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文檔簡介
第二章/第一節紅細胞檢查1整理ppt第二章/第一節紅細胞檢查1整理ppt2整理ppt2整理ppt3整理ppt3整理ppt4整理ppt4整理ppt正常情況下,紅細胞生成與破壞保持動態平衡,血液中紅細胞數量保持在相對恒定的范圍。血液中紅細胞數量可通過紅細胞計數獲得5整理ppt正常情況下,紅細胞生成與破壞保持動態平衡,血液中紅細胞數量保紅細胞計數(redbloodcellcount,RBC)測定單位體積血液中紅細胞的數量診斷貧血及紅細胞增多的指標之一紅細胞計數的方法顯微鏡計數法血液分析儀法6整理ppt紅細胞計數(redbloodcellcount,RB顯微鏡計數法(重點)用等滲液稀釋血液后,滴入血細胞計數板,計數一定范圍內的紅細胞,經換算得每升血液中的紅細胞數。檢測原理
RBC未排除白細胞數量影響7整理ppt顯微鏡計數法(重點)檢測原理RBC未排除7整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝靜脈血加入2ml等滲液中,混勻混懸液充入改良牛鮑計數板高倍鏡下計數中央大方格的四角及中央五個中方格內的紅細胞總數A。換算?操作RBC/L=(A/5)×25×10×106×200=(A/100)×10128整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝靜脈血操作RBC/L=(A/5)Neubauer計數盤9整理pptNeubauer計數盤9整理ppt血液分析儀法采用電阻抗法或激光檢測法10整理ppt血液分析儀法采用電阻抗法或激光檢測法10整理ppt方法學評價方法優點缺點適用范圍顯微鏡計數法傳統方法,設備簡單,廉價費時費力,精密度低參考方法;分析儀異常結果復核血液分析儀法操作便捷,易于標準化,精密度高價貴;環境要求較高健康人群普查;大批量標本篩檢11整理ppt方法學評價方法優點缺點適用范圍顯微鏡計數法傳統方法質量保證(顯微鏡法)技術誤差儀器誤差分布誤差顯微鏡法紅細胞計數誤差來源有三個12整理ppt質量保證(顯微鏡法)技術誤差顯微鏡法紅細胞計數誤差來源有三個稀釋倍數不當2血液凝固4采血部位不當31充液不當33技術誤差13整理ppt稀釋倍數不當2血液凝固4采血部位不當31充液不當33技術誤差參考值成年男性:(4.09~5.74)×1012/L成年女性:(3.68~5.13)×1012/L新生兒:(5.2~6.4)×1012/L嬰兒:(4.0~4.3)×1012/L兒童:(4.0~4.5)×1012/LRBC存在年齡與性別的差異14整理ppt參考值成年男性:(4.09~5.74)×1012/LRBC存臨床意義RBC>參考值上限,RBC增多RBC<參考值下限,即貧血生理性變化病理性變化15整理ppt臨床意義RBC>參考值上限,RBC增多生理性變化病理性變化1生理性增多
生理性缺氧引起16整理ppt生理性增多生理性缺氧引起16整理ppt6個月-2歲嬰兒17整理ppt6個月-2歲嬰兒17整理ppt相對性增多:見于嘔吐、高熱等引起暫時性血液濃縮。通過補液,血容量恢復正常,紅細胞增多即消失。絕對性增多:①繼發性增多,由EPO代償性或非代償性增高引起。②原發性增多,紅細胞系統異常增殖性疾病。病理性增多18整理ppt相對性增多:見于嘔吐、高熱等引起暫時性血液濃縮。通過補液,血19整理ppt19整理ppt20整理ppt20整理ppt病理性減少(貧血)313233生成減少
破壞過多
血管丟失
貧血:紅細胞計數、血紅蛋白測定或血細胞比容低于參考值下限。病因學分類21整理ppt病理性減少(貧血)313233生成減少破壞過多血紅細胞生成減少骨髓造血功能減退或衰竭:再生障礙性貧血。造血物質缺乏或利用障礙:腎性貧血、缺鐵性貧血,巨幼細胞性貧血。22整理ppt紅細胞生成減少骨髓造血功能減退或衰竭:再生障礙性貧血。細胞內在缺陷(遺傳性缺陷)膜缺陷、酶缺陷、血紅蛋白異常致紅細胞壽命縮短。細胞外在異常(獲得性因素)免疫性因素:輸血血型不合、新生兒溶血病等。非免疫性因素:機械損傷、化學物理因素、寄生蟲及脾亢等。紅細胞破壞過多23整理ppt細胞內在缺陷(遺傳性缺陷)紅細胞破壞過多23整理ppt血液丟失:急、慢性失血性貧血24整理ppt血液丟失:急、慢性失血性貧血24整理ppt外傷引發的出血25整理ppt外傷引發的出血25整理ppt血紅蛋白(hemoglobin,Hb)
