Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染主要內容原理結果的判斷臨床應用評價2主要內容原理2一、的原理結核分枝桿菌感染機體后被巨噬細胞吞噬，但不能完全將其清除，巨噬細胞凋亡后釋放出大量特異性抗原，并遞呈給特異性的4、8T細胞，使其激活并釋放大量γ-干擾素。大量研究表明結核抗原特異分泌γ-干擾素的T細胞可作為結核分枝桿菌感染的一種可靠標志物。3一、的原理結核分枝桿菌感染機體后被巨噬細胞吞噬，但不能完全將一、的原理外周血即利用酶聯免疫斑點技術（）通過檢測結核分枝桿菌特異性抗原刺激后外周血單個核細胞釋放的γ-干擾素來檢測抗原特異性Ｔ淋巴細胞的應答反應，從而判斷結核感染狀態。每一個斑點代表一個分泌細胞因子的T細胞，記數斑點數量可以獲得外周血中結核致敏的T細胞數量。4一、的原理外周血即利用酶聯免疫斑點技術（）通過檢測結核分枝桿一、的原理結核特異性抗原——早期分泌靶向抗原(6)和培養濾過蛋白(10)由結核桿菌基因組1區相同的操縱子編碼的蛋白，只存在于結核分枝桿菌群(包括人型、牛型和非洲型分枝桿菌)及其它幾種致病性分枝桿菌(如堪薩斯分枝桿菌，分枝桿菌，海分枝桿菌)中，是T細胞的靶抗原，能誘導皮膚遲發型超敏反應并刺激外周血單核細胞產生γ-干擾素。5一、的原理結核特異性抗原——早期分泌靶向抗原(6)和培養濾二、結果的判斷試驗分四組：空白對照組、抗原組(6和10)、陽性對照組(植物血凝素)。通常正常結果，空白對照孔沒有或有很少的斑點而對照孔斑點數超過20個。空白對照孔斑點數超過10個時結果被認為是“不確定”。當對照孔斑點數少于20個時，檢測結果被認為是“不確定”。當空白對照孔斑點數為0-5個并且（抗原A或抗原B斑點數）減去（空白對照孔斑點數）等于5-7時，此結果被認為是“灰區”，應當利用所有可利用相關的的臨床信息進行判斷。必要時可進行復查。的實驗結果也有用每10^6中斑點形成細胞()的數目來描述，即／106。6二、結果的判斷試驗分四組：空白對照組、抗原組(6和10)、陽二、結果的判斷如果抗原A和/或抗原B有應答，檢測結果為“有反應性”，參照以下標準：空白對照孔斑點數為0-5個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數）-（空白對照孔斑點數）≥6；空白對照孔斑點數為6-10個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數）≥2×（空白對照孔斑點數）；檢測結果為“無反應性”：不符合上述標準且對照孔正常。當對照孔結果為“不確定”且抗原A和抗原B孔結果都為“無反應性”時，該實驗結果被認為是“并不確定”，應當復查。“有反應性”結果表明樣本中存在針對結核桿菌特異的效應T細胞“無反應性”結果表明樣本中可能不存在針對結核桿菌特異的效應T細胞7二、結果的判斷如果抗原A和/或抗原B有應答，檢測結果為“有反二、結果的判斷(影響因素分析)既往結核病史或影像學提示陳舊性肺結核、有結核密切接觸史或高潛伏性結核感染率可使其診斷活動性結核病的特異性降低。只及外周血中結核特異性抗原刺激產生的效應T細胞有關，及感染部位無關。及年齡、機體免疫狀態、感染、營養不良的程度無關。抗結核治療后效應T細胞消失，可使斑點數減少或使結果呈陰性。及是否排菌無關。8二、結果的判斷(影響因素分析)8三、臨床應用活動性結核及潛伏性結核感染的鑒別“菌陰”結核患者的輔助診斷肺外結核的鑒別診斷結核發病風險的預測免疫力低下或受抑制患者的結核病診斷區別結核感染者及接種者抗結核療效的監測9三、臨床應用活動性結核及潛伏性結核感染的鑒別9四、評價（優點）敏感性及特異性高：不受卡介苗接種及環境分枝桿菌影響，不受機體免疫狀態影響。應用廣泛：在活動性肺結核、肺外結核、結核性漿膜炎、潛伏性結核感染及免疫抑制的結核患者均能檢測。診斷快速：24小時可報告結果。可進行療效評估：治療有效則斑點數減少甚至陰性。10四、評價（優點）敏感性及特異性高：不受卡介苗接種及環境分枝桿四、評價（弊端）目前尚無統一的界值用來鑒別潛伏結核感染及活動性肺結核。在5歲兒童、近期暴露于結核桿菌者、免疫功能低下者和需要二次檢測者中使用的證據不足。對標本要求高：室溫保存和運輸血液樣本（18-25℃），不能冷凍或冷藏；血液樣本從采集到檢測不超過8小時。