XXX有限公司新項目方法驗證能力確認報告土壤氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定項目名稱：取分光光度法HJ634-2012項目名稱：負責人： 審核人： 日 期：

報告編號： 第1頁共9土壤氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定HJ6342012方法驗證能力確認報告1、方法依據及適用范圍提取－分光光度法。本標準適用于土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的測定。當樣品量為40.0時，本方法測定土壤中氨氮、亞硝酸鹽氮、硝酸鹽氮的檢出限分別為0.10mg/kg、0.15mg/kg、0.25mg/kg，測定下限分別0.40mg/kg、0.60mg/kg、1.00mg/kg。2、方法原理離子在有次氯酸根離子存在時與苯酚反應生成藍色靛酚染料，在630n波長具有最大吸收。在一定濃度范圍內，氨氮濃度與吸光度值符合朗伯比爾定律。提取液中的亞硝酸鹽氮與磺胺反應生成重氮鹽，再與鹽酸N（1萘基）乙二胺偶聯生成紅色染料，在波長543n波長具有最大吸收。在一定濃度范圍內，亞硝酸鹽氮濃度與吸光度值符合朗伯比爾定律。通過還原柱，將硝酸鹽氮還原為亞硝酸鹽氮，在酸性條件下，亞硝酸鹽氮與磺胺反應生成重氮鹽，再與鹽酸N（1萘基）

報告編號： 第2頁共9在波長543n氮和亞硝酸鹽氮總量與亞硝酸鹽氮含量之差即為硝酸鹽氮含量。

3、主要儀器、設備及試劑為新制備的去離子水。1試劑和材料為電導率小于0.2mS/m（25℃時測定）的去離子水。1濃磷酸：ρ（H3PO4）。）。SO2）。SO2CC6氯化鉀（KCl）：優級純。7氯化銨（NH3二水檸檬酸鈉（CHO2HO4氫氧化鈉（NaOH5二氯異氰尿酸鈉（C）=200mg/L：稱取g適量水溶解，加入0.30ml濃硫酸，冷卻后，移入1000ml容，混勻。該溶液在避光、4℃下可保存一個月。NNaOHO）：優級純（于℃下烘干2h。）8濃鹽酸：ρ（HCl）。9氯化鉀溶液：（KCl）=1mol/L：稱取g適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。0氯化銨標準貯備液：ρ（NH4

報告編號： 第3頁共91氯化銨標準使用液：ρ（NH）：量取5.0m）：量取5.0ml貯備液于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。2苯酚溶液：稱取70g苯酚（C6OH）溶于1000ml于棕色玻璃瓶中，在室溫條件下可保存一年。3二水硝普酸鈉溶液：稱取g二水硝普酸鈉{Na（CNNO]2HHO}溶于1000ml月。4緩沖溶液：稱取280g二水檸檬酸鈉及g氫氧化鈉，溶于500ml水中，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。4硝普酸鈉苯酚顯色劑：量取15ml二水硝普酸鈉溶液及15ml苯酚溶液和750ml水，混勻。該溶液用時現配。5二氯異氰尿酸鈉顯色劑：稱取g二氯異氰尿酸鈉溶于1000ml溶液中，4℃下可保存一個月。6亞硝酸鈉（NaNO2）：優級純（干燥器中干燥24h。）7亞硝酸鹽氮標準貯備液：ρ（NO-N-N）=1000mg/L：稱取g酸鈉用適量水溶解，移入1000ml于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月。8亞硝酸鹽氮標準使用液Ⅰ：ρ（NO-N-N）=100mg/L：量取10.0ml酸鹽氮標準貯備液于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。9亞硝酸鹽氮標準使用液Ⅱ：ρ（NO-N）：量取10.0ml酸鹽氮標準使用液Ⅰ于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。

報告編號： 第4頁共90磺胺溶液（C6H8N2O2S）：向1000ml容量瓶中加入600ml入200ml濃磷酸，然后加入80g磺胺。用水定容，混勻。該溶液于4保存一年。1鹽酸N-（萘基）乙二胺溶液：稱取g鹽酸N-（萘基）2HCl）溶于100ml水中。42HCl）溶于100ml水中。4HN12止使用。2顯色劑：分別量取20ml磺胺溶液、20ml鹽酸N-（萘基）溶液、20ml濃磷酸于100ml棕色試劑瓶中，混合。4℃下保存。3鎘粉：粒徑0.3mm~0.8mm。4硝酸鈉（NaNO3）：優級純（干燥器中干燥24h。）5硫酸銅（CuSO4.5H2O）。OH）：優級純。

