/4/2726（2）根據上述選擇，請你設計一個實驗來探究“蘇丹紅一號”是否對人體有危害。[1]該實驗的原理是：

。[2]實驗方法步驟：①材料準備：從醫院婦產科獲取所需要的原材料組織，濃度為0.09％“蘇丹紅一號”試劑，高倍顯微鏡，培養瓶若干，配制好的培養液，剪刀，培養箱，所需要的酶。

②制備檢測細胞：a．配制細胞懸浮液：

。b．將懸浮液分裝到兩個以上的培養瓶中，置于培養箱中培養一段時間。③檢測過程：

。④實驗結果觀察、分析得出結論。(略)

2021/4/2727動物細胞融合和植物原生質體融合比較，在動物細胞融合中有特殊性的是A．融合的原理B．融合的過程C．融合的誘導手段D．融合的結果C2021/4/2728下表為動、植物細胞工程的有關內容比較，你認為錯誤的有植物細胞工程動物細胞工程特殊處理酶解法去除細胞壁胰蛋白酶處理配制細胞懸液融合方法物理方法，化學方法物理方法，化學方法，生物方法典型應用人工種子，種間雜種植物單克隆抗體的制備培養基的區別麥芽糖是離體組織賴以生長的成分動物血清不可缺少A．0處B．1處C．2處D．3處2021/4/2729（1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用

處理，除去了

；由A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法是

。融合完成的標志是

。（2）若A、B是植物細胞，則形成的D細胞還要應用

技術把D培養成植株。（3）若A、B是動物細胞，一般取自

，然后用

使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞融合的手段是

，所形成的D稱為

，A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有

。（1）纖維素酶和果膠酶細胞壁電刺激、振動、離心產生新的細胞壁（2）植物組織培養(3)動物胚胎或出生不久的幼齡動物的器官或組織胰蛋白酶滅活的病毒誘導雜種細胞一定的流動性2021/4/2730（4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應B細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已經被注射了

。注射后小鼠身體發生了相應的免疫反應，生成了_________，圖中B為

。（5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有

種，用來培養的D細胞應該是

。從中選擇出它的方法是

培養，獲得D后，常用的培養方法是培養液中培養和

。(4)抗原效應B細胞抗體和記憶細胞骨髓瘤細胞

(5)3雜交瘤細胞用特定的選擇培養基小鼠腹腔內增殖2021/4/2731若人基因的作用不受鼠基因影響，則支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的

號染色體上。將分離出的雜種細胞在不同條件下繼續培養，獲得A、B、C三細胞株。各細胞株內含有的人染色體如有表（“+”有，“—”無）測定各細胞株中人體所具有的五種酶的活性。結果是：①B株有a酶活性；②A、B、C株均有b酶活性：③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均無e酶活性。細胞株人染色體編號12345678A株＋＋＋＋－－－－B株＋＋－－＋＋－－C株＋－＋－＋－＋－2021/4/2732比特爾等在1941年提出了“一個基因一種酶假說”。在生物體內，各類物質或分子是經過一系列代謝步驟合成的，每一步都受特定的酶所催化。現假設已分離到某微生物