在有核紅及網織紅內合成是紅細胞胞漿內的呼吸載體蛋白Hb在成熟紅細胞內分布特點(近胞膜處多,中心部少)決定了紅細胞的雙凹圓盤形狀合成速度受促紅細胞生成素(EPO)與雄激素調節26整理ppt血紅蛋白(hemoglobin,Hb)在有核紅及網織紅Hb(四聚體)珠蛋白血紅素2條α鏈2條非α鏈原卟啉鐵原子血紅蛋白組成27整理pptHb珠蛋白血紅素2條α鏈2條非α鏈原卟啉鐵原子28整理ppt28整理ppt29整理ppt29整理ppt血液中血紅蛋白的存在形式存在形式所占比例還原血紅蛋白(Fe2+)正常成人>99%氧合血紅蛋白碳氧血紅蛋白硫化血紅蛋白高鐵血紅蛋白(Fe3+)
1%Hb測定即測定血液中各種血紅蛋白的總濃度。
30整理ppt血液中血紅蛋白的存在形式存在形式血液的物理特性:比重法,折射儀法Hb的分子組成:全血鐵法Hb與O2可逆性結合:血氣分析法Hb衍生物光譜特點:HiCN,SDS-Hb等檢測原理31整理ppt血液的物理特性:比重法,折射儀法檢測原理31整理pptHiCN法檢測原理紅細胞被溶血劑破壞后,高鐵氰化鉀可將各種血紅蛋白(SHb除外)氧化為高鐵血紅蛋白(Hi),后者與試劑中的CN-結合生成棕紅色的氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)。在540nm處測定HiCN的吸光度,直接換算Hb濃度或在標準曲線上查得Hb濃度。32整理pptHiCN法檢測原理紅細胞被溶血劑破壞后,高鐵氰化鉀可將各種血20ul血液加入5ml轉化液中,充分溶血轉化后,以轉化液調零,測定標本(HiCN)在540nm的吸光度A。計算操作直接計算(符合WHO標準的分光光度計)Hb=A×64458÷44000×251=A×367.7以HiCN參考液繪制標準曲線,利用吸光度A在標準曲線上查出Hb濃度33整理ppt20ul血液加入5ml轉化液中,充分溶血轉化后,以轉化液調零方法學評價缺點:試劑有毒、高WBC造成試劑混濁、HbCO轉化慢、不能測SHb。HiCN測定法(參考方法)
優點:操作簡單,反應速度快,產物穩定,便于質控。34整理ppt方法學評價缺點:試劑有毒、高WBC造成試劑混濁、HbCO方法學評價優點:操作簡單,試劑無毒,結果準確,重復性好。缺點:SDS質量差異大;消光系數未定,不能直接計算Hb濃度;不能測定SHb;SDS破壞白細胞。
SDS-Hb測定法(HiCN替代方法)
35整理ppt方法學評價優點:操作簡單,試劑無毒,結果準確,重復性好。方法學評價優點:試劑簡易無毒、呈色穩定、準確性與精密性較高。缺點:575nm波長比色,血液分析儀上應用受限,不能轉化HbF。AHD575測定法36整理ppt方法學評價優點:試劑簡易無毒、呈色穩定、準確性與精密性較高。方法學評價優點:準確度、精密度較高。缺點:試劑有毒、HbCO轉化慢。HiN3測定法37整理ppt方法學評價優點:準確度、精密度較高。缺點:試劑有毒、Hb方法學評價優點:溶血強,不破壞白細胞,適用于血液分析儀。缺點:精密度、準確度低。CATB測定法38整理ppt方法學評價優點:溶血強,不破壞白細胞,適用于血液分析儀。缺點質量保證(比色法)