OH）：優級純。

7硝酸鹽氮標準貯備液：ρ（NO4-N）=1000mg/L：稱取g用適量水溶解，移入1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。該溶液貯存于聚乙烯塑料瓶中，4℃下可保存六個月。或直接購買市售有證標準溶液。8硝酸鹽氮標準使用液Ⅰ：ρ（NO-N）=100mg/L-N）=100mg/L：量取10.0ml氮標準貯備液于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。9硝酸鹽氮標準使用液Ⅱ：ρ（NO-N-N）：量取10.0ml氮標準使用液Ⅰ于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。0硝酸鹽氮標準使用液Ⅲ：ρ（NO-N）：量取6.0ml用液于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。

報告編號： 第5頁共91亞硝酸鹽氮標準使用液Ⅲ：ρ（NO-N）1亞硝酸鹽氮標準使用液Ⅲ：ρ（NO鹽氮標準中間液于100ml容量瓶中，用水定容，混勻。用時現配。2氨水溶液：（1+3）。3氯化銨緩沖溶液貯備液：ρ（NH）：將100g1000ml容量瓶中，加入約800ml水，用氨水溶液調節pH值為水定容，混勻。4氯化銨緩沖溶液使用液：ρ（NH）：量取100ml沖溶液貯備液于1000ml容量瓶中，用水定容，混勻。3.2儀器3.2.可見分光光度計。臺，型號：722限，2022年1月2日。H計：配有玻璃電極和參比電極。3.2.恒溫水浴震蕩器：振蕩頻率可達40次/分鐘。3.2.還原柱：用于將硝酸鹽氮還原為亞硝酸鹽氮。3.2.離心機：轉速可達3000r/min，具100ml聚乙烯離心管。3.2.天平：精度為0.001g。3.2.聚乙烯瓶：500ml所測組分的其他容器。3.2.具塞比色管：20ml、50ml、100ml。3.2.樣品篩：5mm。3.2.10一般實驗室常用儀器和設備。

4、方法能力驗證

報告編號： 第6頁共94.標準曲線測試表41 標準曲線氨氮標準溶液（ml） 含量（μg） 吸光度（AA0） 回歸方程 硝酸鹽氮標準溶液（ml） 含量（μg） 吸光度（AA0） 回歸方程 亞硝酸鹽氮標準溶液（ml） 含量（μg） 吸光度（AA0） 回歸方程 4.方法檢出限

根據方法的要求，對空白樣品平行測7定下限統計結果見表42。表42 檢出限、測定下限測試結果氨氮 硝酸鹽氮氨氮 硝酸鹽氮 亞硝酸鹽氮濃度（mg/kg）

報告編號： 第7頁共9平均值（平均值（mg/kg） 標準偏差（mg/kg） 值 3.143檢出限（mg/kg） 測定下限（mg/kg） 4.3方法精密度及正確度使用兩種標準樣品進行精密度及正確度實驗，方法精密度測試結果見表43、4.4、4.5。表43 氨氮精密度及正確度測試結果 標準樣品1標準樣品1 標準樣品2 標準樣品3 第1第2第3第4第5第6標準樣品標準樣品1 標準樣品2 標準樣品3 （mg/kg） 標準偏差S 相對標準偏差RSD（%） 相對誤差RE（%） 表44 硝酸鹽氮精密度及正確度測試結果平行樣品編號第1第2第3第4第5

報告編號： 第8頁共9第6（mg/kg） 標準偏差S 相對標準偏差RSD（%） 相對誤差RE（%） 表45 亞硝酸鹽氮精密度及正確度測試結果標準樣品1標準樣品1 標準樣品2 標準樣品3 第1第2第3第4第5第6（mg/kg） 標準偏差S 相對標準偏差RSD（%） 相對誤差RE（%） 4.實際樣品測試表44 實際樣品測試結果樣品類別 某農田土壤測定結果（mg/kg）氨氮 硝酸鹽氮

報告編號： 第9頁共95 6 平均值 加標回收率（%） / 5結論

5.人員培訓、設施和環境和環境條件等均滿足方法要求。

5.方法檢出限驗證按照樣品分析的步驟，對空白樣品平行測定7方法關于質量控制的要求。

5.方法精密度驗證使用兩種標準樣品分別平行測定6次進行精密度實驗。標準樣品6定結果的標準偏差、相對標準偏差滿足方法關于質量控制的要求。

5.方法正確度驗證使用兩種標準樣品分別平行測