結果需結合臨床和其它檢測進行判斷，陰性結果不能排除暴露或感染結核桿菌的可能性。不能確定病變部位。11四、評價（弊端）目前尚無統一的界值用來鑒別潛伏結核感染及活動謝謝！12謝謝！12國外文獻報道應用方法檢測活動性肺結核的敏感性可達到78%~100%,特異性可達到80%~100%。國內學者研究應用方法檢測活動性肺結核的敏感性為8398.8%，特異性65100%，陰性預測值81.8~91.6%，陽性預測值45.3~67.9%。13國外文獻報道應用方法檢測活動性肺結核的敏感性可達到78%有學者指出：診斷活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為44210^6。排除活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為12410^6。以7210^6為界值時,診斷活動性結核病的敏感性為71.9%,特異性76.4曲線下面積為0.810。以65210^6為界值時,診斷活動性結核病的特異性達95%。14有學者指出：診斷活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為4潛伏結核感染（）宿主感染結核分枝桿菌后尚未發病、無活動性結核的臨床表現、影像學改變或細菌學證據的一種特殊狀態。潛伏性感染者如不進行治療，約有5-10%會發展成活動性結核。陽性及密切接觸有更好的相關性，能更加準確地診斷。15潛伏結核感染（）宿主感染結核分枝桿菌后尚未發病、無活動性結核潛伏性結核感染的斑點數有可能高于活動性結核，因此T—難以區分活動性結核和潛伏性結核感染。其原因可能有兩點：(1)潛伏性結核感染者的免疫功能良好，少量的抗原刺激就激發出活躍的保護性免疫；(2)活動性結核患者免疫功能低下，大量的抗原刺激也不足以激起有效的細胞免疫。16潛伏性結核感染的斑點數有可能高于活動性結核，因此T—難以區分研究證明：T.SPOT.TB的斑點數越多，發生活動性結核的可能性越大，而且短期內有過結核接觸史的患者T—SPOT.TB的斑點數較多時更有意義。有學者提出：抗原A或B斑點數全20者對臨床診斷活動性結核感染的意義更大。

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17研究證明：T.SPOT.TB的斑點數越多，發生活動性結核的可謝謝！謝謝！Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染T細胞斑點試驗的臨床應用Tspot結核感染主要內容原理結果的判斷臨床應用評價20主要內容原理2一、的原理結核分枝桿菌感染機體后被巨噬細胞吞噬，但不能完全將其清除，巨噬細胞凋亡后釋放出大量特異性抗原，并遞呈給特異性的4、8T細胞，使其激活并釋放大量γ-干擾素。大量研究表明結核抗原特異分泌γ-干擾素的T細胞可作為結核分枝桿菌感染的一種可靠標志物。21一、的原理結核分枝桿菌感染機體后被巨噬細胞吞噬，但不能完全將一、的原理外周血即利用酶聯免疫斑點技術（）通過檢測結核分枝桿菌特異性抗原刺激后外周血單個核細胞釋放的γ-干擾素來檢測抗原特異性Ｔ淋巴細胞的應答反應，從而判斷結核感染狀態。每一個斑點代表一個分泌細胞因子的T細胞，記數斑點數量可以獲得外周血中結核致敏的T細胞數量。22一、的原理外周血即利用酶聯免疫斑點技術（）通過檢測結核分枝桿一、的原理結核特異性抗原——早期分泌靶向抗原(6)和培養濾過蛋白(10)由結核桿菌基因組1區相同的操縱子編碼的蛋白，只存在于結核分枝桿菌群(包括人型、牛型和非洲型分枝桿菌)及其它幾種致病性分枝桿菌(如堪薩斯分枝桿菌，分枝桿菌，海分枝桿菌)中，是T細胞的靶抗原，能誘導皮膚遲發型超敏反應并刺激外周血單核細胞產生γ-干擾素。23一、的原理結核特異性抗原——早期分泌靶向抗原(6)和培養濾二、結果的判斷試驗分四組：空白對照組、抗原組(6和10)、陽性對照組(植物血凝素)。通常正常結果，空白對照孔沒有或有很少的斑點而對照孔斑點數超過20個。空白對照孔斑點數超過10個時結果被認為是“不確定”。當對照孔斑點數少于20個時，檢測結果被認為是“不確定”。當空白對照孔斑點數為0-5個并且（抗原A或抗原B斑點數）減去（空白對照孔斑點數）等于5-7時，此結果被認為是“灰區”，應當利用所有可利用相關的的臨床信息進行判斷。