標本:引起血清濁度增加的因素致Hb假性增高。器材及試劑:定期校準儀器,選用合格的微量采血管和刻度吸管,保證試劑質量。技術操作:控制技術誤差。廢棄物:妥善處理廢液。39整理ppt質量保證(比色法)標本:引起血清濁度增加的因素致Hb假性參考值成年男性:131~172g/L成年女性:113~151g/L新生兒:180~190g/L嬰兒:110~120g/L兒童:120~140g/L老年(>70歲):男性94~122g/L女性87~112g/LHb存在年齡與性別的差異40整理ppt參考值成年男性:131~172g/LHb存在年齡40整理p臨床意義(同紅細胞計數)判斷貧血程度優于紅細胞計數臨床應用注意事項Hb和RBC不一定正確反應全身紅細胞總容量的變化。某些貧血,Hb和RBC減少程度可不一致,同時測定Hb和RBC,對診斷更有意義。41整理ppt臨床意義(同紅細胞計數)判斷貧血程度優于紅細胞計數41整理p貧血程度的判定分度Hb含量癥狀輕度:91g/L~正常值下限癥狀輕微中度:61g/L~90g/L活動后心悸、氣促重度:31g/L~60g/L休息時也有心悸、氣促極重度:<30g/L常合并貧血性心臟病42整理ppt貧血程度的判定分度Hb含量小結Hb測定方法學評價RBC顯微鏡計數法原理RBC計數的臨床意義HiCN測定法原理43整理ppt小結Hb測定方法學評價RBC顯微鏡計數法原理RBC計數的臨床謝謝44整理ppt謝謝44整理ppt第二章/第一節紅細胞檢查45整理ppt第二章/第一節紅細胞檢查1整理ppt46整理ppt2整理ppt47整理ppt3整理ppt48整理ppt4整理ppt正常情況下,紅細胞生成與破壞保持動態平衡,血液中紅細胞數量保持在相對恒定的范圍。血液中紅細胞數量可通過紅細胞計數獲得49整理ppt正常情況下,紅細胞生成與破壞保持動態平衡,血液中紅細胞數量保紅細胞計數(redbloodcellcount,RBC)測定單位體積血液中紅細胞的數量診斷貧血及紅細胞增多的指標之一紅細胞計數的方法顯微鏡計數法血液分析儀法50整理ppt紅細胞計數(redbloodcellcount,RB顯微鏡計數法(重點)用等滲液稀釋血液后,滴入血細胞計數板,計數一定范圍內的紅細胞,經換算得每升血液中的紅細胞數。檢測原理
RBC未排除白細胞數量影響51整理ppt顯微鏡計數法(重點)檢測原理RBC未排除7整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝靜脈血加入2ml等滲液中,混勻混懸液充入改良牛鮑計數板高倍鏡下計數中央大方格的四角及中央五個中方格內的紅細胞總數A。換算?操作RBC/L=(A/5)×25×10×106×200=(A/100)×101252整理ppt10ul末梢血或EDTA抗凝靜脈血操作RBC/L=(A/5)Neubauer計數盤53整理pptNeubauer計數盤9整理ppt血液分析儀法采用電阻抗法或激光檢測法54整理ppt血液分析儀法采用電阻抗法或激光檢測法10整理ppt方法學評價方法優點缺點適用范圍顯微鏡計數法傳統方法,設備簡單,廉價費時費力,精密度低參考方法;分析儀異常結果復核血液分析儀法操作便捷,易于標準化,精密度高價貴;環境要求較高健康人群普查;大批量標本篩檢55整理ppt方法學評價方法優點缺點適用范圍顯微鏡計數法傳統方法質量保證(顯微鏡法)技術誤差儀器誤差分布誤差顯微鏡法紅細胞計數誤差來源有三個56整理ppt質量保證(顯微鏡法)技術誤差顯微鏡法紅細胞計數誤差來源有三個稀釋倍數不當2血液凝固4采血部位不當31充液不當33技術誤差57整理ppt稀釋倍數不當2血液凝固4采血部位不當31充液不當33技術誤差參考值成年男性:(4.09~5.74)×1012/L成年女性:(3.68~5.13)×1012/L新生兒:(5.2~6.4)×1012/L嬰兒:(4.0~4.3)×1012/L兒童:(4.0~4.5)×1012/LRBC存在年齡與性別的差異58整理ppt參考值成年男性:(4.09~5.74)×1012/LRBC存臨床意義RBC>參考值上限,RBC增多RBC<參考值下限,即貧血生理性變化病理性變化59整理ppt臨床意義RBC>參考值上限,RBC增多生理性變化病理性變化1生理性增多
生理性缺氧引起60整理ppt生理性增多生理性缺氧引起16整理ppt6個月-2歲嬰兒61整理ppt6個月-2歲嬰兒17整理ppt相對性增多:見于嘔吐、高熱等引起暫時性血液濃縮。通過補液,血容量恢復正常,紅細胞增多即消失。絕對性增多:①繼發性增多,由EPO代償性或非代償性增高引起。②原發性增多,紅細胞系統異常增殖性疾病。病理性增多62整理ppt相對性增多:見于嘔吐、高熱等引起暫時性血液濃縮。通過補液,血63整理ppt19整理ppt64整理ppt20整理ppt病理性減少(貧血)313233生成減少