必要時可進行復查。的實驗結果也有用每10^6中斑點形成細胞()的數目來描述，即／106。24二、結果的判斷試驗分四組：空白對照組、抗原組(6和10)、陽二、結果的判斷如果抗原A和/或抗原B有應答，檢測結果為“有反應性”，參照以下標準：空白對照孔斑點數為0-5個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數）-（空白對照孔斑點數）≥6；空白對照孔斑點數為6-10個時且（抗原A或抗原B孔的斑點數）≥2×（空白對照孔斑點數）；檢測結果為“無反應性”：不符合上述標準且對照孔正常。當對照孔結果為“不確定”且抗原A和抗原B孔結果都為“無反應性”時，該實驗結果被認為是“并不確定”，應當復查。“有反應性”結果表明樣本中存在針對結核桿菌特異的效應T細胞“無反應性”結果表明樣本中可能不存在針對結核桿菌特異的效應T細胞25二、結果的判斷如果抗原A和/或抗原B有應答，檢測結果為“有反二、結果的判斷(影響因素分析)既往結核病史或影像學提示陳舊性肺結核、有結核密切接觸史或高潛伏性結核感染率可使其診斷活動性結核病的特異性降低。只及外周血中結核特異性抗原刺激產生的效應T細胞有關，及感染部位無關。及年齡、機體免疫狀態、感染、營養不良的程度無關。抗結核治療后效應T細胞消失，可使斑點數減少或使結果呈陰性。及是否排菌無關。26二、結果的判斷(影響因素分析)8三、臨床應用活動性結核及潛伏性結核感染的鑒別“菌陰”結核患者的輔助診斷肺外結核的鑒別診斷結核發病風險的預測免疫力低下或受抑制患者的結核病診斷區別結核感染者及接種者抗結核療效的監測27三、臨床應用活動性結核及潛伏性結核感染的鑒別9四、評價（優點）敏感性及特異性高：不受卡介苗接種及環境分枝桿菌影響，不受機體免疫狀態影響。應用廣泛：在活動性肺結核、肺外結核、結核性漿膜炎、潛伏性結核感染及免疫抑制的結核患者均能檢測。診斷快速：24小時可報告結果。可進行療效評估：治療有效則斑點數減少甚至陰性。28四、評價（優點）敏感性及特異性高：不受卡介苗接種及環境分枝桿四、評價（弊端）目前尚無統一的界值用來鑒別潛伏結核感染及活動性肺結核。在5歲兒童、近期暴露于結核桿菌者、免疫功能低下者和需要二次檢測者中使用的證據不足。對標本要求高：室溫保存和運輸血液樣本（18-25℃），不能冷凍或冷藏；血液樣本從采集到檢測不超過8小時。結果需結合臨床和其它檢測進行判斷，陰性結果不能排除暴露或感染結核桿菌的可能性。不能確定病變部位。29四、評價（弊端）目前尚無統一的界值用來鑒別潛伏結核感染及活動謝謝！30謝謝！12國外文獻報道應用方法檢測活動性肺結核的敏感性可達到78%~100%,特異性可達到80%~100%。國內學者研究應用方法檢測活動性肺結核的敏感性為8398.8%，特異性65100%，陰性預測值81.8~91.6%，陽性預測值45.3~67.9%。31國外文獻報道應用方法檢測活動性肺結核的敏感性可達到78%有學者指出：診斷活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為44210^6。排除活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為12410^6。以7210^6為界值時,診斷活動性結核病的敏感性為71.9%,特異性76.4曲線下面積為0.810。以65210^6為界值時,診斷活動性結核病的特異性達95%。32有學者指出：診斷活動性結核病患者外周血斑點形成細胞中位數為4潛伏結核感染（）宿主感染結核分枝桿菌后尚未發病、無活動性結核的臨床表現、影像學改變或細菌學證據的一種特殊狀態。潛伏性感染者如不進行治療，約有5-10%會發展成活動性結核。陽性及密切接觸有更好的相關性，能更加準確地診斷。33潛伏結核感染（）宿主感染結核分枝桿菌后尚未發病、無活動性結核潛伏性結核感染的斑點數有可能高于活動性結核，因此T—難以區分活動性結核和潛伏性結核感染。其原因可能有兩點：(1)潛伏性結核感染者的免疫功能良好，少量的抗原刺激就激發出活躍的保護性免疫；(2)活動性結核患者免疫功能低下，大量的抗原刺激也不足以激起有效的細胞免疫。34潛伏性結核感染的斑點數有可能高于活動性結核，因此T—難以區