破壞過多
血管丟失
貧血:紅細胞計數、血紅蛋白測定或血細胞比容低于參考值下限。病因學分類65整理ppt病理性減少(貧血)313233生成減少破壞過多血紅細胞生成減少骨髓造血功能減退或衰竭:再生障礙性貧血。造血物質缺乏或利用障礙:腎性貧血、缺鐵性貧血,巨幼細胞性貧血。66整理ppt紅細胞生成減少骨髓造血功能減退或衰竭:再生障礙性貧血。細胞內在缺陷(遺傳性缺陷)膜缺陷、酶缺陷、血紅蛋白異常致紅細胞壽命縮短。細胞外在異常(獲得性因素)免疫性因素:輸血血型不合、新生兒溶血病等。非免疫性因素:機械損傷、化學物理因素、寄生蟲及脾亢等。紅細胞破壞過多67整理ppt細胞內在缺陷(遺傳性缺陷)紅細胞破壞過多23整理ppt血液丟失:急、慢性失血性貧血68整理ppt血液丟失:急、慢性失血性貧血24整理ppt外傷引發的出血69整理ppt外傷引發的出血25整理ppt血紅蛋白(hemoglobin,Hb)
在有核紅及網織紅內合成是紅細胞胞漿內的呼吸載體蛋白Hb在成熟紅細胞內分布特點(近胞膜處多,中心部少)決定了紅細胞的雙凹圓盤形狀合成速度受促紅細胞生成素(EPO)與雄激素調節70整理ppt血紅蛋白(hemoglobin,Hb)在有核紅及網織紅Hb(四聚體)珠蛋白血紅素2條α鏈2條非α鏈原卟啉鐵原子血紅蛋白組成71整理pptHb珠蛋白血紅素2條α鏈2條非α鏈原卟啉鐵原子72整理ppt28整理ppt73整理ppt29整理ppt血液中血紅蛋白的存在形式存在形式所占比例還原血紅蛋白(Fe2+)正常成人>99%氧合血紅蛋白碳氧血紅蛋白硫化血紅蛋白高鐵血紅蛋白(Fe3+)
1%Hb測定即測定血液中各種血紅蛋白的總濃度。
74整理ppt血液中血紅蛋白的存在形式存在形式血液的物理特性:比重法,折射儀法Hb的分子組成:全血鐵法Hb與O2可逆性結合:血氣分析法Hb衍生物光譜特點:HiCN,SDS-Hb等檢測原理75整理ppt血液的物理特性:比重法,折射儀法檢測原理31整理pptHiCN法檢測原理紅細胞被溶血劑破壞后,高鐵氰化鉀可將各種血紅蛋白(SHb除外)氧化為高鐵血紅蛋白(Hi),后者與試劑中的CN-結合生成棕紅色的氰化高鐵血紅蛋白(HiCN)。在540nm處測定HiCN的吸光度,直接換算Hb濃度或在標準曲線上查得Hb濃度。76整理pptHiCN法檢測原理紅細胞被溶血劑破壞后,高鐵氰化鉀可將各種血20ul血液加入5ml轉化液中,充分溶血轉化后,以轉化液調零,測定標本(HiCN)在540nm的吸光度A。計算操作直接計算(符合WHO標準的分光光度計)Hb=A×64458÷44000×251=A×367.7以HiCN參考液繪制標準曲線,利用吸光度A在標準曲線上查出Hb濃度77整理ppt20ul血液加入5ml轉化液中,充分溶血轉化后,以轉化液調零方法學評價缺點:試劑有毒、高WBC造成試劑混濁、HbCO轉化慢、不能測SHb。HiCN測定法(參考方法)
優點:操作簡單,反應速度快,產物穩定,便于質控。78整理ppt方法學評價缺點:試劑有毒、高WBC造成試劑混濁、HbCO方法學評價優點:操作簡單,試劑無毒,結果準確,重復性好。缺點:SDS質量差異大;消光系數未定,不能直接計算Hb濃度;不能測定SHb;SDS破壞白細胞。
SDS-Hb測定法(HiCN替代方法)
79整理ppt方法學評價優點:操作簡單,試劑無毒,結果準確,重復性好。方法學評價優點:試劑簡易無毒、呈色穩定、準確性與精密性較高。缺點:575nm波長比色,血液分析儀上應用受限,不能轉化HbF。AHD575測定法80整理ppt方法學評價優點:試劑簡易無毒、呈色穩定、準確性與精密性較高。方法學評價優點:準確度、精密度較高。缺點:試劑有毒、HbCO轉化慢。HiN3測定法81整理ppt方法學評價優點:準確度、精密度較高。缺點:試劑有毒、Hb方法學評價優點:溶血強,不破壞白細胞,適用于血液分析儀。缺點:精密度、準確度低。CATB測定法82整理ppt方法學
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